Name: flexible colonoscopy in mice to evaluate the severity of colitis and colorectal tumors using a validated endoscopic scoring system
Uploaded: 2013-10-16T20:30:00
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사라 코삭, 미첼 Guanzon, 성 Yeun 양 그들의 실험 동물의 내시경 검사하는 동안 그들의 협력을위한 리 구오 지아, 특별 감사.

1. 내시경 시스템 설정 <ol><li> 제조업체의 지시에 따라 쥐를 마취하기 전에 내시경 검사 시스템을 설정합니다. 이 프로토콜에 대한 인간을 위해 디자인 된 비디오 ureteroscope (그림 1)를 사용합니다. 삽입 튜브의 외경은 9.9 프랑스 (3.3 mm)이며, 그 선단부가 8.5 프랑스 (2.8 mm)이며, 계측 채널의 내부 직경은 6 프랑스 (1.2 mm)이다. </li><li> 내시경의 사용이 질병 전송에 연결되지 않은 있지만, [...

<ol>
	<li>Huang, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colonoscopy+in+mice.">Colonoscopy in mice.</a> Surg. Endosc. 16, 22-24 (2002).</li><li>Wirtz, S., Becker, C., Blumberg, R., Galle, P. R., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+T+cell-dependent+experimental+colitis+in+SCID+mice+by+local+administration+of+an+adenovirus+expressing+IL-18+antisense+mRNA.">Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing IL-18 antisense mRNA.</a> J. Immunol. 168, 411-420 (2002).</li><li>Funovics, M. A., Alencar, H., Su, H. S., Khazaie, K., Weissleder, R., Mahmood, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Miniaturized+multichannel+near+infrared+endoscope+for+mouse+imaging.">Miniaturized multichannel near infrared endoscope for mouse imaging.</a> Mol Imaging. 2, 350-357 (2003).</li><li>Becker, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+colitis+and+colon+cancer+development+in+mice+using+high+resolution+chromoendoscopy.">In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy.</a> Gut. 54, 950-954 (2005).</li><li>Ravnic, D. J., Konerding, M. A., Huss, H. T., Wolloscheck, T., Pratt, J. P., Mentzer, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+microvideo+endoscopy+of+the+colonic+microcirculation.">Murine microvideo endoscopy of the colonic microcirculation.</a> J. Surg. Res. 142, 97-103 (2007).</li><li>Hamilton, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+for+mast+cell+tryptase+in+acute+experimental+colitis.">Essential role for mast cell tryptase in acute experimental colitis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 290-295 (2011).</li><li>Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+colonoscopy+in+live+mice.">High resolution colonoscopy in live mice.</a> Nat. Protoc. 1, 2900-2904 (2006).</li><li>Hensley, H. H., Merkel, C. E., Chang, W. C., Devarajan, K., Cooper, H. S., Clapper, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoscopic+imaging+and+size+estimation+of+colorectal+adenomas+in+the+multiple+intestinal+neoplasia+mouse.">Endoscopic imaging and size estimation of colorectal adenomas in the multiple intestinal neoplasia mouse.</a> Gastrointest. Endosc. 69, 742-749 (2009).</li><li>Banerjee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+control+during+GI+endoscopy.">Infection control during GI endoscopy.</a> Gastrointest. Endosc. 67, 781-790 (2008).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cleaning+and+disinfection+of+equipment+for+gastrointestinal+endoscopy.+Report+of+a+Working.">Cleaning and disinfection of equipment for gastrointestinal endoscopy. Report of a Working.</a> Party of the British Society of Gastroenterology Endoscopy Committee. Gut. 42, 585-593 (1998).</li><li>Sano, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+diagnostic+method+based+on+color+imaging+using+narrow+band+imaging+(NBI)+system+for+gastrointestinal+tract.">New diagnostic method based on color imaging using narrow band imaging (NBI) system for gastrointestinal tract.</a> Gastrointest. Endosc. 53, 125-12 (2001).</li><li>Davies, J., Burke, D., Olliver, J. R., Hardie, L. J., Wild, C. P., Routledge, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methylene+blue+but+not+indigo+carmine+causes+DNA+damage+to+colonocytes+in+vitro+and+in+vivo+at+concentrations+used+in+clinical+chromoendoscopy.">Methylene blue but not indigo carmine causes DNA damage to colonocytes in vitro and in vivo at concentrations used in clinical chromoendoscopy.</a> Gut. 56, 155-156 (2007).</li><li>Chiang, N., Schwab, J. M., Fredman, G., Kasuga, K., Gelman, S., Serhan, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetics+impact+the+resolution+of+inflammation.">Anesthetics impact the resolution of inflammation.</a> PLoS One. 3, e1879 (2008).</li><li>Zilberman, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+digital+flexible+ureteroscope:+in+vitro+assessment+of+optical+characteristics.">The digital flexible ureteroscope: in vitro assessment of optical characteristics.</a> J. Endourol. 25, 519-522 (2011).</li><li>Machida, H., Sano, Y., Hamamoto, Y., Muto, M., Kozu, T., Tajiri, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Narrow-band+imaging+in+the+diagnosis+of+colorectal+mucosal+lesions:+a+pilot+study.">Narrow-band imaging in the diagnosis of colorectal mucosal lesions: a pilot study.</a> Endoscopy. 36, 1094-1098 (2004).</li><li>Dohoo, I., Martin, W., Stryhn, H., McPike, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cohort+studies.">Cohort studies.</a> Veterinary Epidemiologic Research. , 151-162 (2003).</li><li>Yiou, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+pelvic+floor+disorders:+evidence+from+a+histomorphologic+study+of+the+perineum+and+a+mouse+model+of+rectal+prolapse.">The pathophysiology of pelvic floor disorders: evidence from a histomorphologic study of the perineum and a mouse model of rectal prolapse.</a> J. Anat. 199, 599-607 (2001).</li></ol>

생쥐의 내시경 기술의 수정 및 문제 해결에 대한 몇 가지 고려 사항이있다. 가요 성 내시경의 사용 중에 마스터해야 절차의 중요한 측면은 만곡 및 토크 제어의 코디 복부 팽만 및 마우스 호흡기 손상을 방지하는 데 필요한 공기량의 조절, 및보기 컨트롤의 사소한 기술적 측면을 포함 . 토크 제어는 장천공의 위험을 최소화하기 위해 중요하다. 제대로 처리하면, 쥐 유연한 내시경 검사는 직접 시각...

쥐 내시경을 통해 1-3 년을위한 유용한 연구 도구로 수행되었습니다. 일부는 S 상 결장경을 사용하고 있지만 지금까지 쥐 내시경을 사용하는 대부분의 연구는, 딱딱한 내시경을 사용했습니다. 뮤린 내시경 즉각적인 결과를 제공하고 장내 정상, 염증의 중증도, 이러한 체중 감소, 설사 및 조직학 간접 측정, (병변 누덕 때 차선이다)에 비해 종양의 진행의 정도를 객관적 추정하면서 결장의 전반적인 건강에 대한 통찰력을 제공. 안락사하고 콜론 분석 1을위한 수확하는 동물을 필요로 기존의 조직 학적 검사에 반대 특히, 내시경 검사는 시간이 지남에 따라 실험 동물 모델의 반복 평가를 할 수 있습니다. 이러한 장점에도 불구하고, 뮤린 내시경 기술의 광범위한 사용은 불가능했습니다 implementati 및 표준화 된 프로토콜의 부족에 의해 제한된다에 대한 병리학 적 연구 결과의 점수. 제대로 구현, 쥐 내시경 검사는 더 이상 우리의 이해와 염증성 장 질환, 대장염, 대장 종양을 포함한 여러 만성 위장 질환 상태의 동물 모델의 특성을 용이하게하기 위해 큰 약속을 보유하고 있습니다. 쥐 내시경 기술의 유틸리티는 표준화 된 시험 절차의 존재와 장 병리에 대한 일관성, 비 중복 및 신뢰성 평가 시스템이 필요 재현성 및 객관성에 달려있다. 적어도 세 가지 설명 득점 대장염 4-6의 내시경 평가를위한 시스템뿐만 아니라 대장 종양 생쥐의 4,7,8에 출판되었다. 그러나 이러한보고 방법 및 채점 시스템은 연구를 통해 쉽게 비교할 수 없습니다. 많은 경우에, 병변의 분류에 사용되는 기준에 대한 명확한 정의가없고, 기준이 관련 될 때, 이들은 매우 다양. 또한,대장염 종양, 하나의 측정 도구에 동시에 발생 및 결과에 대한 상호 작용 효과를 가질 수있는 가장 일반적인 대장 병변의 두 가지 모두의 평가를 통합보고 된 채점 시스템이 없습니다. 마지막으로, 대장염에 존재 내시경 채점 시스템은 종종 제한 차별 염증 카테고리가 (즉. 종종 1-4 short 정수 저울에 좁은 득점 옵션) 제대로 질병의 진행 시나리오를 대표하는 매개 변수 통계 분석의 사용을 가능하게합니다. 본 논문에서는 뮤린 대장염 및 결장 종양의 중증도를 평가하고, 항문 주위 영역, 직장 및 원위부 대장의 해부학 적 평가에이 기술을 채용하기위한 표준화 된 프로토콜을 설명하는가요 성 내시경을 사용하는 방법을 설명한다. 우리는 외상 및 이미지 유물을 최소화하기 위해 내시경 검사를하는 동안 효과적인 문제 해결을 설명하고, 우리는 재현 할 수있는 평가 시스템을 설명검증 게시 된 임상 매개 변수를 기반으로. 채점 시스템 (특정 진단 값으로 결과를 강조하기 위해 12 염증, 종양의 매핑이 가능 등급과 플로팅 옵션, 새로운 소수점 유닛 시스템 (즉, 진수 식별자)와 차별의 높은 수준을 사용하여 장의 염증과 종양 모두의 평가를 통합 즉, 종양 개발, 내시경 검사 등 중 합병증). 소수점 식별자의 사용은 더욱 하류 분석에 대한 중요한 데이터 세트를 신속하게 추적을 허용한다. 마지막으로, 우리는 대장염 및 대장염 관련 암 (덱스 트란 황산 나트륨 (DSS) 유도 성 대장염, 클로스 트리 디움 남과 어울리지 않는 감염 및 azoxymethane / DSS 유발 대장 암)의 여러 쥐 모델에서 신뢰성 및 채점 시스템의 유효성 테스트를 수행합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="696">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Isoflurane, USP</td>
			<td style="width:160px;">Webster Veterinary&#160;</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">Surgical lubricant</td>
			<td style="width:160px;">Savage laboratories</td>
			<td style="width:217px;">surgilube, 0281-0205-45</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">Phosphate Buffered Saline</td>
			<td style="width:160px;">Thermo Scientific&#160;</td>
			<td style="width:217px;">SH30256</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">RNAlater</td>
			<td style="width:160px;">Ambion</td>
			<td style="width:217px;">AM7021</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:240px;">Methylene Blue 1% Aqueous Solution</td>
			<td style="width:160px;">Fisher Science Education</td>
			<td style="width:217px;">S96393</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:240px;"></td>
			<td style="width:160px;"></td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Flexible digital ureteroscope</td>
			<td style="width:160px;">Olympus America</td>
			<td style="width:217px;">URF-V</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Video system center</td>
			<td style="width:160px;">Olympus America</td>
			<td style="width:217px;">VISERA Pro OTV-S7 Pro</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Xenon light source</td>
			<td style="width:160px;">Olympus America</td>
			<td style="width:217px;">VISERA Pro CLV-S40 Pro</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Video recorder</td>
			<td style="width:160px;">MediCapture, Inc.</td>
			<td style="width:217px;">MediCap USB200</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Flexible biopsy cup forceps</td>
			<td style="width:160px;">Olympus America</td>
			<td style="width:217px;">FBC-3115</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:240px;">Anesthesia machine</td>
			<td style="width:160px;">Euthanex Corporation</td>
			<td style="width:217px;">EZ-7000 Classic System</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

flexible colonoscopy in mice to evaluate the severity of colitis and colorectal tumors using a validated endoscopic scoring system

연구 목적 현대 내시경의 사용은 크게 위장 병리에 대한 우리의 이해를 촉진했다. 특히, 실험 내시경은 만성 염증성 장 질환의 메커니즘과 대장 암의 진행을 평가하는 것과 같은 하나의 실험 동물에서 반복 평가를 필요로 연구에 매우 유용합니다. 그러나, 연구를 통해 사용 방법은 매우 다양하다. 적어도 세 내시경 채점 시스템은 쥐 대장염에 대해 게시 및 대장 종양의 평가를위한 프로토콜이 수반 대장 염증의 존재를 해결하기 위해 실패 출판되었습니다. 이 연구는 개발과 동시에 염증과 종양 모두의 평가를 통합하는 재생 가능한 내시경 채점 시스템의 유효성을 검사합니다. 항문 주위 결과에 따라 대장 염증의 정도와 심각도 1) 평가 (월마트의 투명성이 새로운 채점 시스템은 세 가지 주요 구성 요소가 있습니다L, 점막 출혈 및 국소 병변), 2) 종양 병변 (격자지도와 막대 그래프), 관찰 병변의 할당 된 범주와 소수점 단위를 기준으로 자신의 병리학 및 연구 관련하여 임상 사례 3) 숫자 정렬의 양적 기록 내시경 합병증 (진수 식별자). 여기에 제공된 영상과 원고는 수사관이 인접 내시경 대장염 (D-근육에서 원심을 차별화 할 수있는 시스템 옵션을 사용하여, 잘 확인하고 재현성 내시경 방법을 사용하여 자신의 실험 쥐를 득점 할 수 있도록, IACUC 승인 된 프로토콜에 따라 제조 하였다 ).

본 연구에서 제시하는 프로토콜과 이미지는 올림푸스 URF-V 유연한 내시경 (14)과 NBI 11, 15으로 제조 하였다. 영상은 MPEG-2 포맷과 JPG, TIF, PNG, 또는 표준 USB 플래시 휴대용 메모리에 양도 최대 1,280 X 1,024 픽셀,와 DICOM 형식으로 사진에 저장되었다. NBI는 헤모글로빈을 함유 조직의 시각적 대비를 향상시킵니다. 일반 빛과 NBI 영상은 대장 점막의 정상적인 해부학과 궤양과 종양 개발 <stron...

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Flexible Colonoscopy in Mice to Evaluate the Severity of Colitis and Colorectal Tumors Using a Validated Endoscopic Scoring System

지난 몇 년 동안, 새로운 세대의 내시경은 쥐 대장염과 대장 종양을 평가하기위한 중요한 진단 연구 보조로 등장했습니다. 우리는 생쥐의 염증과 대장 종양의 내시경 적 평가뿐만 아니라 대장염과 대장 종양의 내시경 심각도를 문서화하는 진수 식별자를 사용하는 새로운 채점 시스템에 여기에 대한 자세한 프로토콜을 제시한다.

검증 된 내시경 채점 시스템을 사용하여 대장염과 대장 종양의 위험을 평가하기 위해 마우스의 유연한 대장 내시경 검사

The use of modern endoscopy for research purposes has greatly facilitated our understanding of gastrointestinal pathologies. In particular, experimental ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Establishment and Propagation of Human Retinoblastoma Tumors in Immune Deficient Mice

면역 결함 마우스의 확립과 인간 Retinoblastoma 종양의 전파

Culturing retinoblastoma tumor cells in defined stem cell media gives rise to primary tumorspheres that can be grown and maintained for only a limited ...

연구

의학

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

소설 허벌 요법을 평가하는 패혈증의 동물 모델의 사용

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

마우스의 기관 내 삽관<em&gt;를 통해</em이경 사용&gt; 직접 후두경

Mice, both wildtype and transgenic, are the principal mammalian model in biomedical research currently. Intubation and mechanical ventilation are ...

Non-invasive Assessment of the Efficacy of New Therapeutics for Intestinal Pathologies Using Serial Endoscopic Imaging of Live Mice

라이브 마우스의 직렬 내시경 이미징을 사용하여 소장 병변에 대한 새로운 치료제의 효능의 비 침습적 평가

Animal models of inflammatory bowel disease (IBD) and colorectal cancer (CRC) have provided significant insight into the cell intrinsic and extrinsic ...

Dry Powder and Nebulized Aerosol Inhalation of Pharmaceuticals Delivered to Mice Using a Nose-only Exposure System

건조 분말과 제약의 분무 에어로졸 흡입은 코 전용 노출 시스템을 사용하여 마우스 배달

Obstructive respiratory diseases like asthma and chronic obstructive pulmonary disease (COPD) are currently treated by inhaled anti-inflammatory and ...

Taste Exam: A Brief and Validated Test

맛 시험: 짧고 검증 테스트

The emerging importance of taste in medicine and biomedical research, and new knowledge about its genetic underpinnings, has motivated us to supplement ...

The Pilocarpine Model of Temporal Lobe Epilepsy and EEG Monitoring Using Radiotelemetry System in Mice

측 두 엽 간 질 및 뇌 파 마우스에 Radiotelemetry 시스템을 사용 하 여 모니터링 Pilocarpine 모델

Temporal lobe epilepsy (TLE) is a common neurological disorder in adulthood. For translational studies of chronic epilepsy, pilocarpine-induced status ...

Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice

Murine 원심 인공, C57BL/6 마우스에 전환 Colitis의 새로운 모델

Diversion colitis (DC) is a frequent clinical condition occurring in patients with bowel segments excluded from the fecal stream as a result of a ...

Using a Knee Arthrometer to Evaluate Tissue-specific Contributions to Knee Flexion Contracture in the Rat

쥐에 무릎 굴곡 Contracture 조직 관련 기여를 평가 하는 무릎 Arthrometer를 사용 하 여

Normal knee range of motion (ROM) is critical to well-being and allows one to perform basic activities such as walking, climbing stairs and sitting. Lost ...

Murine Appendectomy Model of Chronic Colitis Associated Colorectal Cancer by Precise Localization of Caecal Patch

만성 대장염 관련 대장암의 뮤린 충수 절제술 모델은 Caecal 패치의 정확한 국소화에 의해

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal ...