Name: a murine model of subarachnoid hemorrhage
Uploaded: 2013-11-21T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage at JoVE.com

A atual pesquisa é financiada pela Fundação Solorz-Zak Research.

Todos os procedimentos cirúrgicos foram submetidos à revisão ética e aprovado pelo governo da Alta Baviera (número de referência: 55.2-1-54-2532.3-13-13 e -2532-136-11). Os animais são macho C57BL / 6 com um peso corporal de aproximadamente 25 g. 1. Preparação animal <ol><li> Induzir a anestesia, colocando o mouse em uma câmara. Lave a câmara com 5% de isoflurano até que o animal perde a consciência. </li><li> Injectar anestésicos pré-misturados por via intraperitoneal: o fe...

<ol>
	<li>Cahill, J., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage:+is+it+time+for+a+new+direction.">Subarachnoid hemorrhage: is it time for a new direction.</a> Stroke. 40, 86-87 (2009).</li><li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage.">Subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 369, 306-318 (2007).</li><li>Lin, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage-induced+cerebral+vasospasm.">A murine model of subarachnoid hemorrhage-induced cerebral vasospasm.</a> J. Neurosci. Methods. 123, 89-97 (2003).</li><li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice.">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> J. Neurosci. Methods. 183, 136-140 (2009).</li><li>Feiler, S., Friedrich, B., Scholler, K., Thal, S. C., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+induction+of+subarachnoid+hemorrhage+in+mice+by+intracranial+pressure+monitoring.">Standardized induction of subarachnoid hemorrhage in mice by intracranial pressure monitoring.</a> J. Neurosci. Methods. 190, 164-170 (2010).</li><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat.">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26, 1086-1091 (1995).</li><li>Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Sheffield+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Stroke. 26, 1279-1283 (1995).</li><li>Kamii, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amelioration+of+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+transgenic+mice+overexpressing+CuZn-superoxide+dismutase.">Amelioration of vasospasm after subarachnoid hemorrhage in transgenic mice overexpressing CuZn-superoxide dismutase.</a> Stroke. 30, 867-871 (1999).</li><li>Parra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage+associated+cerebral+vasospasm:+methodological+analysis.">Mouse model of subarachnoid hemorrhage associated cerebral vasospasm: methodological analysis.</a> Neurol. Res. 24, 510-516 (2002).</li><li>Broderick, J. P., Brott, T. G., Duldner, J. E., Tomsick, T., Leach, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+and+recurrent+bleeding+are+the+major+causes+of+death+following+subarachnoid+hemorrhage.">Initial and recurrent bleeding are the major causes of death following subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 25, 1342-1347 (1994).</li><li>Thal, S. C., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+intraoperative+monitoring+of+blood+pressure+and+arterial+pCO2+during+surgical+anesthesia+in+mice.">Non-invasive intraoperative monitoring of blood pressure and arterial pCO2 during surgical anesthesia in mice.</a> J. Neurosci. Methods. 159, 261-267 (2007).</li><li>Hockel, K., Trabold, R., Scholler, K., Torok, E., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+on+pathophysiology+and+mortality+following+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">Impact of anesthesia on pathophysiology and mortality following subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Exp. Transl. Stroke Med. 4, 5 (2012).</li><li>Wang, Z., Schuler, B., Vogel, O., Arras, M., Vogel, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+optimal+anesthetic+protocol+for+measurements+of+cerebral+autoregulation+in+spontaneously+breathing+mice?.">What is the optimal anesthetic protocol for measurements of cerebral autoregulation in spontaneously breathing mice?.</a> Exp. Brain Res. 207, 249-258 (2010).</li><li>Schwartz, A. Y., Masago, A., Sehba, F. A., Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat:+a+refinement+of+the+endovascular+filament+model.">Experimental models of subarachnoid hemorrhage in the rat: a refinement of the endovascular filament model.</a> J. Neurosci. Methods. 96, 161-167 (2000).</li><li>Feiler, S., Plesnila, N., Thal, S. C., Zausinger, S., Scholler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+matrix+metalloproteinase-9+to+cerebral+edema+and+functional+outcome+following+experimental+subarachnoid+hemorrhage.">Contribution of matrix metalloproteinase-9 to cerebral edema and functional outcome following experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Cerebrovasc. Dis. 32, 289-295 (2011).</li></ol>

As opções de tratamento após SAH são escassos e pouco ineficaz. Portanto, a fisiopatologia da lesão cerebral pós-hemorrágica precisa ser mais bem compreendidos, a fim de identificar novos alvos terapêuticos e desenvolver novas abordagens terapêuticas. Padronizado e modelos animais bem reprodutíveis em animais geneticamente modificados, ou seja, ratos, são cruciais para tais investigações. O modelo CWP tornou-se um modelo amplamente utilizado para a HAS, uma vez que se assemelha a fisiopatologia em ...

HAS é o subtipo tempos com o resultado menos benéfica para os pacientes: 40% dos pacientes morrem dentro de um mês após o sangramento 1 e sobreviventes raramente têm um resultado clinicamente favorável. A grande maioria da SAHOS espontâneas (80%) são causados ​​pela ruptura de aneurismas intracranianos, que são na sua maioria localizadas ao longo da anterior e posterior da artéria, a artéria basilar, artéria cerebral média (MCA) 2 comunicando. Tais aneurismas são difíceis de modelar em animais e, portanto, os modelos animais de SAH são realizadas quer por injecção do sangue para dentro do espaço / ventrículos cerebrais subaracnoideos ou por perfuração de um navio de endovascular subaracnóide. Injeção de sangue autólogo na cisterna magna é de fácil execução e reprodutível, como o volume de sangue pode ser controlada diretamente 3. Infelizmente, alguns aspectos da fisiopatologia da HAS, por exemplo, olesão do vaso, não pode ser modelado por este procedimento. Outra abordagem técnica para indução de HAS é a abertura de uma veia intracisternal 4. No entanto, o CWP intraluminal no ramo MCA parece ser o processo de que os modelos da fisiopatologia em seres humanos mais estreita 5. O método foi desenvolvido e descrito pela primeira vez em ratos por Bederson e colegas, e ao mesmo tempo por Veelken e colegas 6,7. Mais tarde, o modelo da perfuração intraluminal foi adaptado para ratinhos 8,9. Um filamento é introduzido na artéria carótida externa (ECA) e avançada até à base do crânio, através da artéria carótida interna (ICA). No ponto de ramificação do MCA filamento perfura o vaso e induz a uma hemorragia no espaço subaracnóide da base do crânio. O sangue, em seguida, distribui para o espaço subaracnóide restante ao longo de fissuras e vasos sanguíneos. A hemorragia é parada pela formação de coágulos no local da perfuração, mas rebleedings, which são muitas vezes prejudiciais em pacientes de 10, pode ocorrer. Por conseguinte, o modelo de filamentos endovascular se tornou um modelo amplamente usado HAS durante os últimos anos. A desvantagem mais citada do modelo filamento perfuração é que o volume de sangramento não pode ser diretamente controlado e pode, portanto, ser variável. Esta variabilidade pode ser significativamente reduzido por um rígido controle de fisiologia animal e pós-hemorrágica ICP. Os ratos têm a grande vantagem de que um grande número de estirpes geneticamente modificados estão disponíveis. No entanto, devido ao seu pequeno tamanho procedimentos cirúrgicos tendem a ser mais complexo do que em espécies maiores, por exemplo, ratos ou coelhos. Portanto, a redução de escala de técnicas desenvolvidas para os ratos para os ratos costumam não leva aos resultados desejados, por exemplo, como os ratos têm um peso corporal e volume de sangue muito limitadas técnicas não invasivas para a pressão arterial e análise de gases sanguíneos, bem como para a saturação de hemoglobina e monitoramento da freqüência cardíacatem que ser aplicada sempre que possível. Por conseguinte, o objectivo da publicação é descrever o modelo da perfuração de filamentos para HSA em ratinhos e para demonstrar como este modelo pode ser realizado de uma forma padronizada e altamente reprodutível.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operation microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>KL2500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane vaporizer</td>
			<td>Harvard Instruments</td>
			<td>Continuous Flow Vaporizer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>respirator</td>
			<td>Hugo Sachs</td>
			<td>Minivent 845</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microcapnograph</td>
			<td>Hugo Sachs</td>
			<td>Type 340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>temperature controller</td>
			<td>FHC</td>
			<td>DC Temperature Controller</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dental drill</td>
			<td>Paggen</td>
			<td>Labset- N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICP monitor</td>
			<td>Codman</td>
			<td>ICP monitor</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>blood pressure monitor</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>Bridge Amp FE221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringe pump</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>SP101IZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pulsoximeter</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>MouseSTAT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LDF</td>
			<td>Perimed</td>
			<td>Periflux 5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>analog data monitor</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>Power Lab 16/35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cement for ICP probe fixation</td>
			<td>Speiko</td>
			<td>Carboxylate cement</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glue for LDF probe fixation</td>
			<td>Bob Smith Industries</td>
			<td>Cyanoacrylate glue (Maxi Cure and Insta Set)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>venous catheter</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson</td>
			<td>Jelco winged i.v. catheter; REF 4076</td>
			<td>modified intubation tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tubing for femoral catheter</td>
			<td>Smiths Medical</td>
			<td>Fine Bore Polythene Tubing; ID 0.28 mm OD 0.61 mm; REF 800/100/100</td>
			<td>cut to 30 cm length</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>filament for vessel perforation</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>Prolene 5-0</td>
			<td>cut to 12 mm length</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical equipment</td>
			<td>Fine Scientific Instruments</td>
			<td>forceps medical #5, vessel scissors 8 cm, microclip 4 mm jaw</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of subarachnoid hemorrhage

Nesta publicação de vídeo de um modelo padronizado rato de hemorragia subaracnóide (HSA) é apresentado. Sangramento é induzida pelo Círculo endovascular de Willis perfuração (CWP) e comprovada por pressão intracraniana (PIC) de monitoramento. Assim, uma distribuição homogênea de sangue em espaços subaracnóide em torno da circulação arterial e fissuras do cerebelo é alcançado. Fisiologia animal é mantido por entubação, ventilação mecânica, monitorização contínua e on-line de vários parâmetros fisiológicos e cardiovasculares: temperatura corporal, pressão arterial sistêmica, freqüência cardíaca e saturação de hemoglobina. Deste modo, a pressão de perfusão cerebral pode ser firmemente monitorado resultando em um volume variável de menos de sangue extravasado. Isto permite uma melhor padronização de perfuração filamento endovascular em ratos e faz todo o modelo altamente reprodutível. Assim, é facilmente disponível para os estudos farmacológicos e fisiopatológicos no tipo selvagem e genéticaly alterada ratinhos.

Mortalidade Uma vez que a técnica de cirurgia é dominado o procedimento não provocou quaisquer mortalidade intra-operatória. Além disso o sangramento pode ser conseguida em quase todos os animais. Mortalidade pós-operatória é de 30-40%, com a maior parte dos animais morrer no dia 1 após a cirurgia (Figura 5). ICP valores após SAH O ICP antes de sangramento é de cerca de 4 mmHg. Sangramento resulta em um aumento a...

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A Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

Um modelo de rato padronizado de hemorragia subaracnóide por Círculo intraluminal de Willis perfuração é descrito. Perfuração de vasos e hemorragia subaracnóide são monitorados pela monitorização da pressão intracraniana. Além disso os vários parâmetros vitais são registadas e controlada para manter as condições fisiológicas.

Um modelo murino de hemorragia subaracnóide

In this video publication a standardized mouse model of subarachnoid  hemorrhage (SAH) is presented. Bleeding is induced by endovascular Circle of  Willis ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Low Mortality Rat Model to Assess Delayed Cerebral Vasospasm After Experimental Subarachnoid Hemorrhage

Um Modelo de Rato Baixa Mortalidade para Avaliar vasoespasmo cerebral adiada após hemorragia subaracnóide Experimental

Objective: To characterize and establish a reproducible model that demonstrates delayed cerebral vasospasm after aneurysmal subarachnoid hemorrhage (SAH) ...

Medicina

Murine Model of Wound Healing

Modelo Murino de Cicatrização

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Um novo modelo murino de reparação endovascular de aneurisma da aorta

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

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Injection intraestriatal de sangue autólogo ou Clostridial colagenase como modelos murinos de hemorragia intracerebral

Intracerebral hemorrhage (ICH) is a common form of cerebrovascular disease and is associated with significant morbidity and mortality. Lack of effective ...

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O coelho Modelo Blood-shunt para o Estudo da aguda e tardia Sequelas de hemorragia subaracnóidea: Aspectos Técnicos

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