Name: reproducable paraplegia by thoracic aortic occlusion in a murine model of spinal cord ischemia-reperfusion
Uploaded: 2014-03-03T21:55:00
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Gostaríamos de agradecer à Fundação Cirurgia Torácica para Pesquisa e Educação pelo apoio financeiro do projeto.

1. Pré-operatório Preparação e Anestesia <ol><li> Não deixe de observar técnica estéril durante todo o procedimento. Deite fora todos os instrumentos. </li><li> Ligue o leito de controlo da temperatura antes da indução da anestesia de modo que ele pode aquecer até à temperatura apropriada (36,5 ° C). Ligue o monitor de laser Doppler perfusão de modo que ele pode iniciar durante a indução. </li><li> Posicione o mouse na câmara de indução. <ol><li> Monitorar cuidadosamente a frequência respiratória d...

<ol>
	<li>Conrad, M. F., Ye, J. Y., Chung, T. K., Davison, J. K., Cambria, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+complications+after+thoracic+aortic+surgery:+long-term+survival+and+functional+status+varies+with+deficit+severity.">Spinal cord complications after thoracic aortic surgery: long-term survival and functional status varies with deficit severity.</a> J. Vasc. Surg. 48, 47-53 (2008).</li><li>Okita, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fighting+spinal+cord+complication+during+surgery+for+thoracoabdominal+aortic+disease.">Fighting spinal cord complication during surgery for thoracoabdominal aortic disease.</a> Gen. Thorac. Cardiovasc. Surg. 59, 79-90 (2011).</li><li>Wong, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+spinal+cord+deficits+after+thoracoabdominal+aortic+aneurysm+repair.">Delayed spinal cord deficits after thoracoabdominal aortic aneurysm repair.</a> Ann. Thorac. Surg. 83, 1345-1355 (2007).</li><li>Taira, Y., Marsala, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+proximal+arterial+perfusion+pressure+on+function,+spinal+cord+blood+flow,+and+histopathologic+changes+after+increasing+intervals+of+aortic+occlusion+in+the+rat.">Effect of proximal arterial perfusion pressure on function, spinal cord blood flow, and histopathologic changes after increasing intervals of aortic occlusion in the rat.</a> Stroke. 27, 1850-1858 (1996).</li><li>Naslund, T. C., Hollier, L. H., Money, S. R., Facundus, E. C., Skenderis, B. 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D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+Cord+Ischemia:+Development+of+a+model+in+the+mouse.">Spinal Cord Ischemia: Development of a model in the mouse.</a> Stroke. 31, 208-213 (2000).</li><li>Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basso+Mouse+Scale+for+locomotion+detects+differences+in+recovery+after+spinal+cord+injury+in+five+common+mouse+strains.">Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains.</a> J. Neurotrauma. 23, 635-659 (2006).</li><li>Kwon, B. K., Tetzlaff, W., Grauer, J. N., Beiner, J., Vaccaro, A. 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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+infarction:+etiology+and+outcome.">Spinal cord infarction: etiology and outcome.</a> Neurology. 47, 321-330 (1996).</li><li>Kakinohana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+paraplegia+after+spinal+cord+ischemic+injury+requires+caspase-3+activation+in+mice.">Delayed paraplegia after spinal cord ischemic injury requires caspase-3 activation in mice.</a> Stroke. 42 (8), 2302-2307 (2011).</li><li>Wang, Z., Yang, W., Britz, G. W., Lombard, F. W., Warner, D. S., Sheng, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+simplified+spinal+cord+ischemia+model+in+mice.">Development of a simplified spinal cord ischemia model in mice.</a> J. Neurosci. Methods. 189, 246-251 (2010).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=model+of+ischemic+spinal+cord+injury+with+delayed+paralysis+caused+by+aortic+cross-clamping.">model of ischemic spinal cord injury with delayed paralysis caused by aortic cross-clamping.</a> Anesthesiology. 113, 880-891 (2010).</li><li>Kang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+systemic+hypothermia+on+a+murine+model+of+thoracic+aortic+ischemia+reperfusion.">The effects of systemic hypothermia on a murine model of thoracic aortic ischemia reperfusion.</a> J. Vasc. Surg. 52, 435-443 (2010).</li><li>Li, J., Benashski, S., McCullough, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-stroke+hypothermia+provides+neuroprotection+through+inhibition+of+AMP-activated+protein+kinase.">Post-stroke hypothermia provides neuroprotection through inhibition of AMP-activated protein kinase.</a> J. Neurotrauma. 28 (7), 1281-1288 (2011).</li></ol>

Paraplegia secundária a isquemia reperfusão medular, é o resultado de um complexo de patologias mal compreendidos 9. Embora este é mais comumente visto após a cirurgia da aorta toracoabdominal, uma variedade de outros insultos, como dissecções aórticas, trauma, fenômenos embólicos, vasculite e hipotensão sistêmica 10 pode resultar em paraplegia. Para obter uma maior compreensão desta lesão e fornecer metas futuras para eliminar esse prejuízo, os modelos animais se tornaram uma necess...

Menor paralisia extremidade continua a complicar as intervenções toracoabdominal. A lesão, conhecido como medula espinhal lesão de isquemia-reperfusão (SCIR), resulta em paralisia em até 20% dos pacientes de alto risco 1. Adjuntos cirúrgicos, tais como desvio esquerda coração, drenos fluidos cerbrospinal lombares, parada circulatória hipotérmica e reimplante da artéria intercostal ter reduzido a incidência desta complicação 2, no entanto, demasiado muitos pacientes continuam a ser afetados. Clinicamente, a isquemia medular e reperfusão é visto como imediatos ou retardados paralisia após a intervenção 3. No entanto, a nossa compreensão desta lesão foi sufocada pela falta de detalhes mecanicista. Como resultado, algumas opções estão disponíveis para atenuar a lesão, uma vez que tenha ocorrido. Temos, assim, se alistou um animal pequeno, murino, o modelo de isquemia medular, e reperfusão demelhor caracterizar sua patogênese. A maioria dos estudos até agora usaram modelos animais maiores para caracterizar esta lesão, ou seja, 4 rato, coelho 5, e porco 6 modelos. No entanto, estes são limitados pelo seu custo, complexidade, reprodutibilidade variável, e, mais importante, a falta de técnicas disponíveis para a manipulação genética. O mais confiável desses modelos animais publicados envolve pinçamento infra-renal da aorta abdominal em coelhos. No entanto, anterior humana neurônios espinhais na maioria das vezes derivam seu suprimento vascular dos ramos mais proximais 7. Anatomia vascular variável da medula espinal em modelos estes adiciona à dificuldade em fazer a transição seus resultados em utilização clínica. Este manuscrito apresenta um modelo de paraplegia imediato ou tardio, após oclusão da aorta torácica que é clinicamente relevante e fácil de empregar. A exposição do arco aórtico via mini-esternotomiao meu é menos invasiva e pode provocar resultados altamente reprodutíveis com morbidade e mortalidade mínima. Embora este modelo em não sem desafios e nuances técnicas, estas podem ser superadas com dissecção cuidadosa e manipulação de tecidos para produzir um modelo de paralisia dos membros traseiros que podem ser facilmente implementados.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="749">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">VMS Anesthesia Machine</td>
			<td style="width:247px;">MDS Matrx</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:247px;">Vet One</td>
			<td style="width:119px;">13985-528-60</td>
			<td>2.0% through nose cone&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Induction Chamber</td>
			<td style="width:247px;">Vet Equip</td>
			<td>941444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Heating Bed</td>
			<td style="width:247px;">Vestavia Scientific</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Laser Doppler Monitor</td>
			<td style="width:247px;">Moor Instruments</td>
			<td style="width:119px;">VMS-LDF1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">5-0 Suture, Polyester</td>
			<td style="width:247px;">Surgidac</td>
			<td style="width:119px;">VD-551</td>
			<td>Taper Needel</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Microdissecting Clips</td>
			<td style="width:247px;">Biomedical Research Insturments</td>
			<td style="width:119px;">14-1030, 14-1060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:216px;">Surgical Instruments</td>
			<td style="width:247px;">Fine Surgical Instruments</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Forceps, needle holder</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reproducable paraplegia by thoracic aortic occlusion in a murine model of spinal cord ischemia-reperfusion

Fundo Baixa paralisia extremidade continua a complicar intervenções aorta. A falta de compreensão da patologia subjacente tem dificultado avanços para diminuir a ocorrência desta lesão. O modelo atual demonstra reprodutível menor paralisia extremidade após oclusão da aorta torácica. Métodos Camundongos C57BL6 machos adultos foram anestesiados com isoflurano. Através de uma incisão cervicosternal a aorta foi exposta. A aorta e subclávia esquerda descendente artérias torácicas foram identificados sem entrada para o espaço pleural. Esqueletização destas artérias foi seguido pelo fechamento imediato (Sham) ou oclusão de 4 min (isquemia moderada) ou 8 min (isquemia prolongada). A esternotomia e pele foram fechados eo rato foi transferido para a cama aquecimento para a recuperação. Após a recuperação, análise funcional foi obtida em 12 intervalos hr até 48 horas. Resultados jove_content Os ratos que foram submetidos à cirurgia sham não mostraram déficit membro posterior observável. Ratos submetidos à isquemia moderada por 4 min teve déficit funcional mínimo em 12 horas seguido de progressão para completar a paralisia em 48 horas. Ratos submetidos à isquemia prolongada teve uma paralisia imediata com qualquer movimento posterior de membros observável em qualquer ponto no pós-operatório. Não houve mortalidade intra-operatória observada ou pós-operatório. Conclusão Reprodutível menor paralisia extremidade imediato ou retardado pode ser alcançado em um modelo murino. Além disso, usando uma esternotomia mediana e cuidadosa dissecação, as taxas de sobrevivência elevadas, e reprodutibilidade pode ser conseguida.

Ratos foram submetidos a cirurgia sham (n = 3) ou oclusão aórtica por 4 (n = 3) a 8 min (n = 3). Camundongos pós-operatório foram classificados pelo Índice de Basso Mouse (Figura 1). Os ratos que foram submetidos à cirurgia sham não tinha déficits funcionais observáveis ​​em qualquer ponto no pós-operatório. Ratos submetidos à isquemia moderada (4 min) tiveram perto de função normal traseira de membros em 12 horas com o declínio funcional progressivo para completar paralisia por 48 ho...

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Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproducable Paraplegia por Thoracic Aorta Oclusão em um modelo murino de Medula Espinhal A isquemia-reperfusão

A falta de entendimento mecanicista da medula espinhal lesão de isquemia-reperfusão tem dificultado mais adjuntos para evitar paraplegia após operação da aorta alto risco. Assim, o desenvolvimento de modelos animais é imperativo. Este manuscrito demonstra reprodutível menor paralisia extremidade após oclusão da aorta torácica em um modelo murino.

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Aguda e crônica teste sensorial tátil após a lesão medular em ratos

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Medicina

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Um modelo de contusão grave de lesão medular em ratos

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

Um modelo murino de Spinal Cord Injury do colo do útero para o Estudo de pós-lesional respiratória Neuroplasticidade

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Um modelo murino de isquemia-reperfusão, através da ligadura da artéria Descendente Anterior Esquerda

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A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

Um sistema de rádio-telemetria para monitorar a função cardiovascular em ratos com Medula Espinhal transecção e Embryonic Stem Neural enxertos de células-

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

A Neonatal do rato Spinal Cord Injury Compression Modelo

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Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Modelo murino de isquemia-reperfusão

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Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia

Déficit motor reprodutível após oclusão aórtica em um modelo de rato da isquemia da medula espinhal

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Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

Modelo de Mouse de dois vasos oclusão de isquémia-reperfusão Cerebral

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

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Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...