Name: in situ tem of biological assemblies in liquid
Uploaded: 2013-12-30T20:00:00
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लेखक हमारे शोध प्रयासों को प्रोत्साहित करने के लिए वर्जीनिया टेक कैरिलियन रिसर्च इंस्टीट्यूट के निदेशक डॉ माइकल जे फ्रीलैंडर को स्वीकार करते हैं । इस परियोजना को विकास कोष द्वारा एस.M.M और D.F.K. के लिए और भाग में क्रिटिकल टेक्नोलॉजी और एप्लाइड साइंस के लिए वर्जीनिया टेक में संस्थान के नैनो जैव पहल द्वारा समर्थित किया गया था ।

1. एफ़िनिटी कैप्चर डिवाइस तैयार करें16
<ol><li>सिलिकॉन नाइट्राइड ई-चिप्स को 2 मिनट के लिए 15 मिलीलीटर एसीटोन में इनक्यूबेटिंग करके साफ करें और इसके बाद 2 मिनट(चित्रा 1 ए)के लिए 15 मिलीलीटर म...

<ol>
	<li>Zhou, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+atomic+resolution+structural+determination+by+single-particle+cryo-electron+microscopy.">Towards atomic resolution structural determination by single-particle cryo-electron microscopy.</a> Curr. Opin. Struct. Biol. 18, 218-228 (2008).</li><li>Wolf, M., Garcea, R. L., Grigorieff, N., Harrison, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subunit+interactions+in+bovine+papillomavirus.">Subunit interactions in bovine papillomavirus.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 6298-6303 (2010).</li><li>Dubochet, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryo-electron+microscopy+of+vitrified+specimens.">Cryo-electron microscopy of vitrified specimens.</a> Q. Rev. Biophys. 21, 129-228 (1988).</li><li>Unwin, P. N., Henderson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+structure+determination+by+electron+microscopy+of+unstained+crystalline+specimens.">Molecular structure determination by electron microscopy of unstained crystalline specimens.</a> J. Mol. Biol. 94, 425-440 (1975).</li><li>Ohi, M., Li, Y., Cheng, Y., Walz, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Negative Staining and Image Classification - Powerful Tools in Modern Electron Microscopy. Biol. Proced. Online. 6, 23-34 (2004).</li><li>Adrian, M., Dubochet, J., Fuller, S. D., Harris, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryo-negative+staining.">Cryo-negative staining.</a> Micron. 29, 145-160 (1998).</li><li>Parsons, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+wet+specimens+in+electron+microscopy.+Improved+environmental+chambers+make+it+possible+to+examine+wet+specimens+easily.">Structure of wet specimens in electron microscopy. Improved environmental chambers make it possible to examine wet specimens easily.</a> Science. 186, 407-414 (1974).</li><li>Parsons, D. F., Matricardi, V. R., Moretz, R. C., Turner, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+microscopy+and+diffraction+of+wet+unstained+and+unfixed+biological+objects.">Electron microscopy and diffraction of wet unstained and unfixed biological objects.</a> Adv. Biol. Med. Phys. 15, 161-270 (1974).</li><li>Hui, S. W., Parsons, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+diffraction+of+wet+biological+membranes.">Electron diffraction of wet biological membranes.</a> Science. 184, 77-78 (1974).</li><li>Hui, S. W., Parsons, D. F., Cowden, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+diffraction+of+wet+phospholipid+bilayers.">Electron diffraction of wet phospholipid bilayers.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 71, 5068-5072 (1974).</li><li>Ring, E. A., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+system+for+transmission+electron+microscopy.">Microfluidic system for transmission electron microscopy.</a> Microsc. Microanal. 16, 622-629 (2010).</li><li>Dukes, M. J., Ramachandra, R., Baudoin, J. P., Gray Jerome, W., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+locations+of+gold-labeled+proteins+in+a+whole+mount+eukaryotic+cell+obtained+with+3nm+precision+using+aberration-corrected+scanning+transmission+electron+microscopy.">Three-dimensional locations of gold-labeled proteins in a whole mount eukaryotic cell obtained with 3nm precision using aberration-corrected scanning transmission electron microscopy.</a> J. Struct. Biol. 174, 552-562 (2011).</li><li>Yuk, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+EM+of+colloidal+nanocrystal+growth+using+graphene+liquid+cells.">High-resolution EM of colloidal nanocrystal growth using graphene liquid cells.</a> Science. 336, 61-64 (2012).</li><li>Peckys, D. B., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+gold+nanoparticle+uptake+in+live+cells+with+liquid+scanning+transmission+electron+microscopy.">Visualizing gold nanoparticle uptake in live cells with liquid scanning transmission electron microscopy.</a> Nano Lett. 11, 1733-1738 (2011).</li><li>Klein, K. L., Anderson, I. M., de Jonge, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmission+electron+microscopy+with+a+liquid+flow+cell.">Transmission electron microscopy with a liquid flow cell.</a> J. Microsc. 242, 117-123 (2011).</li><li>Degen, K., Dukes, M., Tanner, J. R., Kelly, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+affinity+capture+devices-a+nanoscale+purification+platform+for+biological+in+situ+transmission+electron+microscopy.">The development of affinity capture devices-a nanoscale purification platform for biological in situ transmission electron microscopy.</a> Rsc. Adv. 2, 2408-2412 (2012).</li><li>Gilmore, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+viral+assemblies+in+a+nanoscale+biosphere.">Visualizing viral assemblies in a nanoscale biosphere.</a> Lab Chip. 13, 216-219 (2013).</li><li>Bican, P., Cohen, J., Charpilienne, A., Scherrer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+and+characterization+of+bovine+rotavirus+cores.">Purification and characterization of bovine rotavirus cores.</a> J. Virol. 43, 1113-1117 (1982).</li><li>Frank, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SPIDER+and+WEB:+processing+and+visualization+of+images+in+3D+electron+microscopy+and+related+fields.">SPIDER and WEB: processing and visualization of images in 3D electron microscopy and related fields.</a> J. Struct. Biol. 116, 190-199 (1996).</li><li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-atomic+resolution+using+electron+cryomicroscopy+and+single-particle+reconstruction.">Near-atomic resolution using electron cryomicroscopy and single-particle reconstruction.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 1867-1872 (2008).</li><li>Scheres, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Bayesian+view+on+cryo-EM+structure+determination.">A Bayesian view on cryo-EM structure determination.</a> J. Mol. Biol. 415, 406-418 (2012).</li><li>Kelly, D. F., Abeyrathne, P. D., Dukovski, D., Walz, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Affinity+Grid:+a+pre-fabricated+EM+grid+for+monolayer+purification.">The Affinity Grid: a pre-fabricated EM grid for monolayer purification.</a> J. Mol. Biol. 382, 423-433 (2008).</li></ol>

हमारे प्रस्तुत काम में, हमने रोटावायरस डील्प्स को माइक्रोफ्लुइडिक प्लेटफॉर्म पर आत्मीयता कैप्चर दृष्टिकोण नियोजित किया। यह तरल माइक्रोएनवायरमेंट में मैक्रोमॉलिकुलर परिसरों की सीटू इमेजिंग म?...

जीव विज्ञानियों और इंजीनियरों का एक आम लक्ष्य आणविक मशीनों के आंतरिक कामकाज को समझना है। ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप (TEMs) के पास परमाणु संकल्प1-2पर इन जटिल विवरणों की कल्पना करने के लिए आदर्श उपकरण हैं । टेम की उच्च वैक्यूम प्रणाली को बनाए रखने के लिए, जैविक नमूने आमतौर पर विट्रियस आइस3,शर्करा4,भारी धातु लवण5,याउसकेकुछ संयोजन की पतली फिल्मों में एम्बेडेड होते हैं। नतीजतन, एम्बेडेड नमूनों की छवियां गतिशील प्रक्रियाओं के केवल सीमित स्नैपशॉट प्रकट कर सकती हैं।
पर्यावरणीय तरल कक्षों में हाइड्रेटेड जैविक नमूनों को बनाए रखने के प्रारंभिक प्रयास पार्संस और सहयोगियों द्वारा अंतर पंपिंग चरणों का उपयोग करके किए गए थे। अन दागदार कैटालैस क्रिस्टल के इलेक्ट्रॉन विवर्तन पैटर्न को सफलतापूर्वक हाइड्रेटेड राज्य7-8में 3 Å के संकल्प में दर्ज किया गया था। इसके अलावा, मानव एरिथ्रोसाइट्स9-10के हाइड्रेटेड झिल्ली में चरण-अलग लिपिड डोमेन की जांच की जा सकती है। हालांकि, तरल और इलेक्ट्रॉन बीम के साथ इसके हस्तक्षेप को फैलाने के कारण गति, गंभीर संकल्प हानि के परिणामस्वरूप और जैविक नमूनों का उपयोग करके आगे के प्रयोगों का हाल तक प्रयास नहीं किया गया था।
नव विकसित माइक्रोफ्लुइडिक नमूना धारकों को पेश किया गया है जो माइक्रो-स्केल पर्यावरण कक्ष बनाने के लिए सेमीकंडक्टर माइक्रोचिप्स का उपयोग करते हैं। ये उपकरण तरल में नमूनों को बनाए रख सकते हैं, जबकि वे एक TEM कॉलम11-12में तैनात हैं । TEM इमेजिंग में इस तकनीकी सफलता शोधकर्ताओं को देखने के लिए, पहली बार, आणविक स्तर13पर प्रगतिशील घटनाओं की अनुमति दी गई है । हम इस नए तौर-तरीके को'सीटू आणविक माइक्रोस्कोपी में' के रूप में संदर्भित करते हैं क्योंकि प्रयोग अब ईएम कॉलम14-15के "अंदर" किए जा सकते हैं। इस विधि का समग्र लक्ष्य नैनोमीटर संकल्प पर उनके गतिशील व्यवहार का निरीक्षण करने के लिए तरल में जैविक विधानसभाओं की छवि बनाना है। विकसित तकनीक के पीछे तर्क वास्तविक समय टिप्पणियों को रिकॉर्ड करना और समाधान में जैविक मशीनरी के नए गुणों की जांच करना है। यह पद्धति सेलुलर और आणविक जीव विज्ञान12-16में व्यापक उद्देश्यों के लिए TEMs के उपयोग का विस्तार करती है ।
वर्तमान वीडियो लेख में, हम व्यावसायिक रूप से उपलब्ध माइक्रोफ्लुइडिक नमूना धारक को इकट्ठा करने और उपयोग करने के लिए एक व्यापक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं। ये विशेष धारक एकीकृत स्पेसर्स के साथ उत्पादित सिलिकॉन नाइट्राइड माइक्रोचिप्स का उपयोग एक तरल कक्ष बनाने के लिए करते हैं जो समाधान की मिनट की मात्रा को संलग्न करता है। पतली, पारदर्शी खिड़कियां इमेजिंग उद्देश्यों के लिए माइक्रोचिप्स में नक़्क़ाशीदार हैं12। हम एक TEM का उपयोग कर तरल में सिमियन रोटावायरस डबल स्तरित कणों (DLPs) की जांच करने के लिए एक माइक्रोफ्लुइडिक धारक के उचित उपयोग का प्रदर्शन करते हैं। यह सुनिश्चित करने के लिए कि डीएलसीपी जैसी जैविक असेंबली, इमेजिंग करते समय बड़ी दूरी पर तेजी से फैलाना नहीं है, हम उन्हें माइक्रोफ्लुइडिक चैंबर16की सतह पर सीमित करने के लिए आत्मीयता कैप्चर दृष्टिकोण को नियोजित करते हैं। इस आणविक कैप्चर चरण को तरल में जैविक नमूनों की इमेजिंग के लिए वैकल्पिक तकनीकों पर एक बड़ा लाभ है क्योंकि यह उन छवियों के अधिग्रहण के लिए अनुमति देता है जिनका उपयोग डाउनस्ट्रीम प्रसंस्करण दिनचर्या के लिए किया जाएगा। माइक्रोफ्लुइडिक इमेजिंग के साथ मिलकर इस्तेमाल किया जाने वाला यह कैप्चर स्टेप हमारी प्रक्रियाओं के लिए अद्वितीय है17. TEM या microfluidic इमेजिंग कक्षों का उपयोग कर संरचनात्मक जीव विज्ञान अनुप्रयोगों को रोजगार पाठकों आत्मीयता पर कब्जा तकनीकों के उपयोग पर विचार कर सकते है जब आणविक स्तर पर गतिशील टिप्पणियों अंत लक्ष्य हैं ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="832">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:237px;">E-chips, spacer chip</td>
			<td style="width:183px;">Protochips, Inc.</td>
			<td style="width:245px;">EPB-52TBD</td>
			<td style="width:167px;">400 &#956;m x 50 &#956;m window</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:237px;">E-chip, top chip</td>
			<td style="width:183px;">Protochips, Inc.</td>
			<td style="width:245px;">EPT-45W</td>
			<td style="width:167px;">400 &#956;m x 50 &#956;m window</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Ni-NTA lipid</td>
			<td style="width:183px;">Avanti Polar Lipids</td>
			<td style="width:245px;">790404P</td>
			<td style="width:167px;">Powder form</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">DLPC (12:0) lipid</td>
			<td style="width:183px;">Avanti Polar Lipids</td>
			<td style="width:245px;">850335P</td>
			<td style="width:167px;">Powder form</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Volumetric flasks&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:245px;">20-812A; 20-812C</td>
			<td style="width:167px;">1 ml; 5 ml&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Hamilton Syringes</td>
			<td style="width:183px;">Hamilton Co.</td>
			<td style="width:245px;">80300, 80400</td>
			<td style="width:167px;">1-10 &#956;l; 1-25 &#956;l</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Whatman #1 filter paper</td>
			<td style="width:183px;">Whatman</td>
			<td style="width:245px;">1001 090</td>
			<td style="width:167px;">100 pieces, 90 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Glass Petri dishes</td>
			<td style="width:183px;">Corning&#160;</td>
			<td style="width:245px;">70165-101</td>
			<td style="width:167px;">100 mm x 15 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Glass Pasteur pipettes</td>
			<td style="width:183px;">VWR</td>
			<td style="width:245px;">14673-010</td>
			<td style="width:167px;">14673-010</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Glass culture tubes</td>
			<td style="width:183px;">VWR</td>
			<td style="width:245px;">47729-566</td>
			<td style="width:167px;">6 mm x 50 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Acetone</td>
			<td style="width:183px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:245px;">&#160;A11-1</td>
			<td style="width:167px;">1 L</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Methanol</td>
			<td style="width:183px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:245px;">&#160;A412-1</td>
			<td style="width:167px;">1 L</td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:31px;width:237px;">Chloroform&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Electron Microcopy Sciences</td>
			<td style="width:245px;">12550</td>
			<td style="width:167px;">100 ml&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:31px;width:237px;">His-tagged Protein A</td>
			<td style="width:183px;">Abcam, Inc.</td>
			<td style="width:245px;">ab52953</td>
			<td style="width:167px;">10 mg</td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:31px;width:237px;">Milli-Q water system</td>
			<td style="width:183px;">EMD Millipore Corp.</td>
			<td style="width:245px;">Z00QSV001</td>
			<td style="width:167px;">Ultrapure Water</td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:31px;width:237px;">HEPES</td>
			<td style="width:183px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:245px;">BP310-500</td>
			<td style="width:167px;">500 g</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:237px;">Equipment&#160;</td>
			<td style="width:183px;"></td>
			<td style="width:245px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:237px;">Poseidon In situ specimen holder</td>
			<td style="width:183px;">Protochips, Inc.</td>
			<td style="width:245px;"></td>
			<td>&#160;FEI compatible</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:237px;">FEI Spirit BioTwin TEM</td>
			<td style="width:183px;">FEI Co.</td>
			<td style="width:245px;"></td>
			<td>120 kV</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:237px;">Eagle 2k HS CCD camera</td>
			<td style="width:183px;">FEI Co.</td>
			<td style="width:245px;"></td>
			<td>10&#160;&#197;/pixel sampling at 30,000X</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:237px;">Gatan 655 Dry pump station</td>
			<td style="width:183px;">Gatan, Inc.</td>
			<td style="width:245px;"></td>
			<td>Pump holder tip to 10-6&#160;range</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:237px;">PELCO easiGlow, glow discharge unit</td>
			<td style="width:183px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:245px;"></td>
			<td>&#160;Negative polarity mode</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:237px;">Isotemp heated stir plate</td>
			<td style="width:183px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:245px;"></td>
			<td>Heat to 150 &#186;C for 1.5 hr</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in situ tem of biological assemblies in liquid

शोधकर्ता जैविक संस्थाओं की जांच करने और नई सामग्रियों का आकलन करने के लिए नियमित रूप से ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप (TEMs) का उपयोग करते हैं । यहां, हम इन उपकरणों के लिए एक अतिरिक्त आवेदन का वर्णन-एक तरल वातावरण में वायरल विधानसभाओं को देखने । जैविक संरचनाओं की कल्पना करने की यह रोमांचक और उपन्यास विधि हाल ही में विकसित माइक्रोफ्लुइडिक-आधारित नमूना धारक का उपयोग करती है। हमारा वीडियो लेख दर्शाता है कि कैसे एक TEM के भीतर तरल नमूनों की छवि के लिए एक माइक्रोफ्लुइडिक धारक को इकट्ठा और उपयोग करना है। विशेष रूप से, हम अपने मॉडल सिस्टम के रूप में सिमियन रोटावायरस डबल-लेयर्ड कणों (डीएलसीपी) का उपयोग करते हैं। हम एफिनिटी बायोफिल्म्स के साथ तरल कक्ष की सतह को कोट करने के चरणों का भी वर्णन करते हैं जो डीबीपीएस को देखने वाली खिड़की पर सीमित करते हैं। यह हमें इस तरीके से विधानसभाओं की छवि बनाने की अनुमति देता है जो 3डी संरचना निर्धारण के लिए उपयुक्त है। इस प्रकार, हम एक देशी तरल वातावरण में उपवायरल कणों की पहली झलक पेश करते हैं।

ई-चिप्स का उपयोग करके तरल में डीलबीपीएस की प्रतिनिधि छवियां जो चमक-निर्वहन(चित्रा 3 ए)किसी दिए गए देखने के क्षेत्र में कम डीलप्स दिखाती हैं, संभवतः प्रसार के कारण, डीलिप की तुलना में जो आत्मीयता कै...

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In situ TEM of Biological Assemblies in Liquid

सीटू में तरल में जैविक विधानसभाओं के TEM

यहां हम ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप का उपयोग करके नैनोमीटर रिज़ॉल्यूशन पर तरल में वायरल कॉम्प्लेक्स को इमेज करने की प्रक्रिया का वर्णन करते हैं।

Researchers regularly use Transmission Electron Microscopes (TEMs) to examine biological entities and to assess new materials. Here, we describe an ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

In situ TEM of Biological Assemblies in Liquid

Fluorescent Nanoparticles for the Measurement of Ion Concentration in Biological Systems

बायोलॉजिकल सिस्टम में आयन एकाग्रता के मापन के लिए प्रतिदीप्त नैनोकणों

Tightly regulated ion homeostasis throughout the body is necessary for the prevention of such debilitating states as dehydration.1 In contrast, rapid ion ...

Multiparametric Optical Mapping of the Langendorff-perfused Rabbit Heart

Multiparametric खरगोश Langendorff perfused हार्ट के ऑप्टिकल मानचित्रण

Optical imaging and fluorescent probes have significantly advanced research methodology in the field of cardiac electrophysiology in ways that could not ...

Optical Mapping of Action Potentials and Calcium Transients in the Mouse Heart

माउस हार्ट में कार्रवाई क्षमता और कैल्शियम यात्रियों के ऑप्टिकल मानचित्रण

The mouse heart is a popular model for cardiovascular studies due to the existence of low cost technology for genetic engineering in this species. ...

Cellular Lipid Extraction for Targeted Stable Isotope Dilution Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Analysis

लक्षित स्थिर आइसोटोप कमजोर पड़ने तरल क्रोमैटोग्राफी मास स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषण के लिए सेलुलर लिपिड निकालना

The metabolism of fatty acids, such as arachidonic acid (AA) and linoleic acid (LA), results in the formation of oxidized bioactive lipids, including ...

Quantification of Global Diastolic Function by Kinematic Modeling-based Analysis of Transmitral Flow via the Parametrized Diastolic Filling Formalism

Parametrized डायस्टोलिक भरने रीतिवाद के माध्यम से Transmitral फ्लो की विज्ञान सम्बन्धी मॉडलिंग आधारित विश्लेषण द्वारा ग्लोबल डायस्टोलिक समारोह की मात्रा

Quantitative cardiac function assessment remains a challenge for physiologists and clinicians.&#160;Although historically invasive methods have comprised ...

Generation of Scalable, Metallic High-Aspect Ratio Nanocomposites in a Biological Liquid Medium

एक जैविक तरल माध्यम में स्केलेबल, धातु उच्च पहलू अनुपात nanocomposites का सृजन

The goal of this protocol is to describe the synthesis of two novel biocomposites with high-aspect ratio structures. The biocomposites consist of copper ...

In Situ Mapping of the Mechanical Properties of Biofilms by Particle-tracking Microrheology

In Situ Mapping of the Mechanical Properties of Biofilms by Particle-tracking Microrheology

कण-ट्रैकिंग Microrheology द्वारा biofilms के यांत्रिक गुणों के सीटू मानचित्रण में

Bacterial cells are able to form surface-attached biofilm communities known as biofilms by encasing themselves in extracellular polymeric substances ...

Alternating Magnetic Field-Responsive Hybrid Gelatin Microgels for Controlled Drug Release

नियंत्रित दवा रिलीज के लिए चुंबकीय क्षेत्र उत्तरदायी हाइब्रिड जिलेटिन Microgels बारी

Magnetically-responsive nano/micro-engineered biomaterials that enable a tightly controlled, on-demand drug delivery have been developed as new types of ...

A Novel Technique for Generating and Observing Chemiluminescence in a Biological Setting

एक जैविक सेटिंग में उत्पन्न और देख Chemiluminescence के लिए एक उपन्यास तकनीक

Intraoperative imaging techniques have the potential to make surgical interventions safer and more effective; for these reasons, such techniques are ...

Automated Robotic Liquid Handling Assembly of Modular DNA Devices

स्वचालित रोबोट तरल हैंडलिंग मॉड्यूलर डीएनए उपकरणों की विधानसभा

Recent advances in modular DNA assembly techniques have enabled synthetic biologists to test significantly more of the available &#34;design space&#34; ...