Name: isolation of myeloid dendritic cells and epithelial cells from human thymus
Uploaded: 2013-09-19T21:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Myeloid Dendritic Cells and Epithelial Cells from Human Thymus at JoVE.com

Vi er taknemmelige for kirurgerne på Institut for thorax og kardiovaskulær kirurgi, Universitetsklinikken Tübingen for at give os de thymus prøver og Bruno Kyewski (DKFZ, Heidelberg, Tyskland) varetagelse af CDR2 antistof. Vi vil også gerne takke Hans-Jörg Bühring og Sabrina Grimm fra sorteringsanlægget (University of Tübingen). Dette arbejde blev støttet af SFB 685 og Hertie Foundation.

1.. Udarbejdelse af Værktøj, enzymløsninger og buffere Udfør følgende præparative trin forud for påbegyndelse af protokollen. <ol><li> Værktøj Ren, tør og autoklaveres følgende værktøjer og holde dem i sterile emballage indtil brug. <ol><li> Små skarpe saks med enten buede eller lige tips til at skære brissel væv. Små buede pincet med savtakkede tips til håndtering af væv. </li><li> 50 ml Oak Ridge centrifugerør PC, til Percoll-density centrifugering. </li></ol><...

<ol>
	<li>Miller, J. F. A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+discovery+of+thymus+function+and+of+thymus-derived+lymphocytes.">The discovery of thymus function and of thymus-derived lymphocytes.</a> Immunological Reviews. 185, 7-14 (2002).</li><li>Klein, L., Hinterberger, M., Wirnsberger, G., Kyewski, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antigen+presentation+in+the+thymus+for+positive+selection+and+central+tolerance+induction.">Antigen presentation in the thymus for positive selection and central tolerance induction.</a> Nat Rev Immunol. 9, 833-844 (2009).</li><li>Vandenabeele, S., Hochrein, H., Mavaddat, N., Winkel, K., Shortman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+thymus+contains+2+distinct+dendritic+cell+populations.">Human thymus contains 2 distinct dendritic cell populations.</a> Blood. 97, 1733-1741 (2001).</li><li>Gotter, J., Brors, B., Hergenhahn, M., Kyewski, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medullary+Epithelial+Cells+of+the+Human+Thymus+Express+a+Highly+Diverse+Selection+of+Tissue-specific+Genes+Colocalized+in+Chromosomal+Clusters.">Medullary Epithelial Cells of the Human Thymus Express a Highly Diverse Selection of Tissue-specific Genes Colocalized in Chromosomal Clusters.</a> The Journal of Experimental Medicine. 199, 155-166 (2004).</li><li>Rouse, R. V., Bolin, L. M., Bender, J. R., Kyewski, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monoclonal+antibodies+reactive+with+subsets+of+mouse+and+human+thymic+epithelial+cells.">Monoclonal antibodies reactive with subsets of mouse and human thymic epithelial cells.</a> Journal of Histochemistry &amp; Cytochemistry. 36, 1511-1517 (1988).</li><li>Stoeckle, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cathepsin+S+dominates+autoantigen+processing+in+human+thymic+dendritic+cells.">Cathepsin S dominates autoantigen processing in human thymic dendritic cells.</a> Journal of Autoimmunity. 38, 332-343 (2012).</li><li>Woods Ignatoski, K. M., Bingham, E. L., Frome, L. K., Doherty, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Directed+trans-differentiation+of+thymus+cells+into+parathyroid-like+cells+without+genetic+manipulation.">Directed trans-differentiation of thymus cells into parathyroid-like cells without genetic manipulation.</a> Tissue Eng Part C Methods. 17, 1051-1059 (2011).</li><li>Williams, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Cell+Analysis+of+Complex+Thymus+Stromal+Cell+Populations:+Rapid+Thymic+Epithelia+Preparation+Characterizes+Radiation+Injury.">Single Cell Analysis of Complex Thymus Stromal Cell Populations: Rapid Thymic Epithelia Preparation Characterizes Radiation Injury.</a> Clinical and Translational Science. 2, 279-285 (2009).</li><li>Bendriss-Vermare, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+thymus+contains+IFN-&#945;-producing+CD11c-,+myeloid+CD11c+,+and+mature+interdigitating+dendritic+cells.">Human thymus contains IFN-&#945;-producing CD11c-, myeloid CD11c+, and mature interdigitating dendritic cells.</a> The Journal of Clinical Investigation. 107, 835-844 (2001).</li><li>Schmitt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+characterization+of+human+thymic+dendritic+cell+subsets.">Ex vivo characterization of human thymic dendritic cell subsets.</a> Immunobiology. 212, 167-177 (2007).</li><li>Dzionek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BDCA-4:+Three+Markers+for+Distinct+Subsets+of+Dendritic+Cells+in+Human+Peripheral+Blood.">BDCA-4: Three Markers for Distinct Subsets of Dendritic Cells in Human Peripheral Blood.</a> The Journal of Immunology. 165, 6037-6046 (2000).</li><li>Wu, L., Shortman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+thymic+dendritic+cells.">Heterogeneity of thymic dendritic cells.</a> Seminars in Immunology. 17, 304-312 (2005).</li><li>Seach, N., Wong, K., Hammett, M., Boyd, R. L., Chidgey, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purified+enzymes+improve+isolation+and+characterization+of+the+adult+thymic+epithelium.">Purified enzymes improve isolation and characterization of the adult thymic epithelium.</a> Journal of Immunological Methods. 385, 23-34 (2012).</li><li>Adamopoulou, E., Tenzer, S., Hillen, N., Klug, P., Rota, I. A., Tietz, S., Gebhardt, M., Stevanovic, S., Schild, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+the+MHC-peptide+matrix+of+central+tolerance+in+the+human+thymus.">Exploring the MHC-peptide matrix of central tolerance in the human thymus.</a> Nature Communications. , (2013).</li></ol>

Protokollen beskrevet her er en ændring af den protokol, publiceret af Gotter et al 4. Kritiske trin i protokollen er den tilstand og indledende behandling af væv samt Percoll tæthed separation. Vi anbefaler stærkt at behandle vævet så hurtigt som muligt efter samling. Det er vigtigt at arbejde hurtigt, men grundigt, når rensning og skæring af vævet. Under thymocyt vask beskrevet i trin 2.3, er det afgørende at finde den rette balance, når de anvender tryk med bagsiden af ​​sprøjteste...

Thymus er det organ, hvor T-celle-udvikling forekommer. Dets relative og absolutte størrelse falder med alderen, når det bliver successivt erstattet af fedt, selvom thymisk aktivitet stadig kan påvises i alderdommen. Dens betydning for immunresponset blev påvist i begyndelsen af 1960&#39;erne 1.. T-celle-repertoire er formet gennem interaktion af T-celle-receptorer med peptid-MHC-komplekser på forskellige typer af thymus APC, som giver overlevelse eller død signaler på at udvikle T-celler, hvilket resulterer i en funktionel og i vid udstrækning selv-tolerant T-celle-repertoire 2. Ca. 98% af cellerne i den menneskelige thymus udvikler T-celler omtalt som celler thymocytter. De resterende 2% består af en række forskellige celletyper, herunder en række af TEC (kortikal, medullær, subkapsulær), myeloide og plasmacytoid DC (MDC PDC), makrofager, B-celler, modne re-cirkulerende T-celler, granulocytter, fibroblasts, endotelceller og meget sjældne epitelceller med et udtryk fænotype, der ligner celler fra andre væv, såsom muskel, neuroner og respiratorisk epitel (fig. 1). Af disse TEC og DC er de store APC typer findes i en normal thymus. I de senere år har rensning af disse APC typer for kultur og molekylær profilering fået mere og mere interesse. På grund af deres lave frekvens, isolering af nogen af ​​disse celletyper detaljerede analyser kræver en effektiv, reproducerbar og omkostningseffektiv procedure. Metoden præsenteres her er en modifikation fra tidligere offentliggjorte studier 3,4. Som med enhver anden væv kan celleekstraktion thymus opnås ved enzymatisk disaggregering celle-celle og celle-matrix-interaktion netværk, for at opnå en suspension af enkeltceller. Der er visse parametre som god dissociation effektivitet, celleudbytte, levedygtighed og fastholdelse af celle s celleoverfladetransport markører, der er afgørende og skal optimeres for en vellykket isolering af disse sjældne cellepopulationer. I denne protokol, er isolering af DC og TEC delmængder udføres ved at lave en enkelt celle suspension af væv ved mekanisk sprængning og enzymatisk nedbrydning. Vi bruger Collagenase A fra Clostridium histolyticum, der har et afbalanceret forhold mellem forskellige enzymaktiviteter, at nedbryde native collagen, der holder vævet sammen. DNase I indgår i enzymet løsning til at reducere celleaggregering grund fri DNA fra døde celler (thymocytter er meget følsomme). Vi tilbyder også en alternativ tilgang til den typiske enzymatiske vævsfordøjelse involverer mekanisk og enzymatisk væv behandling bistået af et væv dissociator. Enkelt celle suspension underkastes derefter en enkelt Percoll-densitetscentrifugering til berigelse af lav densitet fraktion (LDF) af celler. Fra denne fraktion af celler kan DC isoleres ved farvning feller DC-overflade markører (dvs. CD11c +) og ved hjælp af magnetisk separation eller fluorescens-aktiveret celle sortering (FACS). I modsætning til de lymfoide celler, der omfatter størstedelen af ​​celler i thymus, behøver TEC ikke udtrykke CD45 ved høje niveauer, men er positive for epitelcelleadhæsionsmolekyle EpCAM. CTec kan skelnes fra medullær TEC ved ekspression af en endnu udefineret antigen genkendes af CDR-2 (kortikal dendritiske retikulocyt-2)-antistof 4,5 og noget lavere EpCAM udtryk. Den differentielle co-ekspression af EpCAM og CDR2 muliggør effektiv isolering af disse TEC undergrupper via high-speed cellesortering 6. Protokollen præsenteres her er optimeret til human thymus væv. Varigheden af ​​fremgangsmåden afhænger af mængden af ​​væv og evne til forsøgslederen samt hastigheden af ​​cellesorteringsapparatet, hvis der anvendes FACS-sortering. Normalt kan protokollen til isolering af DC være afsluttet inden for 5-6 Time og til isolering af TEC i 8-10 timer. Isolering af DC og TEC delmængder fra thymus væv er tid følsomme. Jo hurtigere isolation procedure, jo bedre tilstand af cellerne. Endelig kan de isolerede celler anvendes til yderligere undersøgelser som sammenlignende undersøgelser af mRNA og proteinekspression PCR-forsøg, proteinisolering, molekylær profilering (dvs. transcriptomics, mikro RNA-analyse) samt cellekultur 6. Etiske retningslinjer For at kunne arbejde med humant thymus væv forskeren har brug for at indhente godkendelse fra lokale etiske udvalg eller de ansvarlige myndigheder samt en informeret skriftligt samtykke fra donor (eller normalt sine forældre, da væv sædvanligvis er fremstillet af mindreårige børn). Desuden bør alle humane væv skal håndteres som potentielt smittefarlige og passende foranstaltninger der skal træffes, såsom at arbejde med handsker osv.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Reagents and Materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>PAA</td>
			<td>E15-842</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s PBS</td>
			<td>PAA</td>
			<td>H15-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum-Gold</td>
			<td>PAA</td>
			<td>A15-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>PAA</td>
			<td>K41-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase A</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10 103 586 001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase I, grade II bovine pancreatic</td>
			<td>Roche</td>
			<td>10 104 159 001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA 10x in PBS</td>
			<td>PAA</td>
			<td>L11-001</td>
			<td>stock conc. 20 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 Protein Labelling kit</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A-10235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-human CDR2 (purified)</td>
			<td>Bruno Kyewski, DKFZ- Heidelberg, Germany</td>
			<td></td>
			<td>labeled with Alexa Fluor 488</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-human CD45 (Pacific Blue)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>304022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-human EpCAM (APC)</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-091-254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-human CD11c (PE)</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-092-411</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-PE Microbeads</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-048-801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-CD45 Microbeads, human</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-045-801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LS columns</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-042-401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gentleMACS C Tubes</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-093-237</td>
			<td>for tissue dissociator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percoll (density 1.130 g/ml)</td>
			<td>GE Healthcare, Life Sciences</td>
			<td>17-0891-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile distilled Water (DNAse/ RNAse free)</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>10977-035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gamunex 10%</td>
			<td>Tajecris-Biotherapeutics</td>
			<td>G120052</td>
			<td>1:10 pre-dilution, use 20 &#956;l/1 x 106cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.22 &#956;m filter</td>
			<td>Millex GS</td>
			<td>SLGS033SS</td>
			<td>Syringe driven</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stericup filter unit</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SCGPU05RE</td>
			<td>Pump driven</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml PC oak ridge centrifuge tubes</td>
			<td>Nalgene</td>
			<td>3118-0050</td>
			<td>50 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml PP conical tubes</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>352070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12 mm x 75 mm 5 ml test tubes</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>352058</td>
			<td>FACS stainings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer 70 &#956;m</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>INSTRUMENTS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow Cytometer-Sorter (BD FACSAriaTMIIu)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Evolution R6 (rotor)</td>
			<td>Kendro</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotator REAX 2</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gentleMACS Dissociator</td>
			<td>Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-093 235</td>
			<td>tissue dissociator</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of myeloid dendritic cells and epithelial cells from human thymus

I denne protokol giver vi en metode til at isolere dendritiske celler (DC) og epitelceller (TEC) fra det menneskelige thymus. DC og TEC er den største antigenpræsenterende celle (APC) typer findes i en normal thymus, og det er velkendt, at de spiller forskellige roller i løbet af thymisk valg. Disse celler er lokaliseret i forskellige mikromiljøer i thymus, og hver APC typen udgør kun en mindre population af celler. For yderligere at forstå biologi disse celletyper, karakteriseringen af ​​disse cellepopulationer er meget ønskeligt, men på grund af deres lave frekvens, isolering af nogen af ​​disse celletyper kræver en effektiv og reproducerbar fremgangsmåde. Denne protokol beskriver en metode til at opnå celler er egnede til karakterisering af forskellige cellulære egenskaber. Thymisk væv mekanisk forstyrret og efter forskellige trin i enzymatisk fordøjelse, er den resulterende cellesuspension beriget ved hjælp af en Percoll densitet centrifugering. Til isolering af myeloid DC (CD11 &lt;sup&gt; +) celler fra fraktionen med lav massefylde (LDF) er immunoselected ved magnetisk cellesortering. Berigelse af TEC populationer (MTEC, CTec) opnås ved udtømning af hæmatopoietiske (CD45 hi) celler fra low-density Percoll celle fraktion lade deres efterfølgende isolation via fluorescens aktiveret celle sortering (FACS) ved hjælp af specifikke cellemarkører den. De isolerede celler kan anvendes til forskellige efterfølgende anvendelser.

Som udgangsmateriale i denne protokol, vi bruger thymus væv fjernes fra børn, der gennemgår korrigerende kardiovaskulær kirurgi (Institut for thorax og kardiovaskulær kirurgi, Universitetsklinikken Tübingen) opnået efter informeret samtykke og under de institutionelle retningslinjer. Dette kasseret materiale kan variere meget i størrelse 2-30 g eller mere. Antallet af MDC og TEC delmængder (CTec og MTEC), der opnås, afhænger af størrelse samt en alder af thymus vævsprøve bruges til isolering. <p class=...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Myeloid Dendritic Cells and Epithelial Cells from Human Thymus at JoVE.com

Isolation of Myeloid Dendritic Cells and Epithelial Cells from Human Thymus

Denne protokol beskriver en metode til isolering af antigen-præsenterende celler fra human thymus via forskellige trin af enzymatisk spaltning af vævet efterfulgt af densitetscentrifugering af enkelt cellesuspension og endelig magnetiske og / eller FACS-sortering af cellepopulationer af interesse.

Isolering af myeloide dendritiske celler og epitelceller fra human Thymus

In this protocol we provide a method to isolate dendritic cells (DC) and epithelial cells (TEC) from the human thymus. DC and TEC are the major antigen ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

Isolering af Mouse Lung dendritiske celler

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

Isolation and Characterization of Dendritic Cells and Macrophages from the Mouse Intestine

Isolering og karakterisering af dendritiske celler og makrofager fra mus Tarmen

Within the intestine reside unique populations of innate and adaptive immune cells that are involved in promoting tolerance towards commensal flora and ...

Isolation, Identification, and Purification of Murine Thymic Epithelial Cells

Isolering, identifikation og oprensning af murine thymusepitelmonolag Celler

The thymus is a vital organ for T lymphocyte development. Of thymic stromal cells, thymic epithelial cells (TECs) are particularly crucial at multiple ...

T Cells Capture Bacteria by Transinfection from Dendritic Cells

T-celler Capture bakterier ved Transinfection fra dendritiske celler

Recently, we have shown, contrary to what is described, that CD4+ T cells, the paradigm of adaptive immune cells, capture bacteria from infected dendritic ...

Characterization of Human Monocyte-derived Dendritic Cells by Imaging Flow Cytometry: A Comparison between Two Monocyte Isolation Protocols

Karakterisering af Humane monocytafledte dendritiske celler fra Imaging flowcytometri: en sammenligning mellem to Monocyt Isolation protokoller

Dendritic cells (DCs) are antigen presenting cells of the immune system that play a crucial role in lymphocyte responses, host defense mechanisms, and ...

Generation of Human Monocyte-derived Dendritic Cells from Whole Blood

Generation of Human monocytafledte dendritiske celler fra fuldblod

Dendritic cells (DCs) recognize foreign structures of different pathogens, such as viruses, bacteria, and fungi, via a variety of pattern recognition ...

Isolation of Dendritic Cells from the Human Female Reproductive Tract for Phenotypical and Functional Studies

Isolering af dendritiske celler fra det menneskelige kvindelige forplantningsorganerne for Phenotypical og funktionelle studier

The characterization of the human dendritic cells (DCs) resident in mucosal tissues is challenging due to the difficulty in obtaining samples, and the low ...

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-&#945;

Development and Validation of an Ultrasensitive Single Molecule Array Digital Enzyme-linked Immunosorbent Assay for Human Interferon-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â±

Udvikling og validering af et Ultrasensitive enkelt molekyle Array Digital enzym-forbundet Immunosorbent Assay for menneskelige Interferon-α

The main aim of this protocol is to describe the development and validation of an interferon (IFN)-&#945; single molecule array digital Enzyme-Linked ...

Isolation and Adoptive Transfer of High Salt Treated Antigen-presenting Dendritic Cells

Isolation og adoptiv overførsel af højt saltindhold behandlet Antigen-præsenterer dendritiske celler

Excess dietary salt intake contributes to inflammation and plays a vital role in the development of hypertension. We previously found that ...

Isolation of Salivary Epithelial Cells from Human Salivary Glands for In Vitro Growth as Salispheres or Monolayers

Isolering af spyt Epiteliale celler fra humane spytkirtler til in vitro-vækst som Salisfærer eller Monolayers

The salivary glands are a site of significant interest for researchers interested in multiple aspects of human disease. One goal of researchers is to ...