Name: use of galleria mellonella as a model organism to study legionella pneumophila infection
Uploaded: 2013-11-22T14:00:00
Duration: 12 min 30 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection at JoVE.com

CR Хардинг была поддержана студенчества WT086724 Wellcome Trust.

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Галерее MELLONELLA личинок модель для легионелл инфекции является полезным инструментом для в естественных условиях исследования патогенеза. Здесь показано, что ряд аспектов макрофагов инфекции может быть обобщены в G. MELLONELLA модель, в том числе роли Dot / Icm T4BSS в вирулентности и бактериальной репликации и локализации Dot / ICM-эффекторной SIDC. Кроме того, мы показываем, что химический ингибитор полимеризации актина значительно снижает личинок смертности, имитируя результаты, полученные в macophages 47 и подтверждающие доказательства, что интернализация бактерий требуется, чтобы вызвать личинок смертности. Ранее было показано, что вариации в вирулентности между L. штаммы Pneumophila видели в других моделях инфекции может быть проверена в G. MELLONELLA и что индукция факторов вирулентности в пост-экспоненциальной фазе роста требуется для бактериальной вирулентности <suр&gt; 36, подтверждая, что Г. MELLONELLA является подходящей моделью для L. легионелл инфекции. Определение КОЕ L. легионелл из личинок инфицированных по отдельности или в смешанных инфекций значительно повышает полезность модели. Ранее несколько факторов были обнаружены, что имеют тонкие эффекты на бактериальной репликации в одной или нескольких моделей инфекции 29,48-51. Хотя личинки не обладают адаптивной иммунной системы, наличие врожденного иммунного ответа обеспечивает более высокий выбор по сравнению с только макрофагами, что может служить для усиления тонкие фенотипы. Таким образом, не исключено, что, в то время как эти штаммы, вероятно, не оказывает существенного влияния личинок смертности, они могут демонстрировать уменьшилось бактериальной репликации или пригодность в G. MELLONELLA модель. А также репликация L. легионелл в личинок, мы показали значительное истощение гемоцитов в конце инфекции. Как L.легионелл, как ожидается, чтобы лизировать клетки-хозяева, в конце своего цикла репликации, измерение истощение гемоцитов может также служить в качестве косвенного измерения бактериальной репликации. Истощение Hemocyte ранее коррелирует со смертностью от насекомых в инфекции 3,52, хотя недавние результаты показывают, что эта картина является более сложной, чем первая верили 37. Недавно было показано, что голодание личинок приводит к повышенной восприимчивости к инфекции путем подавления иммунного ответа 53. В анализах, описанных здесь, личинки не кормили в течение всего срока исследования и не известно, насколько хорошо кормили личинок будет реагировать на L. легионелл инфекции. Одним из преимуществ G. MELLONELLA в качестве модельного организма является простота добычи и количественной оценки гемоциты от зараженных личинок. Предыдущее видео показали различные методы для извлечения гемоциты от насекомых 54,55 однако, встретилисьХод представлены здесь проста и подходит для немедленной обработки. После извлечения гемоцитов могут быть легко количественно, используемый для иммунофлуоресцентного, просвечивающей электронной микроскопии 36 или проточной цитометрии 56 или культивируют и инфицированных исключая виво 3 позволяя ответ клеток к инфекции, которые будут подробно исследованы. Это значительно повышает гибкость модели. Одно предостережение иммунофлюоресцентного в G. MELLONELLA является ограниченное предложение антител сверяются с G. MELLONELLA белки. Тем не менее, исследования показали, создание антител против личиночных белков 57 и антител против белков человека, связанных с иммунной были найдены признать G. MELLONELLA белки 11, демонстрирующие потенциал для иммунофлуоресценции на G. MELLONELLA гемоциты. Легкость G. MELLONELLA инфекции позволяет быстро, средних экранов пропускной которые могутиспользоваться для сравнения вирулентность различных Legionella видов и штаммов и могут быть использованы для дальнейшего анализа ранее определенных факторов вирулентности, такие как молекул адгезии или 58 системы 59 типа 2 секреции, которые требуются для вирулентности в других моделях. Кроме того, использование этой модели позволит идентификацию и дополнительную характеристику новых факторов вирулентности в том числе и секретируемых перемещаться эффекторных белков. Недавно было показано, что фосфолипазы С активность L. легионелл играет важную роль в G. MELLONELLA вирулентности 60 и что эффектор белок Dot / Icm SdhA требуется для вирулентности 37. Кроме того, мы недавно показали, что существует корреляция между фенотипами наблюдаемых в G. MELLONELLA и в линии мышей / J 37. Это подчеркивает ценность этого инструмента в дополнение к экологической простейших и одноклеточных хозяина и Muriпе инфекции модели. Г. MELLONELLA модель станет еще более ценным в будущем, после того, как личиночной геномная последовательность будет доступна и более генетические инструменты устанавливаются. Шаги в этом направлении включают недавнюю публикацию с подробным иммунную связанных транскриптома 61 и формирование инициативой продвижения молчание генов в Lepidoptera SPP 62. Используя G. MELLONELLA личинки, у нас есть ряд простых, быстрых показаний бактериальной вирулентности, которые можно использовать для изучения патогенеза L. легионелл. Создание этих анализов и широкого скрининга L. штаммы Pneumophila и серогрупп увеличит полезность этого нового инструмента и будет способствовать нашему пониманию L. легионелл патогенез.

Животные модели инфекции оказались бесценными при определении бактериальных факторов вирулентности. Тем не менее, беспозвоночных модели отмечается повышенный интерес в качестве жизнеспособной альтернативы традиционным моделям млекопитающих инфекции. Личинки восковой моли, Галерея MELLONELLA все чаще используется для изучения ряд важных человеческих патогенов, в том числе грамположительных 1 и грамотрицательных бактерий 2,3 и несколько патогенных грибков 4,5. Использование модель насекомых имеет ряд преимуществ по сравнению с традиционными моделями млекопитающих, как беспозвоночных, G. MELLONELLA не подлежит этических ограничений моделей млекопитающих. Кроме того, личинки могут быть легко поддерживать, инфицированных путем инъекции без анестезии, пройти предварительную обработку с химических ингибиторов 6 и поддерживать инкубации при 37 ° С 7. Интересно, что хорошая корреляция между патогенностью нескольких микроорганизмов в G. Мелlonella и модели млекопитающих инфекции было установлено 2,8. Более глубокое понимание иммунной системы G. MELLONELLA также оказала помощь в характеристике этого модельного организма. Хотя насекомые не имеют адаптивную иммунную систему, которые содержатся в млекопитающих, у них есть сложные клеточные и плечевые оборону включая производство антимикробных пептидов 9. Гемоциты являются основным медиатором сотовых оборону и являются наиболее многочисленными тип клеток нашли в гемолимфе (или крови) группы G. MELLONELLA 10, Эти клетки профессиональные фагоциты и выполняют сходные функции, чтобы человека макрофагов и нейтрофилов обоими занимая и унижающего бактерий в фаго-лизосомные отсека 10,11 и формирования узелки вокруг вторжения бактерий, физически ограничивая бактериальной репликации 12. Легионелл это респираторное патогенный микроорганизм, который вызывает сильную pneumoni(Болезнь легионеров) у восприимчивых групп населения, таких как пожилые люди или ослабленным иммунитетом 13. Legionella найден повсеместно в обоих экологических и техногенных источников воды, где это возбудитель различных видов пресноводных амеб 14,15. Legionella выживает и повторяет в этих профессиональных фагоцитов с использованием мульти-белкового комплекса известного как Dot / ICM (дефект торговли органелл / внутриклеточный умножения) введите 4 секреции систему (T4SS) транслоцироваться более 275 эффекторные белки в клетке-хозяине 16-20. Эти белки служат для подрыва нормальные пути клетка-хозяин фагоцитарные, что приводит к созданию Legionella, содержащего вакуоли (LCV). LCV позволяет избежать слияния с лизосомах, а вместо этого набирает эндоплазматический ретикулум (ER), полученных везикул, в результате специализированного отсеке, который напоминает грубую ER 21,22. L. легионелл считается случайным человеком путьоген; те же стратегии, которые позволяют ему применять их в рамках амеб, также позволяют репликацию в человека альвеолярных макрофагов 23. Млекопитающих хозяева были охарактеризованы в качестве моделей для инфицирования человека Legionella включая мышей и морских свинок 24,25. Тем не менее, большинство линий мышей устойчивы к инфекции Legionella 26, за исключением инбредной альбиноса A / J мышей, который развивает мягкий, самоограничения инфекцию 24. Хотя модель морской свинки больше напоминает человеческую болезнь 25, отсутствие мутантов и увеличение стоимости препятствует их использование 27. Кроме того, несколько беспозвоночных модели были разработаны для легионелл инфекции включая Caenorhabditis Элеганс 28, Дрозофилы 29 и несколько видов амеб 30-32. Тем не менее, эти модели имеют слабые стороны, вирулентность в С. Элеганс </em&gt; Система не Dot / ICM-зависимой 28, что ограничивает полезность этой модели. Модель дрозофилы доказала свою эффективность в расследовании бактериальной вирулентности факторы 29 и, кажется, обещая однако, эта модель не была полностью характеризуется. Одноклеточные амебы являются экологические хозяева L. легионелл и идеально подходят для исследования действия факторов вирулентности на молекулярном уровне 33, однако не хватает нескольких важных медиаторов млекопитающих ответ клетки-хозяина к инфекции, такие как каспазы 34. Слабость существующих моделей, наряду с высокой стоимостью и этических проблем, связанных с экспериментов млекопитающих, привело к поиску других соответствующих модельных организмов 29,35. Недавно мы показали, что Г. MELLONELLA является подходящей моделью для L. легионелл патогенез 36,37. Подробнее Этот протокол экспериментальные методы, используемые для заразитьIng G. MELLONELLA личинки, анализируя личинок мораль, извлечение гемоциты для подсчета и иммунофлюоресценции и определения репликации по жизнеспособного КОЕ считает от зараженного личинками.

<table border="1">
 <tbody>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Material/ Equipment</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>ACES yeast extract (AYE) broth</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>4 g ACES, 4 g yeast extract, 0.4 g &alpha;-ketoglutarate, pH 6.9, 400 ml H2O, autoclaved, 4 ml iron solution*, 4 ml cysteine solution* 
		 *add sterile ingredients after autoclaving</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Charcoal buffered yeast extract (CYE) plates</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>As above, with the addition of 0.6 g activated charcoal and 6 g agar</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sterile iron solution (Ferric Pyrophosphate)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6526 </td>
			<td>0.6 mM solution, sterile filtered</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Sterile cysteine solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C7880</td>
			<td>3.3 mM solution, sterile filtered</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>G. mellonella (waxworms)</td>
			<td>Livefood UK</td>
			<td>W250</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Anti-HA-Tetramethyl Rhodamine Isothiocyanate (TRITC)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9037</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Anti-Legionella LPS</td>
			<td>Cambridge Biosciences</td>
			<td>PA1-7227 </td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Anti-Rabbit IgG Alexa488</td>
			<td>Jackson Immunoreach</td>
			<td>711-485-152</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Isopropyl &beta;-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I6758</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Dulbeccos phosphate buffered saline (D-PBS)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D8662</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Agar Scientific</td>
			<td>R1026</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Ammonium chloride (NH4Cl)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9434</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Trypan Blue solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8154</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Digitonin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D141</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Cytochalasin D</td>
			<td>Biomol International</td>
			<td>BML-T109-0001</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td></td>
		 <td>[header]</td>
 </tr>
		 <tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Material</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Microtiter Syringe</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>24544</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Cell counter, double, Improved Neubauer </td>
			<td>VWR</td>
			<td>631-0926</td>
			<td></td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For centrifuging plates </td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Any microscope with appropriate filters for the required fluorophores</td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Inverted microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For viable cell counting </td>
		 </tr>
		 <tr>
			<td>Puncture-proof glove</td>
			<td>Turtleskin </td>
			<td></td>
			<td></td>
		 </tr>
 </tbody>
 </table>

use of galleria mellonella as a model organism to study legionella pneumophila infection

Легионелл, возбудителем тяжелой пневмонии имени болезнь легионеров, является важным патоген человека, который заражает и повторяет в альвеолярных макрофагов. Его вирулентность зависит от секреции типа IV системы Dot / ICM (T4SS), что очень важно для установления репликации разрешительный вакуоль известный как Legionella, содержащего вакуоли (LCV). L. легионелл инфекции могут быть смоделированы на мышах, однако большинство штаммов мыши не разрешительный, что приводит к поиску новых моделей инфекции. Недавно мы показали, что личинки восковой моли Galleria MELLONELLA подходят для исследования L. легионелл инфекции. Г. MELLONELLA все чаще используется в качестве модели инфекции для человека возбудителей и хорошая корреляция существует между вирулентности нескольких видов бактерий в насекомое и в моделях млекопитающих. Ключевым компонентом иммунной защиты личинок являются гемоциты, профессияаль фагоциты, которые занимают и уничтожить захватчиков. L. легионелл способен инфицировать, образуют LCV и репликации в этих клетках. Здесь мы показываем, протоколы для анализа L. легионелл вирулентность в G. MELLONELLA модель, в том числе, как вырастить инфекционных L. легионелл, предварительной обработки личинок с ингибиторами, заразить личинок и как извлечь инфицированные клетки для количественного и иммунофлюоресценции микроскопии. Мы также опишем, как количественно бактериальной репликации и фитнеса в конкурентных анализах. Эти подходы позволяют быстрого скрининга мутантов, чтобы определить факторы, важные в L. легионелл вирулентности, описывая новый инструмент, чтобы помочь наше понимание этой сложной патогена.

Здесь показано, что Г. MELLONELLA является подходящим, простой в использовании моделью для изучения L. легионелл инфекции. Ранее было показано, что L. легионелл вирулентность в макрофагах, амебы и моделей млекопитающих зависит от наличия системы секреции Dot / ICM 41-43. Г. MELLONELLA личинки были инфицированы, как описано выше, и вирулентность дикого типа (WT) и Dot / ICM-дефицитный штамм сравнивать. Заражение 10 7 КОЕ L. штамм легионелл 130b привело к 100% смертности в течение 24 ч после заражения (PI). Тем не менее, L. легионелл Δ Dota штамм, который не имеет функциональную систему секреции Dot / Icm T4SS, был авирулентным в этом анализе (рис. 1). Это показывает, что Л. легионелл вирулентность в G. MELLONELLA зависит от транслокации Dot / ICM эффекторов, что делает эта модель подходит для характеристикиФункция этих белков. Недавно было показано, что ингибирование фагоцитоза путем обработки цитохалазином увеличили susceptibly личинок к инфекции дрожжей Candida Albicans 6. Как L. легионелл является внутриклеточным патогеном, было принято решение, чтобы определить, поглощение бактерий имеет решающее значение в патогенезе в этой модели. Личинки предварительно обрабатывали 10 мкл 100 мкМ цитохалазином D (CyD) в течение 4 ч при 37 ° С, затем инфицировали 10 7 КОЕ L. WT легионелл 130b и смертность контролируется на 24 часами пи лечение одним ингибитора не влияет личиночной выживаемости. Тем не менее, предварительно, инфицированных личинок отображается значительно большую выживаемость (р = 0,0066, непарный Т-тест) по сравнению с ДМСО обработанных, инфицированных насекомых (рис. 2). Эффект лечения CyD было отменено на 48 час пи (результаты не показаны), что может быть связано с периодом полураспада препарата в G.MELLONELLA. Это показывает, что поглощение L. легионелл в G. MELLONELLA гемоциты является одним из важнейших аспектов бактериальной вирулентности. В целях подтверждения выражение и определить субклеточной локализацию эффекторной белка в G. MELLONELLA, гемоциты были извлечены и обработаны для иммунофлуоресценции микроскопии. Личинки были инфицированы WT и Δ Dota L. легионелл 130b выражая фрагмент четко определенной T4SS эффектора, SIDC 41-918, слитого с 4 N-концевых тегов ГК. Это было продемонстрировано эффектор для связывания LCV через фосфоинозитид-4-фосфат-связывающим доменом 44. Использование анти-Ха (красный) и анти-Legionella (зеленый) антител, 4HA-SIDC 41-918 локализованную на LCV в инфицированных гемоциты (рис. 3). Эта локализация Ранее было показано в discoideum амебы Dictyostelium и в макрофагах млекопитающих 44,45 подтверждающих грomparability этой модели. Важность белков для вирулентности обычно определяется путем сравнения кинетики роста дикого типа и мутантных бактерий. Для того чтобы проследить бактериальных кинетику репликации по ходу инфекции, три личинки были умерщвлены в каждый момент времени (0, 5, 18 и 24 ч PI), гемолимфы собирают и объедин ют и CFU/0.1g добываемой гемолимфы определяется. После первоначального падения на 5 ч пи, КОЕ бактерий WT увеличивается до 24 час пи однако, штамм Δ DotA не подвергается репликации и очищается на 18 час пи (рис. 4). Способность L. легионелл, чтобы вызвать лизис макрофагов в T4SS-зависимым образом уже давно документально 46, однако аналогичные исследования были проведены в естественных условиях. Концентрация циркулирующих гемоцитов определяли при 5, 18 и 24 часа личинки пи были инфицированы WT или Δ <eм&gt; Dota Л. легионелл 130b, гемоциты извлеченные из инфицированных насекомых и жизнеспособных клеток, подсчитанных с помощью трипанового синего метод исключения. На 5 ч пи никакой разницы в гемоцитов отсчетов между штаммами не было видно (рис. 5). Тем не менее, в 18 час пи произошло значительное падение концентрации гемоцитов в WT, но не Δ DotA, инфицированных личинок. Эта разница сохраняется в 24 час пи падение числа гемоцитов, в сочетании с наличием внутриклеточных бактерий, как показано с помощью иммунофлуоресценции, предполагает, что L. легионелл повторяет в гемоциты то лизирует их, позволяя бактериям пройти несколько раундов репликации. <img alt="Рисунок 1" fo:content-width="3.5in" src="/files/ftp_upload/50964/50964fig1.jpg" /> Рисунок 1. Заражение L. легионелл вызывает Dot / ICM зависит от личиночной смертности. 10 личинки были инфицированы PBS в одиночку или 10 <sдо&gt; 7 КОЕ дикого типа (WT) или Δ DOTA L. Pneumophila 130b, инкубировали при 37 ° С в течение 72 ч и в момент смерти личинок записаны. Все личинки инфицированы WT поддался инфекции в течение 24 ч после заражения (пи), однако не смертности не наблюдалось у личинок инокулированного только PBS или штамма Δ DotA. Результаты являются средними из трех отдельных экспериментов, ± стандартное отклонение. <img alt="Рисунок 2" fo:content-width="3.5in" src="/files/ftp_upload/50964/50964fig2.jpg" /> Рисунок 2. Смертность зависит от бактериальной интернализации. 10 л легионелл личинки предварительно обрабатывали 10 мкл 100 мкМ цитохалазином D (CyD) в течение 4 ч при 37 ° С, затем инфицированного 10 7 WT и смертности контролируют при 24 ч пи предварительной обработке личинок значительно показано (P = 0,0066, непарный т-тест) снижение смертности. Результаты представляют МЭСп в четырех независимых экспериментов ± стандартного отклонения с 10 личинок на состоянии. <img alt="Рисунок 3" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50964/50964fig3.jpg" /> Рисунок 3. Иммунофлуоресценции изображений эффекторных белков в извлеченных гемоциты. Гемоциты были извлечены из личинок, инфицированных L. легионелл 130b WT или Δ Dota выражая 4HA-SIDC 41-918 на 5 час пи клетки окрашивали с помощью анти-Ха (красный) и анти-Legionella (зеленый) антител и пятно ДАПИ ДНК (синий) для визуализации ядер. 4HA-SIDC 41-918 наблюдалось окружающую WT, но не Δ DotA, бактерии. Шкала бар 5 мкм. <img alt="Рисунок 4" fo:content-width="3.5in" src="/files/ftp_upload/50964/50964fig4.jpg" /> Рисунок 4. Л. легионелл повторяет в G. МеллоНелла в Dot / ICM-зависимым образом. Личинки были инфицированы WT или Δ Dota Л. Pneumophila и в 0, 5, 18, ​​и 24 часа в сутки пи гемолимфа из трех зараженных насекомых объединенных, высевали на Cye пластин и КОЕ определяется и нормированной на инокулята и весу гемолимфы извлечены. WT Л. легионелл реплицируются в течение эксперимента в то время как штамм Δ DOTA был очищен в течение 18 ч пи Результаты являются средними из трех отдельных экспериментов ± стандартное отклонение. <img alt="Рисунок 5" fo:content-width="3.5in" src="/files/ftp_upload/50964/50964fig5.jpg" /> Рисунок 5. Заражение WT L. Результаты Pneumophila в значительному разрушению гемоцитов. Гемоциты добывались на 5, 18 и 24 часа в сутки пи из личинок, инфицированных WT или Δ Dota Л. Pneumophila и жизнеспособных клеток, подсчитанных с помощью гемоцитометра. Нет разницы вКоличество клеток было видно на 5 ч пи между штаммами однако на 18 ч пи только около 15% гемоцитов остаются в личинок, инфицированных штаммом WT сравнению со штаммом Δ DOTA. Результаты являются средними из трех отдельных экспериментов, ± стандартное отклонение.

Watch this Scientific Journal Video about Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection at JoVE.com

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Личинка восковой моли Galleria MELLONELLA недавно был создан в качестве естественных условиях модели в изучения легионелл инфекции. Здесь мы демонстрируем основные методы, чтобы охарактеризовать патогенез Legionella у личинок, в том числе прививки, измерения бактериальной вирулентности и репликации, а также извлечения и анализа зараженных гемоциты.

Использование<em&gt; Галерея MELLONELLA</em&gt; В качестве модельного организма по изучению<em&gt; Легионелл</em&gt; Инфекция

Legionella pneumophila, the causative agent of a severe pneumonia named Legionnaires&#39; disease, is an important human pathogen that infects and ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Use of Galleria mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

Представляем напряжения сдвига в изучении бактериальной адгезии

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Использование искусственного среднего мокроты для тестирования антибиотиков эффективность против<em&gt; Синегнойной палочки</em&gt; В условиях более актуальными для кистозного фиброза легких

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

The Insect Galleria mellonella as a Powerful Infection Model to Investigate Bacterial Pathogenesis

The Insect Galleria mellonella as a Powerful Infection Model to Investigate Bacterial Pathogenesis

Насекомые<em&gt; Galleria mellonella</em&gt; Как мощная модель инфекции по расследованию бактериального патогенеза

The study of bacterial virulence often requires a suitable animal model. Mammalian models of infection are costly and may raise ethical issues. The use of ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

<em&gt; В пробирке</em&gt; Модель для изучения гетерогенности человека дифференциации макрофагов и поляризация

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

Cecal Ligation and Puncture-induced Sepsis as a Model To Study Autophagy in Mice

Слепой кишки Лигирование и прокол, вызванной Сепсис как модель для изучения аутофагии у мышей

Experimental sepsis can be induced in mice using the cecal ligation and puncture (CLP) method, which causes polymicrobial sepsis. Here, a protocol is ...

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

Использование<em&gt; Shigella flexneri</em&gt; Для изучения аутофагии-Цитоскелет взаимодействий

Shigella flexneri is an intracellular pathogen that can escape from phagosomes to reach the cytosol, and polymerize the host actin cytoskeleton to promote ...

Establishment and Optimization of a High Throughput Setup to Study Staphylococcus epidermidis and Mycobacterium marinum Infection as a Model for Drug Discovery

Establishment and Optimization of a High Throughput Setup to Study Staphylococcus epidermidis and Mycobacterium marinum Infection as a Model for Drug Discovery

Создание и Оптимизация Верховного установки пропускной изучать<em&gt; Эпидермальный стафилококк</em&gt; И<em&gt; Mycobacterium Marinum</em&gt; Инфекция в качестве модели для Drug Discovery

Zebrafish are becoming a valuable tool in the preclinical phase of drug discovery screenings as a whole animal model with high throughput screening ...

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

Porphyromonas gingivalis as a Model Organism for Assessing Interaction of Anaerobic Bacteria with Host Cells

Porphyromonas gingivalis в качестве модельного организма для оценки интерактивности анаэробных бактерий с клеток-хозяев

Anaerobic bacteria far outnumber aerobes in many human niches such as the gut, mouth, and vagina. Furthermore, anaerobic infections are common and ...

Zebrafish as a Model to Assess the Teratogenic Potential of Nitrite

Данио рерио в качестве модели для оценки тератогенных потенциал Нитрит

High nitrate levels in the environment may&#160;result in congenital defects or miscarriages in humans. Presumably, this is due to the conversion of ...

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

Legionella pneumophila Outer Membrane Vesicles: Isolation and Analysis of Their Pro-inflammatory Potential on Macrophages

Легионелл везикул наружной мембраны: Выделение и анализ их провоспалительного потенциала на макрофагах

Bacteria are able to secrete a variety of molecules via various secretory systems. Besides the secretion of molecules into the extracellular space or ...