Name: in utero measurement of heart rate in mouse by noninvasive m-mode echocardiography
Uploaded: 2013-11-22T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography at JoVE.com

Ringraziamo Manon Laprise per la formazione in ecocardiografia e Ann Chamberland per scattare le foto esposte nelle figure 1 e 2. Questo lavoro è stato sostenuto dal Canadian Institutes of Health Research Grant MOP 44363 e Canada Chair 950-216.684.

Tutte le procedure indicate in questo protocollo sono state approvate dal Comitato Animal Care IRCM. 1. Sistema a ultrasuoni e la stazione di preparazione <ol><li> Avviare il sistema di imaging ad ultrasuoni e collegare la sonda e l&#39;unità di controllo fisiologia secondo le istruzioni del produttore (Figura 1). Scegli cardiaca programma di misurazione e la sonda che corrisponde al trasduttore 30 MHz. </li><li> Riempire il revolver del la sonda con acqua deionizzata. Ev...

<ol>
	<li>Hoffman, J. I., Kaplan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+incidence+of+congenital+heart+disease.">The incidence of congenital heart disease.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 39, 1890-1900 (2002).</li><li>Miller, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abnormal+brain+development+in+newborns+with+congenital+heart+disease.">Abnormal brain development in newborns with congenital heart disease.</a> N. Engl. J. Med. 357, 1928-1938 (2007).</li><li>Bruneau, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+developmental+genetics+of+congenital+heart+disease.">The developmental genetics of congenital heart disease.</a> Nature. 451, 943-948 (2008).</li><li>Wessels, A., Sedmera, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+anatomy+of+the+heart:+a+tale+of+mice+and.">Developmental anatomy of the heart: a tale of mice and.</a> 15, 165-176 (2003).</li><li>Yu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ENU+induced+mutations+causing+congenital+cardiovascular+anomalies.">ENU induced mutations causing congenital cardiovascular anomalies.</a> Development. 131, 6211-6223 (2004).</li><li>Seidah, N. G., Prat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+biology+and+therapeutic+targeting+of+the+proprotein+convertases.">The biology and therapeutic targeting of the proprotein convertases.</a> Nat. Rev. Drug Discov. 11, 367-383 (2012).</li><li>Roebroek, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Failure+of+ventral+closure+and+axial+rotation+in+embryos+lacking+the+proprotein+convertase+Furin.">Failure of ventral closure and axial rotation in embryos lacking the proprotein convertase Furin.</a> Development. 125, 4863-4876 (1998).</li><li>Roebroek, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limited+redundancy+of+the+proprotein+convertase+furin+in+mouse+liver.">Limited redundancy of the proprotein convertase furin in mouse liver.</a> J. Biol. Chem. 279, 53442-53450 (2004).</li><li>Kisanuki, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tie2-Cre+transgenic+mice:+a+new+model+for+endothelial+cell-lineage+analysis+in+vivo.">Tie2-Cre transgenic mice: a new model for endothelial cell-lineage analysis in vivo.</a> Dev. Biol. 230, 230-242 (2001).</li><li>Kim, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+endothelial+furin+leads+to+cardiac+malformation+and+early+postnatal+death.">Loss of endothelial furin leads to cardiac malformation and early postnatal death.</a> Mol. Cell Biol. 32, 3382-3391 (2012).</li></ol>

Ecocardiografia M-mode è un metodo efficace e semplice per misurare in utero frequenze cardiache di embrioni di topo. Trasduttori disponibili in commercio offrono una risoluzione sufficiente per visualizzarne i piccoli cuori pulsanti. Così, essi consentono la misurazione della frequenza cardiaca estremamente preciso, rispetto ad altri metodi quali misurazione impulsi, e possono sostituire microscopia video ad alta risoluzione. Tuttavia, gli strumenti attuali non consentono l&#39;analisi simultanea di tutti gl...

CHD è la causa infettiva più comune di morte alla nascita 1. Interventi chirurgici multipli sono spesso necessari per correggere i difetti strutturali nei soggetti la cui qualità della vita può rimanere compromessa 1. I bambini con CHD sviluppano frequentemente disturbi neurologici, anche se non hanno subito un intervento chirurgico, indicando importante in utero conseguenze sullo sviluppo 2,3. Entrambi i fattori genetici e ambientali, come l&#39;esposizione a virus o agenti chimici (alcol) durante la gravidanza, causa CHD. Studiare le contributori genetici è ancora nella sua fase iniziale, ma in rapida crescita. Per identificare questi collaboratori e comprendere il loro ruolo nello sviluppo del cuore, fenotipo topi mutanti con uno strumento semplice e potente sarà di grande beneficio. Mouse è infatti un modello animale di scelta per studiare CHD, e la maggior parte dei casi umani può essere riprodotto in topi 4,5. Di conseguenza, mouse fetale fenotipo cardiaco è diventato increasingly importante indagare l&#39;eziologia della malattia coronarica umana e richiede strumenti adeguati. Anche se gli studi istologici su campioni fissati hanno un valore inestimabile, in tempo reale immagini di animali vivi è fondamentale per comprendere la fisiologia del cuore. Microscopia Video offre immagini dal vivo. Tuttavia, richiede laparotomia per esporre embrioni, compromettendo così la loro stato fisiologico e emodinamico. Recentemente, ecocardiografia è diventata la tecnica di imaging standard per valutazioni cardiache nella clinica così come nei topi. Ecocardiografia fetale mouse viene condotta utilizzando sistemi standard ultrasuoni clinici, nonché sistemi ad ultrasuoni ad altissima frequenza. Questi ultimi prevedono 30 MHz o trasduttori di frequenza superiore che generano immagini bidimensionali e permettono di valutare gli stadi embrionali precoci. Questi trasduttori hanno una profondità relativamente scarsa penetrazione (~ 13 mm), che è tuttavia sufficiente avere piani d&#39;immagine adeguate e determinare pa cuore fondamentaleparametri, come la frequenza cardiaca, diametro interno del ventricolo sinistro e destro in diastole e sistole e setto e lo spessore della parete, senza eseguire laparotomia. Nel nostro studio, abbiamo utilizzato un sistema ad ultrasuoni ad altissima frequenza per valutare le frequenze cardiache di embrioni di topo al giorno E18.5 embrionale. Abbiamo scelto un trasduttore 30 MHz che fornisce un campo visivo di 20 mm x 20 mm, l&#39;ideale date le dimensioni dei feti, con una lunghezza focale di 12,7 mm. Tuttavia, un trasduttore frequenza più elevata può essere scelto per analizzare stadi precoci di sviluppo. L&#39;M-mode selezionata permette la visualizzazione dei tessuti in movimento grazie ad una risoluzione temporale massimo di 1.000 fotogrammi / sec. La procedura completa è semplice e deve essere effettuata il più rapidamente possibile per evitare qualsiasi perturbazione degli stati fisiologici ed emodinamiche del feto. L&#39;analisi di circa 8 embrioni richiede circa 1 ora.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="591">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:164px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:160px;">Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td>
			<td style="width:104px;">CP0406v2</td>
			<td style="width:163px;">1-chloro-2,2,2-trifluoroethyl difluoromethyl ether</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Ultrasound gel</td>
			<td>Parker Laboratories Inc.</td>
			<td>Aquasonic Clear</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Electrode gel</td>
			<td>Parker Laboratories Inc.</td>
			<td>Spectra 360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Ophthalmic gel</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>Tear-Gel</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Depilatory cream</td>
			<td>Church &#38; Dwight Co., Inc.</td>
			<td>Nair</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Hair clipper</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Gauze/cotton swap</td>
			<td>Q-tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Permanent marker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:164px;">High-Resolution In vivo Ultrasound Imaging System</td>
			<td style="width:160px;">Visual Sonics</td>
			<td style="width:104px;">Vevo770</td>
			<td style="width:163px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">30 MHz Transducer</td>
			<td>Visual Sonics</td>
			<td>RMV707B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:164px;">Imaging platform and physiology controller unit</td>
			<td>Visual Sonics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Anesthetic System</td>
			<td>Cyprane North America Inc.</td>
			<td>312462</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Infrared heating lamp</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in utero measurement of heart rate in mouse by noninvasive m-mode echocardiography

Cardiopatie congenite (CHD) è la causa infettiva più frequente di morte alla nascita. L&#39;incidenza di CHD va 4-50 / 1, 000 nascite (Malattia e stime regionali lesioni, Organizzazione Mondiale della Sanità, 2004). Ambulatori che spesso compromettono la qualità della vita sono necessari per correggere i difetti cardiaci, ricordandoci l&#39;importanza di trovare le cause di CHD. Modelli di topo mutante e tecnologia di imaging dal vivo sono diventati strumenti essenziali per studiare l&#39;eziologia di questa malattia. Anche se i metodi avanzati permettono l&#39;imaging dal vivo di cuori anomali negli embrioni, gli stati fisiologici e emodinamici di quest&#39;ultimo sono spesso compromesse a causa di procedure chirurgiche e / o lunghi. Noninvasive immagini ecografiche, tuttavia, può essere utilizzato senza chirurgicamente esporre gli embrioni, mantenendo quindi la loro fisiologia. Qui, usiamo semplice ecografia M-mode per valutare le frequenze cardiache di embrioni a E18.5 in utero. La rilevazione dei tassi anormali del cuore è davvero un buon indicatoretor di disfunzione del cuore e, quindi, costituisce un primo passo verso l&#39;identificazione di difetti di sviluppo che possono portare a insufficienza cardiaca.

Il suddetto metodo è stato usato per valutare l&#39;impatto della presenza o assenza della furina serina proteasi in cellule endoteliali su frequenze cardiache di embrioni di topo a E18.5 in utero. Furin appartiene alla famiglia delle convertasi proprotein (PC) che i precursori delle proteine ​​fendere dopo residui basici. Furin e suoi substrati sono proteine ​​secretorie e scissione possono verificarsi nel Golgi, endosomi o sulla superficie cellulare. Substrati chiave di furin includono TGFb, e fattor...

Watch this Scientific Journal Video about In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography at JoVE.com

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

Ultra-ultrasuoni ad alta frequenza è un potente strumento di imaging dal vivo per esaminare anomalie cardiache nei piccoli animali. La sua invasività consente di mantenere lo stato fisiologico di embrioni. Qui, vi mostriamo l&#39;uso di M-mode ultrasuoni per misurare le frequenze cardiache di embrioni a E18.5 in utero.

In utero Misurazione della frequenza cardiaca in mouse da non invasiva ecocardiografia M-mode

Congenital heart disease (CHD) is the most frequent noninfectious cause of death at birth. The incidence of CHD ranges from 4 to 50/1,000 births (Disease ...

Research

JoVE Journal

Medicine

In utero Measurement of Heart Rate in Mouse by Noninvasive M-mode Echocardiography

Transthoracic Echocardiography in Mice

L&#39;ecocardiografia transtoracica in topi

In recent years, murine models have become the primary avenue for studying the molecular mechanisms of cardiac dysfunction resulting from changes in gene ...

Ricerca

Medicina

A Mouse Model of in Utero Transplantation

A Mouse Model of in Utero Transplantation

Un modello murino di Nell&#39;utero Trapianto

The transplantation of stem cells and viruses in utero has tremendous potential for treating congenital disorders in the human fetus.  For example, in ...

Assessment of Right Ventricular Structure and Function in Mouse Model of Pulmonary Artery Constriction by Transthoracic Echocardiography

Valutazione del ventricolo destro Struttura e funzione in modello murino di polmonare Arteria Costrizione da ecocardiografia transtoracica

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, ...

Noninvasive Assessment of Cardiac Abnormalities in Experimental Autoimmune Myocarditis by Magnetic Resonance Microscopy Imaging in the Mouse

La valutazione non invasiva della Cardiac Anomalie in Experimental Autoimmune miocardite da Risonanza Magnetica Imaging Microscopy nel mouse

Myocarditis is an inflammation of the myocardium, but only ~10% of those affected show clinical manifestations of the disease. To study the immune events ...

Noninvasive Determination of Vortex Formation Time Using Transesophageal Echocardiography During Cardiac Surgery

Determinazione non invasiva del vortice formazione tempo usando l'ecocardiografia Transesophageal durante l'ambulatorio cardiaco

Trans-mitral blood flow produces a three-dimensional rotational body of fluid, known as a vortex ring, that enhances the efficiency of left ventricular ...

Transdermal Measurement of Glomerular Filtration Rate in Mice

Transdermico misurazione del tasso di filtrazione glomerulare in topi

Transdermal analysis of glomerular filtration rate (GFR) is an established technique that is used to assess renal function in mouse and rat models of ...

Noninvasive Electrocardiography in the Perinatal Mouse

Elettrocardiografia non invasiva nel topo perinatale

Electrocardiography (ECG) has long been relied upon as an effective and reliable method of assessing cardiovascular (and cardiopulmonary) function in both ...

Morphological and Functional Assessment of the Right Ventricle Using 3D Echocardiography

Valutazione morfologica e funzionale del ventricolo destro mediante ecocardiografia 3D

Traditionally, it was believed that the right side of the heart has a minor role in circulation; however, more and more data suggest that right ...

Dynamic Measurement and Imaging of Capillaries, Arterioles, and Pericytes in Mouse Heart

Misurazione dinamica e imaging di capillari, arterioli e periciti nel cuore del topo

Coronary arterial tone along with the opening or closing of the capillaries largely determine the blood flow to cardiomyocytes at constant perfusion ...

Measurement of Heart Contractility in Isolated Adult Human Primary Cardiomyocytes

The evaluation of changes in heart contractility is essential during preclinical development for new cardiac- and non-cardiac-targeted compounds. This ...