Name: vigs-mediated forward genetics screening for identification of genes involved in nonhost resistance
Uploaded: 2013-08-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about VIGS-Mediated Forward Genetics Screening for Identification of Genes Involved in Nonhost Resistance at JoVE.com

Questo progetto è stato finanziato dalla Fondazione Samuel Roberts Noble. Autori ringraziano Mss. Janie Gallaway e Colleen Elles per un&#39;eccellente cura delle piante, e la signora Katie Brown per opere d&#39;arte. Vorremmo anche ringraziare Mss. Trina Cottrell, Pooja Uppalapati, Moumita Saha, Swetha Vinukonda e il signor Isaac Greenhut per assistenza tecnica durante istituzione di questo protocollo.

1. Crescita delle piante e Target silenziamento genico <ol><li> Condizioni di crescita delle piante: <ol><li> Seminare N. semi benthamiana sul suolo-meno miscela invasatura, Metro-Mix 350 e germinare i semi in una camera di crescita. Qualsiasi altro suolo o fuori suolo medio può anche essere usato al posto di Metro-Mix. </li><li> Trapianto di tre settimane vecchie piantine in singoli vasi e farli crescere in una serra mantenuta a 21 ± 2 ° C insieme ad altre condizioni di crescita, come descritto n...

<ol>
	<li>Heath, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonhost+resistance+and+nonspecific+plant+defenses.">Nonhost resistance and nonspecific plant defenses.</a> Currrent Opinion in Plant Biology. 3, 315-319 (2000).</li><li>Mysore, K. S., Ryu, C. -. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonhost+resistance:+how+much+do+we+know.">Nonhost resistance: how much do we know.</a> Trends in Plant Science. 9, 97-104 (2004).</li><li>Ellis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+into+nonhost+disease+resistance:+can+they+assist+disease+control+in+agriculture.">Insights into nonhost disease resistance: can they assist disease control in agriculture.</a> The Plant Cell. 18, 523-528 (2006).</li><li>Senthil-Kumar, M., Mysore, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonhost+resistance+against+bacterial+pathogens:+retrospects+and+prospects.">Nonhost resistance against bacterial pathogens: retrospects and prospects.</a> Annual Review of Phytopathology. 51, (2013).</li><li>Lu, M., Tang, X., Zhou, J. -. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arabidopsis+NHO1+is+required+for+general+resistance+against+Pseudomonas+bacteria.">Arabidopsis NHO1 is required for general resistance against Pseudomonas bacteria.</a> The Plant Cell. 13, 437-447 (2001).</li><li>Rojas, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glycolate+oxidase+plays+a+major+role+during+nonhost+resistance+responses+by+modulating+reactive+oxygen+species+mediated+signal+transduction+pathways.">Glycolate oxidase plays a major role during nonhost resistance responses by modulating reactive oxygen species mediated signal transduction pathways.</a> The Plant Cell. 24, 336-352 (2012).</li><li>Daurelio, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptome+analysis+reveals+novel+genes+involved+in+nonhost+response+to+bacterial+infection+in+tobacco.">Transcriptome analysis reveals novel genes involved in nonhost response to bacterial infection in tobacco.</a> Journal of Plant Physiology. 168, 382-391 (2011).</li><li>Moreau, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EDS1+contributes+to+nonhost+resistance+of+Arabidopsis+thaliana+against+Erwinia+amylovora.">EDS1 contributes to nonhost resistance of Arabidopsis thaliana against Erwinia amylovora.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions. 25, 421-430 (2012).</li><li>Senthil-Kumar, M., Mysore, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ornithine-delta-aminotransferase+and+proline+dehydrogenase+genes+play+a+role+in+non-host+disease+resistance+by+regulating+pyrroline-5-carboxylate+metabolism-induced+hypersensitive+response.">Ornithine-delta-aminotransferase and proline dehydrogenase genes play a role in non-host disease resistance by regulating pyrroline-5-carboxylate metabolism-induced hypersensitive response.</a> Plant, Cell &amp; Environment. 35, 1329-1343 (2012).</li><li>Burch-Smith, T. M., Anderson, J. C., Martin, G. B., Dinesh-Kumar, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+and+advantages+of+virus-induced+gene+silencing+for+gene+function+studies+in+plants.">Applications and advantages of virus-induced gene silencing for gene function studies in plants.</a> The Plant Journal. 39, 734-746 (2004).</li><li>Senthil-Kumar, M., Mysore, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+dimensions+for+VIGS+in+plant+functional+genomics.">New dimensions for VIGS in plant functional genomics.</a> Trends in Plant Science. 16, 656-665 (2011).</li><li>Senthil-Kumar, M., Mysore, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virus-induced+gene+silencing+can+persist+for+more+than+2+years+and+also+be+transmitted+to+progeny+seedlings+in+Nicotiana+benthamiana+and+tomato.">Virus-induced gene silencing can persist for more than 2 years and also be transmitted to progeny seedlings in Nicotiana benthamiana and tomato.</a> Plant Biotechnology Journal. 9, 797-806 (2011).</li><li>Bombarely, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+draft+genome+sequence+of+Nicotiana+benthamiana+to+enhance+molecular+plant-microbe+biology+research.">A draft genome sequence of Nicotiana benthamiana to enhance molecular plant-microbe biology research.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions. 25, 1523-1530 (2012).</li><li>Sharma, P. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virus-induced+silencing+of+WIPK+and+SIPK+genes+reduces+resistance+to+a+bacterial+pathogen,+but+has+no+effect+on+the+INF1-induced+hypersensitive+response+(HR)+in+Nicotiana+benthamiana.">Virus-induced silencing of WIPK and SIPK genes reduces resistance to a bacterial pathogen, but has no effect on the INF1-induced hypersensitive response (HR) in Nicotiana benthamiana.</a> Mol Gen Genomics. 269, 583-591 (2003).</li><li>Baulcombe, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+forward+genetics+based+on+virus-induced+gene+silencing.">Fast forward genetics based on virus-induced gene silencing.</a> Current Opinion in Plant Biology. 2, 109-113 (1999).</li><li>Lu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+throughput+virus-induced+gene+silencing+implicates+heat+shock+protein+90+in+plant+disease+resistance.">High throughput virus-induced gene silencing implicates heat shock protein 90 in plant disease resistance.</a> EMBO Journal. 22, 5690-5699 (2003).</li><li>Pozo, O., Pedley, K. F., Martin, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MAPKKK[alpha]+is+a+positive+regulator+of+cell+death+associated+with+both+plant+immunity+and+disease.">MAPKKK[alpha] is a positive regulator of cell death associated with both plant immunity and disease.</a> EMBO Journal. 23, 3072-3082 (2004).</li><li>Wang, K., Senthil-Kumar, M., Ryu, C. -. M., Kang, L., Mysore, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phytosterols+play+a+key+role+in+plant+innate+immunity+against+bacterial+pathogens+by+regulating+nutrient+efflux+into+the+apoplast.">Phytosterols play a key role in plant innate immunity against bacterial pathogens by regulating nutrient efflux into the apoplast.</a> Plant Physiology. 158, 1789-1802 (2012).</li><li>Wang, K., Kang, L., Anand, A., Lazarovits, G., Mysore, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+in+planta+bacterial+infection+at+both+cellular+and+whole-plant+levels+using+the+green+fluorescent+protein+variant+GFPuv.">Monitoring in planta bacterial infection at both cellular and whole-plant levels using the green fluorescent protein variant GFPuv.</a> New Phytologist. 174, 212-223 (2007).</li><li>Ratcliff, F., Martin-Hernandez, A. M., Baulcombe, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+Advance:+Tobacco+rattle+virus+as+a+vector+for+analysis+of+gene+function+by+silencing.">Technical Advance: Tobacco rattle virus as a vector for analysis of gene function by silencing.</a> The Plant Journal. 25, 237-245 (2001).</li><li>MacFarlane, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+biology+of+the+tobraviruses.">Molecular biology of the tobraviruses.</a> Journal of General Virology. 80, 2799-2807 (1999).</li><li>Anand, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+plant+genes+involved+in+Agrobacterium-mediated+plant+transformation+by+virus-induced+gene+silencing.">Identification and characterization of plant genes involved in Agrobacterium-mediated plant transformation by virus-induced gene silencing.</a> Molecular Plant-Microbe Interactions. 20, 41-52 (2007).</li><li>Liu, E., Page, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+cDNA+libraries+for+virus-induced+gene+silencing+(VIGS)+using+tobacco+rattle+virus.">Optimized cDNA libraries for virus-induced gene silencing (VIGS) using tobacco rattle virus.</a> Plant Methods. 4, 5 (2008).</li><li>Vel&#225;squez, A. C., Chakravarthy, S., Martin, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Virus-induced+gene+silencing+(VIGS)+in+Nicotiana+benthamiana+and+tomato.">Virus-induced gene silencing (VIGS) in Nicotiana benthamiana and tomato.</a> J. Vis. Exp. (28), e1292 (2009).</li><li>Peart, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ubiquitin+ligase-associated+protein+SGT1+is+required+for+host+and+nonhost+disease+resistance+in+plants.">Ubiquitin ligase-associated protein SGT1 is required for host and nonhost disease resistance in plants.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 99. , 99-10869 (2002).</li><li>Oh, S. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insight+into+Types+I+and+II+nonhost+resistance+using+expression+patterns+of+defense-related+genes+in+tobacco.">Insight into Types I and II nonhost resistance using expression patterns of defense-related genes in tobacco.</a> Planta. 223, 1101-1107 (2006).</li><li>Senthil-Kumar, M., Mysore, K., Kodama, H., Komamine, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNAi+and+Plant+Gene+Function+Analysis.">RNAi and Plant Gene Function Analysis.</a> Methods in Molecular Biology. 744, 13-25 (2011).</li></ol>

Immunità impianto limita la crescita di patogeni nonhost e, quindi, poca o nessuna fluorescenza verde è emessa da impianti di controllo vettoriale foglie inoculate con patogeni nonhost sotto luce UV di lunghezza d&#39;onda lunga (Figura 3D). Tuttavia, quando un gene coinvolto nella resistenza nonhost viene messo a tacere, le piante silenziate gene favoriscono la crescita di nonhost fluorescenza patogeno e verde è visto (Figura 3E). Questo è il principio di base coinvolti nel metodo ...

Nonhost resistenza è la resistenza di tutte le specie vegetali da anelli di un particolare agente patogeno 1,2. Questo conferisce ampio spettro e durevole resistenza alle malattie nelle piante 2,3. Tuttavia, il suo meccanismo, in particolare contro batteri patogeni, non è ben compreso 4. Screening per mutanti o piante tacere che la resistenza nonhost compromesso, e l&#39;alta velocità trascrizione profiling per l&#39;identificazione di geni differenzialmente espressi durante la resistenza nonhost 5-9 sono due principali approcci precedentemente utilizzati per sezionare batterica resistenza nonhost. Perché la resistenza nonhost è controllato da un complesso meccanismo (s) 4 con il coinvolgimento di molti geni, un approccio genomica funzionale di throughput elevato per l&#39;identificazione di geni è fondamentale per una migliore comprensione del meccanismo di resistenza nonhost (s). Indotta da virus silenziamento genico (VIGS) è stato utilizzato con successo per mettere a tacere pianta endogenageni in molte specie vegetali 10,11. Nicotiana benthamiana è una delle migliori piante adatte per VIGS 10,12 e il suo progetto di sequenza del genoma è ora disponibile 13. virus sonaglio tabacco (TRV) basati VIGS è stato ampiamente utilizzato come strumento di genetica inversa per caratterizzare i geni coinvolti nella resistenza nonhost 2,4,14. Questo VIGS vettori e derivati ​​sono ora disponibili attraverso Arabidopsis Centro di Risorse Biologiche (ABRC, <a href="http://www.arabidopsis.org/abrc/catalog/individ_cloned_gene_1.html" target="_blank">http://www.arabidopsis.org/abrc/catalog/individ_cloned_gene_1.html</a> ). VIGS è stato utilizzato anche come strumento di genetica in avanti per identificare geni coinvolti nella immunità pianta 15-17, resistenza soprattutto nonhost 6,18. Valutare la risposta ipersensibile (HR)-mediata morte cellulare indotta da piante contro uno specifico agente patogeno nonhost e valutare la malattia la morte cellulare indotta sono due importanti saggi utilizzati principalmente per identifying gene suscettibile tacere piante. Tuttavia, la morte delle cellule umane è indotta solo contro di tipo II nonhost patogeni e non contro le tipo-I nonhost patogeni 2. Quindi, le analisi delle risorse umane non può essere usato universalmente per identificare strategie di resistenza nonhost utilizzati dalle piante, in particolare contro un&#39;ampia gamma di tipo-I nonhost patogeni. Inoltre, la perdita parziale della resistenza nonhost in un gene silenziato impianto non sempre porta a sintomi di malattia 6 e quindi di punteggio malattia non può essere utilizzato per identificare le piante compromettenti resistenza nonhost. In contrario, valutare la crescita dei patogeni nonhost nelle piante silenziate gene è un metodo migliore per studiare la perdita di resistenza nonhost nel gene piante silenziate. Rispetto al saggio di crescita convenzionale 6,19, un metodo più veloce per valutare la crescita batterica nonhost sulle piante silenziate gene può ridurre il tempo richiesto per genetica diretta screening. Abbiamo precedentemente riportato un metodo per osservare i batteril crescita patogeno su foglie da occhio nudo sotto ultravioletta (UV) utilizzando batteri esprimenti proteina fluorescente verde (GFP) 19. In questo manoscritto si dimostra l&#39;utilità di GFPuv esprimere patogeni batterici nonhost per una facile identificazione di geni silenziati piante che sono compromesse per la resistenza nonhost. Questa metodologia è accurata per l&#39;identificazione delle piante sensibili e suscettibili di screening ad alto rendimento.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Name of the reagent/equipment</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue number</td>
 <td>Comments (optional)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>96-well U-bottom plates</td>
 <td> Becton Dickinson Labware (Franklin Lakes, NJ, USA)</td>
 <td> 35-3077</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>96-pin replicator stainless steel</td>
 <td> Nalge Nunc International (Naperville, IL, USA)</td>
 <td> 250520</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td> High Intensity UV Inspection Lamps, Model B-100ap</td>
 <td> Thomas scientific (Swedesboro, NJ, USA)</td>
 <td> 6283K50</td>
 <td> Manufacturer ID 95-0127-01</td>
 </tr>
 <tr>
 <td> Stuart SC6 colony counter</td>
 <td> Bibby Scientific Limited, Staffordshire, UK</td>
 <td> SC6PLUS</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td> Soil-less potting mixture, Metro-Mix 350</td>
 <td> SUNGRO Horticulture Distribution, Inc., (Bellevue, WA, USA)</td>
 <td>&nbsp;</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td> Primers: 
 attB1 (GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCT) 
 attB2 (GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGT)</td>
 <td> Integrated DNA Technologies, Inc (Coralville, IA, USA)</td>
 <td> Custom synthesized</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td> MES, Monohydrate</td>
 <td> VWR international (Radnor, PA, USA)</td>
 <td> CAS No. 145224-94-8</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td> Acetosyringone (Dimethoxy-4'-hydroxyacetophenone)</td>
 <td> Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA)</td>
 <td> D134406</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 <tr>
 <td> Vac-In-Stuff (Silwet L-77)</td>
 <td> Lehle Seeds (Round Rock, TX, USA)</td>
 <td> VIS-30</td>
 <td>&nbsp;</td>
 </tr>
 </tbody>
</table>

vigs-mediated forward genetics screening for identification of genes involved in nonhost resistance

Nonhost resistenza alle malattie delle piante contro i batteri patogeni è controllato da meccanismi di difesa complessi. La comprensione di questo meccanismo è importante per lo sviluppo di piante resistenti alle malattie durevoli contro un&#39;ampia gamma di patogeni. Indotta da virus silenziamento genico (VIGS) a base di genetica diretta screening è un approccio utile per l&#39;identificazione di geni di difesa delle piante imprimere resistenza nonhost. Virus sonaglio tabacco (TRV) a base di VIGS vettore è il più efficiente VIGS vettore ad oggi ed è stato utilizzato in modo efficiente per silenziare geni bersaglio endogeni in Nicotiana benthamiana. In questo manoscritto, dimostriamo un approccio prospettico di screening genetico per il silenziamento di singoli cloni da una libreria di cDNA in N. benthamiana e valutare la risposta del gene piante silenziate per resistenza nonhost compromessi contro i patogeni nonhost, Pseudomonas syringae pv. pomodoro T1, P. syringae pv. glycINEA, e X. campestris pv. vesicatoria. Questi agenti patogeni batterici sono progettati per esprimere proteine ​​GFPuv e le loro colonie verde fluorescenti possono essere visti ad occhio nudo sotto la luce UV in nonhost piante inoculate patogeni se il gene bersaglio tacere è coinvolto in impartire resistenza nonhost. Questo facilita l&#39;identificazione affidabile e più veloce di geni silenziati piante suscettibili ai patogeni nonhost. Inoltre, promettente informazioni gene candidato può essere conosciuto con il sequenziamento del gene inserto centrale in TRV vettore. Qui mostriamo la capacità di throughput elevato di VIGS-mediate genetica avanti per identificare i geni coinvolti nella resistenza nonhost. Approssimativamente, 100 cDNA possono essere messi a tacere singolarmente in circa due o tre settimane e la loro rilevanza nella resistenza nonhost contro diversi batteri patogeni nonhost può essere studiato in una settimana dopo. In questo manoscritto, annoveriamo i passaggi dettagliati coinvolti in questo screening. VIGS-mediata genetica diretta screening approccio può essere esteso non solo ai geni coinvolti nella resistenza identificativi nonhost ma anche per studiare geni impartendo diverse tolleranze di stress biotico e abiotico in diverse specie vegetali.

Scopo principale di questo studio è quello di dimostrare un metodo per l&#39;identificazione facile e precisa di gene silenziato N. piante benthamiana che sono compromesse per la resistenza nonhost. Ci sono quattro fasi principali di questa metodologia. Il primo passo è quello di mettere a tacere individualmente gran numero di geni che utilizzano TRV-VIGS. Avevamo silenziato circa 5.000 geni 6,18 su un periodo di circa 1,5 anni usando il protocollo illustrato nella Figura 1.</stron...

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VIGS-Mediated Forward Genetics Screening for Identification of Genes Involved in Nonhost Resistance

Indotta da virus silenziamento genico è uno strumento utile per identificare geni coinvolti nella resistenza nonhost delle piante. Dimostriamo l&#39;uso di agenti patogeni batterici che esprimono GFPuv nell&#39;identificazione di geni silenziati piante suscettibili ai patogeni nonhost. Questo approccio è semplice, veloce e facilita lo screening su larga scala e di protocollo simili possono essere applicati a studiare varie altre interazioni pianta-microbo.

VIGS-Mediated Forward Genetica screening per la identificazione di geni coinvolti nella resistenza Nonhost


	Nonhost disease resistance of plants against bacterial pathogens is controlled by complex defense pathways. Understanding this mechanism is important ...

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