Name: a method to study the impact of chemically-induced ovarian failure on exercise capacity and cardiac adaptation in mice
Uploaded: 2014-04-07T15:00:00
Duration: 14 min 26 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Method to Study the Impact of Chemically-induced Ovarian Failure on Exercise Capacity and Cardiac Adaptation in Mice at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح (HL 098256)، من خلال جائزة بحوث التنمية الوطنية وإرشادهم العلوم (K01 AR052840) وجائزة العلماء المستقلة (K02 HL105799) من المعاهد الوطنية للصحة منح لJP Konhilas ومنحة التخصصات التدريب في علوم القلب والأوعية الدموية (HL007249 ). وكان في استقبال الدعم من مركز سارفر القلب في جامعة أريزونا ومن مؤسسة ستيفن M. Gootter.

<ol>
	<li>Lindheim, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+estimates+of+insulin+sensitivity+in+pre-+and+postmenopausal+women+using+the+insulin+tolerance+test+and+the+frequently+sampled+intravenous+glucose+tolerance+test.">Comparison of estimates of insulin sensitivity in pre- and postmenopausal women using the insulin tolerance test and the frequently sampled intravenous glucose tolerance test.</a> J. Soc. Gynecol. Invest. 1, 150-154 (1994).</li><li>Dubnov-Raz, G., Pines, A., Berry, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diet+and+lifestyle+in+managing+postmenopausal+obesity.">Diet and lifestyle in managing postmenopausal obesity.</a> Climacteric. 10 Suppl 2, 38-41 (2007).</li><li>Grundy, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+syndrome:+connecting+and+reconciling+cardiovascular+and+diabetes+worlds.">Metabolic syndrome: connecting and reconciling cardiovascular and diabetes worlds.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 47, 1093-1100 (2006).</li><li>Sharma, S., Firoozi, S., McKenna, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+exercise+testing+in+assessing+clinical+state+and+prognosis+in+hypertrophic+cardiomyopathy.">Value of exercise testing in assessing clinical state and prognosis in hypertrophic cardiomyopathy.</a> Cardiol. Rev. 9, 70-76 (2001).</li><li>Guyatt, G. H., Devereaux, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+heart+failure+treatment.">A review of heart failure treatment.</a> Mt. Sinai. J. Med. 71, 47-54 (2004).</li><li>Mayer, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+effects+of+ovarian+follicular+depletion+in+rats+by+4-vinylcyclohexene+diepoxide.">Long-term effects of ovarian follicular depletion in rats by 4-vinylcyclohexene diepoxide.</a> Reprod. Toxicol. 16, 775-781 (2002).</li><li>Mayer, L. P., Devine, P. J., Dyer, C. A., Hoyer, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+follicle-deplete+mouse+ovary+produces+androgen.">The follicle-deplete mouse ovary produces androgen.</a> Biol. Reprod. 71, 130-138 (2004).</li><li>Lohff, J. C., Christian, P. J., Marion, S. L., Hoyer, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+duration+of+dosing+on+onset+of+ovarian+failure+in+a+chemical-induced+mouse+model+of+perimenopause.">Effect of duration of dosing on onset of ovarian failure in a chemical-induced mouse model of perimenopause.</a> Menopause. 13, 482-488 (2006).</li><li>Wright, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+skeletal+effects+of+ovariectomy+versus+chemically+induced+ovarian+failure+in+mice.">Comparison of skeletal effects of ovariectomy versus chemically induced ovarian failure in mice.</a> J. Bone Miner Res. 23, 1296-1303 (2008).</li><li>Ogawa, S., Chan, J., Gustafsson, J. A., Korach, K. S., Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+increases+locomotor+activity+in+mice+through+estrogen+receptor+alpha:+specificity+for+the+type+of+activity.">Estrogen increases locomotor activity in mice through estrogen receptor alpha: specificity for the type of activity.</a> Endocrinology. 144, 230-239 (2003).</li><li>Roy, E. J., Wade, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+estrogens+in+androgen-induced+spontaneous+activity+in+male+rats.">Role of estrogens in androgen-induced spontaneous activity in male rats.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 89, 573-579 (1975).</li><li>Fahrbach, S. E., Meisel, R. L., Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preoptic+implants+of+estradiol+increase+wheel+running+but+not+the+open+field+activity+of+female+rats.">Preoptic implants of estradiol increase wheel running but not the open field activity of female rats.</a> Physiol. Behav. 35, 985-992 (1985).</li><li>Morgan, M. A., Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+estrogen+on+activity+and+fear-related+behaviors+in+mice.">Effects of estrogen on activity and fear-related behaviors in mice.</a> Horm. Behav. 40, 472-482 (2001).</li><li>Gorzek, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estradiol+and+tamoxifen+reverse+ovariectomy-induced+physical+inactivity+in+mice.">Estradiol and tamoxifen reverse ovariectomy-induced physical inactivity in mice.</a> Med. Sci. Sports Exerc. 39, 248-256 (2007).</li><li>Kadi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+physical+activity+and+estrogen+treatment+on+rat+fast+and+slow+skeletal+muscles+following+ovariectomy.">The effects of physical activity and estrogen treatment on rat fast and slow skeletal muscles following ovariectomy.</a> J. Muscle Res. Cell Motil. 23, 335-339 (2002).</li><li>Konhilas, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+modifies+exercise+and+cardiac+adaptation+in+mice.">Sex modifies exercise and cardiac adaptation in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, 2768-2776 (2004).</li><li>Caligioni, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+reproductive+status/stages+in+mice.">Assessing reproductive status/stages in mice.</a> Curr. Protoc. Neurosci. 4, (2009).</li><li>Goldman, J. M., Murr, A. S., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rodent+estrous+cycle:+characterization+of+vaginal+cytology+and+its+utility+in+toxicological+studies.">The rodent estrous cycle: characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies.</a> Birth Defects Res. B. Reprod. Toxicol. 80, 84-97 (2007).</li><li>McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performing+vaginal+lavage,+crystal+violet+staining,+and+vaginal+cytological+evaluation+for+mouse+estrous+cycle+staging+identification.">Performing vaginal lavage, crystal violet staining, and vaginal cytological evaluation for mouse estrous cycle staging identification.</a> J. Vis. Exp. , (2012).</li><li>McKee, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexually+dimorphic+myofilament+function+and+cardiac+troponin+I+phosphospecies+distribution+in+hypertrophic+cardiomyopathy+mice.">Sexually dimorphic myofilament function and cardiac troponin I phosphospecies distribution in hypertrophic cardiomyopathy mice.</a> Arch. Biochem. Biophys. 535, 39-48 (2013).</li><li>Konhilas, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise+can+prevent+and+reverse+the+severity+of+hypertrophic+cardiomyopathy.">Exercise can prevent and reverse the severity of hypertrophic cardiomyopathy.</a> Circ. Res. 98, 540-548 (2006).</li><li>Perez, N. J., Chen, H., Regan, J. A., Emert, A., Constantopoulos, E., Lynn, M., Konhilas, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+chemically-induced+ovarian+failure+on+voluntary+cage+wheel+exercise+and+cardiac+adaptation+in+mice.">The impact of chemically-induced ovarian failure on voluntary cage wheel exercise and cardiac adaptation in mice.</a> Compar. Med. In press, (2013).</li></ol>

والكتاب ليس لديهم ما يكشف.

وقد استخدمت كل من ممارسة عجلة القفص ومفرغة تشغيل نظم ممارسة في دراساتنا السابقة 16،21،22. وتحفظ جميع الحيوانات في غرف مخصصة لممارسة تقليل الاضطرابات البيئية أو البشرية. أي اضطراب من الحيوانات الإيقاع البيولوجي يمكن أن تؤثر تأثيرا كبيرا على الحيوانات ممارسة الأداء. لذا، ينبغي أن يتم رعاية الحيوان بأكمله، ورصد الأداء والتسجيل، وممارسة نظم ضمن نفس الإطار الزمني اليومي. يجب أن المحققين نسعى جاهدين لتجنب الإجهاد اضافية الى الحيوانات عن طريق عرض الاحتياطات مثل الحد من فترة التعرض الإجهاد وتغطية الأقفاص عند الاقتضاء. ممارسة عجلة القفص عند إعداد الجهاز عجلة القفص، وينبغي أن تكون العجلة يمكن الوصول إليها بسهولة عن الماوس لجبل والخروج. هناك ينبغي الحد الأدنى من الفراش في الجزء السفلي من القفص لمنع الفئران من أن تعشش حول عجلة القيادة وتعرقل الصحائفحركة عجلة الإلكترونية. وضعت أجهزة الاستشعار المغناطيسي على جزء ثابت من عجلة القيادة والمغناطيس تأمين لعجلة الحرة، وذلك لحساب كل دوران عجلة الماوس كما تمارس. جهاز التسجيل تعلق على أجهزة الاستشعار المغناطيسي يجب أن توضع فوق غطاء سلك القفص، وتحتاج جميع الأسلاك المكشوفة إما أن تكون مسجلة أو الاحتفاظ بها بعيدا عن متناول من الفئران، وذلك لتوفير حاجز ضد مضغ الضرر. وقد سجلت أجهزة الاستشعار المغناطيسي المغناطيس وأيضا إلى الهياكل المناسبة لمنع الضرر على حد سواء والحركة غير المرغوب فيها. أثناء جمع البيانات اليومية، لا بد من فحص جميع الأسلاك مسجلة بشكل وثيق لضمان البقاء الأسلاك سليمة وينبغي أن يكون retaped حسب الضرورة. لأنه قد يتطلب عدة أيام للتأقلم الفئران لمع البيئة الجديدة والبدء في ممارسة الرياضة بشكل منتظم، يجب أن تكون مصممة لتسجيل البيانات لكل حيوان على حدة. على الرغم من أن الحيوانات تميل الى انفاق الكثير من ساعة على عجلة القيادة، ومعظم التوالي يحدث في الليل. لذلك، قد تكشف عن بعض الحيوانات HIGح النشاط الأداء حتى لو كانت تظهر هامده خلال النهار. وعلاوة على ذلك، فإنه ليس من غير المألوف أن بعض الحيوانات سوف يحمل عجلة قفص محدودة التوالي. عادة، قفص النشاط العجلة التي تبلغ في المتوسط ​​1 كم / يوم أو أقل هو نتيجة النشاط قفص عشوائية وغير المرتبطة مع أي تشغيل التحفيز كبيرة. وبالتالي، ينبغي استبعاد الحيوانات التي هي في 1 كم / يوم أو 1 ساعة / يوم أو أقل المعلمات على التوالي في النهائي nonrunners تحليل البيانات. تبعا لأغراض محددة من دراسة الفردية وسلالات من الفئران المعنية، وطول ممارسة يمكن تعديلها. وأظهرت دراستنا السابقة أن لكل من سلالات الفئران المعنية، ارتفع متوسط ​​سرعات تشغيل العجلة ومدة التمرين على عجلة قفص تدريجيا مع مرور الوقت واستقر بنسبة 4 أسابيع. عجلة قفص تشغيل هو نوع من ممارسة طوعية في النماذج الحيوانية، والتي يؤخذ بصفة عامة التي يتم تنفيذها في ظل ظروف أقل إرهاقا. نتحدث عنه اليومآيك ممارسة مفرغه التي معايير معينة يمكن أن تكون محددة مسبقا، كلها تعمل في قفص اختبار طوعي وبسهولة تتأثر العظة البيئية أو السلوكية. لذلك، عادة ما يتم تجنب المقارنات بين إعدادات التجريبية المختلفة ما لم يتم استخدام أرقام المجموعات التجريبية الكبيرة. المناطق المحتملة الأخرى من البحوث التي يمكن أن تستفيد من هذا النوع من التمارين النموذج هي الدراسات التي تتضمن الاستجابات السلوكية مع عواقب فيزيولوجية مثل علم الأعصاب الإدراكي. للدراسات باستخدام نموذج الطوعية عجلة القفص، الخطوات الأكثر أهمية هي القفص إعداد ورصد الأنشطة العملية. ممارسة مفرغه خطوات ضرورية لإعداد تأقلم الحيوانات للبروتوكول ممارسة مفرغة. تبعا للغرض المحدد للدراسة الفردية، ومدة فترة التأقلم يمكن أن تختلف. في هذه الدراسة، تم اختيار فترة أسبوع واحد للسماح للحيوانات لacclimيأكلون لجهاز مفرغه والضوضاء الحركية في القفص، الاحماء فترات هي خطوة هامة من نظام التمرينات. مماثلة لنظرائهم الإنسان، يجب أن تكون درجة حرارة الفئران حتى قبل الدخول في أي نظم ممارسة مكثفة لتجنب وقوع إصابات والتحف البيانات المحتملة. في هذه الدراسة، بدأنا الحزام في ادنى حد ممكن سرعة (4 م / دقيقة) مع تشغيل شبكات صدمة الخروج لمدة 15 دقيقة. عن كل الفئران تشارك لتشغيل وإيقاف الحزام. كانت شبكات صدمة ثم انقلب على والحفاظ على سرعة الحزام عند 4 م / دقيقة. لتجنب الإفراط في التشديد على الفئران، وضعنا الصدمات الكهربائية على مستوى معتدل (1 هرتز). في غضون أيام قليلة، وتكييفها جميع الفئران إلى حزام حلقة مفرغة. ويمكن أيضا أن مدة التشغيل فضلا عن تسارع يكون متلائما مع كل التصميم التجريبي. وأوصى بدءا معدل التسارع هو 1 م / دقيقة. يجب تشغيل الممرات مفرغة من الفئران تظهر عليها علامات الإرهاق من الملعب مباشرة. عادة علامات الإرهاق التي أظهرتها ميلم في حلقة مفرغة هي كما يلي: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعرض المستمر لشبكة صدمة ل&gt; 5-10 ثانية، </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فقدان القدرة على تشغيل مما أدى إلى صدمة التعرض الشبكة&gt; 5X خلال ممارسة نظام واحد، و </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فقدان القدرة على تشغيل مما أدى إلى صدمة التعرض الشبكة&gt; 2 ثانية على الأقل 3X خلال ممارسة نظام واحد. </li></ol> القيم المذكورة أعلاه هي لاستخدامها في المقام الأول بمثابة مبادئ توجيهية لإجراء تجربة معينة. تحتاج هذه المعايير يتم تحديدها لكل بروتوكول ممارسة كما انها تختلف من سلالة إلى سلالة الماوس الماوس، تجربة لهذه التجربة، والباحث المحقق ل. خلافا لممارسة عجلة القفص، يجب تكرار الدراسات مفرغه عدة مرات لإزالة آثار العوامل البيئية والبيولوجية على تشغيل الأداء. ليس من غير المألوف أن نرى تقلبات في إدارة الأداء بين الاختبارات حتى بالنسبة لنفس الحيوان. لأن كل ممارسة نظام تشغيل يفضح الفئران لتعزيز بنية الشعس، فاصل زمني مناسب بين اختبارات يستريح هو ضروري. في تجربتنا، 2-3 أيام يستريح الفترة بين كل اختبار كان كافيا بالنسبة للفئران لاسترداد. مثل ممارسة مفرغه الإنسان، يتم تحديد السرعة لممارسة التحمل أفضل من معدل ضربات القلب أو تشبع الأكسجين في الدم، وهو إنجاز من الصعب من الناحية الفنية مع دراسات الماوس. الخطوة الأكثر أهمية الدراسات مفرغه هو تحديد الإرهاق، والتي تختلف عادة بين الفئران الفردية، وكان من المقرر أن 80٪ سرعة القصوى. في تجربتنا تسجيل النتائج قد تختلف اختلافا كبيرا بين الباحثين الأفراد، لأن المعايير لاستنفاد هي في معظمها ذاتية. وبالتالي، فإن التطبيق المتسق للمعايير نفسها خلال تسجيل أمر بالغ الأهمية.

وتتميز بداية انقطاع الطمث الطبيعية من استنزاف بصيلات البدائية المبيض من خلال رتق، مما أدى في نهاية المطاف في الشيخوخة المبيض. في الولايات المتحدة، وسيتم إنفاق أكثر من 30٪ من حياة كل النساء بعد انقطاع الطمث. في استجابة لانخفاض في وظيفة المبيض، قد تحدث عدة نتائج الفسيولوجية والنفسية، بما في ذلك زيادة السمنة، وعدم الاستقرار الأوعية الدموية، والمزاج أو اضطرابات النوم. بسبب زيادة البدانة / السمنة قبل انقطاع الطمث مقارنة مع نظرائهم 1،2، وخاصة النساء بعد سن اليأس هي أكثر عرضة لمتلازمة الأيض و comorbidities المرتبطة بها، بما في ذلك مرض القلب والأوعية الدموية 3. وعلاوة على ذلك، أصبح من الواضح بشكل متزايد أن إعادة التأهيل القلبي ناجحة لمرضى الأمراض القلبية الوعائية وتشمل التمارين الرياضية المنتظمة، وأنه يقلل من الإصابة بالأمراض القلبية الوعائية ممارسة والوفيات في هذه الموضوعات 4،5. حتى الآن، وكيفية القدرة على ممارسة الرياضة تشاnges خلال الفترة الانتقالية قبل إلى ما بعد انقطاع الطمث لم تتم دراسته بشكل جيد. الأهم من ذلك، دور ممارسة كإجراء وقائي لخطر الأمراض القلبية الوعائية لدى النساء بعد انقطاع الطمث لا يزال سلوكه بشكل ملحوظ. نموذج محرض الأكثر استخداما لمحاكاة انقطاع الطمث لدى النساء هو مستأصلة المبيض (وفك) القوارض. في الآونة الأخيرة، وقد تبين المادة الكيميائية المهنية 4 vinylcyclohexene diepoxide (VCD) خصيصا لاستهداف بصيلات البدائية والأولية المبيض الصغيرة من خلال تسريع عملية طبيعية للرتق، مما أدى في نهاية المطاف إلى فشل المبيض مع عدم وجود سمية واضحة وجدت في الأنسجة الأخرى 6. دورة ودقي من الفئران المعالجة VCD، الذي هو مماثل لدورة الطمث الإنسان، يتوقف في غضون 2-3 أشهر بعد الانتهاء من الحقن VCD، والتي تؤدي بدورها في انسحاب تدريجي من هرمون الاستروجين، ومحاكاة شبه لمرحلة ما بعد انقطاع الطمث تمر بمرحلة انتقالية. وبالتالي، جريب-تستنفد، الحيوان المبيض-سليمة يقترب عن كثب الإنسان الطبيعيةالتقدم من خلال ما قبل إلى المناطق المحيطة بالمدن إلى التحول بعد انقطاع الطمث 7-9. وعلاوة على ذلك، فإنه يوفر بديلا غير الجراحية لنموذج وفك خفض المضاعفات الناجمة عن الجراحة، مثل العدوى. في هذه الدراسة، ونحن العاملين التي يسببها انقطاع الطمث VCD الفئران لدراسة تأثير التمرينات الرياضية على التكيف القلب في الفئران بعد انقطاع الطمث. وهناك العديد من الحالات التي تشير إلى العلاقة بين هرمون الاستروجين وممارسة عجلة قفص في القوارض من كلا الجنسين 10-13. نضوب هرمون الاستروجين عن طريق الجراحة وفك يقلل ممارسة النشاط التطوعي في الفئران والجرذان 14،15. واستخدمت طريقتين للممارسة في هذه الدراسة لاختبار القدرة على ممارسة الرياضة من الفئران التي يسببها انقطاع الطمث VCD. وتعتبر عجلة قفص تشغيل عموما كنوع من ممارسة طوعية في النماذج الحيوانية وتنفيذ، ويفترض، في ظل ظروف أقل إرهاقا. ومع ذلك، عجلة قفص تشغيل ليس مؤشرا على القدرة على ممارسة الرياضة بالنسبة للحيوانات، الأمر الذي يتطلب الحيوانات لexerciحد ذاته عند مستويات أعلى بكثير. واستخدمت ممارسة مفرغه اضطر لتحديد القدرة على ممارسة الرياضة، وتقاس على أنها التسامح ممارسة الشدة والقدرة على التحمل. بالإضافة إلى ذلك، لقد أظهرنا سابقا أن ممارسة عجلة القفص يوفر حافزا لتضخم القلب الضخامي وهذا النمو هو تعتمد على الجنس 16. لذلك، نحن أيضا قياس التكيف القلب لممارسة عجلة قفص الفئران في سن اليأس VCD التي يسببها.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="682">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr>
			<td>4-vinylcyclohexene diepoxide (VCD)</td>
			<td>Sigma, cat# V-3630</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>11.5-cm-diameter wheel with a 5.0-cm-wide running surface</td>
			<td>Petsmart,model 6208</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital magnetic counter</td>
			<td>Sigma Sport,model BC 600</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Treadmill exercise</td>
			<td>Columbus Instruments , model 1055SDRM</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a method to study the impact of chemically-induced ovarian failure on exercise capacity and cardiac adaptation in mice

من مخاطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية ويزيد في النساء بعد انقطاع الطمث، ولكن، ودور ممارسة الرياضة، كإجراء وقائي لخطر الأمراض القلبية الوعائية لدى النساء بعد انقطاع الطمث لم تدرس بشكل كاف. وفقا لذلك، ونحن التحقيق في تأثير ممارسة طوعية قفص عجلة القيادة وممارسة مفرغه أجبرت على التكيف القلب في الفئران بعد انقطاع الطمث. نموذج محرض الأكثر استخداما لمحاكاة انقطاع الطمث لدى النساء هو مستأصلة المبيض (وفك) القوارض. ومع ذلك، فإن نموذج وفك لديها عدد قليل من الاختلاف انقطاع الطمث لدى البشر. في هذه الدراسة، ونحن تدار diepoxide 4 vinylcyclohexene (VCD) لإناث الفئران، التي تسارع فشل المبيض لتكون نموذجا انقطاع الطمث بديلة لدراسة تأثير ممارسة الرياضة في الفئران بعد انقطاع الطمث. VCD يسرع بشكل انتقائي فقدان الحويصلات الأولية والبدائية الناتجة في حالة الغدد الصماء الذي يحاكي عن كثب تطور طبيعي من قبل إلى ما المناطق شبه لمرحلة ما بعد انقطاع الطمث لدى البشر. لتحديد تأثير التمرينات الرياضية على ممارسةالقدرات والتكيف القلب في الفئران التي عولجت VCD الإناث، واستخدمت طريقتين. أولا، وتتعرض مجموعة من الفئران VCD المعاملة وغير المعالجة لعجلة قفص الطوعية. الثانية، كنا ممارسة مفرغه اضطر لتحديد القدرة على ممارسة الرياضة في مجموعة منفصلة وغير المعالجة بمبيدات VCD الفئران التي تقاس على أنها التسامح لممارسة الشدة والقدرة على التحمل.

بروتوكول تجريبية نموذجية، مثل تلك المستخدمة في هذه الدراسة، هو موضح في الشكل 1. بعد 20 يوما متتالية من العلاج VCD، تم استخدام الخلايا المهبلية لتحديد وجود أو عدم وجود دوروية في الفئران المحقونة VCD؛ تم رصدها أيضا الفئران المحقونة السيارة. تم تحديد مرحلة في دورة شبق من نسبة الخلايا الظهارية وخلايا الظهارية متقرن، والكريات البيض في مسحة مهبلية (الشكل 2A). أشارت إلى وجود الخلايا الظهارية متقرن فقط كان الماوس في شبق، وبالتالي كان لا يزال ركوب الدراجات. دورة ودقي في الفئران عادة تستغرق 4 أيام، ومن ثم حقن VCD اعتبرت الحيوانات اللاحلقية بعد 15 يوما من هجوع الودق الثابتة، والتي كشفت في علم الخلايا المهبلية غالبية الكريات البيض (الشكل 2A). أصبحت دورة ودقي من الفئران المعالجة VCD عدم انتظام، ثم توقفت في غضون 2-3 أشهر بعد بدء الحقن VCD (الشكل 2B) </قوي&gt;. أظهرت VCD أنسجة المبيض ضمور كبير، مقارنة مع الضوابط. في التكبير عالية، ونحن نرى نضوب كاملة من الحويصلات الأولية والبدائية (الشكل 2C). لاختبار تأثير فشل المبيض الناجم VCD على أداء التمارين الرياضية، ونحن عشوائية 7 أشهر من العمر VCD والفئران المعالجة السيارة (سلالتين، C57BL / 6 و B6C3F1) إما جماعات ممارسة عجلة المستقرة أو قفص 4-6 أسابيع بعد وقف الدراجات (الشكل 1). وسجلت قيم ممارسة يومية للوقت والمسافة لكل حيوان تمارس طوال فترة ممارسة 4 أسبوع. وتظهر المعدلات الأسبوعية للقيم اليومية للتشغيل عن بعد، والوقت والسرعة في الشكل 3 لC57BL / 6 الفئران التي عولجت مع مركبة أو VCD. لم نر اختلافات كبيرة في الأداء ممارسة يقاس متوسط ​​الوقت يوميا، وبعد المسافة، والسرعة على عجلة قفص بين وVCD مجموعات المعالجة المركبة في أي C57BL / 6 أو B6C3F1 الماوسسلالة (الشكل 4A). بسرعة، تشغيل عجلة المحسوب تدريجيا على مدى فترة تشغيل 4 أسابيع كما هو موضح سابقا 16، ولكن لم تكن تختلف كثيرا بين المجموعات التجريبية. وتشير هذه الدراسات أثر فشل المبيض VCD التي يسببها على ممارسة عجلة قفص الطوعية يتجاوز 2 على الأقل سلالات الفئران. بعد مدة عجلة قفص بروتوكول ممارسة طوعية، سجلت morphometrics الجسم وكانت قلوب رفعه بسرعة وزنه. لقد أظهرنا سابقا أن ممارسة عجلة قفص الطوعية يؤدي إلى زيادة في كتلة القلب 16. هنا، وتبين لنا أيضا تضخم القلب ردا على ممارسة عجلة قفص يقاس وزن القلب المطلقة (HW) وتطبيع الأب إلى طول عظام الساق (TL) (الجدول 1). وكانت كتلة القلب المطلقة ونسبة HW / TL أكبر بكثير في السيارة والفئران المعالجة VCD بالمقارنة مع نظرائهم المستقرة. ومع ذلك، لم تكن هناك قنينةالاختلافات rable في تضخم القلب بين السيطرة والفئران فشل المبيض الناجم عن ممارسة التمارين الرياضية التالية VCD عجلة قفص الطوعية. المقبل، وكنا غير الطوعي (القسري) تشغيل مفرغه لتحديد القدرة على ممارسة الرياضة. نحن تعرض الفئران لأول بروتوكول عالية الكثافة أن زيادة معدل السرعة تدريجي كل 10 دقيقة حتى الإرهاق. في المتوسط، وكانت السرعة القصوى للسيارة معاملة الفئران 26.7 ± 0.95 وكان م / دقيقة والسرعة القصوى لVCD معاملة الفئران 28 ± 1.4 م / دقيقة قبل الإرهاق. كنا أقل حجما على التوالي في 20 م / دقيقة (حوالي 80٪ من الحد الأقصى) لفحص للقدرة والتحمل. كما هو مبين في الشكل 4B، لم يوجد فرق كبير في قدرة عالية أو منخفضة ممارسة كثافة بين مركبة وتتكون المجموعة المعالجة، مشيرا إلى أن فشل المبيض الناجم VCD لم يكن لها تأثير على الماوس القدرة على ممارسة الرياضة. في الختام، وانقطاع الطمث الناجمة عن العلاج VCD له أي تأثير على ص إما الطوعي أو القسري<html> القدرة unning، فضلا عن الاستجابة التكيفية القلب لممارسة الرياضة. <img alt="الشكل 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51083/51083fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51083/51083fig1.jpg" /> كانت تدار الشكل 1. VCD-الإدارة وبروتوكول التجريبية. الفئران VCD (160 ملغ / كلغ) أو زيت السمسم (السيطرة على السيارة) ابتداء من الساعة 2 شهرا من العمر لمدة 20 يوما متتالية. التالية VCD أو مركبة الحقن، تم رصد دورات ودقي وكانوا مصممين cyclicities كما هو موضح في طرق الباب. فقدان وظيفة المبيض وقعت في غضون 60-90 يوما وأكده علم الخلايا المهبلية. في 7 أشهر من العمر، تعرضت الفئران لممارسة عجلة قفص الطوعية لمدة 4 أسابيع أو تخضع لبروتوكول ممارسة مفرغة. oad/51083/51083fig2highres.jpg &quot;سرك =&quot; / files/ftp_upload/51083/51083fig2.jpg &quot;/&gt; . الرقم 2 فشل المبيض الناجم VCD في الفئران ج: علم ​​الخلية من مسحة مهبلية غير ملوثين من سيارة حقن الفأر يدل على أربع مراحل من دورة ودقي: 1) proestrous، تتكون في الغالب من الخلايا الظهارية الأنوية 2) شبق، وتتميز الامم المتحدة الأنوية خلايا متقرن؛ 3) تلية الوداق، تتكون من خلايا الظهارية الأنوية (الأسهم)، الخلايا الظهارية متقرن من الامم المتحدة والأنوية (الأسهم)، والكريات البيض؛ 4) هجوع الودق، تتكون أساسا من الكريات البيض؛ وB: متوسط ​​طول (أيام) من دورة ودقي من السيارة والجماعات حقن VCD. يتم قياس دورة واحدة من أول يوم في شبق إلى اليوم الأول من الفترة المقبلة في شبق. بدأ علم الخلايا المهبلية حوالي 6 أسابيع بعد بداية الحقن. دورات ودقي الحيوانات المحقونة VCD تصبح غير منتظمة، مقارنة مع حقن الحيوان السيارةق، وبعد 12 دورات شبق، علم الخلايا من جميع VCD حقن الحيوانات لم تعد أشارت الدراجات C: H &amp; E تلطيخ من أنسجة المبيض في 8 أشهر من العمر. -المقاطع العرضية القيام به في سمك 5μm للتعامل السيارة (اللوحة اليسرى) و (اللوحة اليمنى) الفئران المعالجة VCD في 20X (اللوحة العلوية) و200X (اللوحة السفلية) التكبير. نسيج المبيض في التكبير 200X يظهر عدد من بصيلات في السيارة مقارنة مع الفئران التي عولجت VCD. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51083/51083fig2highres.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الرقم 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51083/51083fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51083/51083fig3.jpg" /> الرقم 3. الطوعي أداء عجلة قفص في المعالجة VCD C57BL/6J الفئران الإناث للمركبات أو. لوحة اليسار: متوسط ​​المسافات (كم /يوم) لكل فترة 1 أسبوع خلال فترة الدراسة 4 أسابيع لوحة الأوسط: متوسط ​​زمن تشغيل (ساعة / يوم) عن كل فترة 1 أسبوع خلال فترة الدراسة 4 أسابيع لوحة الحق: متوسط ​​سرعة تشغيل (كم / ساعة) لكل 1 فترة أسبوع خلال فترة الدراسة 4 أسبوع. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51083/51083fig3highres.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الرقم 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51083/51083fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51083/51083fig4.jpg" /> الشكل 4. عجلة قفص الطوعي والأداء مفرغة في السيارة والفئران المعالجة VCD. A: (لوحة الأعلى) C57BL / 6 المتوسط ​​التوالي مسافة (كم / يوم) والوقت الذي يقضيه على عجلة (ساعة / يوم) عن كل ساعة 24 خلال فترة الدراسة 4 أسبوع. (لوحة القاع) &amp; #160؛ B6C3F1 متوسط ​​المسافات (كم / يوم) والوقت الذي يقضيه على عجلة (ساعة / يوم) عن كل ساعة على مدى 24 أسبوع 4 فترة الدراسة ب: C57BL / 6 حلقة مفرغة تشغيل المعلمات. الوقت الأقصى (لوحة الأعلى) والسرعة القصوى (لوحة Botoom) باستخدام بروتوكولات مفصلة في قسم الأساليب.

Watch this Scientific Journal Video about A Method to Study the Impact of Chemically-induced Ovarian Failure on Exercise Capacity and Cardiac Adaptation in Mice at JoVE.com

A Method to Study the Impact of Chemically-induced Ovarian Failure on Exercise Capacity and Cardiac Adaptation in Mice

تم اختبار اثنين من ممارسة نماذج على يسببها كيميائيا نموذج انقطاع الطمث الماوس وضعت حديثا لدراسة تأثير انقطاع الطمث على القدرة على ممارسة الرياضة والتكيف القلب لممارسة الرياضة.

طريقة لدراسة تأثير كيميائيا التي يسببها الفشل المبيض على القدرة على ممارسة الرياضة والقلب التكيف في الفئران

The risk of cardiovascular disease (CVD) increases in post-menopausal women, yet, the role of exercise, as a preventative measure for CVD risk in ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

الفوسفور 31 الرنين المغناطيسي الطيفي: أداة لقياس<em&gt; في فيفو</em&gt; القدرة الميتوكوندريا الفسفرة التأكسدية في العضلات الهيكلية البشرية

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

Impact of Intracardiac Neurons on Cardiac Electrophysiology and Arrhythmogenesis in an Ex Vivo Langendorff System

أثر إينتراكاردياك من الخلايا العصبية في القلب الكهربية وأررهيثموجينيسيس في نظام لانجيندورف السابقين فيفو

Since its invention in the late 19th century, the Langendorff ex vivo heart perfusion system continues to be a relevant tool for studying a broad spectrum ...

Conducting Maximal and Submaximal Endurance Exercise Testing to Measure Physiological and Biological Responses to Acute Exercise in Humans

إجراء عملية التحمل القصوى وسوبماكسيمال الاختبار لقياس الاستجابات الفسيولوجية والبيولوجية لممارسة الحادة في البشر

Regular physical activity has a positive effect on human health, but the mechanisms controlling these effects remain unclear. The physiologic and biologic ...

Non-invasive Assessment of Dorsiflexor Muscle Function in Mice

تقييم غير الغازية لوظيفة العضلات دورسيفليكسور في الفئران

Assessment of skeletal muscle contractile function is an important measurement for both clinical and research purposes. Numerous conditions can negatively ...

Implantation of an Isoproterenol Mini-Pump to Induce Heart Failure in Mice

غرس مضخة ايزوبروتيرينول الصغيرة للحث علي فشل القلب في الفئران

Isoproterenol (ISO), is a non-selective beta-adrenergic agonist, that is used widely to induce cardiac injury in mice. While the acute model mimics ...

Integration of Brain Tissue Saturation Monitoring in Cardiopulmonary Exercise Testing in Patients with Heart Failure

دمج مراقبه تشبع انسجه المخ في اختبار التمارين القلبية في المرضي الذين يعانون من قصور القلب

Cerebral hypo-oxygenation during rest or exercise negatively impacts the exercise capacity of patients with heart failure with reduced ejection fraction ...

Generation and Characterization of Right Ventricular Myocardial Infarction Induced by Permanent Ligation of the Right Coronary Artery in Mice

توليد وتوصيف احتشاء عضلة القلب البطيني الأيمن الناجم عن الربط الدائم للشريان التاجي الأيمن في الفئران

Right ventricular infarction (RVI) is a common presentation in clinical practice. Severe RVI can lead to fatal hemodynamic dysfunction and arrhythmia. In ...

Chronic Ovine Model of Right Ventricular Failure and Functional Tricuspid Regurgitation

نموذج الأغنام المزمن لفشل البطين الأيمن والقلس الوظيفي ثلاثي الشرف

The pathophysiology of severe functional tricuspid regurgitation (FTR) associated with right ventricular dysfunction is poorly understood, leading to ...

Modified Heterotopic Abdominal Heart Transplantation and a Novel Aortic Regurgitation Model in Rats

زراعة قلب البطن غير المتجانسة المعدلة ونموذج قلس الأبهر الجديد في الفئران

Over the past 50 years, many researchers have reported heterotopic abdominal heart transplantation in mice and rats, with some variations in the surgical ...

In Vivo Heart Transplantation to Study Endothelial-to-Mesenchymal Transition

A Neonatal Heterotopic Rat Heart Transplantation Model for the Study of Endothelial-to-Mesenchymal Transition

A Neonatal Heterotopic Rat Heart Transplantation Model for the Study of Endothelial-to-Mesenchymal Transition (Video) | JoVE 

Endocardial fibroelastosis (EFE), defined by subendocardial tissue accumulation, has major impacts on the development of the left ventricle (LV) and ...