Name: highly resolved intravital striped-illumination microscopy of germinal centers
Uploaded: 2014-04-09T21:20:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Highly Resolved Intravital Striped-illumination Microscopy of Germinal Centers at JoVE.com

אנו מודים לר &#39;Heintzmann לדיונים פוריים במהלך הפיתוח של הגישה עם פסי התאורה, ק Rajewsky וא&#39; הברמן למתן עכברים הטרנסגניים C57BL / 6 B1-8-GFP. אנו מכירים Forschungsgemeinschaft דויטשה תחת מענק NI1167/3-1 (לRN), HA5354/4-1 וSFB633, A15 פרויקט (לAEH), שריטה תחת מענק מלגת רחל הירש (לRN) לתמיכה כספית. אנחנו בעיקר מכירים את הרשת ג&#39;ימי לדיונים פוריים ותמיכה תשתיתית

התקנת Multi-מרישים לTPLSM פסים תאורה ההגדרה המשמשת כאן היא מיקרוסקופ רב קרן מיוחדת שני פוטונים לייזר סריקה, כפי שתוארה לעיל 6,20. המערכת מתוארת באיור 1. הגישה יכולה להיות מיושמת על מיקרוסקופים אחרים שני פוטונים לייזר סריקה...

<ol>
	<li>Denk, W., Strickler, J. H., Webb, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-photon+laser+scanning+fluorescence+microscopy.">Two-photon laser scanning fluorescence microscopy.</a> Science. 248 (4951), 73-76 (1990).</li><li>Siffrin, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+partially+reversible+th17+cell-induced+neuronal+dysfunction+in+the+course+of+encephalomyelitis.">In vivo imaging of partially reversible th17 cell-induced neuronal dysfunction in the course of encephalomyelitis.</a> Immunity. 33 (3), 424-436 (2010).</li><li>Esplugues, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+Th17+cells+occurs+in+the+small+intestine.">Control of Th17 cells occurs in the small intestine.</a> Nature. 475 (7357), 514-518 (2011).</li><li>Hauser, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+germinal-center+B+cell+migration+in+vivo+reveals+predominant+intrazonal+circulation+patterns.">Definition of germinal-center B cell migration in vivo reveals predominant intrazonal circulation patterns.</a> Immunity. 26 (5), 655-667 (2007).</li><li>Cahalan, M. D., Parker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choreography+of+cell+motility+and+interaction+dynamics+imaged+by+two-photon+microscopy+in+lymphoid+organs.">Choreography of cell motility and interaction dynamics imaged by two-photon microscopy in lymphoid organs.</a> Annu. Rev. Immunol. 26, 585-626 (2008).</li><li>Herz, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+two-photon+intravital+microscopy+to+the+infrared+by+means+of+optical+parametric+oscillator.">Expanding two-photon intravital microscopy to the infrared by means of optical parametric oscillator.</a> Biophys. J. 98 (4), 715-723 (2010).</li><li>Hell, S. W., Rittweger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopy:+Light+from+the+dark.">Microscopy: Light from the dark.</a> Nature. 461 (7267), 1069-1070 (2009).</li><li>Ding, J. B., Takasaki, K. T., Sabatini, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supraresolution+imaging+in+brain+slices+using+stimulated-emission+depletion+two-photon+laser+scanning+microscopy.">Supraresolution imaging in brain slices using stimulated-emission depletion two-photon laser scanning microscopy.</a> Neuron. 63 (4), 429-437 (2009).</li><li>Bianchini, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-wavelength+two-photon+excitation+-+stimulated+emission+depletion+(SW2PE-STED)+super-resolution+imaging.">Single-wavelength two-photon excitation - stimulated emission depletion (SW2PE-STED) super-resolution imaging.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 109 (17), 6390-6393 (2012).</li><li>Berning, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoscopy+in+a+living+mouse+brain.">Nanoscopy in a living mouse brain.</a> Science. 335 (6068), 551 (2012).</li><li>York, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolution+doubling+in+live,+multicellular+organisms+via+multifocal+structured+illumination+microscopy.">Resolution doubling in live, multicellular organisms via multifocal structured illumination microscopy.</a> Nat. Methods. 9, 749-754 (2012).</li><li>Gu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Advanced optical imaging. , (2001).</li><li>Cha, J. W., Ballesta, J., So, P. T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shack-Hartmann-wave+front-sensor-based+adaptive+optics+system+for+multi-photon+microscopy.">Shack-Hartmann-wave front-sensor-based adaptive optics system for multi-photon microscopy.</a> J. Biomed. Opt. 15 (4), (2010).</li><li>Booth, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+optics+in+microscopy.">Adaptive optics in microscopy.</a> Phil. Trans. R. Soc. A. 365, 2829-2843 (2007).</li><li>Niesner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+power+of+single+and+multibeam+two-photon+microscopy+for+high-resolution+and+high-speed+deep+tissue+and+intravital+imaging.">The power of single and multibeam two-photon microscopy for high-resolution and high-speed deep tissue and intravital imaging.</a> Biophys. J. 93 (7), 2519-2529 (2007).</li><li>R&#252;ckel, M., Mack-Bucher, J. A., Denk, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+wave-front+correction+in+TPM+using+coherence-gated+wave-front+sensing.">Adaptive wave-front correction in TPM using coherence-gated wave-front sensing.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 103, 17137-17142 (2006).</li><li>Tang, J., Germain, R. N., Cui, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Superpenetration+optical+microscopy+by+iterative+multiphoton+adaptive+compensation+technique.">Superpenetration optical microscopy by iterative multiphoton adaptive compensation technique.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 109 (22), 8434-8439 (2012).</li><li>Ji, N., Milkie, D. E., Betzig, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+optics+via+pupil+segmentation+for+high+resolution+imaging+in+biological+tissues.">Adaptive optics via pupil segmentation for high resolution imaging in biological tissues.</a> Nat. Methods. 7, 141-147 (2009).</li><li>Lu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Super-resolution+laser+scanning+microscopy+through+spatiotemporal+modulation.">Super-resolution laser scanning microscopy through spatiotemporal modulation.</a> Nano Lett. 9 (11), 3883-3889 (2009).</li><li>Andresen, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+intravital+microscopy.">High-resolution intravital microscopy.</a> PLoS ONE. 7 (12), (2012).</li><li>Debarre, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+optics+for+structured-illumination.">Adaptive optics for structured-illumination.</a> Opt. Exp. 16 (13), 9290-9305 (2008).</li></ol>

המטרה של הדמיה אופטית intravital היא דינמי ופונקציונלי כדי להמחיש תנועתיות ואינטראקציות הסלולר על מנת להבין רקמות ותפקוד איברים בבריאות ובחוליים 5. טכנולוגיה רבת עוצמה ביותר להשגה, מיקרוסקופית לייזר סריקה רב פוטון זה, עדיין יש להתגבר על מגבלות הקשורות לנופף עיוותי...

מיקרוסקופ לייזר סריקת שני פוטונים (TPLSM), עם יתרונות משלה להדמית רקמות עמוקות הקשורות לעירור פעם אולטרה קצר אינפרא אדום 1, יש מהפכה השקפתנו על תהליכים חיוניים ברמה תא בודד על ידי חשיפת דפוסי תנועתיות ואינטראקציה של שונים תת תא חי חיות 2-5. עם זאת, טכנולוגיה נוכחית היא עדיין לא מספיק כדי להבהיר את מנגנוני פעילות של איברים שונים ותפקוד כתנאי מוקדם לפיתוח אסטרטגיות טיפוליות חדשות, שכן הוא הופך את המידע דליל רק על הבסיס המולקולרי של תגובה תאית בתוך רקמות בבריאות ובחוליים. הטכנולוגיה נוכחית מאפשרת חלון מרחבית רק של כמה מאה מיקרונים בשל פיזור ולנופף באפקטי עיוות קדמיות ברזולוציה מרחבית ויחס אות לרעש 6, שהן בולטות במיוחד ברקמה הקומפקטית ביותר של בעלי חיים מבוגרים. השפעות עיוות אלו פיזור ולנופף מולם בשל הטרוגנית מאודחלוקת ד איזוטרופי של מקדם השבירה ברקמות, מה שמוביל בשלב ראשון להידרדרות תלויה עומק של רזולוציה מרחבית 3D וסופו של דבר לאובדן המוחלט של אותות שמקורם פוטונים עירור בליסטיים, כלומר הפסד של יחס אות לרעש. במונחים של bioscientific ויישומי רקמות עמוקות ביו, זה אומר שהטכנולוגיה הנוכחית אינה מסוגלת לחשוף את התקשורת סלולרית באופן חד משמעי, כי ברזולוציה נמוכה תוביל לאינטראקציות באופן כוזב חיוביות ואילו הירידה של יחס אות לרעש הייתי לגרום למערכת להתעלם מכמה יחסי גומלין בין מבנים עמומים. על מנת לזהות באופן חד משמעי אינטראקציות הסלולר באופן דינמי, יש צורך ברזולוציה מרחבית השתפרה מאוד עמוק בתוך הרקמה. טכניקות Nanoscopy החזקות הציגו כיום מבוססות על אלגוריתמים מיוחדים מספריים, למשל גישות מבנה תאורה, על דלדול של המצב המעורר הראשון, כגון </em&gt; STED, RESOLFT, או על לוקליזציה מולקולה, למשל dSTORM, PALM, מצאו יישומים רבים בתאים קבועים, כמו גם בתרביות תאים חיות 7. עם זאת, על מנת להרחיב את היישומים הללו לסעיפי רקמות, רקמות ואורגניזמים חיים שעדיין צריכים להתגבר על קשיים טכניים חמורים. שני פוטונים עירור STED עם אורכי גל שונים, כמו גם עם אורך גל יחיד (sw2PE-STED) לעירור ופליטה מאולץ יושמה כדי לשפר את הרזולוציה לרוחב פרוסות מוח 8 או במטריצות מלאכותיות עם תאים מוטבעים 9, בהתאמה, באותו רזולוציה צירית כTPLSM סטנדרטי. שימוש אחד הפוטון STED, הדינמיקה של קוצים הדנדריטים יכולה להיות צילמה על פני השטח של קליפת המוח (עד 10-15 עומק מיקרומטר) בעכבר Thy1 EGFP מתגורר ברזולוציה של 67 10 ננומטר. כלי תכליתי לביולוגיה התפתחותית מסופק על ידי מיקרוסקופ מובנה תאורה multifocal, המספק 2D הכפול השתפררזולוציה. עם זאת, טכניקה זו ניתן להשתמש רק באורגניזמים עם נטייה נמוכה של פיזור אור, כגון עוברי דגי זברה 11. ובכל זאת, אף אחת מהטכניקות הללו ניתן ליישם ברקמת הפערים הפיזור של בעלי חיים מבוגרים בכמה מאות מיקרומטרים, שהם מודלים חיוניים למחקר ביו והקליני של מחלות עם הופעה לאחר לידה. מבקר של הקירוב משמש לחישוב את צורת חזית גל העקיפה מוגבל, כלומר פונקצית נקודת התפשטות (כוחות הביטחון הפלסטיניים), לאחר ההתמקדות דרך עדשה, הרוחב של כוחות הביטחון הפלסטיניים לאורך הציר האופטי (ברזולוציה צירית) הוא לפחות פי שלוש גדול יותר רוחב כוחות הביטחון הפלסטיניים בניצב לציר האופטי (ברזולוציה רוחב) 12. לנופף עיוותים מול הזמנות שונות לכמת ידי המקדמים של Zernike משמעותי לשנות את צורת חזית הגל של גל אלקטרומגנטים ממוקד בתחום ההדמיה רקמות עמוקות שמוביל לPSFs הרבה יותר גדול, במיוחד לאורך אופטיאל ציר 13-15. לפיכך, שני החוקים העקיפה והשפעות עיוות חזית הגל מצביעים על הרזולוציה לאורך הציר האופטי כגורם המגביל בהדמיה רקמות עמוקות. ואילו טכניקות Nanoscopy להתמקד במנטרלות את המגבלות של השתברות, טכנולוגיה שמשפרת את הרזולוציה וחדות על ידי מנטרל הן עקיפה ואפקטי עיוות גל קדמי צירית יש צורך רק להדמית intravital ברזולוציה גבוהה. באופן אידיאלי, טכניקה זו צריכה להיות גם מהיר מספיק כדי לאפשר ניטור של דינמיקה סלולרית. תיקון סטיות כוחות הביטחון הפלסטיניים ואובדן ניגוד באמצעות האופטיקה מתקנת בTPLSM בזמן אמת, נחקר בהרחבה והשתפר בעשור האחרון 13,14,16-18 ולכן הבחירה הטובה ביותר הזמינים כיום המובילה לניהול טוב יותר של עירור בליסטי פוטונים 14. ובכל זאת, בשל העובדה שרוב לנופף מול תיקון גישות בשימוש באופטיקה אדפטיבית הם איטרטיבי וכי הם חהיש צורך לחזור לאזורים קטנים (כמה 10 x 10 מיקרומטר 2) בשל ההטרוגניות הגבוהה של מקדם השבירה ברקמות, מהירות הרכישה היא נמוכה באופן משמעותי מהנדרש לתנועתיות תא הדמיה ותקשורת. יתר על כן, המגבלה הפיסית בהסתגלות אופטיקה השתפרה TPLSM עדיין נקבעת על ידי עקיפה. אפנון המרחבי של תאורה (SPIN) ואפנון זמני בצד זיהוי (ספייד) הוצעו באופן תיאורטי שיחול על מיקרוסקופיה לייזר סריקה כדי לשפר את הרזולוציה. היישום המעשי שלהם בתחום ההדמיה intravital עדיין להיות הפגין 19. יחדיו, יש ביקוש גבוה לפיתוח של טכנולוגיות, המשפרות את הרזולוציה להדמית רקמות עמוקות בחיים בעלי חיים מבוגרים. בעבודה זו, אנו משיגים אפנון המרחבית של דפוס העירור על ידי שליטה על תהליך הסריקה ברב קרן לייזר-s רב פוטון עם פסי תאורהמיקרוסקופיה שימורים (MB-SI-MPLSM) 20. בניגוד לגישות תאורה מובנה, שבו חתך קורה עירור הוא מווסת מרחבית, אנו משתמשים רק בתהליך הסריקה על מנת להשיג את האפנון המרחבי של העירור. על ידי הרחבת העירור לאורך גל ארוך יותר, אנו מסוגלים לשפר את שניהם ברזולוציה מרחבית ויחס אות לרעש ברקמות עמוקות של מאוד פיזור רקמות (בלוטות לימפה לדוגמא, נתיב חופשי פיזור 47 מיקרומטר 6), ללא תלות באופטית אות שאינו ליניארי אנו מזהים, כגון הקרינה, דור שני הרמוני או בתדירות אחרת ערבוב תופעה. שימוש בגישה זו באורכי גל עירור עד 900 ננומטר אנו מסוגלים באופן דינמי מבנים חלבוניים סלולריים תמונה בקנה המידה של כמה מולקולות במרכזים נבטי של בלוטות לימפה בעכבר. לפיכך, אנו יכולים לחזות טובים יותר את האינטראקציה בין יחידות אנטיגן נושא על פני השטח של תאי דנדריטים זקיקים ותאי B בתהליך של חיטוט אנטיgen במהלך התגובה החיסונית באיברים הלימפה משניים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="600">
	<tbody>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">ATTO590 &#8211; NSH for coupling</td>
			<td style="width:99px;">ATTO Tec, Germany</td>
			<td style="width:119px;">AD-590-35</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="81">
			<td height="81" style="height:81px;width:216px;">CD21/35 &#8211; Fab fragment &#8211; ATTO590</td>
			<td style="width:99px;">DRFZ, Berlin</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">The coupling reaction was performed in the central lab of our institution.</td>
		</tr>
		<tr height="81">
			<td height="81" style="height:81px;width:216px;">B1-8 Jk-/- EGFP+</td>
			<td style="width:99px;">Prof. Anne Habermann, Yale Univ., CA, US</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">Can be also found at Jackson Laboratories (JAX).</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:216px;">EasySep Negative Selection Mouse B Cell Enrichment&#160;</td>
			<td style="width:99px;">StemmCell Technologies, Germany</td>
			<td style="width:119px;">19854</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:216px;">Polystyren beads (605), 0.2 &#181;m</td>
			<td style="width:99px;">Life Technologies, Germany</td>
			<td style="width:119px;">F8803</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;"></td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;"></td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Name of Equipment</td>
			<td style="width:99px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="81">
			<td height="81" style="height:81px;width:216px;">TriMScope I</td>
			<td style="width:99px;">LaVision Biotec, Bielefeld, Germany</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">OPO (manual version)</td>
			<td style="width:99px;">APE, Berlin, Germany</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:216px;">Ti:Sa Laser Chameleon Ultra II</td>
			<td style="width:99px;">Coherent, Duisburg, Germany</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
		<tr height="81">
			<td height="81" style="height:81px;width:216px;">water-immersion objective lens, 20x, NA 0.95, IR, WD 2 mm</td>
			<td style="width:99px;">Olympus Germany, Hamburg, Germany</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:167px;">-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

highly resolved intravital striped-illumination microscopy of germinal centers

ניטור תקשורת סלולרית על ידי מיקרוסקופית רב פוטון רקמות עמוקות intravital הוא המפתח להבנת גורלם של תאי מערכת החיסון בתוך דגימות עבות רקמות ואיברים בבריאות ובחוליים. על ידי שליטה על תבנית הסריקה במיקרוסקופ רב פוטון ויישום אלגוריתמים מספריים מתאימים, פיתחנו גישת פסי תאורה, מה שאיפשר לנו להשיג פי 3 ברזולוציה צירית טוב יותר ויחס משופר אות לרעש, כלומר לעומת זאת, בלמעלה מ 100 עומק רקמת מיקרומטר בתוך מאוד פיזור רקמות של איברים הלימפה בהשוואה למיקרוסקופיה רב פוטון סטנדרטי. מהירות הרכישה, כמו גם השפעות photobleaching וניזקים היו דומה לטכניקת צילום המבוסס על מכפיל סטנדרטי, ואילו עומק ההדמיה היה מעט נמוך יותר בשל השימוש בגלאי שדה. על ידי שימוש בגישה עם פסי התאורה, אנו מסוגלים להתבונן בדינמיקה של פיקדונות מורכבים חיסון בתאים דנדריטים זקיקים משניים ̵1; ברמה של כמה מולקולות חלבון במרכזים נבטי.

רזולוציה מרחבית בבלוטות הלימפה הממדים של התפקוד היעיל נקודת ההתפשטות (ePSF) מתאימות לרזולוציה מרחבית של מיקרוסקופ 12. מדדנו שלוש ממדי פונקציה זאת על ידי רכישת אות דור הרמוניות השנייה של סיבי הקולגן בבלוטות לימפה על ידי MB-SI-TPLSM ש?...

Watch this Scientific Journal Video about Highly Resolved Intravital Striped-illumination Microscopy of Germinal Centers at JoVE.com

Highly Resolved Intravital Striped-illumination Microscopy of Germinal Centers

מיקרוסקופית Intravital הפסים תאורה נפתר מאוד של מרכזי ז&#39;רמינל

ההדמיה intravital ברזולוציה גבוהה עם ניגודיות משופרת עד 120 מיקרומטר עומק בבלוטות הלימפה של עכברים בוגרים מושגת על ידי מרחבית ויסות דפוס העירור של מיקרוסקופ שני פוטונים רב המוקדים. ב100 עומק מיקרומטר מדדנו החלטות 487 ננומטר (לרוחב) ו551 ננומטר (צירי), ובכך לעקוף את מגבלות פיזור ועקיפות.

Monitoring cellular communication by intravital deep-tissue multi-photon microscopy is the key for understanding the fate of immune cells within thick ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Intravital Microscopy of the Inguinal Lymph Node

מיקרוסקופית Intravital של הצומת לימפה מפשעתי

Lymph nodes (LN's), located throughout the body, are an integral component of the immune system. They serve as a site for induction of adaptive immune ...

Tracking Neutrophil Intraluminal Crawling, Transendothelial Migration and Chemotaxis in Tissue by Intravital Video Microscopy

מעקב זחילה Intraluminal נויטרופילים, הגירה Chemotaxis Transendothelial ועל רקמות על ידי מיקרוסקופית וידאו Intravital

The recruitment of circulating leukocytes from blood stream to the inflamed tissue is a crucial and complex process of inflammation1,2. In the ...

Intravital Imaging of the Mouse Thymus using 2-Photon Microscopy

הדמיה Intravital של קורנית עכבר באמצעות 2-פוטון מיקרוסקופית

Two-photon Microscopy (TPM) provides image acquisition in deep areas inside tissues and organs. In combination with the development of new stereotactic ...

Intravital Microscopy of the Spleen: Quantitative Analysis of Parasite Mobility and Blood Flow

מיקרוסקופית Intravital של הטחול: ניתוח כמותי של ניידות טפיל ואת זרימת הדם

The advent of intravital microscopy in experimental rodent malaria models has allowed major advances to the knowledge of parasite-host interactions 1,2. ...

Intravital Microscopy Imaging of the Liver following Leishmania Infection: An Assessment of Hepatic Hemodynamics

Intravital Microscopy Imaging of the Liver following Leishmania Infection: An Assessment of Hepatic Hemodynamics

מיקרוסקופית Intravital הדמיה של הכבד הבא<em&gt; שושנת יריחו</em&gt; זיהום: הערכה של פרמטרים המודינמיים בדיה

Intravital microscopy (IVM) is a powerful optical imaging technique that has made possible the visualization, monitoring and quantification of various ...

Intravital Microscopy of Leukocyte-endothelial and Platelet-leukocyte Interactions in Mesenterial Veins in Mice

אינטראקציות מיקרוסקופית Intravital של יקוציט-האנדותל וטסיות דם-יקוציט בMesenterial ורידים בעכברים

Intravital microscopy is a method that can be used to investigate different processes in different regions and vessels in living animals. In this ...

Imaging Neutrophils and Monocytes in Mesenteric Veins by Intravital Microscopy on Anaesthetized Mice in Real Time

הדמיה נויטרופילים ומונוציטים בmesenteric ורידים על ידי מיקרוסקופית Intravital על עכברים מורדמים בזמן אמת

Efficient immune response is dependent on rapid mobilization of blood leukocytes to the site of infection or injury. Investigating leukocyte migration in ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

שיטת הדגימה ספוגית לצורך זיהוי של norovirus האדם על משטחים

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...

Preparation of Murine Submandibular Salivary Gland for Upright Intravital Microscopy

הכנה של בלוטת הרוק Submandibular מאתר מיקרוסקופ Intravital זקופה

The submandibular salivary gland (SMG) is one of the three major salivary glands, and is of interest for many different fields of biological research, ...

Imaging Cell Interaction in Tracheal Mucosa During Influenza Virus Infection Using Two-photon Intravital Microscopy

אינטראקציה תא הדמיה ב רירית והכו אותי במהלך זיהום בנגיף שפעת באמצעות מיקרוסקופ שני הפוטונים Intravital

The analysis of cell-cell or cell-pathogen interaction in vivo is an important tool to understand the dynamics of the immune response to infection. ...