Name: microfluidic platform for measuring neutrophil chemotaxis from unprocessed whole blood
Uploaded: 2014-06-03T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Microfluidic Platform for Measuring Neutrophil Chemotaxis from Unprocessed Whole Blood at JoVE.com

Støtte fra National Institutes of Health (gir GM092804, DE019938) og Shriners Burns Hospital.

En. Microfluidic Device Fabrication <ol><li> Ved hjelp av standard fotolitografiske teknikker, og lag master formskive i et klasse 1000 rent rom. Mønster den første 3-mikrometer tynne epoxy-basert negative fotoresistsjiktet å definere migrasjonskanaler i henhold til instruksjonene fra produsenten. Mønster den andre 50-mikrometer tykt lag for å definere celle-lasting og chemokine kamre. </li><li> Bruk mønstrede wafer å kaste polydimethylsiloxane (PDMS) enheter. Kraft bland PDMS (20 g) med initiator (2 g) i 5 min...

<ol>
	<li>Hansson, G. K., Robertson, A. K., Soderberg-Naucler, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+atherosclerosis.">Inflammation and atherosclerosis.</a> Annual review of pathology. 1, 297-329 (2006).</li><li>Phillipson, M., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neutrophil+in+vascular+inflammation.">The neutrophil in vascular inflammation.</a> Nature medicine. 17, 1381-1390 (2011).</li><li>Butler, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burn+injury+reduces+neutrophil+directional+migration+speed+in+microfluidic+devices.">Burn injury reduces neutrophil directional migration speed in microfluidic devices.</a> PloS one. 5, (2010).</li><li>Lavrentieva, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+markers+in+patients+with+severe+burn+injury.+What+is+the+best+indicator+of+sepsis.">Inflammatory markers in patients with severe burn injury. What is the best indicator of sepsis.</a> Burns : journal of the International Society for Burn Injuries. 33, 189-194 (2007).</li><li>De Filippo, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mast+cell+and+macrophage+chemokines+CXCL1/CXCL2+control+the+early+stage+of+neutrophil+recruitment+during+tissue+inflammation.">Mast cell and macrophage chemokines CXCL1/CXCL2 control the early stage of neutrophil recruitment during tissue inflammation.</a> Blood. 121, 4930-4937 (2013).</li><li>Mankovich, A. R., Lee, C. Y., Heinrich, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+serum+heat+treatment+on+chemotaxis+and+phagocytosis+by+human+neutrophils.">Differential effects of serum heat treatment on chemotaxis and phagocytosis by human neutrophils.</a> PloS one. 8, (2013).</li><li>Palabrica, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukocyte+accumulation+promoting+fibrin+deposition+is+mediated+in+vivo+by+P-selectin+on+adherent+platelets.">Leukocyte accumulation promoting fibrin deposition is mediated in vivo by P-selectin on adherent platelets.</a> Nature. 359, 848-851 (1992).</li><li>Sackmann, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+kit-on-a-lid:+a+versatile+platform+for+neutrophil+chemotaxis+assays.">Microfluidic kit-on-a-lid: a versatile platform for neutrophil chemotaxis assays.</a> Blood. 120, (2012).</li><li>Jones, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+chambers+for+monitoring+leukocyte+trafficking+and+humanized+nano-proresolving+medicines+interactions.">Microfluidic chambers for monitoring leukocyte trafficking and humanized nano-proresolving medicines interactions.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109, 20560-20565 (2012).</li><li>Nauseef, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+human+neutrophils+from+venous+blood.">Isolation of human neutrophils from venous blood.</a> Methods Mol Biol. 412, 15-20 (2007).</li><li>Lyons, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microarray+analysis+of+human+leucocyte+subsets:+the+advantages+of+positive+selection+and+rapid+purification.">Microarray analysis of human leucocyte subsets: the advantages of positive selection and rapid purification.</a> BMC genomics. 8, (2007).</li><li>Hasenberg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+immunomagnetic+negative+enrichment+of+neutrophil+granulocytes+from+murine+bone+marrow+for+functional+studies+in+vitro+and+in+vivo.">Rapid immunomagnetic negative enrichment of neutrophil granulocytes from murine bone marrow for functional studies in vitro and in vivo.</a> PloS one. 6, (2011).</li><li>Agrawal, N., Toner, M., Irimia, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+migration+assay+from+a+drop+of+blood.">Neutrophil migration assay from a drop of blood.</a> Lab on a chip. 8, 2054-2061 (2008).</li><li>Hoang, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+neutrophil+speed+and+directionality+during+chemotaxis,+directly+from+a+droplet+of+whole+blood.">Measuring neutrophil speed and directionality during chemotaxis, directly from a droplet of whole blood.</a> Technology. , 1-9 (2013).</li><li>Kurihara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolvin+D2+restores+neutrophil+directionality+and+improves+survival+after+burns.">Resolvin D2 restores neutrophil directionality and improves survival after burns.</a> FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. , (2013).</li><li>Buffone, V., Meakins, J. L., Christou, N. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+function+in+surgical+patients.+Relationship+to+adequate+bacterial+defenses.">Neutrophil function in surgical patients. Relationship to adequate bacterial defenses.</a> Arch Surg. 119, 39-43 (1984).</li><li>Malawista, S. E., de Boisfleury Chevance, A., van Damme, J., Serhan, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tonic+inhibition+of+chemotaxis+in+human+plasma.">Tonic inhibition of chemotaxis in human plasma.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105, 17949-17954 (2008).</li></ol>

I dette arbeidet har vi utviklet en microfluidic plattform for å måle nøytrofile chemotaxis fra en dråpe med blod (2 mL). De on-chip mekanisk filtrering av RBCs fra aktivt migrere nøytrofiler omgår behovet for tungvinte celleseparasjonsmetoder slik som tetthetsgradienter 10, positiv utvelgelse 11, eller negativ seleksjon 12, som er tilbøyelige til å innføre artifakter ved å aktivere neutrofiler. Den mekanisk filtrering av RBC skiller vår teknologi fra andre microfluidic chips ...

<html> Nøytrofile trafficking spiller en avgjørende rolle i å bestemme fremdriften og oppløsning av mange inflammatoriske tilstander, inkludert aterosklerose 1, bakteriell infeksjon eller sepsis to, og brannskader tre. For sitt store bidrag til helse-og sykdomstilstander, er nøytrofile granulocytter del av standardblodanalyse ofte sett i kliniske og forskningslaboratorier. Men, til tross for å være en av de mest utbredte tester, verdien av nøytrofile granulocytter i diagnostikk av infeksjon og sepsis har vært hyppig avhørt fire. For eksempel, en studie av nøytrofile i brannskadepasienter viste at antall nøytrofile og nøytrofile migrasjon funksjon ikke korrelerer; som betyr at de nøytrofile alene er ikke en nøyaktig indikator på immunstatus tre. Selv om mer vanskelig å måle, har nøytrofile funksjonell kompetanse blitt foreslått som mer verdifulle i et bredt spekter av betingelser. t &quot;&gt; Viktigere, mange av nøytrofile defekter er forbigående og er ikke utløst av permanente genetiske defekter, en utmerkelse som har vært i stor grad oversett i klinikken inntil nylig. I sammenheng med brannskader, kunne nøytrofile migrasjon overvåkes i løpet av en pasients behandlings som en indikator på inflammatorisk status eller infeksjoner 3. vanlige vandrings assays som brukes i laboratoriet (Boyden kammer, Dunn kammer, mikropipette assay) ikke kan oversettes til en klinisk setting, fordi de krever store mengder blod og tungvint tidkrevende nøytrofil isolasjonsteknikker (tabell 1). disse assays kan heller ikke brukes til å overvåke transiente forandringer i nøytrofil-kjemotakse i små laboratoriedyr, for eksempel mus, fordi volumet av blod som er nødvendig for nøytrofil isolasjon gjør det mulig for bare én prøve, og ofte til og med krever kontinuitets blod fra flere dyr, for en enkelt analyse. For eksempel, en studie som involverte multiple tilstander og behandlinger over flere tidspoeng potensielt kan kreve tusenvis av mus med dagens chemotaxis analyser. Dette begrenser den grunnleggende biologiske undersøkelser som kan gjøres for å forstå de komplekse dynamikken til immunfunksjon i sammenheng med skade, infeksjon eller brennes ofte er studert i murine modeller 5. For å møte behovet for en nøytrofil funksjonelt assay som er rask og robust, samtidig som den krever minimal blodvolum, har vi utviklet en mikrofluidteknisk enhet som måler nøytrofil kjemotakse direkte fra en liten dråpe av helblod. Det er kjent at mange faktorer i fullblod, inkludert serum 6 og blodplater 7, påvirke nøytrofil-funksjon. Det er derfor fordelaktig at hele blodmikrofluid assay minimerer prøvebehandling for å opprettholde in vivo mikromiljøet av nøytrofile ved måling av variasjoner i chemotaxis med et in vitro assay 8. Denne tilnærmingenreduserer tiden fra blodprøvetaking til nøytrofile migrasjon essay fra timer ved hjelp av tradisjonelle teknikker, til bare noen minutter (Tabell 1). Hele blod microfluidic plattformen produserer en stabil lineær gradient kjemoattraktant for lengden av forsøket, har ingen bevegelige deler og krever ikke en ekstern trykkilde (dvs. sprøytepumpe). Det sentrale trekk i utformingen av helblod microfluidic enhet er inkorporering av en rød blodcelle (RBC) filtrering kam som mekanisk filter RBCs fra å komme inn i kanalen migrering av enheten. De riktige svinger av denne filtrerings kam hindre behovet for størrelse utelukkelse filtrering, noe som trolig ville bli tilstoppet av RBC og dermed blokkere kjemoattraktant gradient fra å nå aktivt migrere nøytrofile i WB. Inkorporering av helblod microfluidic enhet i en 12 eller 24 brønns plate letter screening av flere mediatorer for human eller murin neutrofil kjemotakse SImultaneously.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:771px;" width="771">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:191px;">Company</td>
			<td style="width:179px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:191px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Device Fabrication</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">SU8&#160;</td>
			<td style="width:191px;">Microchem</td>
			<td style="width:179px;">Y131273</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Polydimethylsiloxane (PDMS)</td>
			<td style="width:191px;">Ellsworth Adhesives</td>
			<td style="width:179px;">Sylgard 184 1.1 lb. Kit</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Standard glass slides</td>
			<td style="width:191px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:179px;">125495</td>
			<td style="width:191px;">1 X 3 inches</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Glass-bottom plate</td>
			<td style="width:191px;">MatTek</td>
			<td style="width:179px;">P12G-1.5-14-F</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Harris Uni-Core, Tip Diameter 5.0mm</td>
			<td style="width:191px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:179px;">15081</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Harris Uni-Core, Tip Diameter 1.5 mm</td>
			<td style="width:191px;">Ted Pella, Inc.</td>
			<td style="width:179px;">15072</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Microfluidic Assay Preparation and Analysis</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Gel-loading pipet tip</td>
			<td style="width:191px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:179px;">02-707-139</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Syringe</td>
			<td style="width:191px;">Fisher Scientfic</td>
			<td style="width:179px;">309602</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Blunt tip needle, 30g &#189; in.</td>
			<td style="width:191px;">Brico Medical Supply</td>
			<td style="width:179px;">BN3005</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Vacutainer, Heparin</td>
			<td style="width:191px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">HBSS&#160;</td>
			<td style="width:191px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Human serum albumin</td>
			<td style="width:191px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:179px;">A5843-5G</td>
			<td style="width:191px;">0.2% final concentration in HBSS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Fibronectin</td>
			<td style="width:191px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:179px;">F0895-1MG</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">fMLP</td>
			<td style="width:191px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:179px;">F3506-10MG</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">SurgiLance safety lancet, 2.2mm depth, 22 gauge</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:179px;">SLN240</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Hoescht stain</td>
			<td style="width:191px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:179px;">H3570</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Positive Control&#160;</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">HetaSep</td>
			<td style="width:191px;">STEMCELL Technologies Inc.</td>
			<td style="width:179px;">7906</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">EasySep Human Neutrophil Enrichment Kit</td>
			<td style="width:191px;">STEMCELL Technologies Inc.</td>
			<td style="width:179px;">19257</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;"></td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Equipment</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Plasma Asher</td>
			<td style="width:191px;">March Instruments</td>
			<td style="width:179px;">P-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Lindberg/Blue M Oven</td>
			<td style="width:191px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:179px;">13-258-30C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Stainless Steel Precision Tweezers</td>
			<td style="width:191px;">Techni Tool</td>
			<td style="width:179px;">758TW458</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Bel-Art Scienceware Chemical-Resistant Vacuum Desiccator</td>
			<td style="width:191px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:179px;">08-594-15A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:211px;">Dataplate Digital Hot Plate</td>
			<td style="width:191px;">Alpha Multiservices</td>
			<td style="width:179px;">PMC 720&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Nikon TiE inverted microscope</td>
			<td style="width:191px;">Nikon - Micro Video Instruments Inc.</td>
			<td style="width:179px;">MEA53100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">CFI Plan Fluor DL 10x na 15.2wd Objective</td>
			<td style="width:191px;">Nikon - Micro Video Instruments Inc.</td>
			<td style="width:179px;">MRH20101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Lumen 200 with 2 Meter Light Guide for Nikon</td>
			<td style="width:191px;">Nikon - Micro Video Instruments Inc.</td>
			<td style="width:179px;">500-L200NI2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:211px;">DAPI/Hoechst/AMCA Narrow Band 32mm Exciters - 25mm Emitters</td>
			<td style="width:191px;">Chroma - Micro Video Instruments Inc.</td>
			<td style="width:179px;">31013v2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:211px;">Retiga R 2000 cooled CCD Camera 1600x1200 pixels</td>
			<td style="width:191px;">Qimaging - Micro Video Instruments Inc.</td>
			<td>RET-2000R-F-M-12-C</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microfluidic platform for measuring neutrophil chemotaxis from unprocessed whole blood

Nøytrofiler spiller en vesentlig rolle i beskyttelse mot infeksjoner og deres antall i blodet blir ofte målt i klinikken. Høyere nøytrofile granulocytter i blodet er vanligvis en indikator på pågående infeksjoner, mens lavt antall nøytrofile granulocytter er et faresignal for høyere risiko for infeksjoner. For å oppnå sine funksjoner, nøytrofile må også være i stand til å bevege seg effektivt fra blodet, hvor de tilbringer mesteparten av sitt liv, i vev, der infeksjoner oppstår. Følgelig kan enhver defekt i evnen til neutrofiler til å migrere øke risikoen for infeksjoner, selv når nøytrofile celler er til stede i passende antall i blodet. Men måling nøytrofile migrasjon evne i klinikken er en utfordrende oppgave, som er tidkrevende, krever stor mengde blod, og ekspertkunnskap. For å møte disse begrensningene, utviklet vi en robust microfluidic analyser for nøytrofile migrasjon, noe som krever en eneste dråpe med ubehandlet blod, circumventiler behovet for nøytrofil-separasjon, og er lett å kvantifisere på en enkel mikroskop. I dette assay, neutrofiler vandrer direkte fra bloddråpen, gjennom små kanaler, mot kilden chemoattractant. For å hindre at det granulære strømmen av røde blodlegemer gjennom de samme kanaler, gjennomførte vi mekaniske filtre med rett vinkel svinger som selektivt blokkerer forkant av røde blodceller. Vi bekreftet analysen ved å sammenligne nøytrofil migrering fra bloddråper som samles fra finger stikk-og veneblod. Vi har også sammenlignet disse fullblod (WB) kilder med nøytrofile migrasjon fra prøver av renset nøytrofile og funnet konsistent hastighet og retningen mellom de tre kildene. Dette microfluidic plattformen vil gjøre studiet av menneskelige nøytrofile migrasjon i klinikken og forskningen innstillingen for å hjelpe fremme vår forståelse av nøytrofile funksjoner i helse og sykdom.

Hele blod (WB) nøytrofile kjemotaxis analysen ble validert ved å måle akkumulering av nøytrofile mot en fMLP gradient (Movie S1). Resultatene bekrefter at RBC-fanges av filtrering kammen mens nøytrofiler (blå) er i stand til å migrere aktivt av helt blod (fig. 3A og film S1). Den stabile lineær kjemotiltrekkende gradient (grønn) som er dannet av helt blod microfluidic enhet ble bekreftet ved bruk av FITC-merket dekstran (figur 3A innfelt) og m?...

Watch this Scientific Journal Video about Microfluidic Platform for Measuring Neutrophil Chemotaxis from Unprocessed Whole Blood at JoVE.com

Microfluidic Platform for Measuring Neutrophil Chemotaxis from Unprocessed Whole Blood

Denne protokollen detaljer en assay utviklet for å måle human neutrofil kjemotakse av en dråpe av helblod med robust reproduserbarhet. Denne tilnærmingen omgår behovet for nøytrofile separasjon og krever bare noen få minutter av analysen forberedelsestid. Den microfluidic brikken gjør det mulig for den gjentatte mål på nøytrofil-kjemotakse over tid hos spedbarn og små pattedyr, hvor prøvevolum er begrenset.

Microfluidic plattform for måling Neutrofil Chemotaxis fra Ubehandlet Whole Blood

Neutrophils play an essential role in protection against infections and their numbers in the blood are frequently measured in the clinic. Higher ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High-throughput Protein Expression Generator Using a Microfluidic Platform

High-throughput Protein Expression Generator Ved hjelp av en Microfluidic Platform

Rapidly increasing fields, such as systems biology, require the development and implementation of new technologies, enabling high-throughput and ...

Cell Squeezing as a Robust, Microfluidic Intracellular Delivery Platform

Cell klemme som en robust, Microfluidic Intracellulær Levering Platform

Rapid mechanical deformation of cells has emerged as a promising, vector-free method for intracellular delivery of macromolecules and nanomaterials. This ...

The Multi-organ Chip - A Microfluidic Platform for Long-term Multi-tissue Coculture

Multi-orgel Chip - En mikrofluid plattform for langsiktig Multi-vev coculture

The ever growing amount of new substances released onto the market and the limited predictability of current in vitro test systems has led to a high need ...

Controlled Microfluidic Environment for Dynamic Investigation of Red Blood Cell Aggregation

Kontrollert mikrofluid Miljø for Dynamic Gransking av røde blodceller Aggregation

Blood, as a non-Newtonian biofluid, represents the focus of numerous studies in the hemorheology field. Blood constituents include red blood cells, white ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

En mikrofluid plattform for High-throughput encellede Isolering og kultur

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

Fully Automated Centrifugal Microfluidic Device for Ultrasensitive Protein Detection from Whole Blood

Helautomatisk Sentrifugal mikrofluid Enhet for Ultra Protein Detection fra Whole Blood

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is a promising method to detect small amount of proteins in biological samples. The devices providing a platform ...

Microfluidic Platform with Multiplexed Electronic Detection for Spatial Tracking of Particles

Microfluidic Plattform med multiplekset Electronic Detection for Spatial Sporing av partikler

Microfluidic processing of biological samples typically involves differential manipulations of suspended particles under various force fields in order to ...

Imaging the Root Hair Morphology of Arabidopsis Seedlings in a Two-layer Microfluidic Platform

Imaging the Root Hair Morphology of Arabidopsis Seedlings in a Two-layer Microfluidic Platform

Imaging roten håret morfologi av Arabidopsis frøplanter i en to-lags Microfluidic plattform

Root hairs increase root surface area for better water uptake and nutrient absorption by the plant. Because they are small in size and often obscured by ...

A Microfluidic Platform for Longitudinal Imaging in Caenorhabditis elegans

A Microfluidic Platform for Longitudinal Imaging in Caenorhabditis elegans

En Microfluidic plattform for langsgående Imaging i Caenorhabditis elegans

In the last decade, microfluidic techniques have been applied to study small animals, including the nematode Caenorhabditis elegans, and have proved ...

An Ultrahigh-throughput Microfluidic Platform for Single-cell Genome Sequencing

En av beryllium gjennomstrømming Microfluidic plattform for enkeltceller genomet sekvensering

Sequencing technologies have undergone a paradigm shift from bulk to single-cell resolution in response to an evolving understanding of the role of ...