Name: a cgmp-applicable expansion method for aggregates of human neural stem and progenitor cells derived from pluripotent stem cells or fetal brain tissue
Uploaded: 2014-06-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A cGMP-applicable Expansion Method for Aggregates of Human Neural Stem and Progenitor Cells Derived From Pluripotent Stem Cells or Fetal Brain Tissue at JoVE.

Wij danken dr. Soshana Svendsen voor kritisch en bewerken van dit rapport. Dit werk werd bijgedragen door de NIH / NINDS 1U24NS078370-01 en CIRM DR2a-05320.

1. Ethische verklaring en Veiligheid <ol><li> Deze procedure omvat het gebruik van celkweek producten van mens of dier. Alle afgeleide weefsels moet worden goedgekeurd voor gebruik door de bevoegde Institutional Review Board (s) en / of de Institutional Animal Care en gebruik Comite (s). </li><li> Alle bio-gevaarlijk afval moet worden afgevoerd volgens de veiligheidsvoorschriften door de desbetreffende instelling besloten. Kennen en volg alle toepasselijk: veiligheid en milieu richtlijnen tijdens de gehele procedure. ...

<img alt="Figuur 6" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51219/51219fig6highres.jpg" width="500" /> Figuur 6. Hakken Schematische. Uitbreidende spheroïde stam / voorlopercellen cellen in kweek met behulp van de mechanische hakken methode. Kritische stappen Een overzicht van de hakken expansie paradigma wordt getoond in figuur 6. HNPC bol grootte is een van de belangrijke criter...

Er is een lange geschiedenis van het uitbreiden van knaagdieren neurale stamcellen in een kweek als ofwel een monolaag 1-3 of geaggregeerde neurosferen 4-7. Bovendien zijn humane neurale stamcellen (hNPCs) geïsoleerd uit verschillende regio&#39;s van de ontwikkeling van centrale zenuwstelsel 8-17 uitgebreid in vitro. Deze cellen zijn bi-potente, kunnen differentiëren in zowel astrocyten en neuronen en een zeer nuttig hulpmiddel bestuderen neurale ontwikkeling en ziektemechanisme 18,19 20,21 hebben. hNPCs zijn ook getransplanteerd in vele verschillende diermodellen van het centrale zenuwstelsel ziekte met verschillende niveaus van integratie, overleving en functionele effecten 22-24. Traditioneel, knaagdier of foetale-afgeleide NPC blootgesteld aan groeifactoren - vaak epidermale groeifactor (EGF) en / of fibroblastgroeifactor-2 (FGF-2) 25-28 - en beide hechtende 29 en drie-Dimensionale bolvormige systemen zijn meestal gepasseerd met behulp van enzymatische dissociatie in een single-cell suspensie 30-34. De standaard methode om cellen voor onderzoek of klinisch gebruik uit te breiden is als een aanhanger monolaag dankzij eenvoudige manipulatie. Wij hebben echter aangetoond dat de passage monolaag en neurosphere hNPCs met enzymatische of chemische oplossingen resulteerde begin senescentie 35. Bovendien kan enzymatische dissociatie resulteren in verhoogde niveaus van differentiatie en karyotypische afwijkingen gebaseerd op gegevens toonden embryonale stamcellen 36-38. Hoewel de standaard methode van passage hNPCs huidige good manufacturing practice (cGMP) grade producten die 1 klinische studies (Stem Cells Inc, Neuralstem Inc) in fase zijn gegaan heeft geproduceerd, de methode is alleen toegestaan ​​met een paar rondes van cel versterking, het beperken van de bancaire potentieel. Het spreekt vanzelf dat grote onderzoeksexperimenten en toekomstige klinische proeven profiteren van de mogelijkheid ompropageren cellen in bulk en vertraagde veroudering grootschalige groei en celbankwezen mogelijk. Om aan deze behoefte, ontwikkelden we een nieuwe en geautomatiseerde manier van mechanisch passage intact neurosferen door &quot;hakken&quot; ze in kleine clusters naar cel-naar-cel contact onderhouden. Deze werkwijze aanzienlijk verhoogden hun levensduur 39 en suspensiekweek maakt een efficiënter incubatorruimte opzichte monolaagkweken, gezien een alternatieve 3D bioreactor kweekmethode 40. De hakken protocol voorziet in de productie van grote banken ve foetale monster groter dan doorgang 10, een onwaarschijnlijke prestatie met behulp van standaard werkwijzen passage. Hoewel deze methode voor passage hNPCs is onconventioneel, het groeit in populariteit en werd onlangs gepubliceerd met andere celtypen, zoals neurale stamcellen uit menselijke embryonale en geïnduceerde pluripotente stamcellen, waardoor grootschalige expansie voor diverse toepassingen, waaronder in vitro ziektemodel 41-46. Belangrijk is een cGMP-gehalte hNPC cellenbank reeds geproduceerd met hakken methode, waaruit blijkt dat de techniek kan worden toegepast op toekomstige klinische toepassingen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1230">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Beaker, 50 mL</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td>FB-100-50</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Bio-Safety Cabinet, class II</td>
			<td style="width:159px;">Baker</td>
			<td style="width:128px;">SG-603A</td>
			<td style="width:464px;">4 ft. or 6 ft. model.&#160; 6 ft. model recommended; multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Blades, Double-edge Prep</td>
			<td style="width:159px;">Personna</td>
			<td style="width:128px;">74-0002</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers.&#160; CAUTION: Sharp</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Cell Freezing Media</td>
			<td style="width:159px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:128px;">C6295-50ML</td>
			<td style="width:464px;">DMSO, serum-free</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Centrifuge, swing-bucket with 15 mL inserts</td>
			<td style="width:159px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:128px;">5810 R</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Conical Tubes, 15 mL</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:128px;">S50712</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Conical Tubes, 50 mL</td>
			<td style="width:159px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:128px;">352074</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Controlled Rate Freezer</td>
			<td style="width:159px;">Planer&#160;</td>
			<td style="width:128px;">Kryo 750</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Cryovials, 2 mL</td>
			<td style="width:159px;">Corning</td>
			<td style="width:128px;">430488</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Culture Flask, Vented, T12.5</td>
			<td style="width:159px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:128px;">353107</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Culture Flask, Vented, T25</td>
			<td style="width:159px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:128px;">353081</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Culture Flask, Vented, T175</td>
			<td style="width:159px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:128px;">353045</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Culture Flask, Vented, T75&#160;</td>
			<td style="width:159px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:128px;">353110</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Filter, 0.22 &#181;m, attached cup, 1 L</td>
			<td style="width:159px;">Millipore</td>
			<td style="width:128px;">SCGPU11RE</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Filter, 0.22 &#181;m, attached cup, 150 mL</td>
			<td style="width:159px;">Millipore</td>
			<td style="width:128px;">SCGVU01RE</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Filter, 0.22 &#181;m, attached cup, 500 mL</td>
			<td style="width:159px;">Millipore</td>
			<td style="width:128px;">SCGPU05RE</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Filter, 0.22 &#181;m, attached cup, 50 mL</td>
			<td style="width:159px;">Millipore</td>
			<td style="width:128px;">SCGP00525</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Filter Paper, 8.5 cm circles</td>
			<td style="width:159px;">Whatman/GE</td>
			<td style="width:128px;">1001-085</td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Forceps, Standard Pattern - Serrated/Curved/18 cm</td>
			<td style="width:159px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:128px;">11001-18</td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Freezing Chamber, Isopropyl Alcohol</td>
			<td style="width:159px;">Nalgene</td>
			<td style="width:128px;">5100-0001</td>
			<td style="width:464px;">&#34;Mr. Frosty&#34;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Incubator, 37&#176;C/5% CO2</td>
			<td style="width:159px;">Forma</td>
			<td style="width:128px;">370 series</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Hemacytometer, Phase</td>
			<td style="width:159px;">Hausser Scientific</td>
			<td style="width:128px;">1475</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">McIlwain Tissue Chopper</td>
			<td style="width:159px;">Lafayette Instruments</td>
			<td style="width:128px;">TC752-PD</td>
			<td style="width:464px;">&#160;Petri dish modification required.&#160;&#160; CAUTION:&#160; Moving, sharp blade.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Micropipettor, 1 - 10 &#956;L</td>
			<td style="width:159px;">Gilson</td>
			<td style="width:128px;">F144562</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Micropipettor, 100 - 1000 &#956;L (starter kit)</td>
			<td style="width:159px;">Gilson</td>
			<td style="width:128px;">F167700</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Micropipettor, 2 - 20 &#956;L (starter kit)</td>
			<td style="width:159px;">Gilson</td>
			<td style="width:128px;">F167700</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Micropipettor, 20 - 200 &#956;L (starter kit)</td>
			<td style="width:159px;">Gilson</td>
			<td style="width:128px;">F167700</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nutdriver, Autoclavable, 5/16&#34;</td>
			<td style="width:159px;">Steritool</td>
			<td style="width:128px;">10302</td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pasteur Pipets, cotton-plugged</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:128px;">13-678-8B</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Petri Dish, Glass, Autoclavable</td>
			<td style="width:159px;">Corning</td>
			<td style="width:128px;">3160-100</td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Pipet Aid</td>
			<td style="width:159px;">Drummond</td>
			<td style="width:128px;">4-000-101</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Shim disc</td>
			<td style="width:159px;">McMaster-Carr</td>
			<td style="width:128px;">VARIABLE</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterile barrier pipet tips, 10 &#956;L</td>
			<td style="width:159px;">AvantGuard</td>
			<td style="width:128px;">AV10R-H</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterile barrier pipet tips, 1000 &#956;L</td>
			<td style="width:159px;">AvantGuard</td>
			<td style="width:128px;">AV1000</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterile barrier pipet tips, 20 &#956;L</td>
			<td style="width:159px;">AvantGuard</td>
			<td style="width:128px;">AV20-H</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterile barrier pipet tips, 200 &#956;L</td>
			<td style="width:159px;">AvantGuard</td>
			<td style="width:128px;">AV200-H</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterile Disposable pipettes, all-plastic wrap, 10 mL</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:128px;">13-676-10J</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterile Disposable pipettes, all-plastic wrap, 2 mL</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:128px;">13-675-3C</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterile Disposable pipettes, all-plastic wrap, 25 mL</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:128px;">13-676-10K</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterile Disposable pipettes, all-plastic wrap, 5 mL</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:128px;">13-676-10H</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Sterilization Pouches, 19 x 33 cm</td>
			<td style="width:159px;">Crosstex</td>
			<td style="width:128px;">SCL</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:479px;">Strainer, 40 &#181;m</td>
			<td style="width:159px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:128px;">352340</td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Tissue Culture Dishes, 60 mm</td>
			<td style="width:159px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:128px;">351007</td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Tube Racks, Interlocking Four-Way</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:128px;">03-448-17</td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Water Bath</td>
			<td style="width:159px;">Fisherbrand</td>
			<td>S52602Q</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;"></td>
			<td style="width:159px;"></td>
			<td></td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Neural Progenitor Cell-Specific Processing Reagents</td>
			<td style="width:159px;"></td>
			<td style="width:128px;"></td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Neural Stem Cell Expansion Medium (Stemline)</td>
			<td style="width:159px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:128px;">S3194-500ML</td>
			<td style="width:464px;">Important to use the Stemline brand</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Recombinant Human Epidermal Growth Factor (EGF)</td>
			<td style="width:159px;">Millipore</td>
			<td style="width:128px;">GF316</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Recombinant Human Leukemia Inhibitory Factor (LIF)</td>
			<td style="width:159px;">Millipore</td>
			<td style="width:128px;">LIF1010</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">Trypan Blue (0.4%)</td>
			<td style="width:159px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:128px;">T8154-100ML</td>
			<td style="width:464px;">multiple manufacturers/suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:479px;">TrypLE Select (1X)</td>
			<td style="width:159px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:128px;">12563-011</td>
			<td style="width:464px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a cgmp-applicable expansion method for aggregates of human neural stem and progenitor cells derived from pluripotent stem cells or fetal brain tissue

Een cel expansie techniek om grote aantallen cellen vergaren van een enkel exemplaar voor onderzoek experimenten en klinische studies zouden veel baat hebben de stamcel gemeenschap. Veel van de huidige methoden expansie zijn bewerkelijk en kostbaar, en die waarbij volledige dissociatie kan leiden tot verschillende stam-en voorlopercellen celtypen tot differentiatie of vroegtijdige veroudering ondergaan. Om deze problemen te overwinnen, hebben we een geautomatiseerde mechanische passage aangeduid als &quot;hakken&quot; dat eenvoudige en goedkope methode ontwikkeld. Deze techniek vermijdt chemische of enzymatische dissociatie in enkele cellen en in plaats daarvan maakt de grootschalige uitbreiding van opgeschort, bolvormige culturen die constant cel / cel contact te onderhouden. De snij methode voornamelijk gebruikt voor foetale hersenen afgeleide neurale progenitorcellen of neurosferen en onlangs verschenen voor gebruik met neurale stamcellen uit embryonale en geïnduceerde pluripotente stamcellen. De procedure INVOLVes zaaien neurospheres op een weefselkweek petrischaaltje en vervolgens slaagt voor een scherpe, steriel mes door de cellen effectief automatiseren van het moeizame proces van het handmatig mechanisch dissociëren elke bol. Schorsing van cellen in cultuur zorgt voor een gunstig oppervlakte-volume verhouding; en meer dan 500.000 cellen kunnen worden gegroeid in een enkele neurosfeer van minder dan 0,5 mm in diameter. In een T175 kolf, kunnen meer dan 50 miljoen cellen groeien in suspensie kweken vergeleken met slechts 15 miljoen adherente culturen. Belangrijk is dat de hakken procedure werd gebruikt onder de huidige good manufacturing practice (cGMP), waardoor massaproductie hoeveelheid van klinische kwaliteit cel producten.

<img alt="Figuur 5" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51219/51219fig5highres.jpg" width="500" /> Figuur 5. Representatieve gegevens. A) Verwachte cel aantallen hNPCs op p19 bevroren, vervolgens ontdooid en uitgebreid als een aanhanger monolaag met behulp van enzymatische dissociatie vergelijking met neurosferen gepasseerd via de hakken methode. Dag 0 vertegenwoordigt wanneer de cellen werden ontdooid bij p20. B) Vertegenwoordiger be...

Watch this Scientific Journal Video about A cGMP-applicable Expansion Method for Aggregates of Human Neural Stem and Progenitor Cells Derived From Pluripotent Stem Cells or Fetal Brain Tissue at JoVE.

A cGMP-applicable Expansion Method for Aggregates of Human Neural Stem and Progenitor Cells Derived From Pluripotent Stem Cells or Fetal Brain Tissue

Dit protocol beschrijft een nieuwe mechanische snij methode die de sferische expansie van neurale stamcellen en voorlopercellen aggregaten zonder dissociatie een enkele celsuspensie maakt. Handhaving van cel / cel contact maakt een snelle en stabiele groei voor meer dan 40 passages.

Een cGMP-toepassing Uitbreiding Methode voor Aggregaten van menselijke neurale stamcellen en stamcellen afgeleid uit pluripotente stamcellen of foetaal hersenweefsel

A cell expansion technique to amass large numbers of cells from a single specimen for research experiments and clinical trials would greatly benefit the ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neural-Colony Forming Cell Assay: An Assay To Discriminate Bona Fide Neural Stem Cells from Neural Progenitor Cells

Neurale-Colony Forming Cell-test: Een test om Bona Fide neurale stamcellen van Neural Progenitor Cellen Discrimineer

The neurosphere assay (NSA) is one of the most frequently used methods to isolate, expand and also calculate the frequency of neural stem cells (NSCs). ...

Generation of Neural Stem Cells from Discarded Human Fetal Cortical Tissue

Generatie van neurale stamcellen uit afgedankte menselijke foetale Cortical weefsel

Neural stem cells (NSCs) reside along the ventricular zone neuroepithelium during the development of the cortical plate. These early progenitors ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell imaging van zintuig voorloper cellen in Intact Drosophila Poppen

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Uitbreiding van embryonale en adulte neurale stamcellen door<em&gt; In Utero</em&gt; Electroporation of Viral stereotactische injectie

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

Isolatie en Cultuur van neurale lijst cellen van embryonale Murine Neural Tube

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

Progenitor-derived Oligodendrocyte Culture System from Human Fetal Brain

Progenitor afgeleide oligodendrocyt Cultuur System van menselijke foetale hersenen

Differentiation of human neural progenitors into neuronal and glial cell types offers a model to study and compare molecular regulation of neural cell ...

Feeder-free Derivation of Neural Crest Progenitor Cells from Human Pluripotent Stem Cells

Voedingsvrije Afleiding van neurale stamcellen uit humane pluripotente stamcellen

Human pluripotent stem cells (hPSCs) have great potential for studying human embryonic development, for modeling human diseases in the dish and as a ...

Directed Dopaminergic Neuron Differentiation from Human Pluripotent Stem Cells

Geregisseerd Dopaminerge Neuron Differentiatie van menselijke pluripotente stamcellen

Dopaminergic (DA) neurons in the substantia nigra pars compacta  (also known as A9 DA neurons) are the specific cell type that is lost in ...

Identifying Cell Surface Markers of Primary Neural Stem and Progenitor Cells by Metabolic Labeling of Sialoglycan

Identificeren van celoppervlak markeringen van primaire neurale stam en voorlopercellen door metabole labeling van Sialoglycan

Neural stem and progenitor cells (NSPCs) are the cellular basis for the complex structures and functions of the brain. They are located in specialized ...

Derivation, Expansion, Cryopreservation and Characterization of Brain Microvascular Endothelial Cells from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Afleiding, expansie, cryopreservatie en karakterisering van hersenmicrovasculaire endotheelcellen uit door de mens geïnduceerde pluripotente stamcellen

Brain microvascular endothelial cells (BMECs) can be differentiated from human induced pluripotent stem cells (iPSCs) to develop ex vivo cellular models ...