Name: an improved method for accurate and rapid measurement of flight performance in drosophila
Uploaded: 2014-02-13T13:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door de National Institutes of Health verleent F32 NS078958 (DTB) en R01 AG033620 (BG).

1. Monteer Flight Tester <ol><li> Veilige vlucht cilinder Ring Stand 1 behulp kettingklemmen. (Laat ongeveer 3 cm onder de cilinder voor wegen gerecht.) (Opmerking: De vlucht cilinder we gebruiken is 90 cm lang met een diameter van 13,5 cm.) </li><li> Plaats Weeg met een dun laagje minerale olie onder de cilinder vlucht. </li><li> Secure trechter Ring Stand 2 met behulp van een ring klem en klauw klem. De hoogte van de trechter, zodat de onderkant van de trechter gelijk ligt met de bovenkant van de cilinder vlu...

<ol>
	<li>Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+dissection+of+behavior.">Genetic dissection of behavior.</a> Sci. Am. 229, 24-37 (1973).</li><li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assaying+locomotor,+learning,+and+memory+deficits+in+Drosophila+models+of+neurodegeneration.">Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila models of neurodegeneration.</a> J. Vis. Exp. , e2504 (2011).</li><li>de Vries, S. E., Clandinin, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optogenetic+Stimulation+of+Escape+Behavior+in+Drosophila+melanogaster.">Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster.</a> J. Vis. Exp. , e50192 (2013).</li><li>Mundiyanapurath, S., Certel, S., Kravitz, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+aggression+in+Drosophila+(fruit+flies).">Studying aggression in Drosophila (fruit flies).</a> J. Vis. Exp. , e155 (2007).</li><li>Nichols, C. D., Becnel, J., Pandey, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+to+assay+Drosophila+behavior.">Methods to assay Drosophila behavior.</a> J. Vis. Exp. , e3795 (2012).</li><li>Shiraiwa, T., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proboscis+extension+response+(PER)+assay+in+Drosophila.">Proboscis extension response (PER) assay in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. , e193 (2007).</li><li>Lloyd, T. E., Taylor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flightless+flies:+Drosophila+models+of+neuromuscular+disease.">Flightless flies: Drosophila models of neuromuscular disease.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 1184, e1-e20 (2010).</li><li>Atkinson, N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+separation+of+two+behavioral+phenotypes+by+a+mutation+affecting+the+promoters+of+a+Ca-activated+K+channel.">Molecular separation of two behavioral phenotypes by a mutation affecting the promoters of a Ca-activated K channel.</a> J. Neurosci. 20, 2988-2993 (2000).</li><li>Atkinson, N. S., Robertson, G. A., Ganetzky, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+component+of+calcium-activated+potassium+channels+encoded+by+the+Drosophila+slo+locus.">A component of calcium-activated potassium channels encoded by the Drosophila slo locus.</a> Science. 253, 551-555 (1991).</li><li>Elkins, T., Ganetzky, B., Wu, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Drosophila+mutation+that+eliminates+a+calcium-dependent+potassium+current.">A Drosophila mutation that eliminates a calcium-dependent potassium current.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 83, 8415-8419 (1986).</li><li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+iterative+negative+geotaxis+(RING):+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila.">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Exp. Gerontol. 40, 386-395 (2005).</li><li>Fry, S. N., Rohrseitz, N., Straw, A. D., Dickinson, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+control+of+flight+speed+in+Drosophila+melanogaster.">Visual control of flight speed in Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 212, 1120-1130 (2009).</li><li>Mronz, M., Lehmann, F. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+free-flight+response+of+Drosophila+to+motion+of+the+visual+environment.">The free-flight response of Drosophila to motion of the visual environment.</a> J. Exp. Biol. 211, 2026-2045 (2008).</li></ol>

Met behulp van de hier beschreven methoden, zijn we in staat om vliegprestaties van een groot aantal van Drosophila mutanten snelle beoordeling, waardoor een grotere efficiëntie dan voorheen mogelijk was. Voor onze experimenten hebben we routinematig scheiden mannen en vrouwen en hen op te voeden bij lage dichtheid (minder dan 20 vliegen / flacon) om agressie die vleugels kunnen beschadigen beperken. Een andere belangrijke overweging is om goed te controleren voor verschillen in vliegprestatie gevolg van versc...

Drosophila is lange tijd gebruikt om de genetische basis van het gedrag 1 te bestuderen, en onderzoekers hebben een aantal manieren om verschillende gedragingen 2-6 analyseren ontwikkeld. Vliegen zijn bijzonder nuttig bij het ​​verstrekken van bruikbare modellen van neuromusculaire aandoeningen 7 geweest. Een veel voorkomende test gebruikt om motorische gedrag te bestuderen is vliegprestaties. De oorspronkelijke vlucht tester is nuttig voor het identificeren vlucht defecte mutanten en voor de kwantitatieve beoordeling van de vlucht het vermogen 1, maar het heeft een aantal tekortkomingen die zijn aanvraag voor high throughput schermen beperken: het gebruik van geoliede cilinders is rommelig en omslachtig, bepaalde functies zoals de lengte van de cilinder en invoering van ongedierte in de buis met variabele kracht kunnen kwantitatieve nauwkeurigheid, en het is moeilijk om levende vliegen herstellen van de tester. Om deze beperkingen te overwinnen, hebben we de vlucht tester gemodificeerd om een ​​aantal verbeteringen. We voegden een &quot;drop tuworden &quot;om vliegen de variabiliteit tussen experimenten en gebruikers elimineren introduceren. We maken gebruik van verwijderbare acryl platen bekleed met een kleefstof die zorgt voor eenvoudiger opruimen en herstel van individuele vliegen. We hebben de lengte van de vlucht buis verhoogd tot kwantitatieve nauwkeurigheid en betrouwbaarheid te verbeteren. Tenslotte maken we gebruik van een digitale camera en imaging software om de landing hoogten van vliegen te berekenen. Wij geloven dat deze verbeteringen zullen nuttig zijn in elk laboratorium geïnteresseerd in het uitvoeren van grootschalige genetische screens voor gebreken in vliegprestaties zijn.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="704">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">Putty knife</td>
			<td style="width:171px;">Home Depot</td>
			<td style="width:132px;">630147</td>
			<td style="width:185px;"><a href="http://www.homedepot.com">www.homedepot.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">Pine back band moulding ( x2 )</td>
			<td style="width:171px;">Home Depot</td>
			<td style="width:132px;">156469</td>
			<td><a href="http://www.homedepot.com">www.homedepot.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">Furring Strip Board</td>
			<td style="width:171px;">Home Depot</td>
			<td style="width:132px;">164704</td>
			<td><a href="http://www.homedepot.com">www.homedepot.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">Tangle Trap Insect Trap Coating</td>
			<td style="width:171px;">BioControl Network</td>
			<td style="width:132px;">268941</td>
			<td><a href="http://www.biconet.com">www.biconet.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">Laptop Computer </td>
			<td style="width:171px;">Apple</td>
			<td style="width:132px;">_</td>
			<td><a href="http://www.apple.com/mac/">www.apple.com/mac/</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">mineral oil</td>
			<td style="width:171px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:132px;">BP26291</td>
			<td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">white poster board</td>
			<td style="width:171px;">Staples</td>
			<td style="width:132px;">247403</td>
			<td><a href="http://www.staples.com">www.staples.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">polystyrene weighing dish</td>
			<td style="width:171px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:132px;">S67091A</td>
			<td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">ImageJ Software</td>
			<td style="width:171px;">National Institutes of Health</td>
			<td style="width:132px;">_</td>
			<td>http://rsb.info.nih.gov/ij/</td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">digital camera</td>
			<td style="width:171px;">Sony</td>
			<td style="width:132px;">DSC-TX7</td>
			<td style="width:185px;"><a href="http://www.store.sony.com">www.store.sony.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">fine forceps</td>
			<td style="width:171px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:132px;">_</td>
			<td><a href="http://www.finescience.com">www.finescience.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">polycarbonate cylinder (drop tube)</td>
			<td style="width:171px;">mcMaster-Carr</td>
			<td style="width:132px;">8585K62</td>
			<td><a href="http://www.mcmaster.com">www.mcmaster.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">flight cylinder (acrylic)</td>
			<td style="width:171px;">mcMaster-Carr</td>
			<td style="width:132px;">8486K943</td>
			<td><a href="http://www.mcmaster.com">www.mcmaster.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">polycarbonate sheets</td>
			<td style="width:171px;">mcMaster-Carr</td>
			<td style="width:132px;">85585K25</td>
			<td><a href="http://www.mcmaster.com">www.mcmaster.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">ring stand (x2)</td>
			<td style="width:171px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:132px;">S47808</td>
			<td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">ring support</td>
			<td style="width:171px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:132px;">S47791</td>
			<td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">Three-prong extension clamps (x2)</td>
			<td style="width:171px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:132px;">05-769-7Q</td>
			<td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">funnel</td>
			<td style="width:171px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:132px;">10-500-3</td>
			<td><a href="http://www.fishersci.com">www.fishersci.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">chain clamps (x2)</td>
			<td style="width:171px;">VWR</td>
			<td style="width:132px;">21573-275</td>
			<td><a href="http://www.vwr.com">www.vwr.com</a></td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:216px;">glass vials</td>
			<td style="width:171px;">VWR</td>
			<td style="width:132px;">66020-198</td>
			<td><a href="http://www.vwr.com/">www.vwr.com</a></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an improved method for accurate and rapid measurement of flight performance in drosophila

Drosophila heeft bewezen een bruikbaar model systeem voor de analyse van het gedrag, met inbegrip van de vlucht zijn. De eerste vlucht tester betrokken dropping vliegt in een geoliede maatcilinder; landing hoogte aanwezig is een maat voor de vliegprestaties door het beoordelen hoe ver vliegen zal vallen voordat het produceren van voldoende stuwkracht om contact met de wand van de cilinder te maken. Hier beschrijven we een bijgewerkte versie van de vlucht tester met vier belangrijke verbeteringen. Eerst voegden we een &quot;drop tube&quot; zodat alle vliegen alstublieft de cilinder vlucht op een vergelijkbare snelheid tussen processen, waardoor variabiliteit tussen gebruikers. Ten tweede, we vervangen de olie coating met uitneembare kunststof platen bekleed in Tangle-Trap, een lijm ontwikkeld om levende insecten vangen. Ten derde gebruiken we een langere cilinder om meer accurate discriminatie vlucht vermogen mogelijk te maken. Vierde gebruiken we een digitale camera en imaging software om het scoren van vliegprestaties automatiseren. Deze verbeteringen zorgen voor de rapid, kwantitatieve beoordeling van vlieggedrag, handig voor grote datasets en grootschalige genetische screens.

<html> Figuur 1A toont een schema van de bijgewerkte vlucht tester montage. Figuur 1B illustreert het spoor ontwerp laat de camera een panoramisch beeld te nemen zonder het blokkeren van het gezichtsveld. Representatieve resultaten worden getoond in Figuur 2, waar de prestaties van slowpoke mutantvliegen, die een bekende vlucht defect 8-10 hebben vlucht, vergeleken met wildtype Canton-S vliegt. Controle vliegt vaste land nabij de bovenkant va...

Watch this Scientific Journal Video about An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila at JoVE.com

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

Hier beschrijven we een methode voor een snelle en nauwkeurige meting van vliegprestaties in Drosophila, waardoor high-throughput screening.

Een verbeterde methode voor nauwkeurige en snelle meting van Vliegprestaties in<em&gt; Drosophila</em

Drosophila has proven to be a useful model system for analysis of behavior, including flight. The initial flight tester involved dropping flies into an ...

Research

JoVE Journal

Biology

An Improved Method for Accurate and Rapid Measurement of Flight Performance in Drosophila

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyrosequencing: een eenvoudige methode voor Nauwkeurige Genotyping

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

A Magnetic Tether System to Investigate Visual and Olfactory Mediated Flight Control in Drosophila

Een magnetisch Tether System om visuele en olfactorische Mediated Flight Control in Drosophila Onderzoek

It has been clear for many years that insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals track odors carried in the wind. ...

Visually Mediated Odor Tracking During Flight in Drosophila

Visueel Mediated Geur Tracking tijdens de vlucht in Drosophila

Flying insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals additionally track odors carried in the wind. As such, visual ...

An Improved Method of RNA Isolation from Loblolly Pine (P. taeda L.) and Other Conifer Species

An Improved Method of RNA Isolation from Loblolly Pine P. taeda L. and Other Conifer Species

Een verbeterde methode van RNA isolatie uit Loblolly Pine ( P. taeda L.) en andere naaldbomen

Tissues isolated from conifer species, particularly those belonging to the Pinaceae family, such as loblolly pine (Pinus taeda L.), contain high ...

Endurance Training Protocol and Longitudinal Performance Assays for Drosophila melanogaster

Endurance Training Protocol and Longitudinal Performance Assays for Drosophila melanogaster

Conditietraining protocol en Longitudinale Prestaties Testen voor Drosophila melanogaster

One of the most pressing problems facing modern medical researchers is the surging levels of obesity, with the consequent increase in associated disorders ...

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Meting van de levensduur in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

An Innovative Method for Exosome Quantification and Size Measurement

Een innovatieve methode voor exosome kwantificering en Size Measurement

Although the biological importance of exosomes has recently gained an increasing amount of scientific and clinical attention, much is still unknown about ...

Measurement of Metabolic Rate in Drosophila using Respirometry

Measurement of Metabolic Rate in Drosophila using Respirometry

Meting van Metabolic Rate in<em&gt; Drosophila</em&gt; Gebruik respirometrietest

Metabolic disorders are a frequent problem affecting human health. Therefore, understanding the mechanisms that regulate metabolism is a crucial ...

Filtration Isolation of Nucleic Acids:  A Simple and Rapid DNA Extraction Method

Filtratie Isolatie van nucleïnezuren: Een eenvoudige en snelle DNA Extraction Method

FINA, filtration isolation of nucleic acids, is a novel extraction method which utilizes vertical filtration via a separation membrane and absorbent pad ...

Hybrid-Cut: An Improved Sectioning Method for Recalcitrant Plant Tissue Samples

Hybride-Cut: een verbeterde Sectioning Methode voor Recalcitrante plantenweefsel Samples

Maintaining plant section integrity is essential for studying detailed anatomical structures at the cellular, tissue, or even organ level. However, some ...