Name: imaging dendritic spines of rat primary hippocampal neurons using structured illumination microscopy
Uploaded: 2014-05-04T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Imaging Dendritic Spines of Rat Primary Hippocampal Neurons using Structured Illumination Microscopy at JoVE.com

Dit werk werd gefinancierd door een VIDI subsidie ​​aantal H64.09.016 uit Nederland Organisatie voor Wetenschappelijk Onderzoek (NWO) naar CPF. CPF is dankbaar voor Dr Silvina A. Fratantoni voor haar kritische commentaar en correcties op de definitieve manuscript. GMRDL / emmm worden ondersteund door de Nederlandse Technologiestichting STW (project 12151 en 11350), dat deel uitmaakt van het NWO, en dat wordt mede gefinancierd door het Ministerie van Economische Zaken. Wij danken de Catherine Kitts en Peter Drent van Nikon Instruments Europe BV voor hulp en ondersteuning. HX werd ondersteund door de Koninklijke Nederlandse Akademie van Wetenschappen (subsidie ​​11CDP10) en WT werd ondersteund door subsidie ​​van Nederland Organisatie voor Wetenschappelijk onderzoek (subsidie ​​820.02.006).

Alle experimentele procedures waarbij dieren werden geoptimaliseerd om dierenleed te verminderen en werden goedgekeurd door de Commissie voor Dierproeven, Universiteit van Amsterdam, december protocol # DED204 en DED250. 1. Coverslip Voorbereiding <ol><li> Bezuinigen de dekglaasjes tot een grootte van 15 mm x 15 mm met een carbide of diamant schrijver, zodat ze passen in de putjes van een 12-well plaat. </li><li> Tijdens het werken in een zuurkast, beginnen dekglaasje coating door het voll...

<ol>
	<li>Gustafsson, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surpassing+the+lateral+resolution+limit+by+a+factor+of+two+using+structured+illumination+microscopy.">Surpassing the lateral resolution limit by a factor of two using structured illumination microscopy.</a> J Microsc. 198, 82-87 (2000).</li><li>Yoshihara, Y., De Roo, M., Muller, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+spine+formation+and+stabilization.">Dendritic spine formation and stabilization.</a> Curr Opin Neurobiol. 19, 146-153 (2009).</li><li>Dailey, M. E., Smith, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dynamics+of+dendritic+structure+in+developing+hippocampal+slices.">The dynamics of dendritic structure in developing hippocampal slices.</a> J Neurosci. 16, 2983-2994 (1996).</li><li>Alvarez, V. A., Sabatini, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomical+and+physiological+plasticity+of+dendritic+spines.">Anatomical and physiological plasticity of dendritic spines.</a> Annu Rev Neurosci. 30, 79-97 (2007).</li><li>Jaworski, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+microtubules+regulate+dendritic+spine+morphology+and+synaptic+plasticity.">Dynamic microtubules regulate dendritic spine morphology and synaptic plasticity.</a> Neuron. 61, 85-100 (2009).</li><li>Abbe, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beitr&#228;ge+zur+Theorie+des+Mikroskops+und+der+mikroskopischen+Wahrnehmung.">Beitr&#228;ge zur Theorie des Mikroskops und der mikroskopischen Wahrnehmung.</a> Archiv f&#252;r mikroskopische Anatomie. 9, 413-418 .</li><li>Gustafsson, M. G., Agard, D. A., Sedat, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=I5M:+3D+widefield+light+microscopy+with+better+than+100+nm+axial+resolution.">I5M: 3D widefield light microscopy with better than 100 nm axial resolution.</a> J Microsc. 195, 10-16 (1999).</li><li>Heintzmann, R., Cremer, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laterally+modulated+excitation+microscopy:+improvement+of+resolution+by+using+a+diffraction+grating.">Laterally modulated excitation microscopy: improvement of resolution by using a diffraction grating.</a> Proc. SPIE 3568 Optical Biopsies and Microscopic Techniques III. , 185-196 (1999).</li><li>Karadagli&#402;&#225;, D., Wilson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image+formation+in+structured+illumination+wide-field+fluorescence+microscopy.">Image formation in structured illumination wide-field fluorescence microscopy.</a> Micron. 39, 808-818 (2008).</li><li>Schermelleh, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subdiffraction+multicolor+imaging+of+the+nuclear+periphery+with+3D+structured+illumination+microscopy.">Subdiffraction multicolor imaging of the nuclear periphery with 3D structured illumination microscopy.</a> Science. 320, 1332-1336 (2008).</li><li>Gustafsson, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonlinear+structured-illumination+microscopy:+wide-field+fluorescence+imaging+with+theoretically+unlimited+resolution.">Nonlinear structured-illumination microscopy: wide-field fluorescence imaging with theoretically unlimited resolution.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102, 13081-13086 (2005).</li><li>Nagerl, U. V., Willig, K. I., Hein, B., Hell, S. W., Bonhoeffer, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-cell+imaging+of+dendritic+spines+by+STED+microscopy.">Live-cell imaging of dendritic spines by STED microscopy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 105, 18982-18987 (2008).</li><li>Kner, P., Chhun, B. B., Griffis, E. R., Winoto, L., Gustafsson, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Super-resolution+video+microscopy+of+live+cells+by+structured+illumination.">Super-resolution video microscopy of live cells by structured illumination.</a> Nat Methods. 6, 339-342 (2009).</li><li>James, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aligned+microcontact+printing+of+micrometer-scale+poly-L-lysine+structures+for+controlled+growth+of+cultured+neurons+on+planar+microelectrode+arrays.">Aligned microcontact printing of micrometer-scale poly-L-lysine structures for controlled growth of cultured neurons on planar microelectrode arrays.</a> IEEE Trans Biomed Eng. 47, 17-21 (2000).</li><li>Dumitriu, D., Rodriguez, A., Morrison, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput,+detailed,+cell-specific+neuroanatomy+of+dendritic+spines+using+microinjection+and+confocal+microscopy.">High-throughput, detailed, cell-specific neuroanatomy of dendritic spines using microinjection and confocal microscopy.</a> Nat Protoc. 6, 1391-1411 (2011).</li><li>Fitzsimons, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knockdown+of+the+glucocorticoid+receptor+alters+functional+integration+of+newborn+neurons+in+the+adult+hippocampus+and+impairs+fear-motivated+behavior.">Knockdown of the glucocorticoid receptor alters functional integration of newborn neurons in the adult hippocampus and impairs fear-motivated behavior.</a> Mol Psychiatry. , (2012).</li><li>van Hooijdonk, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentivirus-mediated+transgene+delivery+to+the+hippocampus+reveals+sub-field+specific+differences+in+expression.">Lentivirus-mediated transgene delivery to the hippocampus reveals sub-field specific differences in expression.</a> BMC Neurosci. , (2009).</li><li>Kaech, S., Banker, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing+hippocampal+neurons.">Culturing hippocampal neurons.</a> Nat Protoc. 1, 2406-2415 (2006).</li><li>Brewer, G. J., Torricelli, J. R., Evege, E. K., Price, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+survival+of+hippocampal+neurons+in+B27-supplemented+Neurobasal,+a+new+serum-free+medium+combination.">Optimized survival of hippocampal neurons in B27-supplemented Neurobasal, a new serum-free medium combination.</a> J Neurosci Res. 35, 567-576 (1993).</li><li>Izeddin, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Super-resolution+dynamic+imaging+of+dendritic+spines+using+a+low-affinity+photoconvertible+actin+probe.">Super-resolution dynamic imaging of dendritic spines using a low-affinity photoconvertible actin probe.</a> PLoS ONE. 6, (2011).</li></ol>

In dit artikel een werkprotocol op de foto dendritische stekels van de rat primaire hippocampale neuronen gekweekt in vitro gebruik van SIM wordt beschreven. De primaire hippocampale neuron cultuur methode is een aanpassing van de oorspronkelijke methode beschreven door Kaech en Banker 18. De belangrijkste verschillen zijn het gebruik van Neurobasal/B27 kweekmedium, waardoor de eis van astrogliale feeder culturen elimineert, en de toevoeging van de mitotische remmer FUDR op dag 3 welke neuronale over...

Een dendritisch wervelkolom is een klein uitsteeksel van het neuron membraan. Dit karakteristieke structuur is gespecialiseerd in typisch ontvangen input van een enkele synaps en vertegenwoordigt het fysieke contact tussen twee neuronen. Meest functioneel mature dendritische uitsteeksels bestaan ​​uit een bolvormige tip, genoemd hoofd, en een dunne nek die het hoofd verbindt met de dendritische as. Echter, stekels zijn niet statisch en actief bewegen en voortdurend veranderen hun morfologie, zelfs in de volwassen hersenen 2. Binnen een periode van 2 weken tijd, rat primaire hippocampus neuron culturen afkomstig van late embryonale of vroege postnatale tijd ontwikkelen complex dendritische priëlen met tal membraan uitsteeksels die evolueren van vroege filipodia tot wervelkolom-achtige structuren 3. Op basis van deze dynamische gedrag en andere kenmerken, dendritische gedacht dat een anatomisch substraat voor geheugenopslag en synaptische transmissie 4,5 verschaffen. Gezien the cruciale rol die dendritische spine grootte en vorm hebben in synaptische functie, is het belangrijk om de afmetingen te meten. Stekels variëren van ongeveer 200 tot 2000 nanometer lang en kan gemakkelijk worden geïdentificeerd door confocale laser scanning fluorescentie microscopie. Echter, andere dan lengte wervelkolom afmetingen zijn meestal onder de conventionele optische systemen &#39;resolutie, theoretisch vastgesteld door diffractie rond 200 nanometer 6. Deze oplossing van bevoegdheden ontoereikend zijn voor de beeldvorming van fijnere details, zoals de breedte van de wervelkolom nek en hoofd. Veel werk is gewijd aan dit probleem op te lossen en veel relatief nieuwe super-resolutie microscopie technieken hebben aanzienlijke vooruitgang verstrekt. Met name is het mogelijk de resolutie dan de klassieke limiet bereiken zonder waarbij een eventueel emissielicht met zijdelings gestructureerde verlichting microscopie (SIM) in een breed gebied, niet-confocale microscoop 7-10. Met deze techniek in combinatie met niet-linear microscopische technieken, is het theoretisch mogelijk om de laterale resolutie van de optische microscoop te verbeteren door een algemene factor 11. In de meeste experimentele omstandigheden SIM kan de resolutiegrens met een factor twee 1 overtreffen. Andere super-resolutie optische microscopie technieken zoals stimulated emission depletion (STED) microscopie 12 en foto-activering lokalisatie microscopie (PALM) 12 zijn toegepast op beeldvorming van dendritische stekels. Lokalisatie-gebaseerde werkwijzen zoals PALM vereisen zeer grote aantallen onbewerkte afbeeldingen super-resolutie te bereiken en daarom snelheid beperkt. Anderzijds kan STED hoge imaging snelheid te bereiken, maar bij relatief lage fotontellingen en kleine gezichtsveld, wat niet het geval voor SIM 13 kan zijn. In dit artikel is het doel om een werkprotocol te verstrekken aan het vertakte stekels van de rat primaire hippocampale neuronen in vitro gekweekte </em&gt; het gebruik van SIM. Het protocol bestaat uit twee onderscheiden fasen: een eerste een bestaande vestiging, ontwikkeling, transfectie en immunohistochemie van rat primaire hippocampus neuron culturen en een late fase gewijd aan de beeldvorming te proeven.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Big scissor</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt spatula</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope with illumination</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37 &#176;C water bath</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar flow cell culture hood</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-temperature dry-oven</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bunsen burner</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture incubator (5% CO2, 37 &#176;C)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital shaker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon structured illumination microscope setup consisting of:</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Eclipse Ti research inverted microscope with Perfect Focus System</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon CFI Apo TIRF 100x oil objective lens (N.A. 1.49)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4 Coherent Sapphire Lasers (458, 488, 514 and 561 nm exitation wavelength)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SIM Illuminator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Stage Controller</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MCL Nano-Drive piezo controller</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Intensilight C-HGFIE mercury lamp</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SIM Microscope Enclosure temperature control</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Andor EM-CCD Camera iXon DU897</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PC with Microsoft Windows 7 Home Edition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon&#8217;s NiS Elements 6.14 SIM software package</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon type A immersion oil</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

imaging dendritic spines of rat primary hippocampal neurons using structured illumination microscopy

Dendritische uitsteeksels die uit de dendriet van een neuron en vormen de voornaamste doelwitten van prikkelende postsynaptische inputs in de hersenen. Technologische ontwikkelingen hebben deze structuren geïdentificeerd als de belangrijkste elementen in neuron connectiviteit en synaptische plasticiteit. De kwantitatieve analyse van de wervelkolom morfologie met behulp van licht microscopie blijft een essentieel probleem te wijten aan technische beperkingen in verband met intrinsieke breking limiet licht&#39;s. Vertakte stekels kunnen gemakkelijk worden geïdentificeerd door confocale laser scanning fluorescentie microscopie. Echter, het meten van subtiele veranderingen in de vorm en grootte van stekels is moeilijk omdat dan lengte ruggengraat afmetingen zijn meestal kleiner dan conventionele optische resolutie van de theoretische resolutie limiet van 200 nm lichtmicroscopie is vastgesteld. Verschillende recent ontwikkelde super resolutie technieken zijn gebruikt om het cellulaire structuren kleiner dan 200 nm, met inbegrip van vertakte stekels. Teze technieken zijn gebaseerd op klassieke ver-acties in het veld en het dus mogelijk het gebruik van bestaande monster bereidingswijzen en imago voorbij de oppervlakte van een monster. Hier beschreven is een werkprotocol om super resolutie gestructureerde verlichting microscopie (SIM) van toepassing zijn op de beeldvorming van vertakte stekels in primaire hippocampus neuron culturen. Mogelijke toepassingen van SIM overlappen met die van confocale microscopie. De twee technieken met uiteenlopende toepasbaarheid. SIM biedt hogere effectieve laterale resolutie, terwijl de confocale microscopie, als gevolg van het gebruik van een fysieke pinhole, realiseert verbetering resolutie ten koste van de verwijdering van onscherp licht. In dit protocol primaire neuronen gekweekt op dekglaasjes gebruik van een standaard protocol, getransfecteerd met DNA plasmiden die fluorescerende eiwitten en afgebeeld met SIM. Het hele protocol hierin beschreven duurt ongeveer 2 weken, omdat dendritische stekels worden afgebeeld na 16-17 dagen in vitro, wanneerdendritische ontwikkeling optimaal. Na voltooiing van het protocol, kan vertakte stekels worden gereconstrueerd in 3D uit serie van SIM image stacks met behulp van gespecialiseerde software.

Hier beschreven is een gestandaardiseerde werkprotocol voor het afbeelden van dendritische stekels van de rat primaire hippocampus neuronen in vitro gebruik van SIM. Het protocol workflow en zijn cruciale stappen zijn weergegeven in figuur 1. Kortom, het protocol duurt ongeveer 2 weken van experimenteel werk gescheiden in een eerste fase van de bereiding van de monsters, met inbegrip van cultuur, ontwikkeling en transfectie van primaire rat hippocampale neuronen en immunohistochemie, en tweede ...

Watch this Scientific Journal Video about Imaging Dendritic Spines of Rat Primary Hippocampal Neurons using Structured Illumination Microscopy at JoVE.com

Imaging Dendritic Spines of Rat Primary Hippocampal Neurons using Structured Illumination Microscopy

Beeldvorming Dendritische stekels van Rat Primaire hippocampus neuronen met behulp van Structured Illumination Microscopie

Dit artikel beschrijft een werkprotocol op de foto dendritische stekels van hippocampale neuronen in vitro met behulp van Structured Illumination Microscopy (SIM). Superresolutietechnieken gebruik van SIM biedt beeldresolutie aanzienlijk verder gaan dan het licht limiet diffractie in alle drie ruimtelijke dimensies, waardoor de beeldvorming van individuele vertakte stekels met verbeterde details.

Dendritic spines are protrusions emerging from the dendrite of a neuron and represent the primary postsynaptic targets of excitatory inputs in the brain. ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Nucleofection and Primary Culture of Embryonic Mouse Hippocampal and Cortical Neurons

Nucleofection en Primaire Cultuur van de embryonale Mouse hippocampus en de corticale neuronen

Hippocampal and cortical neurons have been used extensively to study central nervous system (CNS) neuronal polarization, axon/dendrite outgrowth, and ...

Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP) of Fluorescence Tagged Proteins in Dendritic Spines of Cultured Hippocampal Neurons

Fluorescence Recovery After Photobleaching FRAP of Fluorescence Tagged Proteins in Dendritic Spines of Cultured Hippocampal Neurons

Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP) van de fluorescentie gemerkte eiwitten in Dendritische stekels van Cultured hippocampus Neuronen

FRAP has been used to quantify the mobility of GFP-tagged proteins. Using a strong excitation laser, the fluorescence of a GFP-tagged protein is bleached ...

Bilaminar Co-culture of Primary Rat Cortical Neurons and Glia

Bilaminar Co-cultuur van primaire Rat corticale neuronen en Glia

This video will guide you through the process of culturing rat cortical neurons in the presence of a glial feeder layer, a system known as a bilaminar or ...

Voltage-sensitive Dye Recording from Axons, Dendrites and Dendritic Spines of Individual Neurons in Brain Slices

Voltage-gevoelige kleurstof Opnemen van axonen, dendrieten en dendritische spines van individuele neuronen in Brain Slices

Understanding the biophysical properties and functional organization of single neurons and how they process information is fundamental for understanding ...

Calcium Phosphate Transfection of Primary Hippocampal Neurons

Calciumfosfaattransfectie van Primary hippocampus neuronen

Calcium phosphate precipitation is a convenient and economical method for transfection of cultured cells. With optimization, it is possible to use this ...

Two-Photon in vivo Imaging of Dendritic Spines in the Mouse Cortex Using a Thinned-skull Preparation

Two-Photon in vivo Imaging of Dendritic Spines in the Mouse Cortex Using a Thinned-skull Preparation

Twee-Photon<em&gt; In vivo</em&gt; Imaging van vertakte stekels in de Mouse Cortex met een uitgedunde schedel Voorbereiding

In the mammalian cortex, neurons form extremely complicated networks and exchange information at synapses. Changes in synaptic strength, as well as ...

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

Fluorescence and Bioluminescence Imaging of Subcellular Ca2+ in Aged Hippocampal Neurons

Fluorescentie en Bioluminescentie beeldvorming van Subcellulaire Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; In Aged hippocampus Neuronen

Susceptibility to neuron cell death associated to neurodegeneration and ischemia are exceedingly increased in the aged brain but mechanisms responsible ...

Live Images of GLUT4 Protein Trafficking in Mouse Primary Hypothalamic Neurons Using Deconvolution Microscopy

Live beelden van GLUT4 eiwit mensenhandel muis primaire hypothalame neuronen met behulp van deconvolutie microscopie

Type 2 diabetes mellitus (T2DM) is a global health crisis which is characterized by insulin signaling impairment and chronic inflammation in peripheral ...

Generation of Neurospheres from Mixed Primary Hippocampal and Cortical Neurons Isolated from E14-E16 Sprague Dawley Rat Embryo

Generatie van neuro sferen van gemengde primaire Hippocampal en corticale neuronen geïsoleerd van E14-e16 Sprague Dawley rat embryo

Primary neuron culture is an essential technique in the field of neuroscience. To gain deeper mechanistic insights into the brain, it is essential to have ...

3D Modeling of Dendritic Spines with Synaptic Plasticity

3D Modellering van Dendritische stekels met synaptische plasticiteit

Computational modeling of diffusion and reaction of chemical species in a three-dimensional (3D) geometry is a fundamental method to understand the ...