Name: dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat
Uploaded: 2014-02-27T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים הפועלים לKJ ממדעי הטבע והנדסת מועצת מחקר של קנדה (NSERC) וקרוהן וקוליטיס הקרן של קנדה (CCFC). VM נתמך על ידי מלגת CFRI וGB מלגת לימודים לתואר שני מן המכון הקנדי לבריאות מחקר (CIHR). BAV הוא ילדים עם מעיים והפרעות בכבד יו&quot;ר הקרן (ילד) למחקר בילדים מחל מעי דלקתי וקנדה מחקר הקתדרה בילדים לגסטרואנטרולוגיה וKJ הוא המטפל מדען בכיר נתמך על ידי ילד והילד ומשפחה מכון מחקר תכנית (CFRI) המטפל מדענים בפרס , אוניברסיטה של ​​קולומביה הבריטית.

הליכים כרוכים בנושאי בעלי חיים לעקוב אחר הנחיות טיפול בבעלי החיים שהותוו על ידי הוועדה המוסדית טיפול בבעלי חיים ושימוש (IACUC) באוניברסיטה של ​​קולומביה הבריטית. נהלים שהוזכרו בפרוטוקול זה יהיה מתואר עבור שני חולדות ועכברים, ואיל...

<ol>
	<li>Per&#353;e, M., Cerar, A., Biotechnol, J. .. . B. i. o. m. e. d. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. , (2012).</li><li>Ghia, J. E., Blennerhassett, P., Deng, Y., Verdu, E., Khan, W., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivation+of+inflammatory+bowel+disease+in+a+mouse+model+of+depression.">Reactivation of inflammatory bowel disease in a mouse model of depression.</a> Gastroenterology. 136 (7), 2280-2288 (2009).</li><li>Reber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+animal+models+of+inflammatory+bowel+disease-an+update+on+the+role+of+the+hypothalamo-pituitary-adrenal+axis.">Stress and animal models of inflammatory bowel disease-an update on the role of the hypothalamo-pituitary-adrenal axis.</a> Psychoneuroendocrinology. 37 (1), 1-19 (2012).</li><li>Qiu, B., Vallance, B., Blennerhassett, P., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+CD4++lymphocytes+in+the+susceptibility+of+mice+to+stress-induced+reactivation+of+experimental+colitis.">The role of CD4+ lymphocytes in the susceptibility of mice to stress-induced reactivation of experimental colitis.</a> Nat. Med. 5 (10), 1178-1182 (1999).</li><li>Boyer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myenteric+plexus+injury+and+apoptosis+in+experimental+colitis.">Myenteric plexus injury and apoptosis in experimental colitis.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 117 (1), 41-53 (2005).</li><li>Saunders, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noradrenergic+and+cholinergic+neural+pathways+mediate+stress-induced+reactivation+of+colitis+in+the+rat.">Noradrenergic and cholinergic neural pathways mediate stress-induced reactivation of colitis in the rat.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 124 (1-2), 56-68 (2006).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calpain+inhibitor+I+reduces+colon+injury+caused+by+dinitrobenzene+sulphonic+acid+in+the+rat.">Calpain inhibitor I reduces colon injury caused by dinitrobenzene sulphonic acid in the rat.</a> Gut. 48 (4), 478-488 (2001).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+reduces+dinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+colitis.">Melatonin reduces dinitrobenzene sulfonic acid-induced colitis.</a> J. Pineal Res. 30 (1), 1-12 (2001).</li><li>Innis, S., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+lipids+in+early+development+and+intestinal+inflammatory+disease.">Dietary lipids in early development and intestinal inflammatory disease.</a> Nutr. Rev. 65, S188-S193 (2007).</li><li>Innis, S. M., de La Presa Owens, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fatty+acid+composition+in+pregnancy+alters+neurite+membrane+fatty+acids+and+dopamine+in+newborn+rat+brain.">Dietary fatty acid composition in pregnancy alters neurite membrane fatty acids and dopamine in newborn rat brain.</a> J. Nutr. 131 (1), 118-122 (2001).</li><li>Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mundra+H.,Innis+S.M.+Intestinal+responsiveness+to+experimental+colitis+in+young+rats+is+altered+by+maternal+diet.">Mundra H.,Innis S.M. Intestinal responsiveness to experimental colitis in young rats is altered by maternal diet.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 289, 13-20 (2005).</li><li>Sanovic, S., Lamb, D. P., Blennerhassett, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Damage+to+the+enteric+nervous+system+in+experimentalcolitis.">Damage to the enteric nervous system in experimentalcolitis.</a> Am. J. Pathol. 155 (4), 1051-107 (1999).</li><li>Vilaseca, J., Salas, A., Guarner, F., Rodriguez, R., Martinez, M., Malagelada, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fish+oil+reduces+progression+of+chronic+inflammatory+lesions+in+a+rat+model+of+granulomatous+colitis.">Dietary fish oil reduces progression of chronic inflammatory lesions in a rat model of granulomatous colitis.</a> Gut. 31, 539-544 (1990).</li><li>Andoh, A., Tsujikawa, T., Ishizuka, I., Araki, Y., Sasaki, M., Koyama, S., Fujiyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-3+fatty+acid-rich+diet+prevents+early+response+of+interleukin-6+elevation+in+trinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+enteritis.">N-3 fatty acid-rich diet prevents early response of interleukin-6 elevation in trinitrobenzene sulfonic acid-induced enteritis.</a> Int. J. Mol. Med. 12, 721-725 (2003).</li><li>Barros, K. V., Xavier, R. A., Abreu, G. G., Martinez, C. A., Ribeiro, M. L., Gambero, A., Carvalho, P. O., Nascimento, C. M., Silveira, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soybean+and+fish+oil+mixture+increases+IL-10,+protects+against+DNA+damage+and+decreases+colonic+inflammation+in+rats+with+dextran+sulfate+sodium+(DSS)+colitis.">Soybean and fish oil mixture increases IL-10, protects against DNA damage and decreases colonic inflammation in rats with dextran sulfate sodium (DSS) colitis.</a> Lipids Health Dis. 9, 68 (2010).</li><li>Hekmatdoost, A., Wu, X., Morampudi, V., Innis, S. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+oils+modify+the+host+immune+response+and+colonic+tissue+damage+following+Citrobacter+rodentium+infection+in+mice.">Dietary oils modify the host immune response and colonic tissue damage following Citrobacter rodentium infection in mice.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 304 (10), 917-928 (2013).</li><li>Innis, S. M., Dai, C., Wu, X., Buchan, A. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perinatal+lipid+nutrition+alters+early+intestinal+development+and+programs+the+response+to+experimental+colitis+in+young+adult+rats.">Perinatal lipid nutrition alters early intestinal development and programs the response to experimental colitis in young adult rats.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 299 (6), 1376-1385 (1152).</li></ol>

מודל DNBS המתואר בפרוטוקול זה הוא מודל קוליטיס יקר, זול, ושחזור שיכול להיות מנוצל ללימוד היבטים שונים של מחלת מעי דלקתי. כאשר מנוהל intrarectally לחולדות או עכברים, DNBS גורם מידה ניכרת של דלקת ופגיעה ברקמות במעי הגס, שמזכיר מחלת קרוהן האנושית במונחים של התכונות היסטולוגית השונ...

מחלות מעי דלקתיות (IBD) מאופיינת בדלקת כרונית התקפי בדרכי העיכול (GI), וכתוצאה מכך תסמינים של שלשולים, ירידה במשקל, וכאבי בטן. קוליטיס כיבית (UC) ומחלת קרוהן (CD) הם שתי הצורות העיקריות של מחלת מעי דלקתי, ויכול להיות מכובד על ידי המיקום של הדלקת בתוך מערכת העיכול. בחולי UC, הדלקת כרוכה בדרך כלל פי הטבעת והוא משתרע בסמיכות את המעי הגס הלמשפיעה על הרירית השטחית רק מידה משתנה. לעומת זאת, CD יכול להשפיע על כל חלק של מערכת העיכול, למרות שזה בעיקר משפיע על המעי וcecum. תקליטור לעתים קרובות בא לידי ביטוי כדלקת transmural קשור לעתים קרובות עם גרנולומות ומובילה לstricturing (fibrostenotic) ו / או חדירת מחלה (fistulizing). למרות אטיולוגיה של IBD נותרת חמקמקה, מקובל גם כי IBD תלוי בכמה גורמים, הכולל אינטראקציות בין המארחים מערכת חיסונית, רגישות גנטית וresponses לגורמים סביבתיים וחיידקים. עד כה, מודלים שונים של IBD הוצעו שמציגים תגובות קליניות, היסטולוגית וחיסוניות שונות אופייניות לUC ו-CD. הדגמים הנפוצים ביותר כוללים עכברים מהונדסים גנטי (IL-2, IL-10 SAMP / yit,) מודלים מושרה, זיהום (rodentium Citrobacter, typhimurium סלמונלה), מודלים העברת מאמצת (CD45 + RB גבוה, העברה לתא CD62L + לעכברים SCID) ו מודלים קוליטיס כימי שגרמו (Dextran נתרן סולפט (DSS), חומצת sulfonic Trinitrobenzene (TNBS), וחומצת sulfonic Dinitrobenzene (DNBS)). בשל העלות הנמוכה שלהם והתפרצות מהירה של מחלה, מודלים כימיים נחשבים לא יסולא בפז לחקר היבטים השונים של מחלת מעי דלקתי. לכל אחד מדגמי קוליטיס הכימיים המפורטים יתרונות כמו גם מגבלות בהיבטים מסוימים של הרלוונטיות הקלינית, חיסונית וhistopathological למחלת המעי דלקתית. DSS הוא אחת מהשיטות כימיות הנפוצות ביותר המועסקות כדי לגרום coliTIS במכרסמים 1. מנהל של 3-10 DSS% (MW: 42 KDA) ל7-10 ימים במי השתייה של עכברים יכול לגרום לסימפטומים וסימנים של דלקת המעי הגס, כולל ירידה במשקל, שלשולים עם דם, קיצור מעי הגס, כיבים ברירית וחדירת נויטרופילים. מודל זה שימושי במיוחד עבור מחקרי הקרנת סמים, כמו גם לבחון את מנגנוני התחדשות אפיתל, את ההשפעה של חסינות מולדת על הומאוסטזיס הרירי, ואת התפקיד של דלקת בקידום דיספלזיה במעי והתפתחות אדנוקרצינומה. יש עם זאת כמה חסרונות למודל DSS, כולל וריאציה בריכוז של DSS הדרוש כדי לגרום לקוליטיס במתקנים שונים של בעלי חיים, כמו גם ספיגת מים עולים בקנה אחד על ידי עכברים וחשיפה ובכך עולה בקנה אחד לDSS, וכתוצאה מכך הווריאציה בתואר, במידה ו הפצה של פגיעה ברירית וכיבים במעי הגס. כל התכונות הללו יובילו לההטרוגניות של תוצאות ולהגביל את היכולת להשוות את התוצאות על פני fr לימודיםקבוצות מחקר שונות אום. אלטרנטיבה למודל DSS היא DNBS-Induced hapten או המודלים TNBS של קוליטיס. מודל זה מעסיק החדרה רקטלית של רירית רגישות DNBS סוכנים או TNBS, בדילול מלא בריכוזים שונים של אתנול. הממשל של אתנול הוא תנאי הכרחי כדי לשבור את מחסום רירית המעי כדי לאפשר חדירה של DNBS או TNBS לpropria lamina. אז DNBS / TNBS יהיה haptenize חלבונים במעי הגס וחיידקי מעיים המקומיים להפוך immunogenic, ובכך מפעילה את המארח מולדים ואת התגובה חיסונית אדפטיבית. באופן כללי, מודל זה קשור לשלשולים חריפים ולעתים עקובים מדם, ירידה במשקל ועיבוי קיר מעיים עם זאת סימפטומים משתנים בהתאם לסוג של מכרסם בשימוש, כמו גם העיתוי, מינון ומידת חשיפה לDNBS או TNBS משמש ב מחקר. הבחנות חשובות בין חולדות ועכברים יש לציין, עם היתרונות של עלות נמוכה יותר לרכישה ולוח, כמו גם לואוr מסת גוף להפחתת עלויות לכל בעלי חיים של טיפול בגוף חי. זה צריך להיות מוגדר נגד כמובן יותר מהיר וחמור של קוליטיס בעכברים, שבו החיות יותר שבירות ותגובה עשויות להגיע לנקודת סיום הומנית במהירות. דלקת המעיים בתחילה כתוצאה מנזק הנגרם על אתנול לתאי האפיתל במעי, שמוביל לחדירות מוגברת אפיתל, חדירה של חיידקים לרירית, haptenization של חלבוני מארח, כל זה וכתוצאה מכך ההסתננות של נויטרופילים, מקרופאגים ולימפוציטים Th1 T לתוך הרירית הפגועה. בהשוואה לDNBS, TNBS נחשב כימי מסוכן בשל מאפייני חמצוני ביותר שלה, שיכול להוות סיכון לפיצוץ במגע עם בסיסים כגון נתרן ואשלגן הידרוקסידי. לכן DNBS נחשב כיום כבחירה מועדפת של חומר כימי על TNBS לגרום לדלקת מעי גס. במכרסמים, קוליטיס DNBS נחשב כאחת השיטות הנוחה ביותר ללמוד folloIBD הכנף קשור מכפילי של מחלה: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דיכאון והפעלה מחדש של קוליטיס: הוכח כי לחץ, חרדה ודיכאון בחולי IBD לעתים קרובות קשורים עם הישנות מחלה. קוליטיס DNBS הוא מודל מתאים ללמוד את התפקיד של דיכאון והשלכותיו על הפעלה מחדש של קוליטיס בעכברים. השיטה כרוכה בדרך כלל אינדוקציה ראשונית של קוליטיס ידי DNBS, ואחריו ברזולוציה של קוליטיס על ידי השארת העכברים עבור 6-8 שבועות. אז העכברים מנוהלים עם סוכני דיכאון גורם כגון reserpine או על ידי bulbectomy חוש הריח כדי לגרום לדיכאון ואחרי בדיקה אותם להפעלה מחדש של קוליטיס דרך אתגר עם מינון subcolitic של DNBS 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתח והפעלה מחדש של קוליטיס: מתח הוא עוד גורם סביבתי נפוץ שנקשר לפתוגנזה של IBD. ישנו גוף הולך וגדל של ראיות המצביע על קשר חזק בין לחץ כרוני והופעת תסמינים של UC ו-CD במכרסמיםזה, כמו גם בבני אדם ופרימטים לא אנושיים 3. קוליטיס DNBS הוא מודל טוב ללמוד מחדש הקשורים ללחץ של קוליטיס בשני עכברים וחולדות. השיטה בדרך כלל מועסקת באופן דומה כאמור לטיפול בדיכאון אלא במקום של דיכאון, בעלי החיים שנחשפו ללחצים כגון קולי ומתח איפוק 4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דלקת נוירוגנית: מספר המחקרים שתואר גם שינויים חולפים או קבועים במערכת העצבים enteric מבנה (ENS) ופונקציה, כפי שניתן לראות בדגימות רקמה ממודלים של בעלי חיים ושל חולים עם מחלת מעי דלקתי. DNBS הוא מודל טוב כדי לחקור את ההשפעות של דלקת בENS 5 וללמוד הן noradrenergic ומסלולים עצביים הכולינרגית 6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנגנוני פציעה תיקון: בפתוגנזה של IBD, מתווכי פגיעה הנגזר מארח כגון מיני חמצן תגובתי (ROS), תחמוצת חנקן (NO), מולקולת הידבקות אינטר 3 (ICAM-3), ו-P-selectin כולם הוכחו pלהניח תפקיד בשיבוש אפיתל במעי. DNBS הוא מודל מצוין ללמוד פציעות שנגרמו על ידי עד הוויסות של מתווכים אלה, כמו גם מנגנוני תיקון שמוסדרים על ידי שימוש בסמים או מעכבי 7,8 סלקטיבית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דלקת transmural: בנוסף ליישומים שהוזכרו לעיל של DNBS, המודל יכול להיות מיושם גם כדי ללמוד דלקת transmural של המעיים, תכונה קלאסית שנמצאה בחולים עם תקליטור. DNBS וקוליטיס-Induced TNBS שניהם קשורים עם חדירה משמעותית של לימפוציטים, לרירית המעי הגס מה שהופך את הדגמים האלה שימושיים במיוחד ללמוד מנגנונים חיסוניים תלויים תא T. </li></ol> בהשוואה למודל DSS, היתרונות של DNBS וקוליטיס-Induced TNBS כוללים עלות נמוכה, התפתחות מהירה של דלקת המעי הגס (בדרך כלל דורש 1-3 ימים כדי להראות כיבים ודלקות לשחזור) ונזק מקומי עקבי למעי גס דיסטלי. עם זאת החסרונות הם דרישה לרמה גבוהה יותר של מומחיות טכנית, אופטימיזציה של מינון DNBS / TNBS, ואת הצורך בהרדמה לממשל בפי הטבעת. במאמר זה אנו מתודולוגיים חקרנו את ההשפעות של ריכוזים שונים של n-6 ו n-3 חומצות שומן רב בלתי רוויות על שינוי תגובת רירית המעי לקוליטיס-Induced DNBS בחולדות באמצעות שמן חריע שמנים צמחיים (SO) ושמן קנולה (CO) , ושמן דגים (FO). הוכח כי חומצות n-6 ו-n-3 שומן הם מתווכים חשובים של מחלה דלקתית של מעי דרך את תפקידם כmoieties acyl של phosopholipids קרום תא 9. בניגוד לפוטנציאל מעודדי דלקת של n-6 חומצות שומן, n-3 חומצות שומן במספיק גבוהה הצריכה הן פוטנציאל חומרים אנטי דלקתיים חזקים. הפעולות אנטי דלקתיות של n-3 חומצות שומן בתיווך ישירות דרך החלפה של חומצה הארכידונית כמצע eicosanoid, עיכוב חילוף חומרים חומצה הארכידונית ובעקיפין באמצעות שינוי של proinflביטוי ammatory גן ואיתות תא. N-3 חומצות השומן גם להצמיח resolvins, משפחה של מתווכים אנטי דלקתיים. צריכה גבוה של n-3 חומצות שומן קשור לירידה בייצור של eicosanoids מעודדי דלקת, ציטוקינים, כמוקינים, מיני חמצן תגובתי וביטוי של מולקולות הדבקות. במחקר זה, חולדות דיאטות כרצונך מודעה זהות בכל החומרים המזינים, למעט חומצות שומן נמאס, עם כאנרגית אחוזים מהשומן, 20% SO, CO 20%, או 18% שמן דגים בתוספת 2% שמן חריע (FO) 10-11 . כאחוז מהאנרגיה היומית, הדיאטה כן ובלבד 15% חומצה לינולאית (LA), עם &lt;חומצת 0.06% α-לינולנית (ALA) ולא חומצת eicosapentaenoic (EPA) או חומצת docosahexaenoic (DHA), דיאטת CO הייתה 4.2 % לוס אנג&#39;לס ו1.9% ALA ללא EPA או DHA, ודיאטת FO סיפקו 1.4% EPA, 4.9% DHA, 0.32% לוס אנג&#39;לס, ו0.12% ALA. שלושה שבועות לאחר תחילת דיאטת השומנים בדם, העכברים ניתנו DNBS intrarectal או 50% אתנול והקריבו 5 ימים לאחר מכן. Inflתגובת ammatory הוערכה על ידי הערכה של ירידה במשקל, ציוני נזק היסטולוגית ופעילות myeloperoxidase רקמות.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="627">
	<colgroup>
		<col />
		<col /> 
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">1 mL syringe</td>
			<td style="width:121px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">309659</td>
			<td style="width:167px;"> </td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">19 gauge needle</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>305187</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-50</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427517</td>
			<td>for intra-rectal administration in mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-90</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427519</td>
			<td>for intra-rectal administration in rat</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DNBS</td>
			<td>MP Bio</td>
			<td>150959</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">tear gel</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>63601662596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Formalin</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>5F93-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>TPZ-0510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A-962.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">hexadecyltrimethyl-ammonium bromide</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>H5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium phosphate buffer solution</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>79628-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">O-dianisidine dihydrochloride</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>D3252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">30% H2O2</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>31642</td>
			<td>hydrogen peroxide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spectrophotometer</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>Benchmarker Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Light Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Image.Z1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Data analysis software program </td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td style="width:119px;"> GraphPad Prism Software Version 4.00 </td>
			<td><a href="http://www.graphpad.com/">San Diego California USA, www.graphpad.com</a></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat

מחלות מעי דלקתיות (IBD), כוללים מחלת קרוהן וקוליטיס כיבית, כבר מזמן מזוהות עם בסיס גנטי, ולאחרונה לארח את תגובה חיסונית לסוכני חיידקים וסביבתיים. קוליטיס Dinitrobenzene חומצת sulfonic (DNBS) מושרה מאפשר אחד כדי ללמוד את הפתוגנזה של גורמים סביבתיים הקשורים IBD כגון מתח ודיאטה, את ההשפעות של טיפולים פוטנציאליים, ואת מנגנוני פציעת דלקת ברירית מעי בסיסית. במאמר זה, אנחנו בדקנו את ההשפעות של חומצות n-3 ו-n-6 חומצות שומן תזונתיות בתגובה הדלקתית ברירית המעי הגס לקוליטיס-Induced DNBS בחולדות. כל החולדות קבלו תזונה זהה למעט סוגים שונים של חומצות שומן מ[ שמן חריע (SO), שמן קנולה (CO), או שמן דגים (FO)] במשך שלושה שבועות לפני החשיפה לintrarectal DNBS. חולדות בקרה נתון אתנול intrarectal המשיכו לעלות במשקל על המחקר של 5 ימים, ואילו, חולדות שטופלו DNBS דיאטות שומנים האכילו את כל losמשקל לא עם חולדות FO וCO הפד הוכחת ירידה משמעותית במשקל על ידי 48 שעות וחולדות שהוזנו זאת על ידי 72 שעה. עלייה במשקל התחדשה לאחר 72 ההודעה hr DNBS, ועל ידי 5 הודעה ימי DNBS, קבוצת FO הייתה משקל גוף גבוה מכך או קבוצות CO. סעיפים במעי הגס שנאספו 5 ימים לאחר DNBS הטיפול הראה כיב מוקד, הרס קריפטה, דלדול תא גביע, וחדירה רירית של שני תאים דלקתיים חריפים וכרוניים, שהשוני בחומרה בין קבוצות דיאטה. הקבוצה כל כך שיגע הראתה נזק החמור ביותר ואחריו CO, וFO האכיל קבוצות שהראו את המידה המתונה ביותר של פגיעה ברקמות. כמו כן, פעילות myeloperoxidase הגס (MPO), סמן של פעילות נויטרופילים היה גבוהה באופן משמעותי בכל כך אחרי חולדות CO הפד, עם חולדות שהוזנו FO שיש פעילות MPO נמוכה באופן משמעותי. תוצאות אלו מראות את השימוש של קוליטיס-Induced DNBS, כפי שתואר בפרוטוקול זה, על מנת לקבוע את ההשפעה של תזונה בפתוגנזה של מחלת מעי דלקתי.

אתגר של חולדות (ספראג-Dawley) או עכברים (C57BL / 6) עם DNBS בדרך כלל תוצאות בירידה במשקל זמנית ושלשולים, לפעמים עם הווה דם בצואה. עם זאת, גורמים כגון גנטיקה, תזונה וחיידקי מעיים יכולים לשנות את רגישות לקוליטיס DNBS המושרה. לכן, בעלי החיים שנכללו בניסויים צריכים להיות מאותו המוסד, א?...

Watch this Scientific Journal Video about DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat at JoVE.com

DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat

קוליטיס המושרה DNBS / TNBS מציע אלטרנטיבה ושיטה זולה ללמוד pathobiology של מחלות מעי דלקתיות. הפרוטוקול שנדון במאמר זה מתאר את היישום המוצלח של DNBS כדי לגרום לדלקת מעי גסה בעכברים וחולדות ומאפשר לאדם ללמוד ביסודיות את תגובות מעיים בתיווך מארחת.

מודלים DNBS / TNBS קוליטיס: מתן תובנות מחלת מעי דלקתי והשפעות של התזונה שומן

Inflammatory Bowel Diseases (IBD), including Crohn&#39;s Disease and Ulcerative Colitis, have long been associated with a genetic basis, and more recently ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1&beta; using a Whole Blood Stimulation Assay

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² using a Whole Blood Stimulation Assay

מדידה מדויקת ופשוטה 1β-IL Pro-ציטוקין דלקתי באמצעות גירוי Assay Whole Blood

Inflammatory processes resulting from the secretion of soluble mediators by immune cells, lead to various manifestations in skin, joints and other tissues ...

Segmentation and Measurement of Fat Volumes in Murine Obesity Models Using X-ray Computed Tomography

פילוח ומדידה של כמויות השומן מודלים השמנת יתר Murine באמצעות קרני רנטגן טומוגרפיה ממוחשבת

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are ...

Gene-environment Interaction Models to Unmask Susceptibility Mechanisms in Parkinson's Disease

מודלים לאינטראקציה בין סביבת גנים כדי לחשוף מנגנוני רגישות במחלת פרקינסון

Lipoxygenase (LOX) activity has been implicated in neurodegenerative disorders such as Alzheimer&#39;s disease, but its effects in Parkinson&#39;s disease ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

הזרקת orthotopic של תאי סרטן השד לחלב שומן Pad של עכברים לחקר התפתחות גידול.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

הערכה של יכולת הקיום של הזרקת שומן האנושי בעכברי עירום עם מיקרו-טומוגרפיה ממוחשבת

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Therapeutic Effectiveness of a Dietary Supplement for Management of Halitosis in Dogs

יעילות טיפולית של תוסף תזונה לניהול של באשת בכלבים

Halitosis is a common complaint involving social and communicational problems in humans and also affects the pet-owner relationship. In this randomized ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

מודלי כירורגי של Gastroesophageal Reflux עם עכברים

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Sacs Ex Vivo המעיים להעריך חדירות ריריות מודלים של מחלות במערכת העיכול

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying ...

Transplantation Into the Mouse Ovarian Fat Pad

השתלת לתוך כרית עכבר השחלות שומן

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic ...

Analyzing Beneficial Effects of Nutritional Supplements on Intestinal Epithelial Barrier Functions During Experimental Colitis

ניתוח מועיל אפקטים של תוספי תזונה על פונקציות מעיים אפיתל מכשול במהלך ניסיוני קוליטיס

Inflammatory bowel diseases (IBD), including Crohn&#39;s disease and ulcerative colitis, are chronic relapsing disorders of the intestines. They cause ...