Name: dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat
Uploaded: 2014-02-27T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av driftsstøtte til KJ fra naturvitenskap og Engineering Research Council of Canada (NSERC) og Crohns og kolitt Foundation of Canada (CCFC). VM er støttet av en CFRI Fellowship og GB utdannet studieplass fra den kanadiske Institutes for Health Research (CIHR). BAV er et barn med tarm og leverlidelser Foundation (BARN) Chair of Pediatric IBD Forskning og Canada Research Chair i Pediatric Gastroenterology og KJ er en erfaren kliniker Scientist støttes av barnet og barnet og familien Research Institute (CFRI) Lege Forskere Award Program , University of British Columbia.

Prosedyrer som involverer dyr fag følger retningslinjene dyr omsorg skissert av Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) ved University of British Columbia. Prosedyrene som er nevnt i denne protokollen vil bli beskrevet for både rotter og mus, mens de representative resultatene vil bli presentert fra Sprague-Dawley rotter. En. Utarbeidelse av DNBs og intrarektal Administrasjon <ol><li> For rektal instillasjon av DNBs hos rotter, tilbereder 15-30 mg...

<ol>
	<li>Per&#353;e, M., Cerar, A., Biotechnol, J. .. . B. i. o. m. e. d. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. , (2012).</li><li>Ghia, J. E., Blennerhassett, P., Deng, Y., Verdu, E., Khan, W., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivation+of+inflammatory+bowel+disease+in+a+mouse+model+of+depression.">Reactivation of inflammatory bowel disease in a mouse model of depression.</a> Gastroenterology. 136 (7), 2280-2288 (2009).</li><li>Reber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+animal+models+of+inflammatory+bowel+disease-an+update+on+the+role+of+the+hypothalamo-pituitary-adrenal+axis.">Stress and animal models of inflammatory bowel disease-an update on the role of the hypothalamo-pituitary-adrenal axis.</a> Psychoneuroendocrinology. 37 (1), 1-19 (2012).</li><li>Qiu, B., Vallance, B., Blennerhassett, P., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+CD4++lymphocytes+in+the+susceptibility+of+mice+to+stress-induced+reactivation+of+experimental+colitis.">The role of CD4+ lymphocytes in the susceptibility of mice to stress-induced reactivation of experimental colitis.</a> Nat. Med. 5 (10), 1178-1182 (1999).</li><li>Boyer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myenteric+plexus+injury+and+apoptosis+in+experimental+colitis.">Myenteric plexus injury and apoptosis in experimental colitis.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 117 (1), 41-53 (2005).</li><li>Saunders, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noradrenergic+and+cholinergic+neural+pathways+mediate+stress-induced+reactivation+of+colitis+in+the+rat.">Noradrenergic and cholinergic neural pathways mediate stress-induced reactivation of colitis in the rat.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 124 (1-2), 56-68 (2006).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calpain+inhibitor+I+reduces+colon+injury+caused+by+dinitrobenzene+sulphonic+acid+in+the+rat.">Calpain inhibitor I reduces colon injury caused by dinitrobenzene sulphonic acid in the rat.</a> Gut. 48 (4), 478-488 (2001).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+reduces+dinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+colitis.">Melatonin reduces dinitrobenzene sulfonic acid-induced colitis.</a> J. Pineal Res. 30 (1), 1-12 (2001).</li><li>Innis, S., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+lipids+in+early+development+and+intestinal+inflammatory+disease.">Dietary lipids in early development and intestinal inflammatory disease.</a> Nutr. Rev. 65, S188-S193 (2007).</li><li>Innis, S. M., de La Presa Owens, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fatty+acid+composition+in+pregnancy+alters+neurite+membrane+fatty+acids+and+dopamine+in+newborn+rat+brain.">Dietary fatty acid composition in pregnancy alters neurite membrane fatty acids and dopamine in newborn rat brain.</a> J. Nutr. 131 (1), 118-122 (2001).</li><li>Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mundra+H.,Innis+S.M.+Intestinal+responsiveness+to+experimental+colitis+in+young+rats+is+altered+by+maternal+diet.">Mundra H.,Innis S.M. Intestinal responsiveness to experimental colitis in young rats is altered by maternal diet.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 289, 13-20 (2005).</li><li>Sanovic, S., Lamb, D. P., Blennerhassett, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Damage+to+the+enteric+nervous+system+in+experimentalcolitis.">Damage to the enteric nervous system in experimentalcolitis.</a> Am. J. Pathol. 155 (4), 1051-107 (1999).</li><li>Vilaseca, J., Salas, A., Guarner, F., Rodriguez, R., Martinez, M., Malagelada, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fish+oil+reduces+progression+of+chronic+inflammatory+lesions+in+a+rat+model+of+granulomatous+colitis.">Dietary fish oil reduces progression of chronic inflammatory lesions in a rat model of granulomatous colitis.</a> Gut. 31, 539-544 (1990).</li><li>Andoh, A., Tsujikawa, T., Ishizuka, I., Araki, Y., Sasaki, M., Koyama, S., Fujiyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-3+fatty+acid-rich+diet+prevents+early+response+of+interleukin-6+elevation+in+trinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+enteritis.">N-3 fatty acid-rich diet prevents early response of interleukin-6 elevation in trinitrobenzene sulfonic acid-induced enteritis.</a> Int. J. Mol. Med. 12, 721-725 (2003).</li><li>Barros, K. V., Xavier, R. A., Abreu, G. G., Martinez, C. A., Ribeiro, M. L., Gambero, A., Carvalho, P. O., Nascimento, C. M., Silveira, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soybean+and+fish+oil+mixture+increases+IL-10,+protects+against+DNA+damage+and+decreases+colonic+inflammation+in+rats+with+dextran+sulfate+sodium+(DSS)+colitis.">Soybean and fish oil mixture increases IL-10, protects against DNA damage and decreases colonic inflammation in rats with dextran sulfate sodium (DSS) colitis.</a> Lipids Health Dis. 9, 68 (2010).</li><li>Hekmatdoost, A., Wu, X., Morampudi, V., Innis, S. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+oils+modify+the+host+immune+response+and+colonic+tissue+damage+following+Citrobacter+rodentium+infection+in+mice.">Dietary oils modify the host immune response and colonic tissue damage following Citrobacter rodentium infection in mice.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 304 (10), 917-928 (2013).</li><li>Innis, S. M., Dai, C., Wu, X., Buchan, A. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perinatal+lipid+nutrition+alters+early+intestinal+development+and+programs+the+response+to+experimental+colitis+in+young+adult+rats.">Perinatal lipid nutrition alters early intestinal development and programs the response to experimental colitis in young adult rats.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 299 (6), 1376-1385 (1152).</li></ol>

Den DNBs modellen som beskrives i denne protokoll er et verdifullt, billig og reproduserbar kolitt-modell som kan bli anvendt for å studere forskjellige aspekter av IBD. Når administreres intrarectally til rotter eller mus, induserer DNBs en betydelig grad av betennelse og vevsskade i tykktarmen, ligner menneskelige Crohns sykdom i form av dens ulike histologiske funksjoner, inkludert transmural infiltrasjon av polymorfnukleære celler og dominerende NF-κB-avhengig Th1 aktivering. Denne m...

Inflammatorisk tarmsykdom (IBD) er karakterisert ved kronisk tilbakevend betennelser i mage-tarm (GI)-tarmkanalen, noe som resulterer i symptomer på diaré, vekttap, og abdominale smerter. Ulcerøs kolitt (UC) og Crohns sykdom (CD) er de to store former for IBD, og ​​kan skilles ved plasseringen av inflammasjon i mage-tarmkanalen. I UC-pasienter, betennelse innebærer vanligvis i rektum og strekker contiguously opp i tykktarmen for en variabel grad påvirker bare den overfladiske mucosa. I motsetning til dette kan CD påvirke enhver del av GI-systemet, selv om den overveiende innvirkning på ileum og cecum. CD ofte manifesterer seg som transmural betennelse som ofte forbindes med granulomer og fører til stricturing (fibrostenotic) og / eller gjennomtrengende (fistulizing) sykdom. Selv om etiologien av IBD fortsatt ukjent, er det vel akseptert at IBD er multifaktoriell, involverer interaksjoner blant vertene immunsystem, genetisk sårbarhet og ansvarses til miljømessige og mikrobielle faktorer. Hittil har forskjellige modeller av IBD er foreslått som vise ulike kliniske, histologiske og immunresponser karakteristisk for UC og CD. De mest brukte modeller inkluderer genmodifiserte mus (IL-2, IL-10, SAMP / YIT), infeksjon indusert modeller (Citrobacter rodentium, Salmonella typhimurium), adoptivoverføringsmodeller (CD45 + RB Høye, CD62L + celle overføring til SCID mus) og kjemisk indusert kolitt modeller (Dextran Natriumsulfat (DSS), Trinitrobenzene sulfonsyre (TNBS) og dinitrobenzen-sulfonsyre (DNBs)). På grunn av deres lave kostnader og hurtig innsettende sykdom, er kjemiske modeller vurderes uvurderlig til studiet av ulike aspekter ved IBD. Hver av de kjemiske kolitt modellene som er oppført har fordeler samt begrensninger i noen aspekter av deres kliniske, immunologiske og histopatologiske relevans til IBD. DSS er en av de mest vanlige kjemiske fremgangsmåter som anvendes for å indusere colitis hos gnagere en. Administrasjon av 3-10% DSS (MW: 42 kDa) i 7-10 dager i drikkevannet av mus kan indusere symptomer og tegn på kolitt, inkludert vekttap, diaré med blod, colonic forkorte, mucosal sårdannelse og nøytrofile infiltrasjon. Denne modellen er spesielt nyttig for medikamentscreeningstudier, i tillegg til å utforske de mekanismer epitelial av regenerering, virkningen av medfødt immunitet på slimhinne homeostase, og rollen til betennelser i å fremme tarm dysplasia og adenokarsinom utvikling. Det er imidlertid noen ulemper for DSS-modellen, herunder variasjon i konsentrasjonen av DSS som trengs for å indusere kolitt hos forskjellige dyrefasiliteter, så vel som inkonsistente vannopptak ved mus og således inkonsekvente eksponering mot DSS, som resulterer i variasjoner i graden, utstrekning og Fordelingen av slimhinneskade og sår i tykktarmen. Alle disse funksjonene føre til heterogenitet av resultater og begrense muligheten til å sammenligne resultater på tvers av studier frOM ulike forskningsmiljøer. Et alternativ til DSS modellen er haptenen-indusert DNBs eller TNBS modeller av kolitt. Denne modellen benytter rektal instillasjon av mucosal sensibiliserende agenter DNBs eller TNBS, fortynnet i varierende konsentrasjoner av etanol. Administreringen av etanol er en forutsetning for å bryte den colonic mucosal barriere for å tillate inntrengning av DNBs eller TNBS inn i lamina propria. DNBs / TNBS vil da haptenize de lokaliserte kolon og gut mikrobielle proteiner for å bli immunogene, og dermed utløser verten medfødte og ervervede immunresponser. Generelt er denne modellen forbundet med alvorlige og noen ganger blodig diaré, vekttap og tarm fortykkede imidlertid symptomer varierer avhengig av typen av gnager benyttes, så vel som tidspunkt, dose og graden av eksponering for DNBs eller TNBS som brukes i studien. Viktige forskjeller mellom rotter og mus bør bemerkes, med fordelene av lavere kostnader for kjøp og styret, samt lower kroppsvekt for å redusere per-dyr kostnadene for behandling in vivo. Dette bør settes mot raskere og mer alvorlig forløp av kolitt hos mus, der de mer skjøre og følsomme dyr kan raskt nå en human endepunkt. Den intestinal inflammasjon opprinnelig resulterer fra etanol indusert skade på intestinale epitelceller, som fører til økte epithelial permeabilitet, mikrobiell penetrasjon inn i mucosa, haptenization vertsproteiner, alt dette resulterer i infiltrasjon av nøytrofiler, makrofager og T-lymfocytter Th1 inn i det skadede mucosa. I forhold til DNBs er TNBS betraktes som et farlig kjemisk på grunn av sin svært oksidative egenskaper som kan utgjøre en risiko for eksplosjon ved kontakt med baser slik som natrium-og kalium-hydroksyd. Derfor DNBs er ansett som en foretrukket valg av kjemisk løpet TNBS å indusere kolitt. I gnagere, er DNBs kolitt ansett som en av de mest praktiske metoder for å studere den følfløyen IBD forbundet modifikatorer av sykdom: <ol><li> Depresjon og reaktivering av colitis: Det har vist seg at stress, angst og depresjon hos IBD-pasienter er ofte assosiert med sykdoms tilbakefall. DNBs kolitt er en egnet modell for å studere rollen til depresjon og dens konsekvenser på reaktivering av kolitt hos mus. Fremgangsmåten omfatter typisk innledende utløsning av colitt ved DNBs, etterfulgt av oppløsningen av kolitt ved å la mus i 6-8 uker. Musene er deretter gis med depresjon kallende stoffer som reserpin eller ved lukte bulbectomy å indusere depresjon fulgt ved å teste dem for reaktivering av kolitt gjennom utfordring med en subcolitic dose av DNBs to. </li><li> Stress og reaktivering av kolitt: Stress er en annen vanlig miljøfaktor som har vært knyttet til IBD patogenesen. Det er en økende mengde bevis som tyder på en sterk sammenheng mellom kronisk stress og utbruddet av symptomer på UC og CD i gnagers så vel som hos mennesker og ikke-menneskelige primater 3. DNBs kolitt er en god modell for å studere stress forbundet reaktivering av kolitt hos både mus og rotter. Fremgangsmåten blir vanligvis anvendt på en lignende måte som nevnt ovenfor for depresjon, bortsett fra i stedet for depresjon, blir dyrene utsatt for belastninger som sonisk og holde belastning 4.. </li><li> Nevrogen inflammasjon: En rekke studier har beskrevet enten forbigående eller permanente forandringer i det enterisk nervesystem (ENS) struktur og funksjon, som vist i vevsprøver fra dyremodeller og hos pasienter med IBD. DNBs er en god modell for å undersøke effekten av betennelse på ENS 5 og til å studere både noradrenergic og kolinerge nervebaner seks. </li><li> Skade-reparasjonsmekanismene: Under IBD patogenese, vertsavledet skademediatorer slik som reaktive oksygenarter (ROS), nitrogenoksid (NO), intercellulært adhesjonsmolekyl 3-(ICAM-3), og P-selektin er alle blitt vist å plå en rolle i tarmepitel avbrudd. DNBs er en utmerket modell for å studere skader som følge av den opp-regulering av disse mediatorer, så vel som reparasjonsmekanismene som er regulert ved hjelp av selektive medikamenter eller inhibitorer 7,8. </li><li> Transmuralt inflammasjon: I tillegg til de ovenfor nevnte anvendelser av DNBs, modellen kan også brukes til å studere transmural betennelse i tarmen, en klassisk funksjon som finnes hos pasienter med CD. Begge DNBs og TNBS-indusert kolitt er forbundet med signifikant infiltrasjon av lymfocytter inn i kolon mukosa gjøre disse modellene spesielt nyttige for å studere T-celleavhengig immunmekanismer. </li></ol> I sammenligning med DSS modellen, fordelene ved DNBs og TNBS-indusert kolitt omfatter lav pris, rask utvikling av kolitt (krever vanligvis 1-3 dager for å vise reproduserbar sår og inflammasjon) og konsistent lokalisert skade på den distale colon. Men ulempene er en forutsetning for enstørre grad av teknisk ekspertise, optimalisering av DNBs / TNBS dose, og behovet for anestesi for rektal administrasjon. I denne metode papir studerte vi effektene av varierende konsentrasjoner av n-6 og n-3 flerumettede fettsyrer på å endre den colonic mucosal respons på DNBs-indusert kolitt hos rotter ved hjelp av vegetabilske oljer saflorolje (SO) og rapsolje (CO) , og fiskeolje (FO). Det har vist seg at n-6 og n-3 fettsyrer, er viktige formidlere av inflammatorisk sykdom gjennom tarm deres rolle som acyldelene cellemembranen phosopholipids 9. I motsetning til den proinflammatoriske potensialet av n-6 fettsyrer, n-3 fettsyrer med tilstrekkelig høyt inntak er potensielt potente anti-inflammatoriske midler. Den anti-inflammatoriske handlingene til n-3 fettsyrer er mediert direkte gjennom erstatning av arakidonsyre som eicosanoid substrat, inhibering av arachidonsyre metabolismen og indirekte via forandring av proinflammatory genuttrykk og cellesignalering. De n-3-fettsyrer også gi opphav til resolviner, en familie av anti-inflammatoriske mediatorer. Høy inntak av n-3 fettsyrer er assosiert med en reduksjon i produksjon av proinflammatoriske eikosanoider, cytokiner, kjemokiner, reaktive oksygen-arter og ekspresjonen av adhesjonsmolekyler. I denne studien ble rotter foret ad libitum dietter identiske i alle næringsstoffer bortsett fettsyrer, og som en prosent energi fra fett, 20% SO, 20% CO, og 18% fiskeolje pluss 2% saflorolje (FO) 10-11 . Som andel av det daglige energi, SO diett gitt 15% linolsyre (LA), med &lt;0,06% α-linolensyre (ALA) og ingen eikosapentaensyre (EPA) og dokosaheksaensyre (DHA), CO-diett hadde 4.2 % LA og 1,9% ALA uten EPA eller DHA, og FO diett gitt EPA 1,4%, 4,9% DHA, 0,32% LA og 0,12% ALA. Tre uker etter initiering av lipid-dietter, ble musene administrert intrarektal DNBs eller 50% etanol og avlivet 5 dager senere. Den inflammatory responsen ble vurdert ved vurdering av vekttap, histologiske skader resultatene og vev myeloperoksidase-aktivitet.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="627">
	<colgroup>
		<col />
		<col /> 
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">1 mL syringe</td>
			<td style="width:121px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">309659</td>
			<td style="width:167px;"> </td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">19 gauge needle</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>305187</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-50</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427517</td>
			<td>for intra-rectal administration in mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-90</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427519</td>
			<td>for intra-rectal administration in rat</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DNBS</td>
			<td>MP Bio</td>
			<td>150959</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">tear gel</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>63601662596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Formalin</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>5F93-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>TPZ-0510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A-962.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">hexadecyltrimethyl-ammonium bromide</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>H5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium phosphate buffer solution</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>79628-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">O-dianisidine dihydrochloride</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>D3252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">30% H2O2</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>31642</td>
			<td>hydrogen peroxide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spectrophotometer</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>Benchmarker Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Light Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Image.Z1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Data analysis software program </td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td style="width:119px;"> GraphPad Prism Software Version 4.00 </td>
			<td><a href="http://www.graphpad.com/">San Diego California USA, www.graphpad.com</a></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat

Inflammatoriske tarmsykdommer (IBD), inkludert Crohns sykdom og ulcerøs kolitt, har lenge vært assosiert med en genetisk basis, og i den senere vert immunresponser mot mikrobielle og miljømessige midler. Dinitrobenzen sulfonsyren (DNBs)-indusert kolitt gjør det interessant å studere patogenesen ved IBD tilhørende miljø triggere som stress og kosthold, effekten av mulige behandlingsformer, og de mekanismene bak tarmbetennelse og slimhinneskader. I denne artikkelen har vi undersøkt effekten av kosttilskudd n-3 og n-6 fettsyrer på colonic slimhinnene inflammatorisk respons på DNBs-indusert kolitt hos rotter. Alle rotter ble foret med dietter identiske med unntak av forskjellige typer fettsyrer [saflorolje (SO), rapsolje (CO), eller fiskeolje (FO)] i tre uker før eksponering for intrarektal DNBs. Kontroll rotter som fikk intrarektal etanol fortsatt økende vekt over 5 dagers studie, mens, DNBs-behandlede rotter matet lipid dietter alle lost vekt med FO og CO matet rotter viser betydelig vekttap ved 48 hr og rotter matet SO etter 72 timer. Vektøkning gjenopptatt etter 72 timers legg DNBs, og etter 5 dager etter DNBs, FO gruppen hadde en høyere kroppsvekt enn SO eller CO grupper. Colonic seksjoner samlet fem dager etter DNBs-behandling viste fokus sårdannelse, krypten ødeleggelse, beger celle uttømming, og slimhinne infiltrasjon av både akutte og kroniske betennelsesceller som skilte i alvorlighetsgrad mellom diet grupper. SO matet gruppen viste den mest alvorlige skaden fulgt av CO, og FO matet grupper som viste den mildeste graden av vevsskade. Tilsvarende colonic myeloperoxidase (MPO) aktivitet, en markør av nøytrofile aktivitet var signifikant høyere i SO fulgt av CO matet rotter, med FO matet rotter har betydelig lavere MPO aktivitet. Disse resultatene viser at bruken av DNBs-indusert kolitt, som beskrevet i denne protokollen, for å bestemme virkningen av dietten i patogenesen av IBD.

Utfordring av rotter (Sprague-Dawley) eller mus (C57BL / 6) med DNBs vanligvis resulterer i transient vekttap og diaré, noen ganger med blod i avføring. Men, kan faktorer som genetikk, kosthold og tarmfloraen endre mottakelighet for DNBs indusert kolitt. Derfor, inkludert dyr i forsøkene bør være fra samme institusjon, enten avledet lokalt eller bestilles fra ett dyr leverandør. Alle dyr bør overvåkes nøye for graden av vekttap og symptomer på nød led under kolitt. Resultatene pre...

Watch this Scientific Journal Video about DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat at JoVE.com

DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat

DNBs / TNBS indusert kolitt tilbyr et alternativ og billig metode for å studere patobiologi av inflammatorisk tarmsykdom. Protokollen diskutert i dette notatet skisserer vellykket bruk av DNBs å indusere kolitt hos mus og rotter, og tillater en å grundig studere verts-mediert tarm svar.

DNBs / TNBS kolitt modeller: gir innsikt i inflammatorisk tarmsykdom og effekter av fett

Inflammatory Bowel Diseases (IBD), including Crohn&#39;s Disease and Ulcerative Colitis, have long been associated with a genetic basis, and more recently ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1&beta; using a Whole Blood Stimulation Assay

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² using a Whole Blood Stimulation Assay

Inflammatory processes resulting from the secretion of soluble mediators by immune cells, lead to various manifestations in skin, joints and other tissues ...

Segmentation and Measurement of Fat Volumes in Murine Obesity Models Using X-ray Computed Tomography

Segmentering og Måling av fett Volumene i murine Fedme modeller med X-ray Datatomografiscanning

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are ...

Gene-environment Interaction Models to Unmask Susceptibility Mechanisms in Parkinson's Disease

Gen-miljø interaksjonsmodeller for å avdekke følsomhetsmekanismer ved Parkinsons sykdom

Lipoxygenase (LOX) activity has been implicated in neurodegenerative disorders such as Alzheimer&#39;s disease, but its effects in Parkinson&#39;s disease ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

Orthotopic Injeksjon av brystkreft celler inn i Mammary Fat Pad av mus å studere tumorvekst.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Vurdering av Livskraftig of Human Fat Injeksjon i Nude Mus med Micro-Datatomografiscanning

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Therapeutic Effectiveness of a Dietary Supplement for Management of Halitosis in Dogs

Terapeutiske effekten av et kosttilskudd for styring av halitosis i Dogs

Halitosis is a common complaint involving social and communicational problems in humans and also affects the pet-owner relationship. In this randomized ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

Kirurgiske modeller av gastroøsofageal refluks med Mus

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Ex Vivo Tarm Sacs å vurdere slimhinner Permeabilitet i modeller av gastrointestinal sykdom

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying ...

Transplantation Into the Mouse Ovarian Fat Pad

Transplantasjon Into the Mouse Ovarian Fat Pad

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic ...

Analyzing Beneficial Effects of Nutritional Supplements on Intestinal Epithelial Barrier Functions During Experimental Colitis

Analysere gunstige effektene av kosttilskudd på Intestinal Epitelial barrierefunksjoner Under Experimental kolitt

Inflammatory bowel diseases (IBD), including Crohn&#39;s disease and ulcerative colitis, are chronic relapsing disorders of the intestines. They cause ...