Name: dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat
Uploaded: 2014-02-27T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado por subvenções de funcionamento a KJ de Ciências Naturais e Engenharia do Conselho de Pesquisa do Canadá (NSERC) ea doença de Crohn e Colite Foundation of Canada (CCFC). VM é apoiado por uma bolsa CFRI e uma bolsa de estudo de pós-graduação GB dos Institutos Canadenses de Pesquisa em Saúde (CIHR). BAV é um Crianças com intestinal e doenças hepáticas Foundation (CRIANÇA) Chair of Pediatric Research IBD ea Cátedra de Pesquisa do Canadá em Gastroenterologia Pediátrica e KJ é um Clínico Cientista Sênior apoiado pelo Criança e da Criança e do Instituto de Pesquisa da Família (CFRI) Programa Clínico Prêmio Cientistas , University of British Columbia.

Procedimentos envolvendo assuntos animais seguir as orientações de cuidados de animais delineadas pelo Animal Care e Use Comitê Institucional (IACUC) da Universidade de British Columbia. Procedimentos descritos no presente protocolo irá ser descrito, tanto para os ratos e murganhos, enquanto que os resultados representativos, será apresentado a partir de ratos Sprague-Dawley. 1. Preparação de DNBS e administração intra-rectal <ol><li> Para a instilaç?...

<ol>
	<li>Per&#353;e, M., Cerar, A., Biotechnol, J. .. . B. i. o. m. e. d. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. , (2012).</li><li>Ghia, J. E., Blennerhassett, P., Deng, Y., Verdu, E., Khan, W., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivation+of+inflammatory+bowel+disease+in+a+mouse+model+of+depression.">Reactivation of inflammatory bowel disease in a mouse model of depression.</a> Gastroenterology. 136 (7), 2280-2288 (2009).</li><li>Reber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+animal+models+of+inflammatory+bowel+disease-an+update+on+the+role+of+the+hypothalamo-pituitary-adrenal+axis.">Stress and animal models of inflammatory bowel disease-an update on the role of the hypothalamo-pituitary-adrenal axis.</a> Psychoneuroendocrinology. 37 (1), 1-19 (2012).</li><li>Qiu, B., Vallance, B., Blennerhassett, P., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+CD4++lymphocytes+in+the+susceptibility+of+mice+to+stress-induced+reactivation+of+experimental+colitis.">The role of CD4+ lymphocytes in the susceptibility of mice to stress-induced reactivation of experimental colitis.</a> Nat. Med. 5 (10), 1178-1182 (1999).</li><li>Boyer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myenteric+plexus+injury+and+apoptosis+in+experimental+colitis.">Myenteric plexus injury and apoptosis in experimental colitis.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 117 (1), 41-53 (2005).</li><li>Saunders, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noradrenergic+and+cholinergic+neural+pathways+mediate+stress-induced+reactivation+of+colitis+in+the+rat.">Noradrenergic and cholinergic neural pathways mediate stress-induced reactivation of colitis in the rat.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 124 (1-2), 56-68 (2006).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calpain+inhibitor+I+reduces+colon+injury+caused+by+dinitrobenzene+sulphonic+acid+in+the+rat.">Calpain inhibitor I reduces colon injury caused by dinitrobenzene sulphonic acid in the rat.</a> Gut. 48 (4), 478-488 (2001).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+reduces+dinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+colitis.">Melatonin reduces dinitrobenzene sulfonic acid-induced colitis.</a> J. Pineal Res. 30 (1), 1-12 (2001).</li><li>Innis, S., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+lipids+in+early+development+and+intestinal+inflammatory+disease.">Dietary lipids in early development and intestinal inflammatory disease.</a> Nutr. Rev. 65, S188-S193 (2007).</li><li>Innis, S. M., de La Presa Owens, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fatty+acid+composition+in+pregnancy+alters+neurite+membrane+fatty+acids+and+dopamine+in+newborn+rat+brain.">Dietary fatty acid composition in pregnancy alters neurite membrane fatty acids and dopamine in newborn rat brain.</a> J. Nutr. 131 (1), 118-122 (2001).</li><li>Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mundra+H.,Innis+S.M.+Intestinal+responsiveness+to+experimental+colitis+in+young+rats+is+altered+by+maternal+diet.">Mundra H.,Innis S.M. Intestinal responsiveness to experimental colitis in young rats is altered by maternal diet.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 289, 13-20 (2005).</li><li>Sanovic, S., Lamb, D. P., Blennerhassett, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Damage+to+the+enteric+nervous+system+in+experimentalcolitis.">Damage to the enteric nervous system in experimentalcolitis.</a> Am. J. Pathol. 155 (4), 1051-107 (1999).</li><li>Vilaseca, J., Salas, A., Guarner, F., Rodriguez, R., Martinez, M., Malagelada, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fish+oil+reduces+progression+of+chronic+inflammatory+lesions+in+a+rat+model+of+granulomatous+colitis.">Dietary fish oil reduces progression of chronic inflammatory lesions in a rat model of granulomatous colitis.</a> Gut. 31, 539-544 (1990).</li><li>Andoh, A., Tsujikawa, T., Ishizuka, I., Araki, Y., Sasaki, M., Koyama, S., Fujiyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-3+fatty+acid-rich+diet+prevents+early+response+of+interleukin-6+elevation+in+trinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+enteritis.">N-3 fatty acid-rich diet prevents early response of interleukin-6 elevation in trinitrobenzene sulfonic acid-induced enteritis.</a> Int. J. Mol. Med. 12, 721-725 (2003).</li><li>Barros, K. V., Xavier, R. A., Abreu, G. G., Martinez, C. A., Ribeiro, M. L., Gambero, A., Carvalho, P. O., Nascimento, C. M., Silveira, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soybean+and+fish+oil+mixture+increases+IL-10,+protects+against+DNA+damage+and+decreases+colonic+inflammation+in+rats+with+dextran+sulfate+sodium+(DSS)+colitis.">Soybean and fish oil mixture increases IL-10, protects against DNA damage and decreases colonic inflammation in rats with dextran sulfate sodium (DSS) colitis.</a> Lipids Health Dis. 9, 68 (2010).</li><li>Hekmatdoost, A., Wu, X., Morampudi, V., Innis, S. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+oils+modify+the+host+immune+response+and+colonic+tissue+damage+following+Citrobacter+rodentium+infection+in+mice.">Dietary oils modify the host immune response and colonic tissue damage following Citrobacter rodentium infection in mice.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 304 (10), 917-928 (2013).</li><li>Innis, S. M., Dai, C., Wu, X., Buchan, A. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perinatal+lipid+nutrition+alters+early+intestinal+development+and+programs+the+response+to+experimental+colitis+in+young+adult+rats.">Perinatal lipid nutrition alters early intestinal development and programs the response to experimental colitis in young adult rats.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 299 (6), 1376-1385 (1152).</li></ol>

O modelo descrito neste DNBS protocolo é um modelo válido, barato e reprodutível que a colite pode ser utilizado para o estudo de vários aspectos da DII. Quando administrado por via retal de ratos ou camundongos, DNBS induz um grau substancial de inflamação e lesão tecidual no cólon, assemelhando-se a doença de Crohn humana em termos de suas várias características histológicas, incluindo infiltração transmural de polimorfonucleares e predominante NF-kB-dependente ativação Th1. <p class="jove_content"...

Doença inflamatória do intestino (IBD) é caracterizada por uma inflamação crónica recidivante no tracto gastro-intestinal (GI), resultando em sintomas de diarreia, perda de peso e dor abdominal. A colite ulcerosa (UC) e doença de Crohn (CD) são as duas formas principais de DII, e podem ser distinguidas pela localização da inflamação dentro do tracto GI. Em pacientes UC, a inflamação geralmente envolve o reto e estende-se de forma contígua no cólon por um grau variável afetando apenas a mucosa superficial. Em contraste, o CD pode afectar qualquer parte do tracto GI, embora afecta predominantemente o íleo e ceco. CD freqüentemente se manifesta como uma inflamação transmural muitas vezes associada a granulomas e levando a stricturing (fibrostenotic) e / ou penetrante (fistulizing) doença. Embora a etiologia da DII permanece indefinida, é bem aceito que IBD é multifatorial, envolvendo interações entre as hostes do sistema imunológico, a susceptibilidade genética e responses a fatores ambientais e microbianos. Até à data, modelos diferentes de DII foram propostos que exibem várias respostas clínicas, histológicas e imunológicas característicos de UC e CD. Os modelos mais utilizados incluem ratinhos geneticamente modificados (IL-2, IL-10, SAMP / yit), infecção modelos induzidas (Citrobacter rodentium, Salmonella typhimurium), os modelos de transferência adoptivos (CD45 + RB alto, de transferência de células CD62L + em ratinhos SCID) e modelos de colite induzida quimicamente (sulfato de sódio de dextrano (DSS), ácido sulfônico Trinitrobenzeno (TNBS), e ácido sulfónico dinitrobenzeno (DNBS)). Devido ao seu baixo custo e um rápido início da doença, os modelos químicos são considerados de grande valor para o estudo de diferentes aspectos da DII. Cada um dos modelos de colite químicos listados tem vantagens, bem como as limitações em alguns aspectos de sua relevância clínica, imunológica e histopatológica de IBD. DSS é um dos métodos químicos mais comuns utilizados para induzir colitis em roedores 1. Administração de 3-10% DSS (PM: 42 kDa) durante 7-10 dias na água de beber dos ratos pode induzir sintomas e sinais de colite, incluindo perda de peso, diarreia com sangue, a gordura do cólon, ulceração da mucosa e a infiltração de neutrófilos. Este modelo é particularmente útil para estudos de pesquisa de drogas, bem como para explorar os mecanismos de regeneração epitelial, o impacto da imunidade inata na homeostase da mucosa, e o papel da inflamação na promoção displasia intestinal e desenvolvimento de adenocarcinoma. No entanto, existem algumas desvantagens no modelo DSS, incluindo a variação na concentração de DSS necessária para induzir a colite, em diferentes instalações de animais, assim como a absorção de água pela inconsistente ratinhos e, assim, a exposição incoerente DSS, resultando em variações no grau, extensão e distribuição de lesão da mucosa e ulceração no cólon. Todas essas características levam a heterogeneidade dos resultados e limitar a capacidade de comparar os resultados entre os estudos frdiferentes grupos de pesquisa Om. Uma alternativa ao modelo DSS é o DNBS induzida por hapteno ou modelos TNBS de colite. Este modelo utiliza a instilação rectal da mucosa agentes sensibilizantes DNBS ou TNBS, diluídas em várias concentrações de etanol. A administração do etanol é um pré-requisito para quebrar a barreira mucosa do cólon para permitir a penetração de DNBS ou TNBS na lâmina própria. DNBS / TNBS então haptenize as proteínas do cólon e intestino microbianas localizadas para se tornar imunogênica, desencadeando o anfitrião inata e resposta imune adaptativa. Em geral, este modelo está associado com diarreia severa e por vezes sanguinolenta, perda de peso e espessamento da parede intestinal, no entanto os sintomas variam dependendo do tipo de roedor utilizadas, bem como o tempo, a dose e o grau de exposição ao DNBS ou TNBS utilizado na estudo. Distinções importantes entre ratos e ratinhos deve-se notar, com os benefícios de menor custo de compra e de bordo, bem como Lower de massa corporal para diminuir os custos por animal de tratamento in vivo. Isso deve ser definido contra o curso mais rápida e grave da colite em ratos, onde os animais mais frágeis e sensíveis podem rapidamente chegar a um desfecho humano. A inflamação intestinal resulta inicialmente a partir de etanol danos induzidos às células epiteliais do intestino delgado, o que leva a um aumento da permeabilidade epitelial, penetração microbiana na mucosa, haptenization de proteínas do hospedeiro, tudo isto resultando na infiltração de neutrófilos, macrófagos e linfócitos T Th1 para a mucosa danificada. Em comparação com DNBS, TNBS é considerado como uma substância química perigosa, devido às suas propriedades altamente oxidativas que podem representar um risco de explosão em contacto com bases, tais como sais de sódio e hidróxido de potássio. Portanto DNBS é considerado atualmente como uma escolha preferida de química sobre TNBS para induzir colite. Em roedores, a colite DNBS é considerado como um dos métodos mais convenientes para estudar o seguinasa IBD modificadores da doença associada: <ol><li> A depressão e a reactivação da colite: Demonstrou-se que o stress, a ansiedade e depressão em pacientes IBD são frequentemente associadas com a recidiva da doença. Colite DNBS é um modelo adequado para estudar o papel da depressão e as suas consequências sobre a reactivação de colite em ratos. O método geralmente envolve a indução inicial de colite por DNBS, seguido pela resolução da colite, deixando os ratos durante 6-8 semanas. Os ratinhos são então administradas com agentes causando depressão, tais como a reserpina ou por bulbectomy olfatório para induzir depressão seguida testando-os para a reactivação de colite por desafio com uma dose de DNBS subcolitic 2. </li><li> Stress e reativação de colite: O estresse é outro fator ambiental comum que tem sido associada ao IBD patogênese. Há um crescente corpo de evidências que sugerem uma forte associação entre o estresse crônico eo aparecimento de sintomas de UC e CD em roedors, bem como em seres humanos e primatas não-humanos 3. Colite DNBS é um bom modelo para estudar a reativação associada ao estresse da colite em ratos e ratos. O método é normalmente empregue de forma semelhante como mencionado acima para a depressão, excepto em lugar da depressão, os animais são expostos a factores de stress tais como o stress sonoro e de retenção 4. </li><li> Inflamação neurogénica: Uma série de estudos descreve tanto alterações transitórias ou permanentes no sistema nervoso entérico (ENS), estrutura e função, como pode ser visto em amostras de tecido a partir de modelos animais e a partir de pacientes com IBD. DNBS é um bom modelo para explorar os efeitos da inflamação na ENS 5 e estudar tanto noradrenérgica e vias neurais colinérgicos 6. </li><li> Mecanismos de lesão de reparação: Durante IBD patogênese, mediadores de lesão derivados do hospedeiro, como as espécies reativas de oxigênio (ROS), o óxido nítrico (NO), molécula de adesão intercelular (ICAM-3 3) e P-selectina têm sido mostrados para pcolocar um papel na ruptura epitelial intestinal. DNBS é um excelente modelo para estudar as lesões causadas pelo aumento da regulação desses mediadores, bem como os mecanismos de reparo que são regulados pelo uso de drogas ou inibidores seletivos 7,8. </li><li> Inflamação transmural: Para além das aplicações de DNBS acima mencionados, o modelo pode também ser aplicada ao estudo de inflamação transmural do intestino, uma característica clássica encontrada em pacientes com CD. Ambos DNBS e colite induzida por TNBS estão associadas com a infiltração de linfócitos significativa, na mucosa do cólon tornando estes modelos particularmente úteis para o estudo de células T mecanismos imunitários dependentes. </li></ol> Em comparação com o modelo de DSS, as vantagens de DNBS e colite induzida por TNBS incluem baixo custo, o rápido desenvolvimento de colite (geralmente requer 1-3 dias para mostrar ulceração reprodutível e inflamação) e dano localizado consistente no cólon distai. No entanto, as desvantagens são um requisito para amaior nível de conhecimento técnico, a otimização da dose DNBS / TNBS, ea necessidade de anestesia para administração rectal. Neste papel metodológico estudámos os efeitos de diferentes concentrações de n-6 e n-3 ácidos gordos poliinsaturados em alterar a resposta da mucosa do cólon com colite induzida pelo DNBS em ratos usando o óleo de cártamo óleos vegetais (SO) e de óleo de canola (CO) e óleo de peixe (FO). Demonstrou-se que os ácidos n-6 e n-3 ácidos gordos são importantes mediadores de doenças inflamatórias intestinais através do seu papel como radicais acilo de phosopholipids membrana celular 9. Em contraste com a pró-inflamatória potencial de n-6 Os ácidos gordos n-3 ácidos gordos no suficientemente elevado consumo são agentes potencialmente anti-inflamatórios potentes. As ações anti-inflamatórias de n-3 os ácidos gordos são mediados diretamente através de substituição de ácido araquidônico como substrato de eicosanóides, inibindo o metabolismo do ácido araquidônico e, indiretamente, através de alteração de proinflexpressão gênica ammatory e sinalização celular. Os n-3 ácidos gordos também dar origem a resolvins, uma família de mediadores anti-inflamatórios. O consumo elevado de n-3 ácidos gordos está associada com uma diminuição na produção de eicosanoides pró-inflamatórios, citocinas, quimiocinas, espécies reactivas de oxigénio e expressão de moléculas de adesão. Neste estudo, os ratos foram alimentados ad libitum dietas idênticos em todos os nutrientes excepto ácidos gordos, com uma energia como por cento de gordura, 20% de SO, 20% de CO, ou 18% de óleo de peixe, mais 2% de óleo de cártamo (FO) 10-11 . Como percentual da energia diária, a dieta SO fornecido 15% de ácido linoléico (LA), com &lt;0,06% de ácido linolênico-α (ALA) e não o ácido eicosapentaenóico (EPA) ou ácido docosahexaenóico (DHA), a dieta de CO teve 4,2 LA% e 1,9% ALA sem EPA ou DHA, ea dieta FO, desde 1,4% EPA, DHA 4,9%, 0,32% LA, e de 0,12% ALA. Três semanas após o início das dietas de lípidos, os ratinhos foram administrados DNBS intra-rectal ou etanol a 50% e sacrificados 5 dias mais tarde. A inflammatory resposta foi avaliada por avaliação da perda de peso, escores de danos histológicos e atividade da mieloperoxidase tecido.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="627">
	<colgroup>
		<col />
		<col /> 
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">1 mL syringe</td>
			<td style="width:121px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">309659</td>
			<td style="width:167px;"> </td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">19 gauge needle</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>305187</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-50</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427517</td>
			<td>for intra-rectal administration in mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-90</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427519</td>
			<td>for intra-rectal administration in rat</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DNBS</td>
			<td>MP Bio</td>
			<td>150959</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">tear gel</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>63601662596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Formalin</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>5F93-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>TPZ-0510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A-962.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">hexadecyltrimethyl-ammonium bromide</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>H5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium phosphate buffer solution</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>79628-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">O-dianisidine dihydrochloride</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>D3252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">30% H2O2</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>31642</td>
			<td>hydrogen peroxide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spectrophotometer</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>Benchmarker Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Light Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Image.Z1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Data analysis software program </td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td style="width:119px;"> GraphPad Prism Software Version 4.00 </td>
			<td><a href="http://www.graphpad.com/">San Diego California USA, www.graphpad.com</a></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat

Doenças inflamatórias do intestino (DII), incluindo a doença de Crohn e colite ulcerativa, têm sido associados com uma base genética, e, mais recentemente, a resposta imune do hospedeiro agentes microbianos e ambientais. Colite dinitrobenzeno ácido sulfônico (DNBS) induzida pelo permite estudar a patogênese da DII gatilhos ambientais associados, como estresse e dieta, os efeitos de terapias potenciais e os mecanismos subjacentes a inflamação intestinal e da mucosa da lesão. Neste trabalho, investigamos os efeitos dos ácidos n-3 e n-6 ácidos graxos na dieta sobre a resposta inflamatória da mucosa do cólon de colite induzida por DNBS em ratos. Todos os ratos foram alimentados com dietas idênticos com a excepção de diferentes tipos de ácidos gordos [óleo de cártamo (SO), óleo de canola (CO), ou óleo de peixe (FO)] durante três semanas antes da exposição ao intrarectal DNBS. Ratos controle dadas etanol intra-retal continuou a ganhar peso ao longo do estudo de 5 dias, enquanto que, os ratos tratados com DNBS dietas lipídicas alimentados todos lost de peso em ratos e FO CO alimentados demonstrando significativa perda de peso por 48 horas e ratos alimentados SO por 72 horas. O ganho de peso retomada após 72 horas pós DNBS, e por 5 dias após DNBS, o grupo FO teve um peso corporal superior ao SO ou grupos CO. Seções do Colo coletadas 5 dias após DNBS-tratamento mostrou ulceração focal, destruição cripta, a depleção de células caliciformes, e mucosa infiltração de ambas as células inflamatórias agudas e crônicas que diferiam em termos de gravidade entre os grupos de dieta. O grupo SO alimentada mostrou o dano mais grave, seguido pela CO, e FO alimentado grupos que apresentaram o mais suave grau de lesão tecidual. Da mesma forma, a mieloperoxidase colónica (MPO) A actividade, um marcador da actividade de neutrófilos foi significativamente mais elevada nas SO seguidos de ratos alimentados com CO, com FO ratos alimentados com actividade significativamente menor MPO. Estes resultados demonstram o uso de colite induzida por DNBS, conforme descrito neste protocolo, para determinar o impacto da dieta na patogênese da DII.

Desafio de ratos (Sprague-Dawley) ou ratinhos (C57BL / 6) com DNBS normalmente resulta na perda de peso transiente e diarreia, por vezes, com a presença de sangue nas fezes. No entanto, fatores como a genética, dieta e microbiota intestinal pode modificar a susceptibilidade a colite induzida DNBS. Portanto, os animais incluídos nos experimentos deve ser da mesma instituição, seja derivada localmente ou ordenadas a partir de um fornecedor animal. Todos os animais devem ser cuidadosamente monitorizados para o grau de...

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DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat

DNBS / colite induzida por TNBS oferece um método alternativo e de baixo custo para estudar a fisiopatologia das doenças inflamatórias do intestino. O protocolo discutidos neste documento descreve a aplicação bem-sucedida de DNBS para induzir colite em camundongos e ratos e permite estudar minuciosamente respostas intestinais com hospedeiros.

DNBS / TNBS Colite Modelos: elucidando sua Doença Inflamatória Intestinal e Efeitos de gordura na dieta

Inflammatory Bowel Diseases (IBD), including Crohn&#39;s Disease and Ulcerative Colitis, have long been associated with a genetic basis, and more recently ...

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Injeção Orthotopic de células cancerosas da mama na mamária Fat Pad de Ratos para o Estudo de crescimento tumoral.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Avaliação da viabilidade de gordura humana injecção em ratinhos nu com Micro-Tomografia Computadorizada

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Therapeutic Effectiveness of a Dietary Supplement for Management of Halitosis in Dogs

Eficácia terapêutica de um suplemento dietético para a Gestão de Halitose em Cães

Halitosis is a common complaint involving social and communicational problems in humans and also affects the pet-owner relationship. In this randomized ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

Modelos cirúrgicos de refluxo gastroesofágico com Ratos

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Ex Vivo Intestinal Sacs para Avaliar mucosa Permeabilidade de modelos de doença gastrointestinal

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying ...

Transplantation Into the Mouse Ovarian Fat Pad

Transplantação no Pad Mouse ovário Fat

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic ...

Analyzing Beneficial Effects of Nutritional Supplements on Intestinal Epithelial Barrier Functions During Experimental Colitis

Analisando Efeitos benéficos de suplementos nutricionais sobre as funções intestinais epitelial de barreira Durante Experimental Colite

Inflammatory bowel diseases (IBD), including Crohn&#39;s disease and ulcerative colitis, are chronic relapsing disorders of the intestines. They cause ...