Name: dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat
Uploaded: 2014-02-27T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat at JoVE.com

Detta arbete stöddes av administrationsbidrag till KJ från naturvetenskaplig och teknisk forskning Council of Canada (NSERC) och Crohns och kolit Foundation of Canada (CCFC). VM stöds av en CFRI Gemenskap och GB en examen studentship från den kanadensiska Institutes for Health Research (CIHR). BAV är ett barn med Intestinal och leversjukdomar Foundation (CHILD) ordförande för pediatrisk IBD forskning och Kanada forskning ordförande i Pediatric Gastroenterology och KJ är en Senior Clinician Scientist stöd av barnet och barn-och familje Forskningsinstitut (CFRI) Clinician Forskare Award Program , University of British Columbia.

Rutiner som involverar djurförsök följer riktlinjer djurskötsel beskrivs av Institutional Animal Care och användning kommittén (IACUC) vid University of British Columbia. Rutiner som nämns i detta protokoll kommer att beskrivas för både råttor och möss, medan de representativa resultaten kommer att presenteras från Sprague-Dawley. 1. Beredning av DNBS och intrarektal administrering <ol><li> För rektal instillation av DNBS hos råttor, nyligen förb...

<ol>
	<li>Per&#353;e, M., Cerar, A., Biotechnol, J. .. . B. i. o. m. e. d. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. , (2012).</li><li>Ghia, J. E., Blennerhassett, P., Deng, Y., Verdu, E., Khan, W., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivation+of+inflammatory+bowel+disease+in+a+mouse+model+of+depression.">Reactivation of inflammatory bowel disease in a mouse model of depression.</a> Gastroenterology. 136 (7), 2280-2288 (2009).</li><li>Reber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+animal+models+of+inflammatory+bowel+disease-an+update+on+the+role+of+the+hypothalamo-pituitary-adrenal+axis.">Stress and animal models of inflammatory bowel disease-an update on the role of the hypothalamo-pituitary-adrenal axis.</a> Psychoneuroendocrinology. 37 (1), 1-19 (2012).</li><li>Qiu, B., Vallance, B., Blennerhassett, P., Collins, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+CD4++lymphocytes+in+the+susceptibility+of+mice+to+stress-induced+reactivation+of+experimental+colitis.">The role of CD4+ lymphocytes in the susceptibility of mice to stress-induced reactivation of experimental colitis.</a> Nat. Med. 5 (10), 1178-1182 (1999).</li><li>Boyer, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myenteric+plexus+injury+and+apoptosis+in+experimental+colitis.">Myenteric plexus injury and apoptosis in experimental colitis.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 117 (1), 41-53 (2005).</li><li>Saunders, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noradrenergic+and+cholinergic+neural+pathways+mediate+stress-induced+reactivation+of+colitis+in+the+rat.">Noradrenergic and cholinergic neural pathways mediate stress-induced reactivation of colitis in the rat.</a> Auto. Neurosci. Basic Clin. 124 (1-2), 56-68 (2006).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calpain+inhibitor+I+reduces+colon+injury+caused+by+dinitrobenzene+sulphonic+acid+in+the+rat.">Calpain inhibitor I reduces colon injury caused by dinitrobenzene sulphonic acid in the rat.</a> Gut. 48 (4), 478-488 (2001).</li><li>Cuzzocrea, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+reduces+dinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+colitis.">Melatonin reduces dinitrobenzene sulfonic acid-induced colitis.</a> J. Pineal Res. 30 (1), 1-12 (2001).</li><li>Innis, S., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+lipids+in+early+development+and+intestinal+inflammatory+disease.">Dietary lipids in early development and intestinal inflammatory disease.</a> Nutr. Rev. 65, S188-S193 (2007).</li><li>Innis, S. M., de La Presa Owens, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fatty+acid+composition+in+pregnancy+alters+neurite+membrane+fatty+acids+and+dopamine+in+newborn+rat+brain.">Dietary fatty acid composition in pregnancy alters neurite membrane fatty acids and dopamine in newborn rat brain.</a> J. Nutr. 131 (1), 118-122 (2001).</li><li>Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mundra+H.,Innis+S.M.+Intestinal+responsiveness+to+experimental+colitis+in+young+rats+is+altered+by+maternal+diet.">Mundra H.,Innis S.M. Intestinal responsiveness to experimental colitis in young rats is altered by maternal diet.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 289, 13-20 (2005).</li><li>Sanovic, S., Lamb, D. P., Blennerhassett, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Damage+to+the+enteric+nervous+system+in+experimentalcolitis.">Damage to the enteric nervous system in experimentalcolitis.</a> Am. J. Pathol. 155 (4), 1051-107 (1999).</li><li>Vilaseca, J., Salas, A., Guarner, F., Rodriguez, R., Martinez, M., Malagelada, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+fish+oil+reduces+progression+of+chronic+inflammatory+lesions+in+a+rat+model+of+granulomatous+colitis.">Dietary fish oil reduces progression of chronic inflammatory lesions in a rat model of granulomatous colitis.</a> Gut. 31, 539-544 (1990).</li><li>Andoh, A., Tsujikawa, T., Ishizuka, I., Araki, Y., Sasaki, M., Koyama, S., Fujiyama, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-3+fatty+acid-rich+diet+prevents+early+response+of+interleukin-6+elevation+in+trinitrobenzene+sulfonic+acid-induced+enteritis.">N-3 fatty acid-rich diet prevents early response of interleukin-6 elevation in trinitrobenzene sulfonic acid-induced enteritis.</a> Int. J. Mol. Med. 12, 721-725 (2003).</li><li>Barros, K. V., Xavier, R. A., Abreu, G. G., Martinez, C. A., Ribeiro, M. L., Gambero, A., Carvalho, P. O., Nascimento, C. M., Silveira, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soybean+and+fish+oil+mixture+increases+IL-10,+protects+against+DNA+damage+and+decreases+colonic+inflammation+in+rats+with+dextran+sulfate+sodium+(DSS)+colitis.">Soybean and fish oil mixture increases IL-10, protects against DNA damage and decreases colonic inflammation in rats with dextran sulfate sodium (DSS) colitis.</a> Lipids Health Dis. 9, 68 (2010).</li><li>Hekmatdoost, A., Wu, X., Morampudi, V., Innis, S. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+oils+modify+the+host+immune+response+and+colonic+tissue+damage+following+Citrobacter+rodentium+infection+in+mice.">Dietary oils modify the host immune response and colonic tissue damage following Citrobacter rodentium infection in mice.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 304 (10), 917-928 (2013).</li><li>Innis, S. M., Dai, C., Wu, X., Buchan, A. M., Jacobson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perinatal+lipid+nutrition+alters+early+intestinal+development+and+programs+the+response+to+experimental+colitis+in+young+adult+rats.">Perinatal lipid nutrition alters early intestinal development and programs the response to experimental colitis in young adult rats.</a> Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 299 (6), 1376-1385 (1152).</li></ol>

Den DNBS modell beskrivs i detta protokoll är en värdefull, billigt och reproducerbar kolit-modell som kan användas för att studera olika aspekter av IBD. Vid administrering intrarektalt till råttor eller möss, DNBS inducerar en väsentlig grad av inflammation och vävnadsskada i tjocktarmen, som liknar människans Crohns sjukdom i termer av dess olika histologiska funktioner inklusive transmural infiltration av polymorfonukleära celler och dominerande NF-kB-beroende Th1 aktivering. D...

Inflammatorisk tarmsjukdom (IBD) kännetecknas av kronisk återkommande inflammationer i det gastrointestinala (GI) området, vilket resulterar i symtom på diarré, viktminskning, och buksmärtor. Ulcerös kolit (UC) och Crohns sjukdom (CD) är de två huvudsakliga formerna av IBD, och kan särskiljas genom platsen för inflammation i mag-tarmkanalen. I UC patienter, inflammationen innebär normalt ändtarmen och sträcker sig intill varandra upp i tjocktarmen för ett varierande utsträckning påverkar bara den ytliga slemhinnan. Däremot kan CD påverka någon del av mag-tarmkanalen, även om det främst drabbar ileum och blindtarmen. CD manifesterar ofta som transmural inflammation förknippas ofta med granulom och leder till stricturing (fibrostenotic) och / eller penetrerande (fistulizing) sjukdom. Även om etiologin av IBD är fortfarande instabil, är det väl accepterat att IBD är multifaktoriell, involverar interaktioner mellan värdarna immunsystem, genetisk känslighet och ansvarSES till miljö-och mikrobiella faktorer. Hittills har olika modeller av IBD föreslagits att visa olika kliniska, histologiska och immunsvar som är karaktäristiska för UC och CD. De vanligaste modellerna omfattar genetiskt modifierade möss (IL-2, IL-10, SAMP / Yit), infektion inducerade modeller (Citrobacter rodentium, Salmonella typhimurium), adoptiv överföringsmodeller (CD45 + RB Hög, CD62L + cellöverföring i SCID-möss) och kemiskt inducerad kolit modeller (Dextran natriumsulfat (DSS), trinitrobensensulfonsyra (TNBS), och dinitrobensen sulfonsyra (DNBS)). På grund av deras låga kostnader och snabbt insättande av sjukdom, är kemiska modeller anses ovärderlig för studier av olika aspekter av IBD. Var och en av de kemiska kolit modeller som anges har fördelar och begränsningar i vissa aspekter av deras kliniska, immunologiska och histopatologiska relevans för IBD. DSS är ett av de vanligaste kemiska metoder som används för att inducera colitis hos gnagare 1. Administration av 3-10% DSS (MW: 42 kDa) i 7-10 dagar i dricksvattnet hos möss kan framkalla symtom och tecken på kolit inklusive viktminskning, diarré med blod, kolon förkortning, mucosal sår och neutrofil infiltration. Denna modell är speciellt användbart för drogscreeningstudier, samt utforska mekanismerna för epithelial förnyelse, effekterna av medfödd immunitet på slemhinnor homeostas, och rollen av inflammation i främjandet av intestinal dysplasi och adenocarcinom utveckling. Det finns dock vissa nackdelar med DSS-modellen, bland annat variationer i koncentrationen av DSS behövs för att framkalla kolit hos olika djuranläggningar, samt inkonsekvent vattenupptagning från möss och därmed inkonsekvent exponering för DSS, vilket resulterar i variationer i grad, omfattning och distribution av gastrointestinala skador och sår i kolon. Alla dessa funktioner leder till heterogenitet resultat och begränsar möjligheten att jämföra resultat mellan studier frOM olika forskargrupper. Ett alternativ till DSS-modellen är den hapten-inducerade DNBS eller TNBS modeller av kolit. Denna modell använder rektal instillation av slemhinnor sensibiliserande ämnen DNBS eller TNBS, utspädda i varierande koncentrationer av etanol. Administreringen av etanol är en förutsättning för att bryta den colonic mucosal barriären för att medge penetrering av DNBS eller TNBS i lamina propria. DNBS / TNBS kommer sedan haptenize de lokaliserade kolon och tarmmikrobiella proteiner för att bli immunogena, vilket orsakade den värd medfödda och adaptiva immunsvar. I allmänhet är denna modell i samband med allvarlig och ibland blodig diarré, viktminskning och tarmvägg förtjockning men symptomen varierar beroende på vilken typ av gnagare som används, liksom tidpunkten, dosen och graden av exponering för DNBS eller TNBS används i studien. Viktiga skillnader mellan råttor och möss bör noteras, med fördelarna av lägre kostnader för inköp och styrelse, samt lower kroppsmassa för att minska per-djur kostnader för behandling in vivo. Detta skall ställas mot den mer plötslig och svår kurs av kolit i möss, där de mer ömtåliga och lyhörda djur snabbt kan nå en human slutpunkt. Den tarminflammation leder initialt ur etanol-inducerad skada på tarmepitelceller, vilket leder till ökad epitelial permeabilitet, mikrobiell penetration in i slemhinnan, haptenization av värdproteiner, allt detta resulterar i infiltrering av neutrofiler, makrofager och Th1-T-lymfocyter in i den skadade slemhinnan. I jämförelse med DNBS är TNBS betraktas som en farlig kemikalie på grund av sin mycket oxidativa egenskaper som kan utgöra en risk för explosion vid kontakt med baser såsom natrium-och kaliumhydroxid. Därför DNBS för närvarande betraktas som en föredras av kemikalier över TNBS att framkalla kolit. Hos gnagare är DNBS kolit anses som en av de mest praktiska metoder för att studera fölvinge IBD associerade modifierare av sjukdom: <ol><li> Depression och reaktivering av kolit: Det har visat att stress, ångest och depression i IBD-patienter är ofta förknippade med sjukdomen återfall. DNBS kolit är en lämplig modell för att studera rollen av depression och dess konsekvenser på reaktivering av kolit i möss. Metoden innebär normalt initial induktion av kolit av DNBS, följt av upplösning av kolit genom att lämna möss i 6-8 veckor. Mössen administreras sedan med depression som orsakar medel såsom reserpin eller lukt bulbectomy att framkalla depression följt av att testa dem för reaktivering av kolit genom utmaning med en subcolitic dos DNBS 2. </li><li> Stress och reaktivering av kolit: Stress är en annan gemensam miljöfaktor som har kopplats till IBD patogenes. Det finns en växande mängd bevis som tyder på ett starkt samband mellan kronisk stress och uppkomsten av symtom på UC och CD i gnagares liksom hos människor och icke-mänskliga primater 3. DNBS kolit är en bra modell för att studera stress associerad reaktivering av kolit hos både möss och råttor. Metoden användes vanligen på ett liknande sätt som nämnts ovan för depression utom i stället för fördjupningen djuren utsätts för stressfaktorer såsom sonisk och återhållsamhet stressen 4. </li><li> Neurogen inflammation: Ett antal studier har beskrivit antingen övergående eller permanenta förändringar i det enteriska nervsystemet (ENS) struktur och funktion, vilket kan ses i vävnadsprover från djurmodeller och från patienter med IBD. DNBS är en bra modell för att undersöka effekterna av inflammation på ENS 5 och studera både noradrenerga och kolinerga nervbanor 6. </li><li> Skada-reparationsmekanismer: Under IBD patogenes, värd-härledda skade mediatorer som reaktiva syreradikaler (ROS), kväveoxid (NO), intercellulär adhesionsmolekyl 3 (ICAM-3) och P-selektin har alla visat sig plägga en roll i intestinal epithelial störningar. DNBS är en utmärkt modell för att studera skador orsakade av uppreglering av dessa mediatorer samt reparationsmekanismer som regleras med hjälp av selektiva läkemedel eller hämmare 7,8. </li><li> Transmural inflammation: Förutom de ovan nämnda tillämpningar av DNBS, modellen kan också användas för att studera transmural inflammation i tarmen, en klassisk funktion hos patienter med CD. Både DNBS och TNBS-inducerad kolit är förknippade med betydande infiltration av lymfocyter, in kolonmukosa gör dessa modeller särskilt användbart för att studera T-cellsberoende immunmekanismer. </li></ol> Jämfört med DSS-modellen, fördelarna med DNBS och TNBS-inducerade kolit innefattar låg kostnad, snabb utveckling av kolit (kräver vanligtvis 1-3 dagar att visa reproducerbar sår och inflammation) och konsekvent lokaliserad skada på distala kolon. Men nackdelarna är ett krav på enhögre teknisk kompetens, optimering av DNBS / TNBS dos, och behovet av anestesi för rektal administrering. I detta metod papper studerade vi effekterna av olika koncentrationer av n-6 och n-3 fleromättade fettsyror på att förändra kolon mukosalt svar på DNBS-inducerad kolit hos råttor genom att använda vegetabiliska oljor safflorolja (SO) och rapsolja (CO) , och fiskolja (FO). Det har visat sig att n-6 och n-3-fettsyror är viktiga mediatorer av intestinala inflammatoriska sjukdomar genom deras roll som acylenheter av cellmembran phosopholipids 9. I motsats till den proinflammatoriska potentialen av n-6-fettsyror, n-3-fettsyror vid tillräckligt höga intag är potentiellt potenta anti-inflammatoriska medel. De antiinflammatoriska åtgärder av n-3-fettsyror förmedlas direkt genom ersättning av arakidonsyra som eikosanoid substrat, hämma arakidonsyrametabolism och indirekt genom förändring av proinflammatory genuttryck och cellsignalering. De n-3-fettsyror ger också upphov till resol, en familj av anti-inflammatoriska mediatorer. Högt intag av n-3-fettsyror är associerad med en minskning i produktionen av proinflammatoriska eikosanoider, cytokiner, kemokiner, reaktiva syretyper och uttryck av vidhäftningsmolekyler. I denna studie gavs råttor matades ad libitum dieter identiska i samtliga näringsämnen förutom fettsyror, med, som en procent energi från fett, 20% SO, 20% CO, eller 18% fiskolja plus 2% safflorolja (FO) 10-11 . I procent av det dagliga energi, SO kost förutsatt 15% linolsyra (LA), med &lt;0,06% α-linolensyra (ALA) och ingen eikosapentaensyra (EPA) och dokosahexaensyra (DHA), hade CO kost 4.2 % LA och 1,9% ALA utan EPA och DHA, och FO dieten förutsatt 1,4% EPA, 4,9% DHA, 0,32% LA, och 0,12% ALA. Tre veckor efter initiering av fettdieter, mössen administrerades intrarektala DNBS eller 50% etanol och avlivades 5 dagar senare. Den inflammatory respons utvärderades genom bedömning av viktminskning, histologiska skador poäng och vävnads myeloperoxidasaktivitet.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="627">
	<colgroup>
		<col />
		<col /> 
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">1 mL syringe</td>
			<td style="width:121px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">309659</td>
			<td style="width:167px;"> </td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">19 gauge needle</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>305187</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-50</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427517</td>
			<td>for intra-rectal administration in mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene tubing PE-90</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>427519</td>
			<td>for intra-rectal administration in rat</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DNBS</td>
			<td>MP Bio</td>
			<td>150959</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">tear gel</td>
			<td>Novartis</td>
			<td>63601662596</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Formalin</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>5F93-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">warming pad</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>TPZ-0510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A-962.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">hexadecyltrimethyl-ammonium bromide</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>H5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium phosphate buffer solution</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>79628-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:220px;">O-dianisidine dihydrochloride</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>D3252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">30% H2O2</td>
			<td style="width:121px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>31642</td>
			<td>hydrogen peroxide</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spectrophotometer</td>
			<td>BIORAD</td>
			<td>Benchmarker Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Light Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Image.Z1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Data analysis software program </td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td style="width:119px;"> GraphPad Prism Software Version 4.00 </td>
			<td><a href="http://www.graphpad.com/">San Diego California USA, www.graphpad.com</a></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dnbs/tnbs colitis models: providing insights into inflammatory bowel disease and effects of dietary fat

Inflammatoriska tarmsjukdomar (IBD), inklusive Crohns sjukdom och ulcerös kolit, har länge varit förknippad med en genetisk grund, och mera nyligen värd immunsvar mot mikrobiella och faktorer i miljön. Dinitrobensen sulfonsyra (DNBS)-inducerad kolit gör att man kan studera patogenesen för IBD tillhörande miljö-triggers som stress och kost, effekter av potentiella terapier, och mekanismerna bakom tarminflammation och mucosal skada. I denna skrift har vi undersökt effekterna av diet n-3 och n-6-fettsyror på colonic mucosal inflammatoriska svaret på DNBS-inducerad kolit hos råttor. Alla råttorna matades identiska dieter med undantag för olika typer av fettsyror [tistelolja (SO), rapsolja (CO) eller fiskolja (FO)] under tre veckor före exponering för intrarektal DNBS. Kontroll råttor som fick intrarektal etanol fortsatte upp i vikt under 5 dagars studie, medan, DNBS-behandlade råttor som matats fettdieter alla lost vikt med FO och CO matade råttor visar betydande viktminskning med 48 timmar och råttor som matats SO med 72 tim. Viktökning återupptas efter 72 timmar efter DNBS, och 5 dagar efter DNBS hade FO-gruppen en högre kroppsvikt än SO eller CO-grupper. Kolon sektioner samlas fem dagar efter DNBS-behandling visade fokal sår, crypt förstörelse, bägare cellbristen, och mucosal infiltration av både akuta och kroniska inflammatoriska celler som skilde sig i svårighetsgrad mellan dietgrupperna. Den så trött gruppen visade den allvarligaste skadan, följt av CO, och FO matade grupper som visade den mildaste graden av vävnadsskada. Likaså colonic myeloperoxidas (MPO)-aktivitet, en markör för neutrofil aktivitet var signifikant högre i den följd av CO matade råttor, med FO råttor matade med signifikant lägre MPO-aktivitet. Dessa resultat visar att användningen av DNBS-inducerad kolit, som beskrivs i detta protokoll, för att bedöma effekten av dieten i patogenesen för IBD.

Utmaning av råttor (Sprague-Dawley) eller möss (C57BL / 6) med DNBS resulterar normalt i övergående viktminskning och diarré, ibland med blod i avföringen. Däremot kan faktorer såsom genetik, kost och tarmfloran ändrar känsligheten för DNBS inducerad kolit. Därför djur som ingår i försöken bör vara från samma institution, antingen härledas lokalt eller beställas från ett djur leverantör. Alla djur bör övervakas noggrant för graden av viktminskning och symtom på ångest lidit under kolit. <p...

Watch this Scientific Journal Video about DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat at JoVE.com

DNBS/TNBS Colitis Models: Providing Insights Into Inflammatory Bowel Disease and Effects of Dietary Fat

DNBS / TNBS inducerad kolit erbjuder ett alternativ och billig metod för att studera pathobiologyen av inflammatorisk tarmsjukdom. Protokollet diskuteras i detta dokument beskriver en framgångsrik tillämpning av DNBS att inducera kolit hos möss och råttor, och gör att man noggrant studera värdmedierad intestinal svar.

DNBS / TNBS kolit modeller: Ge Insights Into inflammatorisk tarmsjukdom och effekter av Dietary Fat

Inflammatory Bowel Diseases (IBD), including Crohn&#39;s Disease and Ulcerative Colitis, have long been associated with a genetic basis, and more recently ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1&beta; using a Whole Blood Stimulation Assay

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² using a Whole Blood Stimulation Assay

Noggrann och enkel mätning av pro-inflammatoriska cytokin IL-1β med hjälp av en hel analys Blood stimulering

Inflammatory processes resulting from the secretion of soluble mediators by immune cells, lead to various manifestations in skin, joints and other tissues ...

Segmentation and Measurement of Fat Volumes in Murine Obesity Models Using X-ray Computed Tomography

Segmentering och Mätning av FAT-volymer i murina fetma modeller med hjälp av X-ray datortomografi

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are ...

Gene-environment Interaction Models to Unmask Susceptibility Mechanisms in Parkinson's Disease

Modeller för genmiljöinteraktion för att avslöja känslighetsmekanismer vid Parkinsons sjukdom

Lipoxygenase (LOX) activity has been implicated in neurodegenerative disorders such as Alzheimer&#39;s disease, but its effects in Parkinson&#39;s disease ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mammary Fat Pad of Mice to Study Tumor Growth.

Orthotopic Injektion av bröstcancerceller i juverfett Pad av möss att studera tumörtillväxt.

Breast cancer growth can be studied in mice using a plethora of models. Genetic manipulation of breast cancer cells may provide insights into the ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Bedömning av livskraft Human Fat Injektion i nakna möss med Micro-datortomografi

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Therapeutic Effectiveness of a Dietary Supplement for Management of Halitosis in Dogs

Terapeutisk effektivitet kosttillskott för hantering av dålig andedräkt hos hundar

Halitosis is a common complaint involving social and communicational problems in humans and also affects the pet-owner relationship. In this randomized ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

Kirurgiska Modeller av gastroesofageal reflux med möss

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Ex vivo Intestinal Sacs att bedöma Mukös permeabilitet i Modeller av gastrointestinal sjukdom

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying ...

Transplantation Into the Mouse Ovarian Fat Pad

Transplantation i musen äggstocksfettkudden

Orthotopic transplantation assays in mice are invaluable for studies of cell regeneration and neoplastic transformation. Common approaches for orthotopic ...

Analyzing Beneficial Effects of Nutritional Supplements on Intestinal Epithelial Barrier Functions During Experimental Colitis

Analysera gynnsamma effekterna av Kosttillskott på intestinala epiteliala barriärfunktioner Under experimentell kolit

Inflammatory bowel diseases (IBD), including Crohn&#39;s disease and ulcerative colitis, are chronic relapsing disorders of the intestines. They cause ...