Name: tissue engineering of tumor stromal microenvironment with application to cancer cell invasion
Uploaded: 2014-03-18T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion at JoVE.com

APS è supportato da Debra International e la Fondazione britannica pelle. YZN è sostenuta da A * STAR - Università di Dundee partenariato Dottorato.

Questo studio è stato condotto secondo la Dichiarazione di Helsinki Principi ed è stato approvato dai comitati etici competenti. 1. Preparazione dei Media e reagenti <ol><li> Preparazione di 200x di acido L-ascorbico 2-fosfato magazzino <ol><li> Sciogliere 29 mg di acido L-ascorbico 2-fosfato per 5 ml di soluzione di Dulbecco Modified mezzo di Eagle (DMEM) e filtrare attraverso filtro a membrana 0,22 micron. Store come 0,25 ml aliquote sterili -20 ° C. </li><li> Aggiungere 0,25 ml un&#3...

<ol>
	<li>Bell, E., Ehrlich, H. P., Buttle, D. J., Nakatsuji, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Living+tissue+formed+in+vitro+and+accepted+as+skin-equivalent+tissue+of+full+thickness.">Living tissue formed in vitro and accepted as skin-equivalent tissue of full thickness.</a> Science. 211 (4486), 1052-1054 (1981).</li><li>Asselineau, D., Bernhard, B., Bailly, C., Darmon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+morphogenesis+and+induction+of+the+67+kD+keratin+polypeptide+by+culture+of+human+keratinocytes+at+the+liquid-air+interface.">Epidermal morphogenesis and induction of the 67 kD keratin polypeptide by culture of human keratinocytes at the liquid-air interface.</a> Exp. Cell Res. 159 (2), 536-539 (1985).</li><li>Pruni&#233;ras, M. M., R&#233;gnier, M. M., Woodley, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+Cultivation+of+Keratinocytes+with+an+Air-Liquid+Interface.">Methods for Cultivation of Keratinocytes with an Air-Liquid Interface.</a> J. Invest. Dermatol. 81 (1 Suppl), 28-33 (1983).</li><li>Prunieras, M., R&#233;gnier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+procedure+for+culturing+human+epidermal+cells+on+allogenic+or+xenogenic+skin:+preparation+of+recombined+grafts.">New procedure for culturing human epidermal cells on allogenic or xenogenic skin: preparation of recombined grafts.</a> Ann. Chir. Plast. 24 (4), 357-362 (1979).</li><li>Gaggioli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-led+collective+invasion+of+carcinoma+cells+with+differing+roles+for+RhoGTPases+in+leading+and+following+cells.">Fibroblast-led collective invasion of carcinoma cells with differing roles for RhoGTPases in leading and following cells.</a> Nature. 9 (12), 1392-1400 (2007).</li><li>Bhowmick, N. A., Neilson, E. G., Moses, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+fibroblasts+in+cancer+initiation+and+progression.">Stromal fibroblasts in cancer initiation and progression.</a> Nature. 432 (7015), 332-337 (2004).</li><li>Erez, N., Truitt, M., Olson, P., Hanahan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer-Associated+Fibroblasts+Are+Activated+in+Incipient+Neoplasia+to+Orchestrate+Tumor-Promoting+Inflammation+in+an+NF-&#954;B-Dependent.">Cancer-Associated Fibroblasts Are Activated in Incipient Neoplasia to Orchestrate Tumor-Promoting Inflammation in an NF-&#954;B-Dependent.</a> Manner. Cancer Cell. 17 (2), 135-147 (2010).</li><li>Harkness, R. D., Marko, A. M., Muir, H. M., Neuberger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+metabolism+of+collagen+and+other+proteins+of+the+skin+of+rabbits.">The metabolism of collagen and other proteins of the skin of rabbits.</a> Biochem. J. 56 (4), 558-569 (1954).</li><li>Ehrmann, R. L., Gey, G. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+growth+of+cells+on+a+transparent+gel+of+reconstituted+rat-tail+collagen.">The growth of cells on a transparent gel of reconstituted rat-tail collagen.</a> J. Natl. Cancer Inst. 16 (6), 1375-1403 (1956).</li><li>Kleinman, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basement+membrane+complexes+with+biological+activity.">Basement membrane complexes with biological activity.</a> Biochemistry. 25 (2), 312-318 (1986).</li><li>Vukicevic, S., Kleinman, H. K., Luyten, F. P., Roberts, A. B., Roche, N. S., Reddi, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+active+growth+factors+in+basement+membrane+Matrigel+suggests+caution+in+interpretation+of+cellular+activity+related+to+extracellular+matrix+components.">Identification of multiple active growth factors in basement membrane Matrigel suggests caution in interpretation of cellular activity related to extracellular matrix components.</a> Exp. Cell Res. 202 (1), 1-8 (1992).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BD+Biosciences+-+Discover+Labware.">BD Biosciences - Discover Labware.</a> SPC-356230 Rev 5.0 at Rev 5.0. , .</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>Ng, Y. Z., Dayal, J. H., South, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+Predisposition+to+Cutaneous+Squamous+Cell+Carcinoma.">Genetic Predisposition to Cutaneous Squamous Cell Carcinoma.</a> , .</li><li>Christiano, A. M. A., Greenspan, D. S. D., Lee, S. S., Uitto, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloning+of+human+type+VII+collagen.+Complete+primary+sequence+of+the+alpha+1(VII)+chain+and+identification+of+intragenic+polymorphisms.">Cloning of human type VII collagen. Complete primary sequence of the alpha 1(VII) chain and identification of intragenic polymorphisms.</a> J. Biol. Chem. 269 (32), 20256-20262 (1994).</li><li>Hovnanian, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+linkage+of+recessive+dystrophic+epidermolysis+bullosa+to+the+type+VII+collagen+gene.">Genetic linkage of recessive dystrophic epidermolysis bullosa to the type VII collagen gene.</a> J. Clin. Invest. 90 (3), 1032-1036 (1992).</li><li>Ryyn&#228;nen, M. M., Ryyn&#228;nen, J. J., Sollberg, S. S., Iozzo, R. V. R., Knowlton, R. G. R., Uitto, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+linkage+of+type+VII+collagen+(COL7A1)+to+dominant+dystrophic+epidermolysis+bullosa+in+families+with+abnormal+anchoring+fibrils.">Genetic linkage of type VII collagen (COL7A1) to dominant dystrophic epidermolysis bullosa in families with abnormal anchoring fibrils.</a> J. Clin. Invest. 89 (3), 974-980 (1992).</li><li>Ng, Y. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-derived+dermal+matrix+drives+development+of+aggressive+cutaneous+squamous+cell+carcinoma+in+patients+with+recessive+dystrophic+epidermolysis+bullosa.">Fibroblast-derived dermal matrix drives development of aggressive cutaneous squamous cell carcinoma in patients with recessive dystrophic epidermolysis bullosa.</a> Cancer Res. 72 (14), 3522-3534 (2012).</li><li>Larouche, D., Paquet, C., Fradette, J., Carrier, P., Auger, F. A., Germain, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+15.">Chapter 15.</a> Methods Mol. Biol. 482, 233-256 (2009).</li><li>Pouliot, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstructed+human+skin+produced+in+vitro+and+grafted+on+athymic+mice).">Reconstructed human skin produced in vitro and grafted on athymic mice).</a> Transplantation. 73 (11), 1751-1757 (2002).</li><li>Purdie, K. J., Pourreyron, C., South, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+squamous+cell+carcinoma+lines.">Isolation and culture of squamous cell carcinoma lines.</a> Methods Biol. 731, 151-159 (2011).</li><li>Pinnell, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+collagen+biosynthesis+by+ascorbic+acid:+a+review.">Regulation of collagen biosynthesis by ascorbic acid: a review.</a> Yale J. Biol. Med. 58 (6), 553-559 (1985).</li><li>Hata, R., Senoo, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-ascorbic+acid+2-phosphate+stimulates+collagen+accumulation,+cell+proliferation,+and+formation+of+a+three-dimensional+tissuelike+substance+by+skin+fibroblasts.">L-ascorbic acid 2-phosphate stimulates collagen accumulation, cell proliferation, and formation of a three-dimensional tissuelike substance by skin fibroblasts.</a> J. Cell. Physiol. 138 (1), 8-16 (1988).</li></ol>

A causa della natura di questo esperimento, il tempo totale necessario per il completamento può essere fino a due mesi. In tutto questo tempo, di cura e del tessuto sterile necessità pratiche di coltura devono essere impiegati per prevenire la contaminazione microbica. Oltre al suo ruolo come cofattore nella sintesi di idrossiprolina e idrossilisina di collagene, acido ascorbico stimola il collagene specifico mRNA in fibroblasti 22. L&#39;acido ascorb...

L&#39;uso di biomateriale in coltura tissutale 3D ha permesso ai ricercatori di studiare il comportamento delle cellule in laboratorio in condizioni fisiologiche più simile ad un ambiente in vivo di quella di una ricapitolato con adesione 2D e un substrato di plastica. In particolare, grandi passi avanti sono stati fatti nella modellazione epiteli stratificati con l&#39;adozione di metodi di coltura 3D all&#39;interfaccia aria-liquido 1-4. Tali tecniche fedelmente imitare differenziazione dei cheratinociti e l&#39;invasione delle cellule tumorali consentendo una maggiore flessibilità e fedeltà per i ricercatori che studiano questi processi. La scelta del substrato biomateriale per simulare l&#39;ambiente stromale ha principalmente comportato l&#39;uso di collagene di tipo I, Engelbreth-Holm-Swarm topo matrice sarcoma e derma de-epidermized. Ad esempio, fibroblasti cancro-associate hanno dimostrato di contribuire verso invasione cancro 5, iniziazione e progressione attraverso interazioni stroma-epiteliale 6,7 when coltivato in tali substrati. Il gold standard per mimare l&#39;ambiente stromale in pelle, più grandi e più studiati epiteli stratificati utilizzando tali tecniche, è considerato di essere de-epidermized derma umano (DED). Preparazione del DED comporta la rimozione dell&#39;epidermide mediante tripsinizzazione o dissociazione fisica dalla pelle 3,4 cadavere umano. Tuttavia, l&#39;accesso a tali pelle può essere molto difficile per i laboratori non connessi con le istituzioni cliniche e derma malati è quasi impossibile da ottenere. In alternativa, laboratori utilizzano frequentemente una combinazione di collagene di tipo I (isolato da code di ratto) e / o la matrice del mouse Engelbreth-Holm-Swarm sarcoma. Dopo la scoperta nel 1927 da Nageotte 8 che il collagene può essere facilmente isolato con acido acetico e precipitazione di sali, la sua applicazione alla coltura di tessuti è stata successivamente lanciato da Huzella e colleghi 9. Rivestimento di collagene ha dimostrato di essere superiore al vetro per coltura cellulare di 29 ceppi e espianti di tessuto come interrogati dai Ehrmann e Gey 9. Attualmente, il principale tipo di collagene utilizzato in coltura tissutale è isolato da tendini ratto-coda, ed è solitamente acquistato da fonti commerciali. Tuttavia, lo svantaggio di fedeli substrato ricapitolazione è che il collagene ratto coda non è identico al collagene umano, o il derma umano, dove tipo I e III collageni sono presenti come costituenti principali, e isolato di ratto coda collagene è invariabilmente frammentato. Engelbreth-Holm-Swarm matrice del mouse sarcoma è una miscela proteica gelatinosa secreta dalle colture Engelbreth-Holm-Swarm cellule di topo sarcoma 10. I principali componenti sono laminina, collagene di tipo IV, eparina solfato proteoglicani, entactin e nidogen e le esatte rapporti di queste proteine ​​possono variare da lotto a lotto. Oltre a pro strutturaleproteine, questa matrice contiene anche significativi livelli di fattori di crescita come trasformare β fattore di crescita, fattore di crescita epidermico, insulin-like growth factor 1, bovini fattore di crescita dei fibroblasti, e fattore di crescita derivato dalle piastrine che altererebbe comportamento cellulare 11,12. Che punta verso la complessità del Engelbreth-Holm-Swarm matrice del mouse sarcoma, per un totale di 1851 proteine ​​sono stati identificati in un recente studio di proteomica 13. Alla luce della natura ricca e complessa di questa matrice, la cautela è stata informata quando interpretano e confronto diverse esperienze con l&#39;uso di esso 11. I nostri laboratori hanno un forte interesse per le malattie genetiche della pelle, in particolare quelli con una predisposizione a sviluppare un carcinoma cutaneo a cellule squamose (CSCC) 14. Nel caso di epidermolisi bollosa distrofica recessiva (RDEB), una grave malattia vesciche con mutazioni germinali del gene COL7A1 <sup&gt; 15-17, abbiamo stabilito che il microambiente cutaneo in questi pazienti è dipromozione 18. Nel corso di questo studio siamo stati in grado di valutare il tumore promuovendo proprietà dei fibroblasti dermici incorporati all&#39;interno di collagene I / Engelbreth-Holm-Swarm topo matrice sarcoma e studiati metodi di valutazione propri, matrice nativa cellule. Per raggiungere questo obiettivo, abbiamo modificato una tecnica precedente dal laboratorio di Lucie Germain lavorare su pelle umana equivalenti 19,20. La tecnica di Germain era in grado di ricostruire la pelle umana con membrana basale ben organizzato utilizzando cheratinociti umani e colture primarie di fibroblasti in assenza di un ponteggio sintetico o cadaverico. In questo lavoro i passaggi utilizzati per riepilogare il microambiente cutaneo tumore stromale (matrice nativa) desunte direttamente dai fibroblasti stromali primarie in vitro sono descritti 18. Matrici Native produced da coltura a lungo termine di fibroblasti sono stati utilizzati come dermico equivalente al saggio per l&#39;invasione delle cellule CSCC. Vi presentiamo i dati utilizzando matrice nativa derivata sia dalla matrice extracellulare secreta dai fibroblasti RDEB (deficit di tipo VII collagene (C7)) o da fibroblasti RDEB retrovirally trasdotte con un tipo di collagene VII esprimere costruire e dimostrare l&#39;effetto profondo di un singolo collagene su tumore invasione delle cellule.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="352">
	<colgroup>
		<col span="4" style="width:66pt" width="88" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="64" style="height:48.0pt">
			<td class="xl63" height="64" style="height:48.0pt;width:66pt" width="88">L-Ascorbic acid 2-phosphate</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Sigma</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">A8960</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl65" height="42" style="height:31.5pt;width:66pt" width="88">DMEM with l-glutamine,</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88">Life Technologies</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88">11995-073</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="106" style="height:79.5pt">
			<td class="xl63" height="106" style="height:79.5pt;width:66pt" width="88">4,500 mg/L d-glucose, 110 mg/L sodium pyruvate</td>
		</tr>
		<tr height="85" style="height:63.75pt">
			<td class="xl63" height="85" style="height:63.75pt;width:66pt" width="88">100x Penicillin-Streptomycin</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Life Technologies</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">15070</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="43" style="height:32.25pt">
			<td class="xl63" height="43" style="height:32.25pt;width:66pt" width="88">Vaseline</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">VWR</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">PROL28908.290</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="43" style="height:32.25pt">
			<td class="xl63" height="43" style="height:32.25pt;width:66pt" width="88">Clonal cylinders</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Sigma</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Z370789</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="148" style="height:111.0pt">
			<td class="xl63" height="148" style="height:111.0pt;width:66pt" width="88">Nylon Net Filter Disc Hydrophilic 100um 25um diameter 100/pk</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Millipore</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">NY1H02500</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="127" style="height:95.25pt">
			<td class="xl63" height="127" style="height:95.25pt;width:66pt" width="88">Bent stainless steel wire mesh support</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Made in house</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88"></td>
			<td class="xl66" style="width:66pt" width="88">Dimensions were made so that the mesh would fit into 6-well plates</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tissue engineering of tumor stromal microenvironment with application to cancer cell invasion

Colture organotipiche 3D di cellule epiteliali su una matrice incorporata con cellule mesenchimali sono ampiamente utilizzati per studiare la differenziazione delle cellule epiteliali e invasione. Tipo di coda di ratto collagene e / o matrice derivata da cellule topo sarcoma Engelbreth-Holm-Swarm è stato tradizionalmente impiegato come substrati per modellare il microambiente stromale o matrice in cui le cellule mesenchimali (di solito fibroblasti) sono popolate. Sebbene esperimenti utilizzando tali matrici sono molto informativo, si può affermare che a causa di una presenza prevalente di una singola proteina (come nel collagene tipo I) o un alto contenuto di componenti della membrana basale e fattori di crescita (come in matrice derivata da topo cellule di sarcoma), questi substrati non meglio riflettono il contributo alla composizione della matrice fatta dalle stesse cellule stromali. Per studiare matrici native prodotte da fibroblasti dermici primari isolati da pazienti con un tumore prona, vesciche disordine genetico (distrofica recessivaepidermolisi bollosa), abbiamo adattato un protocollo matrice originaria esistente per studiare l&#39;invasione delle cellule tumorali. I fibroblasti sono indotte a produrre la propria matrice per un periodo prolungato in coltura. Questa matrice nativa viene poi staccato dal piatto di coltura e le cellule epiteliali vengono seminate su di esso prima che l&#39;intera co-coltura viene generato all&#39;interfaccia aria-liquido. Differenziazione e / o invasione cellulare possono essere valutati nel tempo. Questa tecnica consente di valutare le interazioni delle cellule epiteliali-mesenchimali in un ambiente 3D senza la necessità di una matrice sintetica o estere con l&#39;unico svantaggio è il periodo prolungato di tempo richiesto per produrre la matrice nativa. Qui si descrive l&#39;applicazione di questa tecnica per valutare la capacità di una singola molecola espressa dai fibroblasti, collagene tipo VII, di inibire l&#39;invasione delle cellule tumorali.

<html> Questa tecnica apre la possibilità di esaminare e confrontare il comportamento invasivo di cellule tumorali (in questo caso CSCC) in differenti ambienti stromali 3D. Utilizzando questa tecnica, non solo le matrici native C7-deficienti che ricapitolato l&#39;ambiente RDEB cutanea possono essere generati, ma anche matrici aggiuntivi che sono stati geneticamente modificati per over-esprimono C7 18. Come si vede nella figura 2, invasione di cheratinociti RDEB CSCC era significativamente ri...

Watch this Scientific Journal Video about Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion at JoVE.com

Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion

Ingegneria dei tessuti del tumore stromale Microenvironment con l&#39;applicazione di Invasion Cancer Cell

Ingegneria tessutale fibroblasti derivati ​​da matrice nativa è uno strumento emergente per generare un substrato stromale che supporta la proliferazione delle cellule epiteliali e differenziazione. Ecco un protocollo di applicazione di tale metodologia per valutare l&#39;impatto dei diversi tipi di cellule stromali sulla biologia delle cellule tumorali è presentato.

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Microfluidic Device for Recreating a Tumor Microenvironment in Vitro

Microfluidic Device for Recreating a Tumor Microenvironment in Vitro

Dispositivo Microfluidic per ricreare un microambiente tumorale<em&gt; In Vitro</em

We have developed a microfluidic device that mimics the delivery and systemic clearance of drugs to heterogeneous three-dimensional tumor tissues in ...

Ricerca

Bioingegneria

Directed Cellular Self-Assembly to Fabricate Cell-Derived Tissue Rings for Biomechanical Analysis and Tissue Engineering

Diretto Cellular Self-Assembly di fabbricare Cell-Derived Anelli tessuto per l&#39;analisi biomeccanica e di ingegneria dei tessuti

Each year, hundreds of thousands of patients undergo coronary artery bypass surgery in the United States.1 Approximately one third of these patients do ...

Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion

Tridimensionale Cultura modello cellulare per misurare gli effetti del flusso del fluido interstiziale sulla Invasion cellule tumorali

The growth and progression of most solid tumors depend on the initial transformation of the cancer cells and their response to stroma-associated signaling ...

Engineering Skeletal Muscle Tissues from Murine Myoblast Progenitor Cells and Application of Electrical Stimulation

Ingegneria tessuti muscolo scheletrico di cellule murine progenitrici mioblasti e di applicazione di stimolazione elettrica

Engineered muscle tissues can be used for several different purposes, which include the production of tissues for use as a disease model in vitro, e.g. to ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Ingegneria dei tessuti di un Umano 3D<em&gt; In vitro</em&gt; Sistema Tumore test

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Engineering Fibrin-based Tissue Constructs from Myofibroblasts and Application of Constraints and Strain to Induce Cell and Collagen Reorganization

Ingegneria fibrina a base di tessuto costrutti da miofibroblasti e applicazione di vincoli e la tensione per indurre Organizzazione cellulare e collagene (Re)

Collagen content and organization in developing collagenous tissues can be influenced by local tissue strains and tissue constraint. Tissue engineers aim ...

Long-term Intravital Immunofluorescence Imaging of Tissue Matrix Components with Epifluorescence and Two-photon Microscopy

A lungo termine intravitale immunofluorescenza Imaging di tessuto componenti della matrice con Epifluorescenza e due fotoni Microscopia

Besides being a physical scaffold to maintain tissue morphology, the extracellular matrix (ECM) is actively involved in regulating cell and tissue ...

Concentric Gel System to Study the Biophysical Role of Matrix Microenvironment on 3D Cell Migration

Concentric Sistema Gel per studiare il ruolo biofisica di Matrix Microenvironment sulla migrazione Cell 3D

The ability of cells to migrate is crucial in a wide variety of cell functions throughout life&#160;from embryonic development and wound healing&#160;to ...

Sandwich-like Microenvironments to Harness Cell/Material Interactions

Microambienti sandwich di sfruttare Cellulari / Materiale Interazioni

Cell culture has been traditionally carried out on bi-dimensional (2D) substrates where cells adhere using ventral receptors to the biomaterial surface. ...

In Vitro Model of Physiological and Pathological Blood Flow with Application to Investigations of Vascular Cell Remodeling

In Vitro Model of Physiological and Pathological Blood Flow with Application to Investigations of Vascular Cell Remodeling

Modello in vitro di fisiologiche e patologiche flusso sanguigno con applicazione di indagini di rimodellamento vascolare cellulare

Vascular disease is a common cause of death within the United States. Herein, we present a method to examine the contribution of flow dynamics towards ...