Name: tissue engineering of tumor stromal microenvironment with application to cancer cell invasion
Uploaded: 2014-03-18T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion at JoVE.com

APS er støttet av Debra International og British Skin Foundation. YZN støttes av A * STAR - University of Dundee Partner PhD-programmet.

Denne undersøkelsen ble gjennomført i henhold til Helsinkideklarasjonen Prinsipper og ble godkjent av de relevante etiske komiteer. En. Utarbeidelse av Media og reagenser <ol><li> Fremstilling av 200x av L-askorbinsyre 2-fosfat lager <ol><li> Oppløs 29 mg av L-askorbinsyre 2-fosfat pr 5 ml av Dulbeccos modifiserte Eagles medium (DMEM)-løsning og filtreres gjennom 0,22 um membranfilter. Lagre som 0,25 ml sterile alikvoter i -20 ° C. </li><li> Til 0,25 ml alikvot av 200x L-askorbinsyre ...

<ol>
	<li>Bell, E., Ehrlich, H. P., Buttle, D. J., Nakatsuji, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Living+tissue+formed+in+vitro+and+accepted+as+skin-equivalent+tissue+of+full+thickness.">Living tissue formed in vitro and accepted as skin-equivalent tissue of full thickness.</a> Science. 211 (4486), 1052-1054 (1981).</li><li>Asselineau, D., Bernhard, B., Bailly, C., Darmon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+morphogenesis+and+induction+of+the+67+kD+keratin+polypeptide+by+culture+of+human+keratinocytes+at+the+liquid-air+interface.">Epidermal morphogenesis and induction of the 67 kD keratin polypeptide by culture of human keratinocytes at the liquid-air interface.</a> Exp. Cell Res. 159 (2), 536-539 (1985).</li><li>Pruni&#233;ras, M. M., R&#233;gnier, M. M., Woodley, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+Cultivation+of+Keratinocytes+with+an+Air-Liquid+Interface.">Methods for Cultivation of Keratinocytes with an Air-Liquid Interface.</a> J. Invest. Dermatol. 81 (1 Suppl), 28-33 (1983).</li><li>Prunieras, M., R&#233;gnier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+procedure+for+culturing+human+epidermal+cells+on+allogenic+or+xenogenic+skin:+preparation+of+recombined+grafts.">New procedure for culturing human epidermal cells on allogenic or xenogenic skin: preparation of recombined grafts.</a> Ann. Chir. Plast. 24 (4), 357-362 (1979).</li><li>Gaggioli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-led+collective+invasion+of+carcinoma+cells+with+differing+roles+for+RhoGTPases+in+leading+and+following+cells.">Fibroblast-led collective invasion of carcinoma cells with differing roles for RhoGTPases in leading and following cells.</a> Nature. 9 (12), 1392-1400 (2007).</li><li>Bhowmick, N. A., Neilson, E. G., Moses, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+fibroblasts+in+cancer+initiation+and+progression.">Stromal fibroblasts in cancer initiation and progression.</a> Nature. 432 (7015), 332-337 (2004).</li><li>Erez, N., Truitt, M., Olson, P., Hanahan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer-Associated+Fibroblasts+Are+Activated+in+Incipient+Neoplasia+to+Orchestrate+Tumor-Promoting+Inflammation+in+an+NF-&#954;B-Dependent.">Cancer-Associated Fibroblasts Are Activated in Incipient Neoplasia to Orchestrate Tumor-Promoting Inflammation in an NF-&#954;B-Dependent.</a> Manner. Cancer Cell. 17 (2), 135-147 (2010).</li><li>Harkness, R. D., Marko, A. M., Muir, H. M., Neuberger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+metabolism+of+collagen+and+other+proteins+of+the+skin+of+rabbits.">The metabolism of collagen and other proteins of the skin of rabbits.</a> Biochem. J. 56 (4), 558-569 (1954).</li><li>Ehrmann, R. L., Gey, G. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+growth+of+cells+on+a+transparent+gel+of+reconstituted+rat-tail+collagen.">The growth of cells on a transparent gel of reconstituted rat-tail collagen.</a> J. Natl. Cancer Inst. 16 (6), 1375-1403 (1956).</li><li>Kleinman, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basement+membrane+complexes+with+biological+activity.">Basement membrane complexes with biological activity.</a> Biochemistry. 25 (2), 312-318 (1986).</li><li>Vukicevic, S., Kleinman, H. K., Luyten, F. P., Roberts, A. B., Roche, N. S., Reddi, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+active+growth+factors+in+basement+membrane+Matrigel+suggests+caution+in+interpretation+of+cellular+activity+related+to+extracellular+matrix+components.">Identification of multiple active growth factors in basement membrane Matrigel suggests caution in interpretation of cellular activity related to extracellular matrix components.</a> Exp. Cell Res. 202 (1), 1-8 (1992).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BD+Biosciences+-+Discover+Labware.">BD Biosciences - Discover Labware.</a> SPC-356230 Rev 5.0 at Rev 5.0. , .</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>Ng, Y. Z., Dayal, J. H., South, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+Predisposition+to+Cutaneous+Squamous+Cell+Carcinoma.">Genetic Predisposition to Cutaneous Squamous Cell Carcinoma.</a> , .</li><li>Christiano, A. M. A., Greenspan, D. S. D., Lee, S. S., Uitto, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloning+of+human+type+VII+collagen.+Complete+primary+sequence+of+the+alpha+1(VII)+chain+and+identification+of+intragenic+polymorphisms.">Cloning of human type VII collagen. Complete primary sequence of the alpha 1(VII) chain and identification of intragenic polymorphisms.</a> J. Biol. Chem. 269 (32), 20256-20262 (1994).</li><li>Hovnanian, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+linkage+of+recessive+dystrophic+epidermolysis+bullosa+to+the+type+VII+collagen+gene.">Genetic linkage of recessive dystrophic epidermolysis bullosa to the type VII collagen gene.</a> J. Clin. Invest. 90 (3), 1032-1036 (1992).</li><li>Ryyn&#228;nen, M. M., Ryyn&#228;nen, J. J., Sollberg, S. S., Iozzo, R. V. R., Knowlton, R. G. R., Uitto, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+linkage+of+type+VII+collagen+(COL7A1)+to+dominant+dystrophic+epidermolysis+bullosa+in+families+with+abnormal+anchoring+fibrils.">Genetic linkage of type VII collagen (COL7A1) to dominant dystrophic epidermolysis bullosa in families with abnormal anchoring fibrils.</a> J. Clin. Invest. 89 (3), 974-980 (1992).</li><li>Ng, Y. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-derived+dermal+matrix+drives+development+of+aggressive+cutaneous+squamous+cell+carcinoma+in+patients+with+recessive+dystrophic+epidermolysis+bullosa.">Fibroblast-derived dermal matrix drives development of aggressive cutaneous squamous cell carcinoma in patients with recessive dystrophic epidermolysis bullosa.</a> Cancer Res. 72 (14), 3522-3534 (2012).</li><li>Larouche, D., Paquet, C., Fradette, J., Carrier, P., Auger, F. A., Germain, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+15.">Chapter 15.</a> Methods Mol. Biol. 482, 233-256 (2009).</li><li>Pouliot, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstructed+human+skin+produced+in+vitro+and+grafted+on+athymic+mice).">Reconstructed human skin produced in vitro and grafted on athymic mice).</a> Transplantation. 73 (11), 1751-1757 (2002).</li><li>Purdie, K. J., Pourreyron, C., South, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+squamous+cell+carcinoma+lines.">Isolation and culture of squamous cell carcinoma lines.</a> Methods Biol. 731, 151-159 (2011).</li><li>Pinnell, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+collagen+biosynthesis+by+ascorbic+acid:+a+review.">Regulation of collagen biosynthesis by ascorbic acid: a review.</a> Yale J. Biol. Med. 58 (6), 553-559 (1985).</li><li>Hata, R., Senoo, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-ascorbic+acid+2-phosphate+stimulates+collagen+accumulation,+cell+proliferation,+and+formation+of+a+three-dimensional+tissuelike+substance+by+skin+fibroblasts.">L-ascorbic acid 2-phosphate stimulates collagen accumulation, cell proliferation, and formation of a three-dimensional tissuelike substance by skin fibroblasts.</a> J. Cell. Physiol. 138 (1), 8-16 (1988).</li></ol>

På grunn av arten av dette forsøk, kan den totale tid som kreves for fullføring være opp til to måneder. I løpet av denne tiden må ytterste forsiktighet og sterile vevskultur fremgangsmåter anvendes for å forhindre mikrobiell forurensning. I tillegg til sin rolle som en kofaktor i syntesen av hydroksyprolin og hydroksylysin av kollagen, stimulerer askorbinsyre kollagenspesifikke mRNA ekspresjon i fibroblaster 22. Den askorbinsyre valg her er de...

Bruken av biomateriale i 3D vevskultur har gjort det mulig forskere for å studere oppførselen celle i laboratoriet under fysiologiske betingelser mer beslektet med en in vivo miljø enn en rekapitulert med 2D-adhesjon og en plast-substrat. Spesielt store fremskritt fremover har blitt gjort i modellering stratifisert epitel med innføringen av 3D-kultur metoder på luft-væske-grensesnittet 1-4. Slike teknikker trofast etterligne keratinocyte differensiering og svulst celle invasjon muliggjør større fleksibilitet og troskap for forskere som studerer disse prosessene. Valget av biomateriale substrat å etterligne stromal miljøet har primært involvert bruk av type I kollagen, Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matrix og de-epidermized dermis. For eksempel har kreftassosierte fibroblaster vist seg å bidra til kreft invasjon 5, initiering og progresjon via stromal-epitel interaksjoner 6,7 When vokst i slike underlag. Gullstandarden for ligne stromal miljøet i huden, de største og mest studerte stratifisert epitel ved hjelp av slike teknikker, regnes for å være de-epidermized menneskelige dermis (DED). Fremstilling av DED omfatter fjerning av overhuden via trypsinering eller fysisk disassociation fra humant kadaver skin 3,4. Men, kan tilgang til slik hud være svært vanskelig for laboratorier ikke forbundet med kliniske institusjoner, og syke dermis er nær umulig å oppnå. Som et alternativ, laboratorier ofte bruke en kombinasjon av type I kollagen (isolert fra rottehaler) og / eller Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matrise. Etter oppdagelsen i 1927 av Nageotte 8 at kollagen kan lett bli isolert ved hjelp av eddiksyre og salt nedbør, ble sin søknad til vev kultur senere utviklet av Huzella og kolleger ni. Kollagen belegg viste seg å være bedre enn glass for cellekultur av 29 stammer og vev eksplantater som forhørt av Ehrmann og Gey ni. For tiden, er den større type av kollagen benyttes i vevskultur isolert fra rotte-hale sener, og er vanligvis kjøpes fra kommersielle kilder. Imidlertid er ulempen for trofast substrat gjentagelse er at rottehale kollagen ikke er identisk med humant kollagen, eller de humane dermis, hvor type I-og III-kollagen er tilstede som hoved-bestanddeler, og isolert rottehale kollagen er alltid fragmentert. Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matrise er en geléaktig protein blanding utskilt av dyrkede Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom celler 10. De viktigste bestanddelene er laminin, type IV kollagen, heparin sulfat proteoglycan, entactin og nidogen og de eksakte prosenter av disse proteinene vil variere fra parti til parti. Bortsett fra strukturelle proproteiner, inneholder denne matrisen også signifikante nivåer av vekstfaktorer slik som transformerende vekstfaktor β, epidermal vekstfaktor, insulin-lignende vekstfaktor-1, bovin fibroblast vekstfaktor og blodplateavledet vekstfaktor som ville endre cellulære oppførselen 11,12. Peker mot selve kompleksiteten i Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matrise, ble totalt 1851 proteiner identifisert i en fersk proteomikk studie 13. I lys av den rike og komplekse natur av denne matrisen, har forsiktig blitt informert når tolke og sammenligne ulike eksperimenter med bruk av det 11. Våre laboratorier har en interesse i genetiske hudsykdommer, særlig de med en predisposisjon for utvikling av cutaneous plateepitelkarsinom (CSCC) 14. I tilfelle av recessive dystrofe Epidermolysis bullosa (RDEB), en alvorlig blemmer sykdom med germline mutasjoner i COL7A1 genet <sopp&gt; 15-17, har vi fastslått at dermal mikromiljøet i disse pasientene er svulst fremme 18. I løpet av denne studien var vi ikke i stand til å vurdere svulsten fremme egenskaper dermal fibroblaster innebygd i kollagen I / Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matrise og undersøkte måter å vurdere cellenes eget, native matrise. For å oppnå dette, endret vi en tidligere teknikk fra laboratoriet av Lucie Germain jobber med menneskelig hud ekvivalenter 19,20. Teknikken Germain, var i stand til å rekonstruere menneskehud med velorganisert basalmembran ved hjelp av primære human keratinocytt-og fibroblast-kulturer i fravær av et syntetisk eller avdød stillaset. I denne utredningen trinnene som brukes til å rekapitulere den cutaneous svulst stromal mikromiljøet (native matrise) stammer direkte fra primær stromal fibroblaster in vitro er beskrevet 18. Native matriser produced ved langtidskultur av fibroblaster ble anvendt som en dermal ekvivalent med assay for CSCC celle invasjon. Vi presentere data ved hjelp av innfødte matrise stammer enten fra den ekstracellulære matrise utskilt av RDEB fibroblaster (mangelfull i type VII kollagen (C7)) eller fra RDEB fibroblaster retrovirally transduserte med en type VII kollagen uttrykke konstruere og demonstrere den dype effekten av en enkelt kollagen på tumor celle invasjon.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="352">
	<colgroup>
		<col span="4" style="width:66pt" width="88" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="64" style="height:48.0pt">
			<td class="xl63" height="64" style="height:48.0pt;width:66pt" width="88">L-Ascorbic acid 2-phosphate</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Sigma</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">A8960</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl65" height="42" style="height:31.5pt;width:66pt" width="88">DMEM with l-glutamine,</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88">Life Technologies</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88">11995-073</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="106" style="height:79.5pt">
			<td class="xl63" height="106" style="height:79.5pt;width:66pt" width="88">4,500 mg/L d-glucose, 110 mg/L sodium pyruvate</td>
		</tr>
		<tr height="85" style="height:63.75pt">
			<td class="xl63" height="85" style="height:63.75pt;width:66pt" width="88">100x Penicillin-Streptomycin</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Life Technologies</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">15070</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="43" style="height:32.25pt">
			<td class="xl63" height="43" style="height:32.25pt;width:66pt" width="88">Vaseline</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">VWR</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">PROL28908.290</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="43" style="height:32.25pt">
			<td class="xl63" height="43" style="height:32.25pt;width:66pt" width="88">Clonal cylinders</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Sigma</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Z370789</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="148" style="height:111.0pt">
			<td class="xl63" height="148" style="height:111.0pt;width:66pt" width="88">Nylon Net Filter Disc Hydrophilic 100um 25um diameter 100/pk</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Millipore</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">NY1H02500</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="127" style="height:95.25pt">
			<td class="xl63" height="127" style="height:95.25pt;width:66pt" width="88">Bent stainless steel wire mesh support</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Made in house</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88"></td>
			<td class="xl66" style="width:66pt" width="88">Dimensions were made so that the mesh would fit into 6-well plates</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tissue engineering of tumor stromal microenvironment with application to cancer cell invasion

3D organotypic kulturer av epitelceller på en matrise med innebygde mesenchymalceller er mye brukt til å studere epitelial celledifferensiering og invasjon. Rotte hale type I kollagen og / eller matrise avledet fra Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom celler har tradisjonelt blitt brukt som underlag for å modellere matrise eller stromal mikromiljøet der mesenchymalceller (vanligvis fibroblaster) er befolket. Selv om forsøk ved bruk av slike matriser er meget informative, kan det hevdes at på grunn av en overordnet tilstedeværelsen av et enkelt protein (for eksempel i type I kollagen) eller et høyt innhold av kjellermembrankomponenter og vekstfaktorer (slik som i matrise utledet fra mus sarcom-celler), kan disse substrater ikke best reflekterer bidrag til matrise-blandingen gjort av stromale celler selv. Å studere innfødte matriser produsert av primær dermal fibroblaster isolert fra pasienter med en svulst utsatt, genetisk blemmer forstyrrelse (recessive dystrofeEpidermolysis bullosa), har vi tilpasset en eksisterende innfødte matrise-protokollen for å studere svulst celle invasjon. Fibroblaster er overtalt til å produsere sin egen matrise over en lengre periode i kultur. Denne opprinnelige matrise blir så løsnet fra dyrkningsskål og epitelceller blir sådd ut på den før hele coculture heves til luft-væske-grensesnittet. Cellulær differensiering og / eller invasjon kan deretter vurderes over tid. Denne teknikken gjør det mulig å vurdere epitel-mesenchymale celle interaksjoner i en 3D-innstillingen uten behov for en syntetisk eller fremmed matriks med den eneste ulempe er den lengre tid som kreves for å frembringe den opprinnelige matrise. Her beskriver vi anvendelse av denne teknikk for å vurdere evnen til en enkelt molekyl uttrykt av fibroblaster, kollagen type VII, for å hemme tumorcelle invasjon.

<html> Denne teknikken åpner opp muligheten for å undersøke og å sammenlikne den invasive oppførsel av tumorceller (i dette tilfelle CSCC) under forskjellige 3D stromale miljøer. Ved hjelp av denne teknikken, kan ikke bare C7-mangel innfødte matriser som recapitulated den RDEB dermal miljøet bli generert, men også flere matriser som er genmodifisert til å over-uttrykke C7 18. Som vist i figur 2, invasjon av RDEB CSCC keratinocytter var betydelig retardert i C7-overekspresjon innfødt...

Watch this Scientific Journal Video about Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion at JoVE.com

Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion

Tissue Engineering av Tumor stromal mikromiljøet med Søknad til Cancer Cell Invasion

Tissue konstruert fibroblast-avledede opprinnelige matrise er en ny verktøy for å generere en stromal substrat som understøtter epitelial cellevekst og differensiering. Her en protokoll å bruke denne metoden for å vurdere effekten av ulike stromal celletyper på kreftcellebiologi er presentert.

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Microfluidic Device for Recreating a Tumor Microenvironment in Vitro

Microfluidic Device for Recreating a Tumor Microenvironment in Vitro

We have developed a microfluidic device that mimics the delivery and systemic clearance of drugs to heterogeneous three-dimensional tumor tissues in ...

Directed Cellular Self-Assembly to Fabricate Cell-Derived Tissue Rings for Biomechanical Analysis and Tissue Engineering

Regissert Cellular Self-Assembly å dikte Cell-Avledet Tissue Rings for Biomekaniske Analysis and Tissue Engineering

Each year, hundreds of thousands of patients undergo coronary artery bypass surgery in the United States.1 Approximately one third of these patients do ...

Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion

Tredimensjonal Cell Kultur Modell for å måle effekten av interstitiell væske Flow på Tumor Cell Invasion

The growth and progression of most solid tumors depend on the initial transformation of the cancer cells and their response to stroma-associated signaling ...

Engineering Skeletal Muscle Tissues from Murine Myoblast Progenitor Cells and Application of Electrical Stimulation

Engineering skjelettmuskulatur vev fra Murine Myoblast stamceller og anvendelse av elektrisk stimulering

Engineered muscle tissues can be used for several different purposes, which include the production of tissues for use as a disease model in vitro, e.g. to ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering av en menneskelig 3D<em&gt; In vitro</em&gt; Tumor Test System

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Engineering Fibrin-based Tissue Constructs from Myofibroblasts and Application of Constraints and Strain to Induce Cell and Collagen Reorganization

Engineering Fibrin-baserte Tissue konstruerer fra myofibroblasts og anvendelse av restriksjoner og belastning å bevege Cell og kollagen (Re) Organisasjon

Collagen content and organization in developing collagenous tissues can be influenced by local tissue strains and tissue constraint. Tissue engineers aim ...

Long-term Intravital Immunofluorescence Imaging of Tissue Matrix Components with Epifluorescence and Two-photon Microscopy

Langsiktig Intravital Immunfluorescens Imaging av Tissue Matrix Komponenter med epifluorescence og To-foton mikroskopi

Besides being a physical scaffold to maintain tissue morphology, the extracellular matrix (ECM) is actively involved in regulating cell and tissue ...

Concentric Gel System to Study the Biophysical Role of Matrix Microenvironment on 3D Cell Migration

Konsentriske Gel System for å studere den Biofysikalsk rolle Matrix mikromiljøet på 3D-Cell Migration

The ability of cells to migrate is crucial in a wide variety of cell functions throughout life&#160;from embryonic development and wound healing&#160;to ...

Sandwich-like Microenvironments to Harness Cell/Material Interactions

Sandwich-lignende microenvironments å utnytte Cell / Material Interactions

Cell culture has been traditionally carried out on bi-dimensional (2D) substrates where cells adhere using ventral receptors to the biomaterial surface. ...

In Vitro Model of Physiological and Pathological Blood Flow with Application to Investigations of Vascular Cell Remodeling

In Vitro Model of Physiological and Pathological Blood Flow with Application to Investigations of Vascular Cell Remodeling

In Vitro Modell av fysiologiske og patologiske Blood Flow med Application å Undersøkelser av Vaskulær Cell Remodeling

Vascular disease is a common cause of death within the United States. Herein, we present a method to examine the contribution of flow dynamics towards ...