Name: tissue engineering of tumor stromal microenvironment with application to cancer cell invasion
Uploaded: 2014-03-18T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion at JoVE.com

APS stöds av Debra International och British Skin Foundation. YZN stöds av A * STAR - University of Dundee Partnership Forskarskola.

Denna studie genomfördes i enlighet med Helsingforsdeklarationen Principer och godkändes av lämpliga etiska kommittéer. 1. Beredning av media och reagens <ol><li> Framställning av 200x av L-askorbinsyra 2-fosfat lager <ol><li> Lös upp 29 mg L-askorbinsyra 2-fosfat per 5 ml av Dulbeccos modifierade Eagles medium (DMEM)-lösning och filtreras genom 0,22 | im membranfilter. Affär som 0,25 ml sterila alikvoter i -20 ° C. </li><li> Lägg till 0,25 ml alikvot av 200x L-askorbinsyra 2-fos...

<ol>
	<li>Bell, E., Ehrlich, H. P., Buttle, D. J., Nakatsuji, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Living+tissue+formed+in+vitro+and+accepted+as+skin-equivalent+tissue+of+full+thickness.">Living tissue formed in vitro and accepted as skin-equivalent tissue of full thickness.</a> Science. 211 (4486), 1052-1054 (1981).</li><li>Asselineau, D., Bernhard, B., Bailly, C., Darmon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+morphogenesis+and+induction+of+the+67+kD+keratin+polypeptide+by+culture+of+human+keratinocytes+at+the+liquid-air+interface.">Epidermal morphogenesis and induction of the 67 kD keratin polypeptide by culture of human keratinocytes at the liquid-air interface.</a> Exp. Cell Res. 159 (2), 536-539 (1985).</li><li>Pruni&#233;ras, M. M., R&#233;gnier, M. M., Woodley, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+Cultivation+of+Keratinocytes+with+an+Air-Liquid+Interface.">Methods for Cultivation of Keratinocytes with an Air-Liquid Interface.</a> J. Invest. Dermatol. 81 (1 Suppl), 28-33 (1983).</li><li>Prunieras, M., R&#233;gnier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+procedure+for+culturing+human+epidermal+cells+on+allogenic+or+xenogenic+skin:+preparation+of+recombined+grafts.">New procedure for culturing human epidermal cells on allogenic or xenogenic skin: preparation of recombined grafts.</a> Ann. Chir. Plast. 24 (4), 357-362 (1979).</li><li>Gaggioli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-led+collective+invasion+of+carcinoma+cells+with+differing+roles+for+RhoGTPases+in+leading+and+following+cells.">Fibroblast-led collective invasion of carcinoma cells with differing roles for RhoGTPases in leading and following cells.</a> Nature. 9 (12), 1392-1400 (2007).</li><li>Bhowmick, N. A., Neilson, E. G., Moses, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+fibroblasts+in+cancer+initiation+and+progression.">Stromal fibroblasts in cancer initiation and progression.</a> Nature. 432 (7015), 332-337 (2004).</li><li>Erez, N., Truitt, M., Olson, P., Hanahan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer-Associated+Fibroblasts+Are+Activated+in+Incipient+Neoplasia+to+Orchestrate+Tumor-Promoting+Inflammation+in+an+NF-&#954;B-Dependent.">Cancer-Associated Fibroblasts Are Activated in Incipient Neoplasia to Orchestrate Tumor-Promoting Inflammation in an NF-&#954;B-Dependent.</a> Manner. Cancer Cell. 17 (2), 135-147 (2010).</li><li>Harkness, R. D., Marko, A. M., Muir, H. M., Neuberger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+metabolism+of+collagen+and+other+proteins+of+the+skin+of+rabbits.">The metabolism of collagen and other proteins of the skin of rabbits.</a> Biochem. J. 56 (4), 558-569 (1954).</li><li>Ehrmann, R. L., Gey, G. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+growth+of+cells+on+a+transparent+gel+of+reconstituted+rat-tail+collagen.">The growth of cells on a transparent gel of reconstituted rat-tail collagen.</a> J. Natl. Cancer Inst. 16 (6), 1375-1403 (1956).</li><li>Kleinman, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basement+membrane+complexes+with+biological+activity.">Basement membrane complexes with biological activity.</a> Biochemistry. 25 (2), 312-318 (1986).</li><li>Vukicevic, S., Kleinman, H. K., Luyten, F. P., Roberts, A. B., Roche, N. S., Reddi, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multiple+active+growth+factors+in+basement+membrane+Matrigel+suggests+caution+in+interpretation+of+cellular+activity+related+to+extracellular+matrix+components.">Identification of multiple active growth factors in basement membrane Matrigel suggests caution in interpretation of cellular activity related to extracellular matrix components.</a> Exp. Cell Res. 202 (1), 1-8 (1992).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BD+Biosciences+-+Discover+Labware.">BD Biosciences - Discover Labware.</a> SPC-356230 Rev 5.0 at Rev 5.0. , .</li><li>Hughes, C. S., Postovit, L. M., Lajoie, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrigel:+a+complex+protein+mixture+required+for+optimal+growth+of+cell+culture.">Matrigel: a complex protein mixture required for optimal growth of cell culture.</a> Proteomics. 10 (9), 1886-1890 (2010).</li><li>Ng, Y. Z., Dayal, J. H., South, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+Predisposition+to+Cutaneous+Squamous+Cell+Carcinoma.">Genetic Predisposition to Cutaneous Squamous Cell Carcinoma.</a> , .</li><li>Christiano, A. M. A., Greenspan, D. S. D., Lee, S. S., Uitto, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloning+of+human+type+VII+collagen.+Complete+primary+sequence+of+the+alpha+1(VII)+chain+and+identification+of+intragenic+polymorphisms.">Cloning of human type VII collagen. Complete primary sequence of the alpha 1(VII) chain and identification of intragenic polymorphisms.</a> J. Biol. Chem. 269 (32), 20256-20262 (1994).</li><li>Hovnanian, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+linkage+of+recessive+dystrophic+epidermolysis+bullosa+to+the+type+VII+collagen+gene.">Genetic linkage of recessive dystrophic epidermolysis bullosa to the type VII collagen gene.</a> J. Clin. Invest. 90 (3), 1032-1036 (1992).</li><li>Ryyn&#228;nen, M. M., Ryyn&#228;nen, J. J., Sollberg, S. S., Iozzo, R. V. R., Knowlton, R. G. R., Uitto, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+linkage+of+type+VII+collagen+(COL7A1)+to+dominant+dystrophic+epidermolysis+bullosa+in+families+with+abnormal+anchoring+fibrils.">Genetic linkage of type VII collagen (COL7A1) to dominant dystrophic epidermolysis bullosa in families with abnormal anchoring fibrils.</a> J. Clin. Invest. 89 (3), 974-980 (1992).</li><li>Ng, Y. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast-derived+dermal+matrix+drives+development+of+aggressive+cutaneous+squamous+cell+carcinoma+in+patients+with+recessive+dystrophic+epidermolysis+bullosa.">Fibroblast-derived dermal matrix drives development of aggressive cutaneous squamous cell carcinoma in patients with recessive dystrophic epidermolysis bullosa.</a> Cancer Res. 72 (14), 3522-3534 (2012).</li><li>Larouche, D., Paquet, C., Fradette, J., Carrier, P., Auger, F. A., Germain, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+15.">Chapter 15.</a> Methods Mol. Biol. 482, 233-256 (2009).</li><li>Pouliot, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstructed+human+skin+produced+in+vitro+and+grafted+on+athymic+mice).">Reconstructed human skin produced in vitro and grafted on athymic mice).</a> Transplantation. 73 (11), 1751-1757 (2002).</li><li>Purdie, K. J., Pourreyron, C., South, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+squamous+cell+carcinoma+lines.">Isolation and culture of squamous cell carcinoma lines.</a> Methods Biol. 731, 151-159 (2011).</li><li>Pinnell, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+collagen+biosynthesis+by+ascorbic+acid:+a+review.">Regulation of collagen biosynthesis by ascorbic acid: a review.</a> Yale J. Biol. Med. 58 (6), 553-559 (1985).</li><li>Hata, R., Senoo, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=L-ascorbic+acid+2-phosphate+stimulates+collagen+accumulation,+cell+proliferation,+and+formation+of+a+three-dimensional+tissuelike+substance+by+skin+fibroblasts.">L-ascorbic acid 2-phosphate stimulates collagen accumulation, cell proliferation, and formation of a three-dimensional tissuelike substance by skin fibroblasts.</a> J. Cell. Physiol. 138 (1), 8-16 (1988).</li></ol>

På grund av karaktären av detta experiment kan den totala tid som krävs för slutförande vara upp till två månader. Under hela denna tid, måste största försiktighet och steril vävnadsodlingsmetoder användas för att förhindra mikrobiell förorening. Bortsett från dess roll som en kofaktor i syntesen av hydroxiprolin och hydroxilysin av kollagener, stimulerar askorbinsyra kollagen specifik mRNA-expression i fibroblaster 22. Askorbinsyran val...

Användningen av biomaterial i 3D vävnadskultur har gjort det möjligt för forskare att studera cellens beteende i laboratoriet under fysiologiska förhållanden som mer liknar en in vivo-miljö än i en rekapituleras med 2D vidhäftning och ett plastsubstrat. Speciellt framåt stora framsteg har gjorts i modellering stratifierat epitel med antagandet av 3D odlingsmetoder vid luft-vätske-gränssnittet 1-4. Sådana tekniker härma troget keratinocytdifferentieringen och tumörcellsinvasion som möjliggör större flexibilitet och trohet för forskare som studerar dessa processer. Valet av biomaterial substrat för att efterlikna den stromal miljön har i första hand inneburit att användningen av typ I-kollagen, Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matris och de-epidermized dermis. Exempelvis har cancerassocierade fibroblaster visat sig bidra mot cancer invasion 5, initiering och progression via stromal-epithelial interaktioner 6,7 when odlas i sådana substrat. Guldmyntfoten för att imitera stromal miljön i huden, den största och mest studerade stratifierat epitel som använder sådan teknik, anses vara de-epidermized mänskliga dermis (DED). Framställning av DED innebär avlägsnande av epidermis via trypsinering eller fysisk tagande från humant kadaver 3,4. Dock kan tillgång till en sådan hud vara mycket svårt för laboratorierna inte förknippas med kliniska institutioner, och sjuka dermis är nära omöjligt att få. Som ett alternativ, laboratorierna använder ofta en kombination av typ I-kollagen (isolerad från skolästfiskar) och / eller Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matris. Efter upptäckten 1927 av Nageotte 8 att kollagen kan lätt isoleras med användning av ättiksyra och saltutfällning, dess tillämpning på vävnadskultur därefter uppfunnen av Huzella och kollegor 9. Kollagen beläggning visade sig vara överlägsen till glas för cellodling av 29 stammar och vävnadsexplantat som förhörs av Ehrmann och Gey 9. För närvarande är den viktigaste typen av kollagen som används i vävnadsodling isoleras från råttsvanssenor, och är oftast köpas från kommersiella källor. Emellertid är nackdelen för trogen substrat rekapitulation att råttsvanskollagen är inte identisk med humant kollagen, eller de humana dermis, där typ I-och III-kollagener är närvarande som huvudbeståndsdelar, och isolerade råttsvanskollagen är invariably fragmenterad. Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matris är en geléproteinblandning som utsöndras av odlade Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkomceller 10. De viktigaste beståndsdelarna är laminin, typ IV kollagen, heparinsulfat proteoglycan, entaktin och nidogen och de exakta proportionerna av dessa proteiner kommer att variera från parti till parti. Förutom strukturella proproteiner, har denna matris också signifikanta nivåer av tillväxtfaktorer, såsom transformerande tillväxtfaktor β, epidermal tillväxtfaktor, insulinliknande tillväxtfaktor 1, bovint fibroblasttillväxtfaktor och blodplättshärledd tillväxtfaktor som skulle kunna ändra cellbeteende 11,12. Pekar mot komplexiteten i Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matris, har totalt 1,851 proteiner identifieras i en nyligen proteomic studie 13. Mot bakgrund av den rika och komplexa karaktär denna matris har försiktighet fått rådet vid tolkningen och jämföra olika experiment med hjälp av det 11. Våra laboratorier har ett stort intresse för genetiska hudsjukdomar, särskilt de med en benägenhet att utveckla kutan skivepitelcancer (CSCC) 14. I fallet med recessiv dystrofisk epidermolysis bullosa (RDEB), en allvarlig blåsbildning sjukdom med nedärvda mutationer i COL7A1-genen <supp&gt; 15-17, har vi bestämt att huden mikromiljö hos dessa patienter är tumör främja 18. Under loppet av denna undersökning kunde vi inte bedöma tumören främja egenskaper dermala fibroblaster inbäddade i kollagen I / Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkom matris och undersökt metoder för att bedöma cellernas egna, infödd matris. För att uppnå detta, ändrade vi en tidigare teknik från laboratoriet av Lucie Germain arbetar på mänsklig hud ekvivalenter 19,20. Germain teknik var kunna återskapa mänsklig hud med välorganiserad basalmembran med användning av primära humana keratinocyter och fibroblast-kulturer i frånvaro av en syntetisk eller avliden scaffold. I denna uppsats de steg som används för att sammanfatta den kutana tumörer stromal mikromiljö (native matris) härstammar direkt från primära stromala fibroblaster in vitro beskrivs 18. Native matriser producerad genom långtidsodling av fibroblaster användes som en dermal ekvivalent med analys för CSCC cellinvasion. Vi presenterar data med hjälp av infödda matris kommer från antingen den extracellulära matrisen utsöndras av RDEB fibroblaster (med brist på typ VII kollagen (C7)) eller från RDEB fibroblaster retroviralt omvandlade med en typ VII kollagen uttrycker konstruera och demonstrera djupgående effekt på en enda kollagen på tumör cellinvasion.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="352">
	<colgroup>
		<col span="4" style="width:66pt" width="88" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="64" style="height:48.0pt">
			<td class="xl63" height="64" style="height:48.0pt;width:66pt" width="88">L-Ascorbic acid 2-phosphate</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Sigma</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">A8960</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="42" style="height:31.5pt">
			<td class="xl65" height="42" style="height:31.5pt;width:66pt" width="88">DMEM with l-glutamine,</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88">Life Technologies</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88">11995-073</td>
			<td class="xl67" rowspan="2" style="border-bottom:1.0pt solid black;
 border-top:none;width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="106" style="height:79.5pt">
			<td class="xl63" height="106" style="height:79.5pt;width:66pt" width="88">4,500 mg/L d-glucose, 110 mg/L sodium pyruvate</td>
		</tr>
		<tr height="85" style="height:63.75pt">
			<td class="xl63" height="85" style="height:63.75pt;width:66pt" width="88">100x Penicillin-Streptomycin</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Life Technologies</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">15070</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="43" style="height:32.25pt">
			<td class="xl63" height="43" style="height:32.25pt;width:66pt" width="88">Vaseline</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">VWR</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">PROL28908.290</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="43" style="height:32.25pt">
			<td class="xl63" height="43" style="height:32.25pt;width:66pt" width="88">Clonal cylinders</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Sigma</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Z370789</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="148" style="height:111.0pt">
			<td class="xl63" height="148" style="height:111.0pt;width:66pt" width="88">Nylon Net Filter Disc Hydrophilic 100um 25um diameter 100/pk</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Millipore</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">NY1H02500</td>
			<td class="xl64" style="width:66pt" width="88"></td>
		</tr>
		<tr height="127" style="height:95.25pt">
			<td class="xl63" height="127" style="height:95.25pt;width:66pt" width="88">Bent stainless steel wire mesh support</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88">Made in house</td>
			<td class="xl63" style="width:66pt" width="88"></td>
			<td class="xl66" style="width:66pt" width="88">Dimensions were made so that the mesh would fit into 6-well plates</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tissue engineering of tumor stromal microenvironment with application to cancer cell invasion

3D organotypiska kulturer av epitelceller på en matris inbäddat med mesenchymala celler används i stor utsträckning för att studera epitelial celldifferentiering och invasion. Rat svans typ I-kollagen och / eller matris kommer från Engelbreth-Holm-Swarm mus sarkomceller har traditionellt används som substrat för att modellera matrisen eller stromal mikromiljö i vilken mesenkymala celler (vanligen fibroblaster) är befolkade. Även om experiment med användning av sådana matriser är mycket informativt, kan det hävdas att på grund av ett tvingande närvaron av ett enda protein (t ex i typ I-kollagen) eller en hög halt av basalmembrankomponenter och tillväxtfaktorer (såsom i matrisen härrörande från mus sarkomceller), dessa substrat inte bäst speglar bidraget till matrissammansättning gjorts av stromaceller själva. Att studera infödda matriser som produceras av primära dermala fibroblaster isolerade från patienter med en tumör benägen, genetisk blåsor disorder (recessiv dystrofiskepidermolysis bullosa), har vi anpassat en befintlig infödda matris protokoll för att studera tumörcellsinvasion. Fibroblaster induceras att producera sin egen matris under en längre tid i odling. Denna nativa matris därefter lösgöras från odlingsskålen och epitelceller sås på det innan hela samodling höjes till luft-vätskegränsytan. Celldifferentiering och / eller invasion kan sedan utvärderas med tiden. Denna teknik ger möjlighet att bedöma epithelial-mesenchymal cell-interaktioner i ett 3D-inställning utan behov av en syntetisk eller främmande matris med den enda nackdelen är den långa tidsperiod som krävs för att producera den nativa matrix. Här beskriver vi tillämpningen av denna teknik för att bedöma förmågan hos en enda molekyl uttryckt av fibroblaster, typ VII kollagen, för att hämma tumörcellinvasion.

<html> Denna teknik öppnar upp möjligheten att undersöka och jämföra den invasiva beteende av tumörceller (i detta fall CSCC) under olika 3D-stromal miljöer. Med denna teknik kan inte bara C7-brist infödda matriser som intagits RDEB huden miljö skapas, utan också ytterligare matriser som är genetiskt manipulerade till över-express C7 18. Såsom framgår av fig. 2, invasion av RDEB CSCC keratinocyter var signifikant retarderad i C7-uttrycker nativa matriser i jämförelse med C7-bri...

Watch this Scientific Journal Video about Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion at JoVE.com

Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion

Tissue Engineering av tumör Stromal mikromiljö med Ansökan till Cancer Cell Invasion

Vävnadsteknisk fibroblast-härledd infödda matris är ett framväxande verktyg för att generera en stromal substrat som stöder epitelcellsproliferation och differentiering. Här ett protokoll tillämpa denna metod för att bedöma effekterna av olika stromaceller celltyper på tumörcellbiologin presenteras.

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Microfluidic Device for Recreating a Tumor Microenvironment in Vitro

Microfluidic Device for Recreating a Tumor Microenvironment in Vitro

Mikroflödessystem enhet för att återskapa en tumör mikromiljö<em&gt; In vitro</em

We have developed a microfluidic device that mimics the delivery and systemic clearance of drugs to heterogeneous three-dimensional tumor tissues in ...

Directed Cellular Self-Assembly to Fabricate Cell-Derived Tissue Rings for Biomechanical Analysis and Tissue Engineering

Riktad Cellular Self-Assembly att tillverka-cellerna Tissue Ringar för Biomekaniska analys och Tissue Engineering

Each year, hundreds of thousands of patients undergo coronary artery bypass surgery in the United States.1 Approximately one third of these patients do ...

Three-dimensional Cell Culture Model for Measuring the Effects of Interstitial Fluid Flow on Tumor Cell Invasion

Tredimensionell cellkulturmodell för mätning av effekterna av interstitialvätska Flow på Tumörcellinvasion

The growth and progression of most solid tumors depend on the initial transformation of the cancer cells and their response to stroma-associated signaling ...

Engineering Skeletal Muscle Tissues from Murine Myoblast Progenitor Cells and Application of Electrical Stimulation

Engineering Skelettmuskulatur Vävnader från murinceller myoblast progenitorceller och tillämpning av elektrisk stimulering

Engineered muscle tissues can be used for several different purposes, which include the production of tissues for use as a disease model in vitro, e.g. to ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering av en Human 3D<em&gt; In vitro</em&gt; Tumör Test System

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Engineering Fibrin-based Tissue Constructs from Myofibroblasts and Application of Constraints and Strain to Induce Cell and Collagen Reorganization

Engineering fibrinbaserade Tissue konstruktioner från Myofibroblaster och tillämpning av begränsningar och påfrestningar för att inducera cell-och kollagen (om) organisering

Collagen content and organization in developing collagenous tissues can be influenced by local tissue strains and tissue constraint. Tissue engineers aim ...

Long-term Intravital Immunofluorescence Imaging of Tissue Matrix Components with Epifluorescence and Two-photon Microscopy

Långsiktig Intravital Immunofluorescence avbildning av Tissue Matrix Komponenter med epifluorescens och Två-foton mikroskopi

Besides being a physical scaffold to maintain tissue morphology, the extracellular matrix (ECM) is actively involved in regulating cell and tissue ...

Concentric Gel System to Study the Biophysical Role of Matrix Microenvironment on 3D Cell Migration

Concentric Gel system att studera den Biofysikalisk roll Matrix mikromiljö på 3D Cell Migration

The ability of cells to migrate is crucial in a wide variety of cell functions throughout life&#160;from embryonic development and wound healing&#160;to ...

Sandwich-like Microenvironments to Harness Cell/Material Interactions

Sandwich liknande mikromiljöer att utnyttja Cell / Material Interaktioner

Cell culture has been traditionally carried out on bi-dimensional (2D) substrates where cells adhere using ventral receptors to the biomaterial surface. ...

In Vitro Model of Physiological and Pathological Blood Flow with Application to Investigations of Vascular Cell Remodeling

In Vitro Model of Physiological and Pathological Blood Flow with Application to Investigations of Vascular Cell Remodeling

I vitro-modell av fysiologiska och patologiska blodflöde med Application till Undersökningar av Vascular Cell ombyggnad

Vascular disease is a common cause of death within the United States. Herein, we present a method to examine the contribution of flow dynamics towards ...