Name: harmonic nanoparticles for regenerative research
Uploaded: 2014-05-01T13:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Harmonic Nanoparticles for Regenerative Research at JoVE.com

המחברים רוצים להכיר במימון החלקי של האירופי FP7 פרויקט המחקר NAMDIATREAM (NMP4-LA-2010-246,479, http://www.namdiatream.eu) ופרויקט INTERREG IV צרפת שוויץ נעמי.

1. תרבות והרחבת ESC האדם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את מדיום התפשטות תאים (הנקרא בערב) המכיל נוק DMEM בתוספת 20% נוק סרום, 1% חומצות אמינו שאינו חיוניות MEM, 1% L-גלוטמין 200 מ&quot;מ, 1% פניצילין, סטרפטומיצין, ו3.5 μl β-mercaptoethanol. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להפש?...

<ol>
	<li>Bonacina, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polar+Fe(IO3)3+nanocrystals+as+local+probes+for+nonlinear+microscopy.">Polar Fe(IO3)3 nanocrystals as local probes for nonlinear microscopy.</a> Applied Physics B-Lasers and Optics. 87, 399-403 (2007).</li><li>Nakayama, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tunable+nanowire+nonlinear+optical+probe.">Tunable nanowire nonlinear optical probe.</a> Nature. 447, 1098-1101 (2007).</li><li>Aufray, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+Synthesis+of+Nanosized+Niobium+Oxides+and+Lithium+Niobate+Particles+and+Their+Characterization+by+XPS+Analysis.">New Synthesis of Nanosized Niobium Oxides and Lithium Niobate Particles and Their Characterization by XPS Analysis.</a> J Nanosci Nanotechno. 9, 4780-4785 (2009).</li><li>Hsieh, C. L., Grange, R., Pu, Y., Psaltis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+harmonic+holographic+microcopy+using+nanoparticles+as+probes+for+cell+imaging.">Three-dimensional harmonic holographic microcopy using nanoparticles as probes for cell imaging.</a> Opt Express. 17, 2880-2891 (2009).</li><li>Pantazis, P., Maloney, J., Wu, D., Fraser, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Second+harmonic+generating+(SHG)+nanoprobes+for+in+vivo+imaging.">Second harmonic generating (SHG) nanoprobes for in vivo imaging.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107, 14535-14540 (2010).</li><li>Baumner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evanescent-field-induced+second+harmonic+generation+by+noncentrosymmetric+nanoparticles.">Evanescent-field-induced second harmonic generation by noncentrosymmetric nanoparticles.</a> Opt Express. 18, 23218-23225 (2010).</li><li>Le Xuan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photostable+second-harmonic+generation+from+a+single+KTiOPO4+nanocrystal+for+nonlinear+microscopy.">Photostable second-harmonic generation from a single KTiOPO4 nanocrystal for nonlinear microscopy.</a> Small. 4, 1332-1336 (2008).</li><li>Sandeau, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defocused+imaging+of+second+harmonic+generation+from+a+single+nanocrystal.">Defocused imaging of second harmonic generation from a single nanocrystal.</a> Opt Express. 15, 16051-16060 (2007).</li><li>Johnson, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-field+imaging+of+nonlinear+optical+mixing+in+single+zinc+oxide+nanowires.">Near-field imaging of nonlinear optical mixing in single zinc oxide nanowires.</a> Nano Lett. 2, 279-283 (2002).</li><li>Kachynski, A. V., Kuzmin, A. N., Nyk, M., Roy, I., Prasad, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zinc+oxide+nanocrystals+for+nonresonant+nonlinear+optical+microscopy+in+biology+and+medicine.">Zinc oxide nanocrystals for nonresonant nonlinear optical microscopy in biology and medicine.</a> J Phys Chem C. 112, 10721-10724 (2008).</li><li>Bonacina, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonlinear+Nanomedecine:+Harmonic+Nanoparticles+toward+Targeted+Diagnosis+and+Therapy.">Nonlinear Nanomedecine: Harmonic Nanoparticles toward Targeted Diagnosis and Therapy.</a> Mol Pharmaceut. 10, 783-792 (2013).</li><li>Dempsey, W. P., Fraser, S. E., Pantazis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SHG+nanoprobes:+advancing+harmonic+imaging+in+biology.">SHG nanoprobes: advancing harmonic imaging in biology.</a> Bioessays. 34, 351-360 (2012).</li><li>Campagnola, P. J., Loew, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Second-harmonic+imaging+microscopy+for+visualizing+biomolecular+arrays+in+cells,+tissues+and+organisms.">Second-harmonic imaging microscopy for visualizing biomolecular arrays in cells, tissues and organisms.</a> Nat Biotechnol. 21, 1356-1360 (2003).</li><li>Denk, W., Strickler, J. H., Webb, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2-Photon+Laser+Scanning+Fluorescence+Microscopy.">2-Photon Laser Scanning Fluorescence Microscopy.</a> Science. 248, 73-76 (1990).</li><li>Magouroux, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-Speed+Tracking+of+Murine+Cardiac+Stem+Cells+by+Harmonic+Nanodoublers.">High-Speed Tracking of Murine Cardiac Stem Cells by Harmonic Nanodoublers.</a> Small. 8, 2752-2756 (2012).</li><li>Staedler, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Harmonic+Nanocrystals+for+Biolabeling:+A+Survey+of+Optical+Properties+and+Biocompatibility.">Harmonic Nanocrystals for Biolabeling: A Survey of Optical Properties and Biocompatibility.</a> Acs Nano. 6, 2542-2549 (2012).</li><li>Extermann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanodoublers+as+deep+imaging+markers+for+multi-photon+microscopy.">Nanodoublers as deep imaging markers for multi-photon microscopy.</a> Optics Express. 17, 15342-15349 (2009).</li><li>Chen, I. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wavelength+dependent+damage+in+biological+multi-photon+confocal+microscopy:+A+micro-spectroscopic+comparison+between+femtosecond+Ti+:+sapphire+and+Cr+:+forsterite+laser+sources.">Wavelength dependent damage in biological multi-photon confocal microscopy: A micro-spectroscopic comparison between femtosecond Ti : sapphire and Cr : forsterite laser sources.</a> Opt. Quantum Electron. 34, 1251-1266 (2002).</li><li>Ferreira, L., Karp, J. M., Nobre, L., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+opportunities:+The+use+of+Nanotechnologies+to+manipulate+and+track+stem+cells.">New opportunities: The use of Nanotechnologies to manipulate and track stem cells.</a> Cell Stem Cell. 3, 136-146 (2008).</li><li>Kaur, S., Singhal, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=When+nano+meets+stem:+The+impact+of+nanotechnology+in+stem+cell+biology.">When nano meets stem: The impact of nanotechnology in stem cell biology.</a> J Biosci Bioeng. 113, 1-4 (2012).</li><li>Hong, H., Yang, Y. N., Zhang, Y., Cai, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-Invasive+Imaging+of+Human+Embryonic+Stem+Cells.">Non-Invasive Imaging of Human Embryonic Stem Cells.</a> Curr Pharm Biotechno. 11, 685-692 (2010).</li><li>Tumbar, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+epithelial+stem+cell+niche+in+skin.">Defining the epithelial stem cell niche in skin.</a> Science. 303, 359-363 (2004).</li><li>Shah, B. S., Clark, P. A., Moioli, E. K., Stroscio, M. A., Mao, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labeling+of+mesenchymal+stem+cells+by+bioconjugated+quantum+dots.">Labeling of mesenchymal stem cells by bioconjugated quantum dots.</a> Nano Lett. 7, 3071-3079 (2007).</li><li>Zimmer, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Size+series+of+small+indium+arsenide-zinc+selenide+core-shell+nanocrystals+and+their+application+to+in+vivo+imaging.">Size series of small indium arsenide-zinc selenide core-shell nanocrystals and their application to in vivo imaging.</a> J Am Chem Soc. 128, 2526-2527 (2006).</li><li>Vallee, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+stem+cell-based+cardiopatches+improve+cardiac+function+in+infarcted+rats.">Embryonic stem cell-based cardiopatches improve cardiac function in infarcted rats.</a> Stem Cells Transl Med. 1, 248-260 (2012).</li><li>Idris, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+transplanted+cells+in+live+animal+using+upconversion+fluorescent+nanoparticles.">Tracking transplanted cells in live animal using upconversion fluorescent nanoparticles.</a> Biomaterials. 30, 5104-5113 (2009).</li><li>Haase, M., Schafer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Upconverting+nanoparticles.">Upconverting nanoparticles.</a> Angew Chem Int Ed Engl. 50, 5808-5829 (2011).</li><li>Cheng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multifunctional+Upconversion+Nanoparticles+for+Dual-Modal+Imaging-Guided+Stem+Cell+Therapy+under+Remote+Magnetic+Control.">Multifunctional Upconversion Nanoparticles for Dual-Modal Imaging-Guided Stem Cell Therapy under Remote Magnetic Control.</a> Adv Funct Mater. 23, 272-280 (2013).</li><li>Konig, K., So, P. T. C., Mantulin, W. W., Gratton, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+response+to+near-infrared+femtosecond+laser+pulses+in+two-photon+microscopes.">Cellular response to near-infrared femtosecond laser pulses in two-photon microscopes.</a> Optics Letters. 22, 135-136 (1997).</li></ol>

היישום של הננוטכנולוגיה למחקר בתאי גזע הוא תחום חדש יחסית, אך המתרחב במהירות. כפי שציין במאמרי ביקורת שונים על הנושא, השימוש של חלקיקים ניתן ליישם כדי לבצע משימות מחקר שונות, החל מתא מעקב (הן במבחנה in vivo), למשלוח תאיים של חלבונים והגנים, לפחות לא ביצירת סביבות סלול...

מערכות מיקרוסקופיה קוי, הודות לשלוש יכולות חתכם הטבועות ממדיות, יש יותר ויותר שהפעילו את הביקוש לfluorophores צילום יציב עם להקות קליטת שני פוטונים באינפרא אדום הקרוב. רק בשנים האחרונות, כדי להשלים את הפיתוח של תוויות המבוססת על הקרינה (צבעים, נקודות קוונטיות, חלקיקי המרה-up), המתודולוגיה הדמיה שונה כבר מנצלת את השימוש במשפחה חדשה של חלקיקי מיסוד קוי כתוויות, כלומר חלקיקים הרמוניים (HNPs) אשר פותחו במיוחד עבור מיקרוסקופ רב פוטון. תוויות אלה, המבוססים על גבישי noncentrosymmetric אורגניים, להפעיל ניגוד אופטי שהניבו SH של תדר העירור: למשל על ידי המרת חלק קטן של אור עירור פעם הקרוב אינפרא אדום (λ = 800 ננומטר) לאור כחול גלוי (λ / 2 = 400 ננומטר) . כמה מחברים בתקופה האחרונה בחנו חומרים שונים, ובכלל זה iodate ברזל Fe (IO <sub&gt; 3) 3 1, niobate אשלגן (KNbO 3) 2, niobate ליתיום (Linbo 3) 3, titanate בריום (BaTiO 3) 4,5, אשלגן זרחה titanyl (KTiOPO4, KTP) 6-8, ותחמוצת אבץ (ZnO 5,9,10). בהשוואה לבדיקות ניאון, HNPs יש שורה של נכסים אטרקטיביים, כגון עדר מוחלט של הלבנת ומהבהבת, להקות פליטה צרות, tunability עירור באורך הגל (מסגול לאינפרא אדום), יכולת שליפת אורינטציה, ותגובה אופטית קוהרנטית. מאפיינים ייחודיים אלה כבר הסבירו לאחרונה בשני מאמרי סקירה מקיפים 11,12. האפשרות לעבוד באזור רפאים אינפרא אדום, אשר מגדיל את עומק הדמיה ידי מזעור פיזור וקליטה, גם באופן דרסטי מגבילה מדגם השפלה תמונה 13,14. יתר על כן, את אות צילום יציב לאין שיעור ערבות HNPs עושה בדיקות האידיאליות למעקב סלולרי לטווח ארוך, שבו אניזה מושך במיוחד ליישומי רפואת רגנרטיבית 15. בניסוי דמיינו את זה, פרטים בפרוטוקול ניתנים לתיוג במבחנה של תאי גזע עובריים אנושיים (hESC) עם HNPs unfunctionalized. הסינתזה והכנת תרחיפים colloidal היא מפורטת בפרסום קודם ובהפניות בי 16 והוא מעבר להיקף של עבודה זו. מתודולוגיות לחקירת hESC ידי מיקרוסקופית רב פוטון והבידול שלהם בצבירי לב (נשמרו כתרבויות אוויר נוזלי לטווח ארוך) מוצגות. ניתן לתת ESC האנושי להבחין בתוך גוף שנקרא embryoid (EBS) בשתי דרכים שונות, או על ידי היווצרות EB של שברי מושבה בהשעיה או, לחלופין, נאלצו צבירה של תאים בודדים לEBS באמצעות צלחת Aggrewell, כפי שמודגם באיור 1 א fac מסננים נקבוביים. Culturing להכות אשכולות של תאי לב על polytetrafluoroethylene (PTFE)ilitates התחזוקה ארוך הטווח שלהם למחקרים נוספים (למשל מדידות אלקטרו של פוטנציאל פעולה). מקור העירור של הסריקה מיקרוסקופ צריך להיות מסוגל לספק פולסים ultrashort (עם משך פעימה קטן יותר מאשר 300 fsec במדגם) על מנת להגיע לשיא הכוח דרוש כדי לבצע הדמיה הרמונית שנייה של HNPs. לדוגמא, fsec-המקור הנפוץ ביותר המשמש להדמיה הוא Ti מתכונן: לייזרי ספיר. לחלופין, יכולים להיות מועסקים לייזרים מהירים אחרים, ליון ארביום למשל 17, forsterite כרום 18 או טי: מתנדים פרמטרים אופטיים אינפרא אדום ספיר שאוב. מיקרוסקופ יכול להיות מצויד במטרה עם עדיפות צמצם מספרי גבוה למדי. מאוד חשוב, לפני מדידות, ובכל פעם המטרה מוחלפת, הוא חובה כדי למזער את הווה הפיזור בהגדרה (עדשות) על ידי אופטימיזציה של ההגדרות של דופק לייזר מראש המדחס בעבודהאורך גל של בחירה. הליך זה, שפורט בפרוטוקול, מבטיח כי דופק הלייזר הוא קרוב ככל האפשר ללהפוך לתקופה מוגבלת (כלומר כקצר ביותר אפשרי) במישור המוקד ומגדיל את התגובה קוי מדגם. המטרה של ניתוח התמונה שתואר בסוף הפרוטוקול היא לזהות ולעקוב אחר תנועות 3D HNPs קשורים ההתכווצויות קצביות של מכות אשכולות לב. חלקיקי מעקב במטוס התמונה הוא פשוט הבין שעל ידי זיהוי עמדותיהם במסגרות סרט רצופים. כדי לחלץ מידע על תנועה צירית, כיול מוקדם של תגובה בעוצמה לא קוי כפונקציה של תזוזה צירית הוא חובה. שים לב שעבור מדידות לטווח ארוך, שליטת interferometric פעילה של מדגם עמדה צירית נדרש כדי לשמור על תוקפו של עקום הכיול בנוכחות מרחף תרמית ו / או מכאני. HNPs משמש כאן לטראקתאי דואר פועמים בתוך אגרגטים מבוססים על תחמוצת אשלגן niobate (KNbO 3), אבל ננו קוי זמין אחר נסקרים בפירוט בעבודה של טאדלר אח&#39; 16. היעילות האופטית קוי של רוב ננו נחקר עד כה הן מאוד דומה. הבחירה לKNbO 3 הונעה בעיקרו על ידי היציבות טובה של פתרון colloidal וההתאמה הביולוגית הטוב שלה, בדקה בכמה שורות תאים אנושיות אפילו בריכוז גבוה למדי ופעמים אקספוזיציה ארוכות 16. לאור החידוש של nanomaterial מועסק לעבודה זו, המאפיינים העיקריים של HNPs בהשוואה לביו סמני ניאון / ניאון מוצגים באנימצית מחשב וידאו קצרה מקורית הבינה המחברים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1008">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Microscope Incubator</td>
			<td style="width:231px;">OKO LAB</td>
			<td style="width:205px;">UNO package (top stage)</td>
			<td style="width:343px;">&#160;37&#176;C, 5% CO2, moisturized</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="64" rowspan="2" style="height:64px;width:231px;">Multiphoton microscope</td>
			<td rowspan="2" style="width:231px;">Nikon</td>
			<td rowspan="2" style="width:205px;">AR1-MP</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:343px;">Fast scanning, four non photomultiplier descanned detectors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="64" rowspan="3" style="height:64px;width:231px;">Filters SHG and autofluorescence</td>
			<td rowspan="3" style="width:231px;">Semrock</td>
			<td style="width:205px;">FF01-360/12-25</td>
			<td rowspan="3" style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:205px;">FF01-395/11-25&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:205px;">FF02-485/20-25</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="64" rowspan="3" style="height:64px;width:231px;">Microscope objectives</td>
			<td rowspan="3" style="width:231px;">Nikon</td>
			<td style="width:205px;">CFI Plan Fluor 10x</td>
			<td style="width:343px;">NA 0.30, WD 16 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:205px;">CFI Plan Apo 20x</td>
			<td style="width:343px;">NA 0.75, WD 1.0 mm, VC</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:205px;">CFI Apo 40x</td>
			<td style="width:343px;">NA 1.25, WD 0.18mm &#955;S, Nano-Crystal Coat</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:231px;">Rhock inhibitor&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Sigma</td>
			<td style="width:205px;">Y-27632</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:231px;">Knockout DMEM</td>
			<td style="width:231px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:205px;">10829</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Knockout Serum&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:205px;">10828</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">MEM Non-Essential Amino Acids&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:205px;">1140</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">L-glutamine 200mM&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:205px;">25030</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Penicillin-streptomycin</td>
			<td style="width:231px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:205px;">15140</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">&#946;-mercaptoethanol&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Sigma</td>
			<td style="width:205px;">M7522</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Collagenase IV&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Gibco</td>
			<td style="width:205px;">17104-019</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Roller scraper tool&#160;</td>
			<td style="width:231px;">StemPro EZPassage, Invitrogen</td>
			<td style="width:205px;">23181-010</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">StemPro Accutase&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Gibco</td>
			<td style="width:205px;">S11105-01</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Aggrewell system&#160;</td>
			<td style="width:231px;">StemCell Technologies</td>
			<td style="width:205px;">27845</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Hyclone serum&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:205px;">SH30070.03</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Gelatin</td>
			<td style="width:231px;">Sigma</td>
			<td style="width:205px;">G9391</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">6-well plates&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Falcon</td>
			<td style="width:205px;">353046</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">24-well plates&#160;</td>
			<td style="width:231px;">Nunclon</td>
			<td style="width:205px;">142475</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:231px;">Polytetrafluoroethylene (PTFE) filters</td>
			<td style="width:231px;">Millipore&#160;</td>
			<td style="width:205px;">NA76/25</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:231px;">Inserts</td>
			<td style="width:231px;">Millipore</td>
			<td style="width:205px;">PICM03050</td>
			<td style="width:343px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

harmonic nanoparticles for regenerative research

בניסוי דמיינו את זה, פרטים בפרוטוקול ניתנים לתיוג במבחנה של תאי גזע עובריים אנושיים (hESC) עם חלקיקי דור שני הרמוני (HNPs). האחרונים הם משפחה חדשה של בדיקות שהוכנסו לאחרונה לתיוג דגימות ביולוגיות להדמיה רב פוטון. HNPs מסוגל להכפיל את התדירות של אור העירור על ידי התהליך האופטי קוי של דור השני הרמוני עם אין הגבלה על אורך גל העירור. רב פוטון מתודולוגיות לבידול hESC לאשכולות לב (נשמרו כתרבויות אוויר נוזלי לטווח ארוך) המבוסס מוצגים בפירוט. בפרט, ראיות על איך למקסם את הפליטה האינטנסיבית השנייה ההרמונית (SH) של HNPs המבודד במהלך ניטור 3D של רקמת לב פועם ב3D מוצגת. הניתוח של תמונות וכתוצאה מכך לאחזר דפוסי תזוזת 3D הוא גם מפורט.

לפני הערכת פעילות המכות על ידי ההדמיה confocal, אפיון מדוקדק של התגובה האופטית לא לינארית של מסנני PTFE בוצע, לבד או בנוכחות HNPs בריכוז גבוה (1 מ&quot;ג / מיליליטר). הוא הבטיח כי: א) הקרינה נרגשת שני הפוטונים המצע החשוף היא חלשה מאוד ולא יכולה למנוע מדידת הדגימות ביולוגיות הרלוונט...

Watch this Scientific Journal Video about Harmonic Nanoparticles for Regenerative Research at JoVE.com

Harmonic Nanoparticles for Regenerative Research

הרמוני חלקיקים למחקר הרגנרציה

פרטי פרוטוקול ניתנים לתאים במבחנה תיוג גזע עובריים אנושיים עם חלקיקים ליצירת הרמוניים שני. מתודולוגיות לחקירת hESC ידי מיקרוסקופית רב פוטון והבידול שלהם בצבירי לב גם מוצגות.

In this visualized experiment, protocol details are provided for in vitro labeling of human embryonic stem cells (hESC) with second harmonic generation ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Constructing a Collagen Hydrogel for the Delivery of Stem Cell-loaded Chitosan Microspheres

בניית Hydrogel קולגן עבור משלוח של התא טעון גזע Chitosan microspheres

Multipotent stem cells have been shown to be extremely useful in the field of regenerative medicine1-3. However, in order to use these cells effectively ...

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

Viral Nanoparticles for In vivo Tumor Imaging

חלקיקים נגיפיים עבור<em&gt; בחי</em&gt; הדמית גידול

The use of nanomaterials has the potential to revolutionize materials science and medicine. Currently, a number of different nanoparticles are being ...

Biofunctionalized Prussian Blue Nanoparticles for Multimodal Molecular Imaging Applications

Biofunctionalized הכחול פרוסים חלקיקים ליישומי הדמיה מולקולריים Multimodal

Multimodal, molecular imaging allows the visualization of biological processes at cellular, subcellular, and molecular-level resolutions using multiple, ...

Solid Lipid Nanoparticles (SLNs) for Intracellular Targeting Applications

Solid Lipid Nanoparticles SLNs for Intracellular Targeting Applications

מוצקים שומנים חלקיקים (SLNs) אפליקציות לתאיות מיקוד

Nanoparticle-based delivery vehicles have shown great promise for intracellular targeting applications, providing a mechanism to specifically alter ...

Correlative Light- and Electron Microscopy Using Quantum Dot Nanoparticles

מיקרוסקופי אלקטרונים בהירי-עור גומל באמצעות חלקיקי נקודה קוונטית

A method is described whereby quantum dot (QD) nanoparticles can be used for correlative immunocytochemical studies of human pathology tissue using ...

Neonatal Cardiac Scaffolds: Novel Matrices for Regenerative Studies

Neonatal לב פיגומים: מטריצות Novel ללימודי הרגנרציה

The only definitive therapy for end stage heart failure is orthotopic heart transplantation.  Each year, it is estimated that more than 100,000 donor ...

Production of Metal Nanoparticles by Pulsed Laser-ablation in Liquids: A Tool for Studying the Antibacterial Properties of Nanoparticles

ייצור של חלקיקי מתכת על ידי פעימה לייזר ablation בנוזלים: כלי לחקר מאפיינים אנטיבקטריאליים של חלקיקים

The emergence of multidrug-resistant bacteria is a global clinical concern leading some to speculate about our return to a "pre-antibiotics" era of ...

20 mJ, 1 ps Yb:YAG Thin-disk Regenerative Amplifier

20 mJ, 1 PS Yb: YAG דיסק דק מגבר משובי

This is a report on a 100 W, 20 mJ, 1 ps Yb:YAG thin-disk regenerative amplifier. A homemade Yb:YAG thin-disk, Kerr-lens mode-locked oscillator with ...