Name: technique of subnormothermic ex vivo liver perfusion for the storage, assessment, and repair of marginal liver grafts
Uploaded: 2014-08-13T15:00:00
Duration: 9 min 29 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts at JoVE.com

Работа выполнена при поддержке грантов на исследования по пересадке Roche органов Research Foundation (ROTRF) и Astellas. Маркус Selzner поддержали премию развития ASTS карьеры. Маттиас Кнаак при поддержке стипендии Astellas Research. Мы благодарим Уве Mummenhoff и семью Birmingham за их щедрую поддержку.

<ol>
	<li>Qiu, J., Ozawa, M., Terasaki, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+transplantation+in+the+United+States.">Liver transplantation in the United States.</a> Clinical Transplants. , 17-28 (2005).</li><li>Maheshwari, A., Maley, W., Li, Z., Thuluvath, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+complications+and+outcomes+of+liver+transplantation+from+donors+after+cardiac+death.">Biliary complications and outcomes of liver transplantation from donors after cardiac death.</a> Liver Transpl. 13 (12), 1645-1653 (2007).</li><li>Reich, D. J., Hong, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+status+of+donation+after+cardiac+death+liver+transplantation.">Current status of donation after cardiac death liver transplantation.</a> Curr Opin Organ Transplant. 15 (3), 316-321 (2010).</li><li>Grewal, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+transplantation+using+controlled+donation+after+cardiac+death+donors:+an+analysis+of+a+large+single-center+experience.">Liver transplantation using controlled donation after cardiac death donors: an analysis of a large single-center experience.</a> Liver Transpl. 15 (9), 1028-1035 (2009).</li><li>Nguyen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+outcomes+of+donation+after+cardiac+death+liver+allografts+from+a+single+center.">Long-term outcomes of donation after cardiac death liver allografts from a single center.</a> Clin Transplant. 23 (2), 168-173 (2009).</li><li>Heidenhain, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+and+risk+factors+for+ischemic-type+biliary+lesions+following+orthotopic+liver+transplantation.">Incidence of and risk factors for ischemic-type biliary lesions following orthotopic liver transplantation.</a> Transpl Int. 23 (1), 14-22 (2010).</li><li>Moench, C., Uhrig, A., Lohse, A. W., Otto, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CC+chemokine+receptor+5delta32+polymorphism-a+risk+factor+for+ischemic-type+biliary+lesions+following+orthotopic+liver+transplantation.">CC chemokine receptor 5delta32 polymorphism-a risk factor for ischemic-type biliary lesions following orthotopic liver transplantation.</a> Liver Transpl. 10 (3), 434-439 (2004).</li><li>Iacob, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic,+immunological+and+clinical+risk+factors+for+biliary+strictures+following+liver+transplantation.">Genetic, immunological and clinical risk factors for biliary strictures following liver transplantation.</a> Liver Int. 32 (8), 1253-1261 (2012).</li><li>Heidenhain, C., Puhl, G., Moench, C., Lautem, A., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokine+Receptor-5Delta32+Mutation+is+No+Risk+Factor+for+Ischemic-Type+Biliary+Lesion+in+Liver+Transplantation.">Chemokine Receptor-5Delta32 Mutation is No Risk Factor for Ischemic-Type Biliary Lesion in Liver Transplantation.</a> J Transplant. , (2009).</li><li>Hashimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+tissue+plasminogen+activator+in+liver+transplantation+from+donation+after+cardiac+death+donors.">Use of tissue plasminogen activator in liver transplantation from donation after cardiac death donors.</a> Am J Transplant. 10 (12), 2665-2672 (2010).</li><li>Staib, W., Scholz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Stoffwechsel der perfundierten Leber. , (1968).</li><li>Brauer, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver.">Liver.</a> Annu Rev Physiol. 18, 253-278 (1956).</li><li>Boehnert, M. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+acellular+ex+vivo+liver+perfusion+reduces+liver+and+bile+duct+injury+of+pig+livers+retrieved+after+cardiac+death.">Normothermic acellular ex vivo liver perfusion reduces liver and bile duct injury of pig livers retrieved after cardiac death.</a> Am J Transplant. 13 (6), 1441-1449 (2013).</li><li>Guarrera, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+machine+preservation+in+human+liver+transplantation:+the+first+clinical+series.">Hypothermic machine preservation in human liver transplantation: the first clinical series.</a> Am J Transplant. 10 (2), 372-381 (2010).</li><li>Fondevila, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+oxygenated+machine+perfusion+in+porcine+donation+after+circulatory+determination+of+death+liver+transplant.">Hypothermic oxygenated machine perfusion in porcine donation after circulatory determination of death liver transplant.</a> Transplantation. 94 (1), 22-29 (2012).</li><li>Rougemont, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One+hour+hypothermic+oxygenated+perfusion+(HOPE)+protects+nonviable+liver+allografts+donated+after+cardiac+death.">One hour hypothermic oxygenated perfusion (HOPE) protects nonviable liver allografts donated after cardiac death.</a> Ann Surg. 250 (5), 674-683 (2009).</li><li>Chung, W. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Addition+of+a+kidney+to+the+normothermic+ex+vivo+perfused+porcine+liver+model+does+not+increase+cytokine+response.">Addition of a kidney to the normothermic ex vivo perfused porcine liver model does not increase cytokine response.</a> J Artif Organs. 15 (3), 290-294 (2012).</li><li>Brockmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normothermic+perfusion:+a+new+paradigm+for+organ+preservation.">Normothermic perfusion: a new paradigm for organ preservation.</a> Ann Surg. 250 (1), 1-6 (2009).</li><li>Hessheimer, A. J., Fondevila, C., Garc&#237;a-Valdecasas, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracorporeal+machine+liver+perfusion:+are+we+warming+up.">Extracorporeal machine liver perfusion: are we warming up.</a> Curr Opin Organ Transplant. 17 (2), 143-147 (2012).</li><li>Vogel, T., Brockmann, J. G., Friend, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex-vivo+normothermic+liver+perfusion:+an+update.">Ex-vivo normothermic liver perfusion: an update.</a> Curr Opin Organ Transplant. 15 (2), 167-172 (2010).</li><li>Swindle, M. M., Smith, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Best+practices+for+performing+experimental+surgery+in+swine.">Best practices for performing experimental surgery in swine.</a> J Invest Surg. 26 (2), 63-71 (2013).</li><li>Smith, A. C., Swindle, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+swine+for+the+laboratory.">Preparation of swine for the laboratory.</a> ILAR J. 47 (4), 358-363 (2006).</li><li>Cywes, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+intraportal+glucose+infusion+on+hepatic+glycogen+content+and+degradation,+and+outcome+of+liver+transplantation.">Effect of intraportal glucose infusion on hepatic glycogen content and degradation, and outcome of liver transplantation.</a> Ann Surg. 216 (3), 235-246 (1992).</li><li>Ishida, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+oral,+peripheral+intravenous,+and+intraportal+glucose+on+hepatic+glucose+uptake+and+insulin+and+glucagon+extraction+in+conscious+dogs.">Differential effects of oral, peripheral intravenous, and intraportal glucose on hepatic glucose uptake and insulin and glucagon extraction in conscious dogs.</a> J Clin Invest. 72 (2), 590-601 (1983).</li><li>Morsiani, E., Aleotti, A., Ricci, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Haemodynamic+and+ultrastructural+observations+on+the+rat+liver+after+two-thirds+partial+hepatectomy.">Haemodynamic and ultrastructural observations on the rat liver after two-thirds partial hepatectomy.</a> J Anat. 4 (Pt 4), 507-515 (1998).</li><li>Sch&#246;n, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+transplantation+after+organ+preservation+with+normothermic+extracorporeal+perfusion.">Liver transplantation after organ preservation with normothermic extracorporeal perfusion.</a> Ann Surg. 233 (1), 114-123 (2001).</li><li>Currin, R. T., Gores, G. J., Thurman, R. G., Lemasters, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+by+acidotic+pH+against+anoxic+cell+killing+in+perfused+rat+liver:+evidence+for+a+pH+paradox.">Protection by acidotic pH against anoxic cell killing in perfused rat liver: evidence for a pH paradox.</a> FASEB J. 5 (2), 207-210 (1991).</li><li>Derveaux, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+ex+vivo+vascular+resistance+reflect+viability+of+non-heart-beating+donor+livers?.">Does ex vivo vascular resistance reflect viability of non-heart-beating donor livers?.</a> Transplant Proc. 37 (1), 338-339 (2005).</li><li>Guarrera, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermic+Machine+Preservation+of+Human+Liver+Allografts:+Markers+of+Reperfusion+Injury+[abstract#+1282].">Hypothermic Machine Preservation of Human Liver Allografts: Markers of Reperfusion Injury [abstract# 1282].</a> Am J Transpl. 7, 476 (2007).</li><li>Tolboom, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subnormothermic+machine+perfusion+at+both+20&#176;C+and+30&#176;C+recovers+ischemic+rat+livers+for+successful+transplantation.">Subnormothermic machine perfusion at both 20&#176;C and 30&#176;C recovers ischemic rat livers for successful transplantation.</a> J Surg Res. 175 (1), 149-156 (2012).</li><li>Vollmar, B., Menger, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hepatic+microcirculation:+mechanistic+contributions+and+therapeutic+targets+in+liver+injury+and+repair.">The hepatic microcirculation: mechanistic contributions and therapeutic targets in liver injury and repair.</a> Physiol Rev. 89 (4), 1269-1339 (2009).</li><li>Jamieson, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+steatosis+and+normothermic+perfusion-preliminary+experiments+in+a+porcine+model.">Hepatic steatosis and normothermic perfusion-preliminary experiments in a porcine model.</a> Transplantation. 92 (3), 289-295 (2011).</li></ol>

Авторы не имеют ничего раскрывать.

В модели свиньи, которая имитирует трансплантации печени DCD, мы показали, что subnormothermic перфузии печени с сотовым результатов перфузии раствора в стабильных параметров перфузии, минимальная травматизация гепатоцитов и активного метаболизма в печени. Наша subnormothermic перфузии настроить доказала восстановить гепатоцеллюлярной гомеостаз и обмен веществ. Гликогена восстанавливается и метаболиты отбрасываются. Экс естественных перфузии печени как метода сохранения предлагает впервые возможность оценить маркеры функции трансплантата и травмы во время сохранения органов и до трансплантации. Кроме макроскопического оценки трансплантата перфузии однородности, значения расхода обеспечивают хороший показатель жизнеспособности трансплантата и степень ишемического повреждения, нанесенный ему ранее 29. Потребление кислорода и производство желчи являются маркерами метаболические функции. Уровни печеночных ферментов, таких как AST может быть использован какSESS степень и динамику развития гепатоцеллюлярной травмы 30. Это тщательная оценка трансплантат может позволить надежную дискриминацию между трансплантации и не трансплантации маргинальных органов. Мы выбрали subnormothermic температуру 33 ° С в нашей системе перфузии, так как температура достаточна, чтобы позволить обмен веществ, а также АТФ и синтез гликогена. В то же время, он обеспечивает снижение потребности в кислороде в сравнении с нормотермических настроек перфузии, который обеспечивает дополнительную безопасность в отношении ишемического повреждения. В целом, температура перфузии выше 30 ° С показали, чтобы свести к минимуму холодной ишемического повреждения и обеспечить достаточную метаболическую активность 31. В отличие от других групп, мы не использовали цельную кровь, как перфузата, но нормо-осмотическое решение альбумина (Steen) с промывали и фильтровали красных кровяных клеток. Исключив компонент плазмы, а также тромбоциты и лейкоциты, перфузии решение деподписали минимизировать провоспалительных сигналов во время экс естественных перфузии. В дополнение к оценке трансплантата, стабильные условия перфузии в течение нескольких часов позволит обработку трансплантата. Многочисленные молекулы показали для ослабления реперфузионного в экспериментальных условиях 32. Тем не менее, почти нет Режим лечения сделал свой путь в клиническую практику, пока. Одна из причин, кажется, отсутствие возможности применить эти процедуры во время холодного хранения. Метаболически активными печени на экс естественных перфузии системы является оптимальным для применения любой вид лечения. В связи с этим, не только процедуры для улучшения условий реперфузии, как ослабление активности клеток Купфера или продувки активных форм кислорода являются возможными, но и лечения, как генной терапии для кондиционирования трансплантата, например, против гепатита С рецидива. Другие потенциальные стратегии могут включать сокращение на стеатоз во время экс естественных перфузиипериод 33. Таким образом, экс естественных перфузии печени является новая стратегия, чтобы минимизировать холодную ишемического повреждения и оценить предельные трансплантатов печени перед трансплантацией печени. Экс естественных установка перфузии предоставляет уникальную возможность для ремонта и состояние трансплантаты до трансплантации.

Трансплантация печени является единственным вариантом лечения для пациентов с терминальной стадией заболевания печени или передовой гепатоцеллюлярной карциномы. За последние 25 лет, количество ожидающих кандидатов список постепенно увеличивается и превысило число доступных трансплантатов. Количество сердце бьется доноров уменьшилось за последнее десятилетие. В то же время, количество краевых трансплантатов, таких как пожертвования после сердечной смерти (DCD), а также старых и жирных печени увеличили 1,2. Маргинальные трансплантаты часто отказался трансплантации печени в связи с повышенной вероятностью первичного трансплантата неуплату или отсроченной функции. В DCD трансплантатов, развитие ишемической типа желчных стриктур (ITBS) является предметом особой заботы. С обычной статической холодной технике консервации, ITBS встречаются примерно 10-40% от DCD трансплантатов. В большинстве пациентов, ITBS приводит к повторной трансплантации или смерти пациента. Особенно длительные теплые и холодные ишемические пояс рискфакторами для ITBS 3-7. Донор возраст, генетическая предрасположенность (например, CCR5 дельта 32), и выбора сохранения решения также были обсуждены факторы дополнительного риска 7-10. Частичное microthrombosis из peribiliary судов был предложен в качестве механизма для ITBS после трансплантации печени с DCD прививает 11. До введения клинической трансплантации печени, экс виво перфузии печени были использованы для изучения печеночный метаболизм и физиологию 12,13. После трансплантации печени нашел свой ​​путь в клинических условиях в 1960-х, бесчисленные попытки были сделаны, чтобы использовать Экс Vivo перфузии печени как метод сохранения, имитируя физиологические питания и оксигенации условия. Его полезность для сохранения маргинальных трансплантатов была исследована в последнее десятилетие, но она не достигла стандартный клинический уход. Мы недавно описал снижение в желчи травмы протоков в DТрансплантация печени CD экс естественных перфузии сохранение 14. Были сделаны различные подходы в отношении перфузии раствором. Выбор колеблется от сотовых решений как цельной крови от животного-донора или эритроцитарной массы в сочетании с человеческой плазме, к ацеллюлярных подходов, как машины университета решения Висконсин, решения IGL или Steen решения 14-19. Температура колеблется от 4-37 ° C 20. Номенклатура в гипотермической, subnormothermic и нормотермической очень изменчива и противоречива. Все разные методы, решения и параметры температуры направлены на 1) стабильных условиях перфузии, 2) достаточно кислородом, и 3) восстановление функции органа. Укрепление потенциала сохранение, а также способность оценки и лечения органов во время нормотермической и subnormothermic перфузии сталкивается высшее техническое сложность и затраты по сравнению с гипотермической перфузии 20,21. Мы разработали subnormothermic Экс Vivo печени системы перфузии в течение последних 4 лет. Система может быть использована для 1) &quot;перезарядить&quot; печеночный содержание энергии, 2) для оценки качества трансплантата, и в 3) ремонт маргинальные печень перед трансплантацией. Следующий протокол содержит всю информацию для стабильной печеночной перфузии.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>circuit</td>
			<td>Maquet (Hirrlingen, GER)</td>
			<td>custom made</td>
			<td>main reservoir (3L, 3/8&#34; outflow)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>portal reservoir (1.5L, 1/4&#34;, outflow)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>centrifugal pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>oxygenator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>-</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>leukocyte filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tubing (1/4&#34; x 1/16&#34;)</td>
			<td>Raumedic (Helmbrechts, GER)</td>
			<td>MED7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tubing (3/8&#34; x 3/32&#34;)</td>
			<td>Raumedic (Helmbrechts, GER)</td>
			<td>MED7536</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tubing connectors</td>
			<td>Raumedic (Helmbrechts, GER)</td>
			<td></td>
			<td>various sizes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dialysis filter, Optiflux F160NR</td>
			<td>Fresenius Medical Care (Waltham, MA)</td>
			<td>F160NR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>STEEN solution</td>
			<td>XVIVO (G&#246;teborg, SWE)</td>
			<td>19004</td>
			<td>2L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dialysis acid concentrate A</td>
			<td>Baxter (Mississauga, ON)</td>
			<td>D12188M</td>
			<td>45ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>amino acid, Travasol 10%</td>
			<td>Baxter (Mississauga, ON)</td>
			<td>JB6760</td>
			<td>100ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Sigma-Aldrich (St. Louis, MO)</td>
			<td>P2256</td>
			<td>1.1g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Sandoz Canada Inc (Toronto, ON)</td>
			<td>10750</td>
			<td>40000 iU</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Gluconate</td>
			<td>Pharmaceutical Partners of Canada (Richmond Hill, ON)</td>
			<td>C31110</td>
			<td>10mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fast acting Insulin</td>
			<td>various vendors</td>
			<td></td>
			<td>1000 iU</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazoline</td>
			<td>various vendors</td>
			<td></td>
			<td>1g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metronidazole</td>
			<td>Baxter (Mississauga, ON)</td>
			<td>JB3401</td>
			<td>500mg</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

technique of subnormothermic ex vivo liver perfusion for the storage, assessment, and repair of marginal liver grafts

Успех трансплантации печени привело к резкому нехватки органов. В большинстве трансплантации регионах 20-30% пациентов, включенных в список ожидания для трансплантации печени умирает, не получив трансплантации или исключены для прогрессирования заболевания. Одна из стратегий, чтобы увеличить доноров бассейн является использование маргинальных трансплантатов, таких как жирные печени, трансплантатов от старых доноров или пожертвования после сердечной смерти (DCD). Нынешняя методика сохранение холодной статической памяти только плохо переносится маргинальных печени приводит к значительному повреждению органа. Кроме того, холодного хранения статической орган не позволяет оценку или ремонт перед трансплантацией трансплантата. Эти недостатки холодной статической сохранения вызвали интерес к теплой сохранения перфузии органов для уменьшения холодной ишемического повреждения, оценить трансплантатов печени во время сохранения, а также изучить возможность восстановить предельные печень до трансплантации. Оптимальные пресуверенным и расхода условия, температура перфузии, состав перфузии раствора и потребность в переносчика кислорода был спорным в прошлом. Несмотря на многообещающие результаты в нескольких исследованиях на животных, сложность и затраты предотвратили более широкий клиническое применение до сих пор. Недавно, с повышенной технологий и лучшего понимания физиологии печени во время экс естественных перфузии исход теплой перфузии печени улучшилось и последовательно хорошие результаты могут быть достигнуты. Эта статья будет предоставлять информацию о поиске печени, методов хранения и изолированной перфузии печени у свиней. Мы проиллюстрируем) требования, чтобы обеспечить достаточное поступление кислорода к органу, б) технические соображения о перфузии машины и перфузии раствора, и с) биохимических аспектов изолированных органах.

Ниже мы приводим результаты 5 перфузии экспериментов с DCD-трансплантатов после 45 мин прогрева и 4 часа холодной ишемии до начала subnormothermic экс естественных перфузии. Основная цель для экс естественных перфузии печени является обеспечение достаточного притока кислорода к органу. Ишемия вызывает вазоконстрикцию, таким образом, повышая устойчивость перфузии. Достижение постоянные сосудистые потоки со стабильными давления является хорошим показателем адекватной оксигенации. В течение периода индукции, равного 1-2 ч раствор перфузии и орган нагревают до 33 ° С, что болезней сосудов сопротивление печени. После того, как целевая температура 33 ° С достигается, значения расхода уровня при постоянном, почти физиологического диапазона для остальной части 6 ч времени перфузии (3А-3D). В то же время, этот орган становится метаболически активными. Фиг.4А показывает венозный рО &lt;суб&gt; 2, маркер потребления кислорода. В течение первых 2 часов венозные рО 2 снижается до постоянного плато. В этой метаболически активном состоянии, печень начинает производить желчь (рисунок 4B). Диализатора обеспечивает сбалансированное электролитного гомеостаза (Цифры 4C-4D). Первоначальный гиперкалиемия быстро нивелируются. Измерение онлайн АСТ служит мониторинга гепатоцеллюлярного повреждения. Рисунок 5 отображает только неглубокую увеличение линейной AST течение всего периода перфузии. H &amp; E окрашивание после 6 часов перфузии показывает некроз гепатоцитов &lt;5% с невредимым очаговая и синусоидальной структуры (рисунок 6). PAS окрашивание в тот же момент времени показывает пополняется сотовой запасы гликогена по сравнению с истощенной хранения в холодных сохранившихся DCD-трансплантатов (рисунок 7). <img alt="Рисунок 3" src="/files/ftp_upload/51419/51419fig3highres.jpg" /> Рисунок 3 Перфузионные потоки и давление (п = 5, планки погрешностей показывают стандартное отклонение). (A, B) печеночной артерии (ГА) расхода и давления: Во время фазы потепления в первые 1-2 часа, поток увеличивается в стабильных давлениях и постоянна впоследствии. Глядя на уменьшении давления воротной вены (C), увеличение потока HA к концу перфузии может быть ауторегуляторного реакция печени. (С, D) воротной вены (PV) увеличивается потока, соответствующие потоку HA в ходе первые 2 ч потепления. Давления остаются относительно стабильными. <img alt="Рисунок 4" src="/files/ftp_upload/51419/51419fig4highres.jpg" /> Рисунок 4 параметры мониторинга (п = 5, планки погрешностей показывают стандартное отклонение). (А) венозная рО 2 в качестве маркера потребления кислорода и метаболической активности снижается в начальной фазе потепления в связи с активированным CELLULAг метаболизм; он остается стабильным после этого (Б) производство желчи в качестве маркера метаболической активности начинается при температуре около 30 ° С, и, таким образом, между первой и второй час перфузии (С, D) диализатора обеспечивает гомеостаз электролита..; начальная гиперкалиемия быстро сбалансированы. <img alt="Рисунок 5" src="/files/ftp_upload/51419/51419fig5highres.jpg" /> Рисунок 5 АСТ (п = 5, планки погрешностей показывают стандартное отклонение) АСТ является чувствительным маркером гепатоцеллюлярной травмы.; мелкой увеличение не предполагает значительный вред во время экс естественных перфузии. <img alt="Рисунок 6" src="/files/ftp_upload/51419/51419fig6highres.jpg" /> Рисунок 6 H &amp; E окрашивание (20-кратным увеличением). () Образец Шам печени до теплой ишемии, один представитель долька печени с неповрежденной architecturе. (В) Печень образца через 45 мин теплой ишемии, 4 ч холодной ишемии и 6 ч в subnormothermic перфузии, очаговая архитектура неповрежден без некроза и только минимальное набухание клеток, синусоидальные пространства умеренно расширены по сравнению с обман образец.

Watch this Scientific Journal Video about Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts at JoVE.com

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

Предельные трансплантаты, такие как жирные печени, трансплантатов из более старых доноров или печени, получаемых после сердечной смерти (DCD) переносят обычную, холодный статического хранения только слабо. Мы разработали новую модель subnormothermic экс естественных перфузии печени для сохранения, оценки и ремонта маргинальных трансплантатов печени до трансплантации.

Методика Subnormothermic<em&gt; Экс Vivo</em&gt; Печень перфузии для хранения, оценки и Ремонт окраинных печени трансплантатов

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

Steps for the Autologous Ex vivo Perfused Porcine Liver-kidney Experiment

Steps for the Autologous Ex vivo Perfused Porcine Liver-kidney Experiment

The use of ex vivo perfused models can mimic the physiological conditions of the liver for short periods, but to maintain normal homeostasis for an ...

Procedure for Human Saphenous Veins Ex Vivo Perfusion and External Reinforcement

Procedure for Human Saphenous Veins Ex Vivo Perfusion and External Reinforcement

Порядок человека подкожных вен<em&gt; Экс Vivo</em&gt; Перфузии и внешнего подкрепления

The mainstay of contemporary therapies for extensive occlusive arterial disease is venous bypass graft. However, its durability is threatened by intimal ...

Isolated Hepatic Perfusion as a Treatment for Liver Metastases of Uveal Melanoma

Изолированные печени перфузии для лечения метастазов в печени сосудистой меланомы

Isolated hepatic perfusion (IHP) is a procedure where the liver is surgically isolated and perfused with a high concentration of the chemotherapeutic ...

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Ex Situ Normothermic Machine Perfusion of Donor Livers

Экс Ситу нормотермических машина перфузии Печени доноров

In contrast to conventional static cold preservation (0-4 &#176;C), ex situ machine perfusion may provide better preservation of donor livers. Continuous ...

Functional Human Liver Preservation and Recovery by Means of Subnormothermic Machine Perfusion

Функциональная печени человека Сохранение и восстановление с помощью Subnormothermic машины перфузии

There is currently a severe shortage of liver grafts available for transplantation.  Novel organ preservation techniques are needed to expand the pool of ...

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Normothermic Ex Vivo Kidney Perfusion for the Preservation of Kidney Grafts prior to Transplantation

Нормотермических<em&gt; Экс Vivo</em&gt; Почки перфузии по охране почки графты до трансплантации

Kidney transplantation has become a well-established treatment option for patients with end-stage renal failure. The persisting organ shortage remains a ...

Method of Direct Segmental Intra-hepatic Delivery Using a Rat Liver Hilar Clamp Model

Метод прямых Сегментные Intra-печеночной доставка с помощью модели печени крысы Hilar зажима

Major hepatic surgery with inflow occlusion, and liver transplantation, necessitate a period of warm ischemia, and a period of reperfusion leading to ...

Laparoscopic Technique for Serial Collection of Liver and Mesenteric Lymph Nodes in Macaques

Лапароскопическая Техника для последовательного Сборнике печени и мезентериальных лимфоузлов макак

The mesenteric lymph nodes (MLN) and the liver are exposed to microbes and microbial products from the gastrointestinal (GI) tract, making them ...

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Оценка плазменной коагуляции на ткани печени в большой модели на животных в естественных условиях

Plasma coagulation as a form of electrocautery is used in liver surgery for decades to seal the large liver cut surface after major hepatectomy to prevent ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

Мелких животных модель Ex Vivo нормотермических печени перфузии

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...