Name: heterotopic mucosal engrafting procedure for direct drug delivery to the brain in mice
Uploaded: 2014-07-16T14:00:00
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この研究は、パーキンソン病リサーチ2011迅速な応答イノベーションアワードプログラムのMci​​hael J·フォックス財団によって資金を供給された。資金提供者は、研究デザイン、データ収集と分析、公開することを決定、または原稿の準備に何の役割がありませんでした。

手術前に行われるためにすべての手続きが動物実験委員会および追加倫理的または法的当局によって承認され、人道的な動物の治療プラクティスを使用していることを確認してください。これは、無菌手術の条件を用いて動物実験委員会は、法を承認した使用して、マウスを麻酔し、手術中に獣医軟膏をマウスに目を潤滑し、術後のケアを提供することを含む。手順の側面が承認されるかど?...

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	<li>Cardoso, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Looking+at+the+blood-brain+barrier:+Molecular+anatomy+and+possible+investigation+approaches.">Looking at the blood-brain barrier: Molecular anatomy and possible investigation approaches.</a> Brain Res. Rev. 64, 328-363 (2010).</li><li>Pardridge, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+transport+across+the+blood-brain+barrier.">Drug transport across the blood-brain barrier.</a> J. Cereb. 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Lett. 252, 87-90 (1998).</li><li>Grondin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=controlled+GDNF+infusion+promotes+structural+and+functional+recovery+in+advanced+parkinsonian+monkeys.">controlled GDNF infusion promotes structural and functional recovery in advanced parkinsonian monkeys.</a> Brain. 125, 2191-2201 (2002).</li><li>Kirik, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localized+striatal+delivery+of+GDNF+as+a+treatment+for+Parkinson+disease.">Localized striatal delivery of GDNF as a treatment for Parkinson disease.</a> Nat. Neurosci. 7, 105-110 (2004).</li><li>Pardridge, W. 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S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+cerebrospinal+fluid+leak+repair:+An+animal+model+to+test+feasibility.">Laser-assisted cerebrospinal fluid leak repair: An animal model to test feasibility.</a> Otolaryngol. Head Neck Surg. 137, 810-814 (2007).</li></ol>

ここに記載されている手順の最も困難な段階は、脳の表面に適切なサイズの粘膜を正常に転送することです。収穫され、鼻中隔が十分に大きく、十分に洗浄された場合は、この手順が大幅に容易になる。中隔の腹側の部分が切り捨てられた場合、新たな移植片が得られるはずである。掘削角度は、粘膜ドリルによって損傷を受けないことを保証するために、マウスの頭部に対して垂直である?...

神経および精神疾患の治療に重大な中枢神経系1-3に到達するすべての潜在的な薬剤の95％以上を阻止する血液脳関門（BBB）の存在によって妨げられる。全身的に送達されたとき、それがBBB 4-6に浸透することができないため、例えば、神経栄養因子（GDNF）、グリア由来の脳に直接注射した場合に、パーキンソン病を治療するのに有効であることが示されている、しかし、効果がない。 多数の接近は、この問題を回避しようとするために開発されている。 neurotheraputicsの全身送達の改善は、脳毛細血管内皮上にある輸送タンパク質に選択的な抗体を含有する薬物複合体を使用することによって実証されている。しかしながら、この方法は、医薬品7,8の幅広い適用可能であることが示されていない。さらに、BBBの浸透開口部はクリニック使用されています。関心9の脳領域へのより直接的な配信とは対照的に、同盟国、しかし、この方法は、全身薬物投与の影響を受けている。相当な努力が直接脳に10月12日を対象としたのを期待して経鼻配信を最適化するようになってきた。いくつかの成功が達成されてきたが、決定的な結果は、例えば、インスリン、13,14などの内因性受容体を有する薬物のために得られている。さらに経鼻デリバリーのメカニズムは、嗅覚ニューロンの取り込みを介して、または血流11を通って脳への間接的なエントリを示唆する証拠と議論されています。植込み型カテーテルを使用する直接、経頭蓋配達がこの手順では、侵襲性が高いと多数の合併症15,16と関連し、達成された。現在までに、脳内に高分子量化合物を送達するためのない一般的な、低侵襲性の方法は存在しない。 マウスの外科的処置は、本明細書で提示さそれは、脳で半透過性のインターフェイスを作成します。これは、マウスでの外科的開頭欠損上粘膜外植片17を移植することによって達成される。この手順を使用して、それは500 kDaの最大水溶性化合物は、時間と分子量依存的に18の両方において、中枢神経系（直接脳実質内へ、並びに脳脊髄液への）に送達することができることが示されている。 BBBを迂回するこの方法は、経鼻内視鏡手術19,20次の頭蓋骨に穴を修復するために血管新生粘膜移植片を使用していますヒトで頭蓋底の欠陥の修理のためのモデルです。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:848px;" width="849">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:220px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:263px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">mice</td>
			<td style="width:220px;">Taconic</td>
			<td>C57BL/6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:220px;">Piramal Healthcare</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Student Fine Scissors</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91461-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">pneumatic drill</td>
			<td style="width:220px;">MTI Dental</td>
			<td style="width:119px;">333-CB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">drill bit</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">forcepts</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91106-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">0.9% Sodium Chloride Injection USP</td>
			<td style="width:220px;">Abbott Laboratories</td>
			<td>4925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Polystyrene Detri Dish</td>
			<td style="width:220px;">Fisher</td>
			<td>08-757-12</td>
			<td>for temporarily storing graft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bead Sterilizer</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxygen/Isoflurane System</td>
			<td style="width:220px;">SurgiVet</td>
			<td>V720100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Temperature Control System</td>
			<td style="width:220px;">Physitemp</td>
			<td style="width:119px;">TCAT-2LV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Animal Stereotaxic Instrument</td>
			<td style="width:220px;">KOPF</td>
			<td style="width:119px;">Model 940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye Ointment</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td style="width:220px;">Fisher</td>
			<td>23-400-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7.5% Provadone Iodine</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Betadine surgical scrub</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Surgical Blade Stainless</td>
			<td style="width:220px;">Feather</td>
			<td style="width:119px;">2976#10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Scalpel Handle - #3</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3% Hydogen Peroxide</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>for cleaning the skull</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Vetbond Tissue Adhesive</td>
			<td style="width:220px;">3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">needles</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>305176</td>
			<td>needle tip cut off and used as well</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309597</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">nitrile gloves</td>
			<td style="width:220px;">Denville Scientific Inc</td>
			<td>G4162</td>
			<td>for well closure and protection of graft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5-0 Nylon Suture Thread</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Student Halsey Needle Holder</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91201-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">cyanoacrylate adhesive</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>commecially available super glue</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dental Cement Kit, 1 lb, Pink Opaque</td>
			<td style="width:220px;">Stoelting</td>
			<td>51458</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">isobutane (2-methylbutane)</td>
			<td style="width:220px;">Aldrich</td>
			<td>M32631</td>
			<td>for dry ice bath</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">dry ice</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

heterotopic mucosal engrafting procedure for direct drug delivery to the brain in mice

脳への治療薬の送達は、血流から脳組織への極性および高分子量化合物の通過を制限する血液脳関門（BBB）の存在によって妨げられる。ヒトでのいくつかの直接の受け渡しの成功は、経頭蓋カテーテルの移植を介して達成された。しかし、この方法は非常に侵襲的であり、数々の合併症を伴うです。より侵襲性の低い代替物は、ヒトにおける内視鏡経鼻腫瘍除去手術後の頭蓋底の欠陥を修復するために使用される鼻粘膜のような外科的に移植され、半透膜を介して脳に投与するためであろう。この膜も薬物伝達が効率的にBBBをバイパスして、脳と脳脊髄液に直接拡散する。このアプローチに触発され、マウスでの外科的アプローチは、頭蓋外の手術のBBB欠損上移植されたドナー中隔粘膜を使用して開発した。このモデルは、効果的に示されている脳内への高分子量化合物の通過を可能にする。数多くの薬剤候補がBBBを通過することができないので、このモデルでは、神経精神疾患に対する新しい治療法の前臨床試験を実施するための貴重なものです。

十分な大きさの鼻中隔の外植片を得ることがその後のステップのために重要である。これは、 図1aに示されたドナーマウスの頭蓋上の位置で穿孔することによって達成することができる。 図1bに示すように、この経路に沿って切断して十分なサイズの外植片を生成する。掘削深さが十分に深くない場合には、移植片は切り捨てられ、それが脳の表面を覆うように十分...

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Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

マウスの脳に直接薬剤送達のための異粘膜移植手順

ヒト視鏡頭蓋底再建のマウスモデルは、鼻粘膜移植片を用いて、脳と鼻の間の半透過性界面を作成することが開発されている。この方法では、研究者は、全身投与された場合に他の方法で血液脳関門によって除外された高分子量治療薬の中枢神経系への送達を研究することを可能にする。

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

マイクロコンピュータ断層撮影イメージング用Microfilで虚血後肢と血管系の灌流に浸透ドラッグデリバリー

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

ラット網膜へのエルバックス40Wを通じて徐放性ドラッグデリバリー：慢性症状の治療のための含意

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

Direct Mouse Trauma/Burn Model of Heterotopic Ossification

直接マウストラウマ/異所性骨化のモデルバーン

Heterotopic ossification (HO) is the formation of bone outside of the skeleton which forms following major trauma, burn injuries, and orthopaedic surgical ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

マウスにおける異子宮頸心臓移植

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

マウスの動静脈瘻内皮への管腔内薬物送達

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

Ivacaftor、主要な代謝産物および嚢胞性線維症患者の体液中の Lumacaftor の臨床サンプルの高スループット分析のための最適化された LC-MS/MS 法

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

体外血液脳関門ブタ脳血管内皮細胞に基づくモデルの確立のための改良法

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

Trans-Tympanic Drug Delivery for the Treatment of Ototoxicity

難聴の治療のためのトランス鼓膜ドラッグデリバリー

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could ...

In Vivo Photolabeling of Cells in the Colon to Assess Migratory Potential of Hematopoietic Cells in Neonatal Mice

In Vivo Photolabeling of Cells in the Colon to Assess Migratory Potential of Hematopoietic Cells in Neonatal Mice

生体内で新生児マウスの造血細胞の移動の可能性を評価するためにコロンの細胞の Photolabeling

Enteric bacterial communities are established early in life and influence immune cell development and function. The neonatal microbiota is susceptible to ...

Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

鼻の頭脳への薬剤投与を評価する吸入麻酔下で経鼻投与する手法

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...