Name: cryo-electron microscopy specimen preparation by means of a focused ion beam
Uploaded: 2014-07-26T15:00:00
Duration: 10 min 54 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cryo-electron Microscopy Specimen Preparation By Means Of a Focused Ion Beam at JoVE.com

Это исследование получило поддержку от Проекта QNano http://www.qnano-ri.eu который финансируется Европейским сообществом исследовательских инфраструктур в рамках Программы FP7 емкость (грант № INFRA-2010-262163). Мы также благодарим исследовательский совет Formas за финансовую поддержку.

<ol>
	<li>Echlin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Low Temperature Microscopy and Analysis. , (1992).</li><li>Rubino, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+site-specific+focused-ion-beam+lift-out+method+for+cryo+Transmission+Electron+Microscopy.">A site-specific focused-ion-beam lift-out method for cryo Transmission Electron Microscopy.</a> J. Struct. Biol. 180, 572 (2012).</li><li>Studer, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+approach+for+cryofixation+by+high-pressure+freezing.">A new approach for cryofixation by high-pressure freezing.</a> J. Microsc. 203, 285 (2001).</li><li>Umrath, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cooling+bath+for+rapid+freezing+in+electron+microscopy.">Cooling bath for rapid freezing in electron microscopy.</a> J. Microsc. 101, 103 (1974).</li><li>Walther, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+in+freeze-fracturing+of+high-pressure+frozen+samples.">Recent progress in freeze-fracturing of high-pressure frozen samples.</a> J. Microsc. 212, 34 (2003).</li><li>Elder, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focused+ion+beam+micromachining+of+eukaryotic+cells+for+cryoelectron+tomography.">Focused ion beam micromachining of eukaryotic cells for cryoelectron tomography.</a> Cryo fixation. Techniques in Immunocytochemistry. , (1989).</li><li>Giannuzzi, L. A., Stevie, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Introduction to Focused Ion Beams. , (2005).</li><li>Marko, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focused-ion-beam+thinning+of+frozen-hydrated+biological+specimens+for+cryoelectron+microscopy.">Focused-ion-beam thinning of frozen-hydrated biological specimens for cryoelectron microscopy.</a> Nat. Methods. 4, 215 (2007).</li><li>Hayles, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+making+of+frozen-hydrated,+vitreous+lamellas+from+cells+for+cryo-electron+microscopy.">The making of frozen-hydrated, vitreous lamellas from cells for cryo-electron microscopy.</a> J. Struct. Biol. 172, 180 (2010).</li><li>Rigort, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focused+ion+beam+micromachining+of+eukaryotic+cells+for+cryoelectron+tomography.">Focused ion beam micromachining of eukaryotic cells for cryoelectron tomography.</a> J. Struct. Biol. 109, 4449-44 (2012).</li><li>Hsieh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+high-resolution+three-dimensional+imaging+of+native+mammalian+tissue:+electron+tomography+of+frozen-hydrated+rat+liver+sections.">Towards high-resolution three-dimensional imaging of native mammalian tissue: electron tomography of frozen-hydrated rat liver sections.</a> J. Struct. Biol. 153, 1 (2006).</li><li>McDowall, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+microscopy+of+frozen+hydrated+sections+of+vitreous+ice+and+vitrified+biological+samples.">Electron microscopy of frozen hydrated sections of vitreous ice and vitrified biological samples.</a> J. Microsc. 131, 1 (1983).</li><li>Hayles, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+improved+focused+ion+beam+milling+of+cryo-prepared+life+science+specimens.">A technique for improved focused ion beam milling of cryo-prepared life science specimens.</a> J. Microsc. 226, 263 (2007).</li><li>Pettersson, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+producing+site-specific+TEM+specimens+from+low+contrast+materials+with+nanometer+precision.">A method for producing site-specific TEM specimens from low contrast materials with nanometer precision.</a> Microsc. Microanal. 19 (1), 73 (2013).</li><li>W&#228;tjen, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cu+out-diffusion+in+kesterites—A+transmission+electron+microscopy+specimen+preparation+artifact.">Cu out-diffusion in kesterites—A transmission electron microscopy specimen preparation artifact.</a> Appl. Phys. Lett. Appl. Phys. Lett, 051902 (2013).</li></ol>

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Этот протокол является довольно простой адаптации до криогенных температур стандартной пробоподготовки FIB / TEM, используемого в материаловедении при комнатной температуре. Метод производит образцы ПЭМ без механических деформаций и ножевых марок (Основным недостатком приготовление гистологических срезов), хотя curtaining может возникнуть, если поверхность образца неоднородна. Это может быть уменьшена путем крио-осаждения слоя (укупорки в этой работе был использован Pt), Обработанная, пока не будет гладкой и невыразительный 13. Образцы с компонентами очень различной твердости, могут быть получены также без риска, что они будут разрушить в условиях стресса в процессе приготовления. Внутренние напряжения могут вызвать еще тонкий пластинчатый согнуть или локон, и в этом случае размер секции должен быть уменьшен. Недостатком по сравнению с другими метода является возможность изменять биологическую структуру в результате воздействия ионного пучка и возможной имплантации ионов в образце. Эти недостатки также происходить при комнатной температуре в течение образца подгоAtion в материаловедении 15. Они могут быть снижены путем заполнения истончение с конечной стадии полировки на самом низком ускоряющем напряжении для ионов (500-1000 В). Это очень нежный шаг полировки удалит поврежденный слой из пластинки. Из-за характера крио-осаждения (шаги 3,5, 3,10 и 3,13), большие части образца будет покрыта, тем самым препятствуя вид исходной поверхности. Это может затруднить отслеживать ROI, если несколько маркировка не используются, как это предлагается в пункте 3.3. Во время шагов 4,5 и 4,7 тонкие пластинчатые рисков, которые соприкасаются с воздухом. Это должно быть избегать, так как это вызвало бы влагу в воздухе с образованием кристаллов льда на поверхности образца, возможно до точки скрывая важные особенности. Эти шаги должны быть выполнены как можно быстрее, но в то же время неправильное обращение во время передачи может привести к потере образца онсамостоятельно. Рекомендуется, чтобы пользователь практикует эти шаги, используя пустые ПЭМ сетки перед попыткой на реальном образце производится. В материаловедения, FIB инструмент стал основным методом подготовки образца ТЕА в течение десятилетия ее коммерциализации. Поскольку он может быть использован практически на любого образца, это устраняет необходимость адаптировать технику подготовки к типу образца. Мы твердо верим, то же самое может произойти при криогенных температурах, благодаря методике, подробно описанной здесь. Его применение в более крупные образцы все еще ​​является предметом способности крио-сохранить их в керамической государства, но методы, такие как погружной замораживания или высокого давления морозильные 3,5 может оказаться оптимальные пути решения этой проблемы.

В этом протоколе cryo-FIB/SEM используется для производства образцов ПЭМ от конкретного региона образца, ранее идентифицированного с высокой точностью с помощью анализа СЭМ. Электронная микроскопия (сканирование или передача) анализ биологических образцов является рутинной техника, используемая для исследований и диагностики. SEM довольно быстро и легко использовать и интерпретировать, но информация получается только с поверхности образца и с разрешением в диапазоне 1,5 нм. ТЕМ имеет более высокое разрешение, но сложнее в реализации, анализ изображения не столь очевидна и в то время как основная информация получается, образцы должны разбавлять электрон прозрачности (менее 500 нм). Дополнительная проблема состоит в том, что требования вакуумные из этих инструментов, редко переносится водосодержащих образцов. В большинстве случаев, биологические образцы должны быть либо химически фиксированных (заменив воду с, например, полимеры) или высушивают. В обоих случаях существенных изменений вморфология и структура образца могут произойти. Подготовка Крио ТЕМ гидратированных образцов вызывает минимальные химические изменения, и это производит образцы как можно ближе к их нативном состоянии, особенно если витрификация льда получается 1-6. FIB широко используется для приготовления образцов ПЭМ своими многочисленными преимуществами 7. Чтобы назвать несколько: использование высокоэнергетических ионов в ближней нормальном падении минимизирует влияние материальных, связанных с дифференцированным ставкам фрезерных; область извлекается из объемного образца может быть выбран с точностью субмикронного; очень небольшое количество материала извлекается. Некоторые недавние технические разработки сделали возможным использованием FIB также для подготовки проб ПЭМ при криогенных температурах 2,8-10. Есть несколько преимуществ по сравнению с традиционным методом подготовки крио-приготовление гистологических срезов 11,12 используется в основном для образцов мягкой материи, таких, как отсутствие механической деформации нарезанный ламель,отсутствие ножа знаков и возможностью подготовить композитные образцы с жесткий / мягкий интерфейсов или компонентов.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Strata DB 235&#160;</td>
			<td style="width:71px;">FEI</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">FIB/SEM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Omniprobe 100&#160;</td>
			<td colspan="2">Oxford Instruments&#160;</td>
			<td>nanomanipulator</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Alto 2500</td>
			<td style="width:71px;">Gatan</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>cryo preparation chamber</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">cryo-holder model 626</td>
			<td style="width:71px;">Gatan</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>cryo transfer TEM holder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tecnai F30</td>
			<td style="width:71px;">FEI</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>TEM</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cryo-electron microscopy specimen preparation by means of a focused ion beam

Здесь мы приводим протокол, используемый для приготовления образцов крио-ПЭМ из Aspergillus Niger спор, но который может быть легко адаптирован для любого количества микроорганизмов или растворов. Мы используем построения своей крио-передаточной станции и модифицированной крио-SEM подготовки камеры 2. Споры взяты из культуры, окунуться заморозки в жидком слякоть азота и наблюдается в крио-SEM, чтобы выбрать интересующую область. Тонкая пластинка затем экстрагируют с помощью FIB, прикреплен к ТЕМ сетке и затем прореживают электрон прозрачности. Сетка передается держателю крио-TEM и в ПЭМ для исследований с высоким разрешением. Благодаря введению охлажденного оконечности наноманипулятора и крио-передаточной станции, этот протокол является прямым адаптация к криогенной температуре используемого регулярно подготовки FIB образцов ПЭМ. Как таковая, она имеет преимущества требуя небольшое количество модификации существующих инструментов, установок и процедур; это яс легко реализовать; он имеет широкий спектр применения, в принципе так же, как для пробоподготовки крио-TEM. Одним из ограничений является то, что она требует умелого обращения из образцов при критических шагов, чтобы избежать или свести к минимуму загрязнения.

В этой работе мы использовали: двойной луч FIB / SEM, оснащенного наноманипулятора и крио-подготовки камеры; ТЕМ с держателем крио-передачи; прототип крио-передачи станции. Anticontaminator (АС) Лопасти крио-подготовки камеры и верхушка наноманипулятора (Нью-Мексико) были изменены Gatan. Что касается стандартного препарата крио-камеры, лопасти переменного тока больше, чтобы обеспечить больший теплоотвод для наконечника нм. Кроме того, AC оснащен зажимами для подключения косы Cu для теплообмена с наконечником нм. В пневматика о FIB / SEM были изменены, чтобы позволить Н.М. быть и оставаться вставленным даже когда образец камера вентилируется. Следует отметить, что параметры, используемые в данной работе лучше всего подходят для указанному выше оборудованию; эти параметры могут необходимо скорректировать при работе с другими типами оборудования. Для работы с этим протоколом, нормальные меры предосторожности при обращении криогенику, жидкий азот и вакуумные системы должныпоследует. Метод был испытан на различных типах образцов с хорошими результатами, начиная от растворов или полимерных матрицах, содержащих наночастицы, чтобы одноклеточного организма к нематод. Примеры различных этапах процедуры показаны на рисунках 1-12 на А. Нигер споры окрашивали осмия и перманганата калия. Споры сначала изображается SEM (рис. 1), чтобы определить место для извлечения. В этом случае поперечное сечение любой спор был достаточен, но можно позиционировать ROI для экстракции суб-микронных точностью до, например, ломтик конкретную ячейку на определенном расстоянии от клеточной мембраны. После того, как функция представляет интерес был идентифицирован, первый этап осаждения крио-Pt реализуется (рис. 2), чтобы защитить образец от повреждений пучка от ионного травления. Наклона образца до 52 °, чтобы продолжить первых шагов Oе фрезерование (рис. 3): распыление двух траншей по обе стороны пластинки. Затем образец наклонена назад и дополнительно измельчить, чтобы оставить только два маленьких мосты, соединяющие его с навалом (рис. 4). Охлажденный наноманипулятора приводят в контакт с пластинкой (рис. 5), а другой крио-осаждени платины припои их вместе (рис. 6). Маленькие соединительные мосты затем измельчают, а до Н.М. перемещает ламель около области крепления ТЕА сетки (рис. 7), где она спаяна с окончательным крио-осаждения Pt (рис. 8). Н.М. затем отделяют от пластинки (рис. 9), который похудел с электрон прозрачности с ионного пучка (рис. 10 и 11). Пластинка, наконец, перевели в ТЕА (рис. 12), где высокое разрешение изображений, спектроскопии, томография и другие методы чан быть использованы. <img alt="Рисунок 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig1.jpg" /> Рисунок 1. Крио-РЭМ изображение спор А. Нигер, перед нанесением Pt. <img alt="Рисунок 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig2.jpg" /> Рисунок 2. Та же самая область на рисунке 1 после нанесения Pt но до отверждения. <img alt="Рисунок 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig3.jpg" /> Рисунок 3. Крио-РЭМ изображение той же области на рисунке 2, наклонена 52 º, после осаждения Pt и отверждения, с позиционной фрезерования ведутся(См. шаг 3.7). <img alt="Рисунок 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig4.jpg" /> Рисунок 4. Ламель, готов к подъемной отъезда. <img alt="Рисунок 5" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig5highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig5.jpg" /> Рисунок 5. Наконечник холодной наноманипулятора вступает в контакт с пластинки. <img alt="Рисунок 6" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig6.jpg" /> Рисунок 6. Вторая Pt крио-осаждения используется для пайки вместе наноманипулятор и ламель. <iмг альт = &quot;Рисунок 7&quot; FO: содержание ширины = &quot;5 дюймов&quot; FO: Пребывание &quot;/ files/ftp_upload/51463/51463fig7highres.jpg&quot; Первоначально &quot;/ files/ftp_upload/51463/51463fig7.jpg&quot; /&gt; На рисунке 7. Холодный наноманипулятора используется для передачи ламель к области прикрепления ТЕА сетки. <img alt="Рисунок 8" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig8highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig8.jpg" /> Рисунок 8. Крио-осаждения используется еще раз, чтобы прикрепить ламель для ТЕА сетки. <img alt="Рисунок 9" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig9highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig9.jpg" /> На рисунке 9. Ламель разрезают свободным от наноманипулятора и он готов к любой хранения или истончение электронов прозрачности. <p class="jove_content" fo:keep-together.в-странице = &quot;всегда&quot;&gt; <img alt="Рисунок 10" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig10highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig10.jpg" /> Рисунок 10. Промежуточный этап прореживания, с несколькими спорами видимых в поперечном сечении. <img alt="Рисунок 11" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig11highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig11.jpg" /> Рисунок 11 Крио-РЭМ-изображение образца после окончательного прореживания.; большинство других спор был быть фрезерованием, поскольку ламель начали скручиваться. <img alt="Рисунок 12" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51463/51463fig12highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51463/51463fig12.jpg" /> Рисунок 12. Составной крио-ПЭМ картину пластинки. Часть Аль заглушки был включенв ламели (черная стрелка).

Watch this Scientific Journal Video about Cryo-electron Microscopy Specimen Preparation By Means Of a Focused Ion Beam at JoVE.com

Cryo-electron Microscopy Specimen Preparation By Means Of a Focused Ion Beam

Крио-электронной микроскопии Изготовление образцов с помощью электронного луча, сфокусированного

Крио электронные микроскопы, либо сканирования (СЭМ) или передачи (ПЭМ), которые широко используются для характеристики биологических образцов или других материалов с высоким содержанием воды 1. SEM / электронного луча, сфокусированного (FIB) используется для идентификации особенности интерес в пробах и извлечь тонкую, электронно-прозрачным ламель для перевода к крио-TEM.

Here we present a protocol used to prepare cryo-TEM samples of Aspergillus niger spores, but which can easily be adapted for any number of microorganisms ...

Research

JoVE Journal

Biology

MALDI Sample Preparation: the Ultra Thin Layer Method

MALDI пробоподготовки: ультра тонкий слой Метод

This video demonstrates the preparation of an ultra-thin matrix/analyte layer for analyzing peptides and proteins by Matrix-Assisted Laser Desorption ...

Cell Block Preparation from Cytology Specimen with Predominance of Individually Scattered Cells

Cell Block получение из цитологии образцов с преобладанием индивидуально отдельные клетки

This video demonstrates Shidham's method for preparation of cell blocks from liquid based cervicovaginal cytology specimens containing individually ...

Examination of Drosophila Larval Tracheal Terminal Cells by Light Microscopy

Examination of Drosophila Larval Tracheal Terminal Cells by Light Microscopy

Экспертиза<em&gt; Drosophila</em&gt; Личинок трахеи Клетки терминала с помощью световой микроскопии

Cell shape is critical for cell function. However, despite the importance of cell morphology, little is known about how individual cells generate specific ...

Sample Preparation for Single Virion Atomic Force Microscopy and Super-resolution Fluorescence Imaging

Подготовка образцов для одной микроскопии атомной силы Virion и флуоресценции супер-разрешения

Immobilization of virions to glass surfaces is a critical step in single virion imaging. Here we present a technique&#160;adopted from single molecule ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

В Vivo 4-мерном Tracking гемопоэтических стволовых и клеток-предшественников в взрослой мыши свода черепа костного мозга

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Do's and Don'ts of Cryo-electron Microscopy: A Primer on Sample Preparation and High Quality Data Collection for Macromolecular 3D Reconstruction

И что нельзя делать крио-электронной микроскопии: учебник по пробоподготовки и высокое качество сбора данных для высокомолекулярных 3D реконструкции

Cryo-electron microscopy (cryoEM) entails flash-freezing a thin layer of sample on a support, and then visualizing the sample in its frozen hydrated state ...

Sample Preparation and Imaging of Exosomes by Transmission Electron Microscopy

Подготовка образцов и изображений Exosomes, просвечивающей электронной микроскопии

Exosomes are nano-sized extracellular vesicles secreted by body fluids and are known to represent the characteristics of cells that secrete them. The ...

Visualization of DNA Compaction in Cyanobacteria by High-voltage Cryo-electron Tomography

Визуализация ДНК уплотнения в цианобактерий, томография высокого напряжения крио электрон

This protocol describes how to visualize the transient DNA compaction in cyanobacteria. DNA compaction is a dramatic cytoplasmic event recently found to ...

Miniaturized Sample Preparation for Transmission Electron Microscopy

Миниатюрных Пробоподготовка для просвечивающей электронной микроскопии

Due to recent technological progress, cryo-electron microscopy (cryo-EM) is rapidly becoming a standard method for the structural analysis of protein ...

Biological Sample Preparation by High-pressure Freezing, Microwave-assisted Contrast Enhancement, and Minimal Resin Embedding for Volume Imaging

Подготовка биологический образец высокого давления замораживания, при содействии Микроволновая печь контрастности и минимальным смолы, встраивание образов тома

The described sample preparation technique is designed to combine the best quality of ultrastructural preservation with the most suitable contrast for the ...