Gostaríamos de agradecer o Fundo Comum do NIH - Protein Programa de reagentes de captura para financiar o desenvolvimento da seleção anticorpo recombinante e caracterização gasoduto Antibody Rede e da Fundação Canadense para Inovação para a compra financiamento da plataforma seleção robótico.

1. Antigen Generation NOTA: os domínios de antigénios pode ser sintetizado e clonado por uma variedade de fornecedores comerciais para uma construção de expressão de IPTG induzível adequado. <ol><li> Transformar as construções de expressão em quimicamente competente, T1-fago resistente, BL21 E. células de E. coli por mistura de 10 ng de ADN que codifica em 20 ul de 1X KCM sobre gelo numa placa de 96 poços de PCR, seguida pela adição de 20 L de células quimic...

<ol>
	<li>Winter, G., Milstein, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Man-made+antibodies.">Man-made antibodies.</a> Nature. 349, 293-299 (1991).</li><li>Miersch, S., Sidhu, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+antibodies:+concepts,+potential+and+practical+considerations.">Synthetic antibodies: concepts, potential and practical considerations.</a> Methods. 57, 486-498 (2012).</li><li>Schofield, D. 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Biol. 373, 924-940 (2007).</li><li>Paduch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generating+conformation-specific+synthetic+antibodies+to+trap+proteins+in+selected+functional+states.">Generating conformation-specific synthetic antibodies to trap proteins in selected functional states.</a> Methods. 60, 3-14 (2013).</li><li>Studier, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+production+by+auto-induction+in+high+density+shaking+cultures.">Protein production by auto-induction in high density shaking cultures.</a> Protein Expr. Purif. 41, 207-234 (2005).</li><li>Huang, H., Sidhu, S. 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Ao conduzir em selecções de anticorpos in vitro, os dois principais determinantes do sucesso selecção são 1) o isolamento de alvos antigénicos bem dobradas para a selecção em cima e 2) a disponibilidade de uma biblioteca de anticorpos de alta diversidade funcional. Em muitos casos, a disponibilidade de quantidades suficientes de bem-dobradas, proteína de comprimento completo pode ser limitante. Uma abordagem para superar esta limitação é a utilização de domínios identificados a partir da...

Com o início da era pós-genômica, a disponibilidade de reagentes de ligação de alta qualidade para caracterizar e modular proteínas é fundamental para abrir novas pesquisas e avenidas terapêuticas. Os anticorpos continuam a ser fundamentais para ambos os pesquisadores acadêmicos e industriais como a pesquisa básica e ferramentas de diagnóstico e terapêuticas potenciais. Não surpreendentemente, tem havido um crescimento impressionante de empresas de desenvolvimento de anticorpos contrato, a maioria dos que dependem de tecnologias de hibridoma convencionais para gerar anticorpos personalizados. No entanto, a seleção in vitro utilizando bibliotecas de anticorpos exibidos-fago está se tornando uma poderosa tecnologia alternativa que pode oferecer vantagens únicas e sucesso em que as tecnologias convencionais podem enfrentar limitações 1, 2. À luz do que uma considerável procura de anticorpos de alta qualidade como ferramentas de investigação, dois desafios principais para a produção de anticorpos são renováveis ​​1) selecção de transferência e 2) av antigénioailability. Um certo número de grupos têm agora descrito em condutas de selecção in vitro com vista a aumentar o rendimento e a taxa de identificação de anticorpos. Estas descrições detalhe uma variedade de abordagens que incluem seleccionar viáveis ​​em cima ou de comprimento completo como alvo 3,4, 5,6,7 ou domínios estruturalmente relacionado, usando 6,8 ou a placa de base de 3,4-regimes de antigénio de imobilização à base de grânulo. Além disso, o crescente adopção de tecnologias de síntese de genes 9 fez geração antigénio sistemática, particularmente de domínios isolados, razoavelmente custo eficaz e potencialmente pode aliviar a dificuldade na obtenção de quantidades suficientes de antigénio purificado, de comprimento completo. Ao utilizar as duas tecnologias em conjunto, um oleoduto auto-contido e geração antigénio escalável e selecção de anticorpos foi concebida que permita o isolamento de anticorpos para paralelo de grandes conjuntos de domínios de antigénios expressos e facilitar o desenvolvimento de reagentes para a characterizing classes inteiras de proteínas estruturalmente ou funcionalmente relacionados. Para atingir esse objectivo, um pipeline integrado que casais em silico identificação de domínios de antigénio, a síntese de genes expressáveis, expressão bacteriana de alto rendimento de antigénios e selecções de anticorpo exibido em fagos tem sido desenvolvido escaláveis. Este gasoduto requer apenas infra-estrutura básica disponível para a maioria dos laboratórios de ciências da vida (incluindo bibliotecas de anticorpos que são cada vez mais disponíveis através de licença ou de transferência de material acordo), mas também é passível de automação para uso em escala industrial. Usando este protocolo, é possível gerar centenas de domínios de antigénio marcado com afinidade, e rotineiramente isolar fragmentos de anticorpos altamente específicos para muitos destes antigénios. A tecnologia de apresentação de fagos demonstrou compatibilidade demonstrado com uma ampla variedade de formatos de reagentes de afinidade recombinantes incluindo Fab, scFv, Fv e domínios autónomos e umcrescente conjunto de pequenos &#39;estruturas alternativas&#39; (proteínas ankyrin repetição projetados (DARPINS), fibronectina (FN), domínios lipocalina e mais 10). Discussão é limitado neste exemplo para o isolamento de fragmentos de anticorpos Fab, embora se presume estes métodos podem ser adaptados a outros tipos de bibliotecas. Utilizando esta tecnologia, os Fabs com baixa afinidade nanomolar para pequeno, marcaram domínios proteicos, incluindo domínios de factor de transcrição, domínios SH2, proteínas e outros ligação RNA foram seleccionadas com sucesso, muitos dos quais se ligam a proteína de comprimento completo e são funcionais em imunoensaios tais como imunofluorescência , imunoprecipitação e imuno-histoquímica. Importante, clones de ligação recombinantes são totalmente renovável e pode ser re-gerada a partir de construções de expressão via oferta de produção bacteriana maior coerência, reprodutibilidade e custo-efetividade, justificando, assim, a despesa de validação clone rigorosa. Neste protOCOL e vídeo acompanhante, métodos básicos para a selecção de anticorpos a partir de bibliotecas exibidas em fagos utilizando domínios de antigénios imobilizados são demonstradas. Este método particular emprega domínios de proteínas marcadas com GST imobilizados por adsorção passiva em placas de micropoços, embora outras marcações 11,12,13 13,14,2 e formatos de selecção, também têm sido utilizados com sucesso. Considerações críticas para a instalação e condução das seleções com acompanhamento paralelo de parâmetros de seleção que visam identificar e isolar anticorpos clonais especificamente enriquecido para validação são detalhados.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="470">
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td colspan="4" height="22" style="height:22px;width:471px;">MATERIALS</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td colspan="2" height="43" style="height:43px;width:249px;">Name</td>
			<td style="width:135px;">Company</td>
			<td style="width:87px;">Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td colspan="2" height="40" style="height:40px;width:249px;">New Brunswick Innova44 stackable incubator shaker</td>
			<td style="width:135px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:87px;">M1282-0004</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td colspan="2" height="40" style="height:40px;width:249px;">Liquidator 96 channel manual benchtop pipetting system</td>
			<td style="width:135px;">Anachem Ltd</td>
			<td style="width:87px;">LIQ-96-200</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">Microplate shaker</td>
			<td style="width:135px;">VWR</td>
			<td style="width:87px;">12620-926</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td colspan="2" height="40" style="height:40px;width:249px;">ThermoScientific Sorvall ST-40 benchtop centrifuge</td>
			<td style="width:135px;">Thermo Product</td>
			<td style="width:87px;">75004525</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td colspan="2" height="40" style="height:40px;width:249px;">ELx405 Select Deep Well Microplate Washer</td>
			<td style="width:135px;">Biotek</td>
			<td>ELX405USD</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td colspan="2" height="41" style="height:41px;width:249px;">Custom High Throughput Automated Phage Selection Robot</td>
			<td style="width:135px;">S&#38;P Robotics</td>
			<td style="width:87px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">Plastic conical Falcon tube: 50 mL</td>
			<td style="width:135px;">VWR</td>
			<td style="width:87px;">21008-178</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">Plastic conical Falcon tube: 15 mL</td>
			<td style="width:135px;">VWR</td>
			<td style="width:87px;">89039-668</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">Axygen 1.7 mL microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:135px;">Corning</td>
			<td style="width:87px;">MCT-175-L-C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">96-well/384-well Maxisorp plate</td>
			<td style="width:135px;">Sigma</td>
			<td style="width:87px;">M9410-1CS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">Corning 96-well V-bottom deep-well block</td>
			<td style="width:135px;">Corning</td>
			<td style="width:87px;">3960</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">Axygen Mini-tube 96-well sterile microplate blue box</td>
			<td style="width:135px;">Corning</td>
			<td style="width:87px;">AXY-MTS-06-C-R-S</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">Breathable adhesive plate sealing film</td>
			<td style="width:135px;">VWR</td>
			<td style="width:87px;">60941-084</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="4" height="22" style="height:22px;width:471px;">REAGENTS</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td colspan="2" height="43" style="height:43px;width:249px;">Name</td>
			<td style="width:135px;">Company</td>
			<td style="width:87px;">Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">polyethylene glycol</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">PEG800.1</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td colspan="2" height="18" style="height:18px;">yeast extract</td>
			<td>Bioshop</td>
			<td>YEX401.1</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">bio-tryptone</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">TRP402.1</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">N-Z amine</td>
			<td style="width:135px;">Sigma</td>
			<td style="width:87px;">C7290</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">glucose</td>
			<td style="width:135px;">Sigma</td>
			<td style="width:87px;">G8270-1KG</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">lactose</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">LAC234</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">glycerol</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td>GLY001.500</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">carbenicillin&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">CAR544.10</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">kanamycin</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">KAN201.25</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">tetracycline&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">TET701.25</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td colspan="2" height="43" style="height:43px;width:249px;">Tween 20</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">TWN510.500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">monobasic potassium phophate</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">PPM302.1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">dibasic sodium phosphate</td>
			<td style="width:135px;">Anachemia</td>
			<td style="width:87px;">84486-440</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">sodium chloride</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">SOD001.10</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">potassium chloride</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">POC308.1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td colspan="2" height="20" style="height:20px;width:249px;">calcium chloride</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">CCL302.500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">magnesium sulphate</td>
			<td style="width:135px;">EMD</td>
			<td style="width:87px;">MX0070-1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">magnesium chloride</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">MAG510.500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">NH4Cl</td>
			<td style="width:135px;">Amresco</td>
			<td style="width:87px;">0621-1KG</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">Na2SO4</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">SOS513.500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">agar</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">AGR001.500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">SybrSafe DNA gel stain</td>
			<td style="width:135px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:87px;">S33102</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">phosphoric acid</td>
			<td style="width:135px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:87px;">201140010</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">lysozyme</td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">LYS702.25</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">benzonase</td>
			<td style="width:135px;">Novagen</td>
			<td style="width:87px;">71205</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:139px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:111px;"></td>
			<td style="width:135px;">Bioshop</td>
			<td style="width:87px;">TRX506.500</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;width:249px;">protease inhibitor cocktail tablets</td>
			<td style="width:135px;">Roche</td>
			<td style="width:87px;">11 836 170 001</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">Ni-NTA resin&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Qiagen</td>
			<td style="width:87px;">1018240</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td colspan="2" height="42" style="height:43px;width:249px;">1000x helper phage (M13K07) stock (1013 phage per mL)</td>
			<td style="width:135px;">NEB</td>
			<td style="width:87px;">N0315S</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="39" rowspan="2" style="height:40px;width:249px;">HRP conjugated M13-specific antibody (anti-M13-HRP).</td>
			<td rowspan="2" style="width:135px;">GE Healthcare</td>
			<td rowspan="2" style="width:87px;">27-9241-01</td>
		</tr>
		<tr height="18">
		</tr>
		<tr height="44">
			<td colspan="2" height="44" style="height:44px;width:249px;">TMB substrate: mix equal volumes of TMB and H2O2 peroxidase substrate&#160;</td>
			<td style="width:135px;">KPL</td>
			<td style="width:87px;">50-76-00</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">dNTPs</td>
			<td style="width:135px;">Biobasic</td>
			<td style="width:87px;">DD0056</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">Taq polymerase</td>
			<td style="width:135px;">Genscript</td>
			<td style="width:87px;">E00007</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">Exonuclease</td>
			<td style="width:135px;">GE Healthcare&#160;</td>
			<td style="width:87px;">EZ0073X-EZ</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td colspan="2" height="22" style="height:22px;width:249px;">Shrimp alkaline phosphatase</td>
			<td style="width:135px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:87px;">E70092Z-EZ</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

scalable high throughput selection from  phage-displayed synthetic antibody libraries

A demanda por anticorpos que atendam às necessidades de ambas as aplicações básicas e clínicas de pesquisa é alto e vai aumentar drasticamente no futuro. No entanto, é evidente que as tecnologias tradicionais não são monoclonais sozinho até esta tarefa. Isto conduziu ao desenvolvimento de métodos alternativos para satisfazer a procura de alta qualidade e reagentes de afinidade renováveis ​​para todos os elementos acessíveis do proteoma. Para este fim, os métodos de alto rendimento para a realização de seleções a partir de bibliotecas de anticorpos sintéticos exibido em fagos foram concebidos para aplicações que envolvem diversos antígenos e otimizado para o rendimento e sucesso rápido. Nisto, um protocolo é descrito em detalhe que ilustra com demonstração de vídeo a selecção de clones paralelo Fab-fago a partir de bibliotecas de alta diversidade contra centenas de alvos quer utilizando um manipulador de líquidos 96 canal manual ou sistema de robótica automatizado. Usando este protocolo, um único usuário pode gerar centenas de antígenos,selecionar anticorpos para-los em paralelo e validar a ligação do anticorpo dentro de 6-8 semanas. Destacam-se: i) um formato de antígeno viável, ii) caracterização antígeno pré-selecção, iii) passos críticos que influenciam a seleção de clones específicos de afinidade e alta, e iv) formas de eficácia seleção monitoramento e fase inicial de anticorpos clone caracterização. Com esta abordagem, temos obtido os fragmentos de anticorpos sintéticos (FAB) para muitas classes alvo, incluindo os receptores de uma só passagem de membrana, hormônios proteína secretada e proteínas intracelulares multi-domínio. Estes fragmentos são facilmente convertidos em anticorpos de comprimento total e foram validados para apresentar uma elevada afinidade e especificidade. Além disso, eles têm sido demonstrados para ser funcional em uma variedade de imunoensaios convencionais, incluindo Western blot, ELISA, imunofluorescência celular, ensaios de imunoprecipitação e afins. Esta metodologia irá acelerar a descoberta de anticorpos e, finalmente, trazer-nos mais perto de realizar o objetivo of gerar anticorpos qualidade renováveis, elevadas para o proteoma.

O protocolo aqui descrito foi utilizado para isolar fragmentos de anticorpo a uma variedade de ambos os domínios de antigénios structurally- e funcionalmente relacionados com o de bibliotecas combinatórias exibida por fagos de Fab em paralelo. Problemas relacionados com a disponibilidade de antigénio pode ser contornado, em muitos casos, por na identificação de domínios de antigénios silico expressáveis ​​que são apropriados para selecção de anticorpos 23. Ao acoplar a expressão de antigénio...

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Scalable High Throughput Selection From  Phage-displayed Synthetic Antibody Libraries

Selecção de alta Scalable Rendimento de bibliotecas de anticorpos em fagos sintética exibida-

Um método é descrito com acompanhamento visual para a realização escaláveis, selecções de alto rendimento de bibliotecas combinatórias de anticorpos sintéticos exibidos em fagos contra centenas de antigénios simultaneamente. Usando esta abordagem paralela, isolámos fragmentos de anticorpos que exibem uma elevada afinidade e especificidade para diversos antígenos que são funcionais em imunoensaios convencionais.

The demand for antibodies that fulfill the needs of both basic and clinical research applications is high and will dramatically increase in the future. ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Separation of Single-stranded DNA, Double-stranded DNA and RNA from an Environmental Viral Community Using Hydroxyapatite Chromatography

Separação de Single-stranded DNA, Double-stranded DNA e RNA de uma Comunidade Ambiental Viral Usando Cromatografia hidroxiapatita

Viruses, particularly bacteriophages (phages), are the most numerous biological entities on Earth1,2.  Viruses modulate host cell abundance and diversity, ...

Imunologia e Infecção

High-throughput Detection Method for Influenza Virus

Alta capacidade método de detecção de vírus Influenza

Influenza virus is a respiratory pathogen that causes a high degree of morbidity and mortality every year in multiple parts of the world. Therefore, ...

Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Quantitativo de alta capacidade ensaio de citotoxicidade de célula única para as células T.

Cancer immunotherapy can harness the specificity of  immune response to target and eliminate tumors. Adoptive cell therapy (ACT)  based on the adoptive ...

High-throughput Screening for Broad-spectrum Chemical Inhibitors of RNA Viruses

Triagem de alta capacidade para amplo espectro químico Inibidores de Vírus RNA

RNA viruses are responsible for major human diseases such as flu, bronchitis, dengue, Hepatitis C or measles. They also represent an emerging threat ...

ScanLag: High-throughput Quantification of Colony Growth and Lag Time

ScanLag: de alta capacidade Quantificação do crescimento da colônia e intervalo de tempo

Growth dynamics are fundamental characteristics of microorganisms. Quantifying growth precisely is an important goal in microbiology. Growth dynamics are ...

High-throughput Gene Tagging in Trypanosoma brucei

High-throughput Gene Tagging in Trypanosoma brucei

De alto rendimento Gene Tagging no<em&gt; Trypanosoma brucei</em

Improvements in mass spectrometry, sequencing and bioinformatics have generated large datasets of potentially interesting genes. Tagging these proteins ...

Construction of Synthetic Phage Displayed Fab Library with Tailored Diversity

Construção do fago sintética exibida Fab biblioteca com diversidade sob medida

Demand for monoclonal antibodies (mAbs) in basic research and medicine is increasing yearly. Hybridoma technology has been the dominant method for mAb ...

A High-throughput, High-content, Liquid-based C. elegans Pathosystem

A High-throughput, High-content, Liquid-based C. elegans Pathosystem

Uma alta produtividade, alto teor, baseada em líquido c. elegans patossistema

The number of new drugs identified by traditional, in vitro screens has waned, reducing the success of this approach in the search for new weapons to ...

A High-throughput Shigella-specific Bactericidal Assay

A High-throughput Shigella-specific Bactericidal Assay

Um do elevado-throughput Shigella-ensaio bactericida específico

Serum bactericidal assays (SBAs) measure the functional activity of antibodies and have been used for many decades. SBAs directly measure antibody killing ...

Targeted Antibody Blocking by a Dual-Functional Conjugate of Antigenic Peptide and Fc-III Mimetics (DCAF)

Targeted Antibody Blocking by a Dual-Functional Conjugate of Antigenic Peptide and Fc-III Mimetics DCAF

Bloqueio de anticorpos direcionados por um conjugado duplo-funcional de peptídeo antigênico e mimetismo FC-III (DCAF)

Elimination of harmful antibodies from organisms is a valuable approach for the intervention of antibody-associated diseases, such as Dengue hemorrhagic ...