Name: bladder smooth muscle strip contractility as a method to evaluate lower urinary tract pharmacology
Uploaded: 2014-08-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Bladder Smooth Muscle Strip Contractility as a Method to Evaluate Lower Urinary Tract Pharmacology at JoVE.com

מחקר זה נתמך על ידי מענקי NIH R37 DK54824 וR01 DK57284 לק&quot;ג

כל הנהלים שתוארו כאן אושרו על ידי ועדת IACUC באוניברסיטת פיטסבורג. .1 פתרונות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן פתרון קרבס על פי המתכון. הרכב במ&quot;מ: 118 NaCl, KCl 4.7, CaCl 2 1.9, 4 MgSO 1.2, NaHCO 3 24.9, KH 2 PO 4<...

במאמר זה אנו מתארים פשוטים בשיטת מבחנה שריר חלק התכווצות שיכול לשמש כדי לטפל במספר השאלות מדעיות חשובות הקשורים לפיזיולוגיה בשלפוחית ​​השתן ופתולוגיה, כמו גם סיוע לגילוי תרופות חדשות לטיפול בתפקוד שלפוחית ​​השתן. יש לנו הדגמתי את השימוש בשיטה זו להערכת מאפי?...

שריר החלק בשלפוחית ​​השתן נרפה כדי לאפשר אחסון שתן, וחוזים לעורר חיסול שתן. הרפיה מתווכת על ידי תכונות שריר חלק פנימיות ועל ידי שחרור טוניק של נוראפינפרין (NE) מהעצבים הסימפתטית, אשר מפעיל קולטני בטא adrenergic (β 3 AR באדם) בdetrusor. רקה מושגת על ידי עיכוב הקלט האוהד והפעלת העצבים הפאראסימפתטית שישחררו ACH / ATP להתכווץ שריר החלק בשלפוחית ​​השתן 1. תנאים רבים פתולוגיים, כולל מוח ו / או פגיעה בחוט השדרה, מחלות ניווניות, סוכרת, חסימת מוצא שלפוחית ​​השתן או דלקת שלפוחית ​​השתן interstitial, יכולים לשנות את תפקוד שלפוחית ​​השתן עמוק, עם השלכות קשות על איכות חיים של המטופל 2. תנאים אלה לשנות את ההתכווצות של שריר החלק על ידי המשפיע על אחד או יותר מרכיבים של שלפוחית ​​השתן: שריר החלק, מביא או עצבי efferent ו / אורירית. כמה in vivo ובשיטות מבחנה ללמוד תפקוד שלפוחית ​​השתן פותחו. בvivo, cystometry הוא המדידה הראשונית של תפקוד שלפוחית ​​השתן. למרות זאת היא הכנה שלמה המאפשרת איסוף מידע במסגרת קרובה לתנאים פיסיולוגיים, יש מספר הנסיבות שבהן השימוש ברצועות שריר חלק הוא מועדפת. אלה כוללים מצבים שבם וכירורגי / או מניפולציות תרופתי ישפיעו על ההישרדות והיציבות של הכנת in vivo, או כאשר המחקרים דורשים שימוש ברקמה האנושית או כימיקלים יקרים. שיטה זו גם מאפשרת בדיקה של ההשפעות של תרופות, גיל ופתולוגיה בכל רכיב של שלפוחית ​​השתן, כלומר שריר חלק, רירית, מביא ועצבי efferent. רצועות שלפוחית ​​כבר מועסקות במשך השנים על ידי קבוצות רבות לענות על מספר שאלות מדעיות. הם היו רגילים לevaשינויי luate בפעילות ספונטנית myogenic הנגרמים על ידי פתולוגיה. הוא האמין כי פעילות זו תורמת לתסמיני דחיפות ותכיפות של פעילות יתר של שלפוחית ​​(OAB), ולכן הוא יעד לתרופות שפותחו עבור OAB 3-9. רצועות שלפוחית ​​השתן שמשו גם כדי לחקור גורמי myogenic ועצביים המווסתים את טונוס שרירים חלק במטרה לגלות תעלות יונים ו / או קולטנים ו / או מסלולים תאיים שיכול להיות ממוקדת כדי לגרום או הרפיה או התכווצות של שריר חלק 3,10- 13. מחקרים אחרים התמקדו בטבע של עצבית, כולל משדרים וקולטנים המעורבים ושינויים הנגרמים על ידי פתולוגיה 14,15. בנוסף, השיטה הייתה בשימוש להשוואה בין רקמות ממינים שונים 16- 18, בין האיברים 19-21, והערכה של מערכות יחסים מבנה פעילות תרופת 22-24. סיומת של שיטה זו נעשתה שימוש כדי measurדואר את ההשפעה של תרופות על שחרור משדר מעצבי efferent 25. יתר על כן, מגוון רחב של רקמות (שלפוחית ​​השתן, שופכה, מערכת עיכול, במערכת העיכול) שנקטפו מבעלי חיים או בני אדם (מניתוחים או רקמת תורם איברים שאושרו למחקר) וממגוון רחב של מודלים של בעלי חיים, כולל פגיעה בחוט השדרה (SCI), חסימת מוצא שלפוחית ​​השתן (BOO), או דלקת שלפוחית ​​השתן interstitial (IC) יכול להיחקר שימוש בטכניקה זו. במאמר זה אנו מציגים את השימוש בשיטה זו יחד עם פרוטוקולי ניסוי הכרחיים, כדי לטפל בכמה שאלות מדעיות שהוזכרו לעיל.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="658">
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:123px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:180px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Equipment</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Tissue Bath System with Reservoir</td>
			<td>Radnoti, LLC</td>
			<td style="width:119px;">159920</td>
			<td style="width:180px;">isolated tissue baths</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Warm water recirculator pump</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">TPZ-749</td>
			<td style="width:180px;">to keep tissue baths to 37 C</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Computer</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Data Acquisiton System</td>
			<td style="width:123px;">DataQ Instruments</td>
			<td style="width:119px;">DI-710-UH</td>
			<td style="width:180px;">To view, record and analyze data</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Transbridge Transducer Amplifier</td>
			<td style="width:123px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">SYS-TBM4M</td>
			<td style="width:180px;">Transducer amplifier</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Grass stimulator</td>
			<td style="width:123px;">Grass Technologies</td>
			<td>Model S88</td>
			<td style="width:180px;">Stimulator</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Anesthesia System</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td>ACV-1205S</td>
			<td style="width:180px;">To anesthetesize the animal</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:237px;"><a name="RANGE!A10">Anesthetizing Box</a></td>
			<td style="width:123px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">500116</td>
			<td style="width:180px;">To anesthetesize the animal</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Anesthesia Masks</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">AC-09508</td>
			<td style="width:180px;">To anesthetesize the animal</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Materials and surgical instruments</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">sylgard</td>
			<td>Dow Corning Corp</td>
			<td>184 SIL ELAST KIT</td>
			<td style="width:180px;">To pin, dissect &#38; cut tissue</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Petri Dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3160-152</td>
			<td style="width:180px;">To dissect/cut tissue</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:51px;width:237px;">Insect Pins</td>
			<td style="width:123px;">ENTOMORAVIA Austerlitz Insect Pins</td>
			<td style="width:119px;">Size 5</td>
			<td style="width:180px;">To pin tissue</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Bench Pad</td>
			<td style="width:123px;">VWR International</td>
			<td style="width:119px;">56617-014</td>
			<td style="width:180px;">Absorbent bench underpads</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Rat surgical Kit</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INSRATKIT</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">2 Dumont #3 Forceps</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INS500064</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Tissue Forceps</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INS500092</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Scalpel</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INS500236</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Scalpel blade</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INS500239</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Professional Clipper&#160;</td>
			<td style="width:123px;">Braintree Scientific, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">CLP-223&#160;45</td>
			<td style="width:180px;">To remove fur</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Suture Thread</td>
			<td style="width:123px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18020-50</td>
			<td style="width:180px;">Tie tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Tissue Clips</td>
			<td>Radnoti, LLC</td>
			<td style="width:119px;">158802</td>
			<td style="width:180px;">Attach tissue to rod/transducer</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">1g weight</td>
			<td style="width:123px;">&#160;Mettler Toledo</td>
			<td>11119525</td>
			<td style="width:180px;">For transducer calibration</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Chemicals</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="170">
			<td height="170" style="height:170px;width:237px;">Krebs Solution:&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Sodium Chloride 
			Potassium Chloride 
			Monobasic Potassium Phosphate 
			Magnesium Sulfate 
			Dextrose 
			Sodium Bicarbonate 
			Calcium Chloride 
			Magnesium Chloride</td>
			<td style="width:123px;">Sigma&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; 
			Fisher 
			Fisher 
			Fisher 
			Fisher 
			Sigma 
			EMD 
			Baker</td>
			<td style="width:119px;">&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; S7653 
			P217-500 
			P285-3 
			M65-500 
			D16-500 
			S5761 
			CX0130-2 
			2444</td>
			<td style="width:180px;">To prepare Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:123px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">029405</td>
			<td style="width:180px;">To anesthetesize the animal</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">&#160;Oxygen tank</td>
			<td style="width:123px;">Matheson Tri Gas</td>
			<td style="width:119px;">ox251</td>
			<td style="width:180px;">To use with anesthesia system</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Carbogen Tank (95% Oxygen; 5% Carbon Dioxide)&#160;</td>
			<td style="width:123px;">Matheson Tri Gas</td>
			<td style="width:119px;">Moxn00hn36D</td>
			<td style="width:180px;">To aerate Krebs solutions</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bladder smooth muscle strip contractility as a method to evaluate lower urinary tract pharmacology

אנו מתארים שיטה במבחנה למדידת התכווצות שריר חלק בשלפוחית ​​השתן, ושימוש בו לחקירת מאפיינים פיסיולוגיים ותרופתיים של שריר החלק, כמו גם שינויים הנגרמים על ידי פתולוגיה. שיטה זו מספקת מידע קריטי להבנת תפקוד שלפוחית ​​השתן תוך כדי התגברות על קשיים גדולים מתודולוגיים נתקלו בניסויי vivo, כגון מניפולציות כירורגית ותרופתיות המשפיעות על יציבות והישרדות של ההכנות, שימוש ברקמות אנושיות, ו / או שימוש בכימיקלים יקרים. הוא גם מספק דרך לחקור את המאפיינים של כל מרכיב בשלפוחית ​​השתן (כלומר שריר חלק, רירית, בעצבים) בתנאים בריאים ופתולוגי. שלפוחית ​​השתן הוא להסיר חיה הרדים, להציב פתרון קרבס וחתוך לרצועות. רצועות ממוקמות לתוך תא מלא בפתרון קרבס חם. קצה אחד מחובר לtensio איזומטרימתמר n למדוד כוח התכווצות, בקצה השני מחובר למוט קבוע. רקמה היא מגורה על ידי ישירות הוספת תרכובות באמבטיה או על ידי אלקטרודות גירוי שדה חשמליות המפעילות את עצבים, בדומה למפעיל התכווצויות שלפוחית ​​in vivo. אנו מדגימים את השימוש בשיטה זו על מנת להעריך התכווצות שריר חלק ספונטנית במהלך פיתוח, ולאחר פגיעה בחוט השדרה ניסיונית, הטבע של עצבית (משדרים וקולטנים מעורבים), גורמים מעורבים בויסות של פעילות שריר חלק, התפקיד של רכיבי שלפוחית ​​בודדים, ומינים והבדלי איבר בתגובה לסוכנים תרופתיים. בנוסף, הוא יכול לשמש לחקר מסלולים תאיים מעורבים בהתכווצות ו / או הרפיה של שריר החלק, יחסי מבנה פעילות תרופה והערכה של שחרור משדר. שיטת התכווצות שריר חלק במבחנה כבר נעשה שימוש נרחב FOr מעל 50 שנים, וספק נתונים שתרמו באופן משמעותי להבנה של תפקוד שלפוחית ​​שלנו, כמו גם לפיתוח תרופות של תרכובות המשמשות כיום מבחינה קלינית לניהול שלפוחית ​​השתן.

פעילות myogenic ספונטנית פעילות myogenic ספונטנית היא אופייני שריר חלק חשוב שעובר שינויים עם התפתחות לאחר הלידה 6-9 ופתולוגיה (למשל, SCI, BOO) 3-5. משום שהאמינה כי פעילות זו תורמת לסימפטומים של פעילות יתר של שלפוחית ​?...

Watch this Scientific Journal Video about Bladder Smooth Muscle Strip Contractility as a Method to Evaluate Lower Urinary Tract Pharmacology at JoVE.com

Bladder Smooth Muscle Strip Contractility as a Method to Evaluate Lower Urinary Tract Pharmacology

כתב יד זה מציג פשוט, אך רב עוצמה, בשיטה חוץ גופית להערכת התכווצות שריר חלק בתגובה לסוכנים תרופתיים או גירוי עצב. יישומים עיקריים הם הקרנת סמים ופיזיולוגיה רקמת הבנה, פרמקולוגיה, ופתולוגיה.

שריר חלק בשלפוחית ​​השתן רצועת התכווצות כשיטה להערכת נמוכה יותר בדרכי שתן פרמקולוגיה

We describe an in vitro method to measure bladder smooth muscle contractility, and its use for investigating physiological and pharmacological properties ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Mouse Bladder Wall Injection

שלפוחית ​​השתן עכבר וול Injection

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

Manual Muscle Testing:  A Method of Measuring Extremity Muscle Strength Applied to Critically Ill Patients

בדיקת שרירים ידנית: שיטת מדידת חוזק שרירים בגפיים יישומית על חולים אנושים

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and other causes of critical illness often have generalized weakness, reduced exercise tolerance, ...

Probe-based Confocal Laser Endomicroscopy of the Urinary Tract: The Technique

Endomicroscopy בדיקה מבוסס Confocal ליזר בדרכי השתן: הטכניקה

Probe-based  confocal laser endomicroscopy (CLE) is an emerging optical imaging technology  that enables real-time in vivo microscopy of mucosal surfaces ...

A Modified Precipitation Method to Isolate Urinary Exosomes

שיטת ממטרים השתנה לבודד השתן Exosomes

Identification of biomarkers that allow early detection of kidney diseases in urine and plasma has been an area of active interest for several years. ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

תגובות שתן בשלפוחית ​​השתן ההתנפחות העוררת Visceromotor כמודל לשלפוחית ​​שתן כאב בעכברים

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Calcification of Vascular Smooth Muscle Cells and Imaging of Aortic Calcification and Inflammation

הסתיידות של לתאי השריר החלק בכלי הדם והדמיה של אבי העורקים הסתיידות ודלקת

Cardiovascular disease is the leading cause of morbidity and mortality in the world.  Atherosclerotic plaques, consisting of lipid-laden macrophages and ...

Contractility Measurements of Human Uterine Smooth Muscle to Aid Drug Development

Contractility המידות של האדם הרחם שריר חלק לפיתוח התרופה עזרה

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We ...

Microelectrode Impalement Method to Record Membrane Potential from a Cannulated Middle Cerebral Artery

שיטת החלוקה של מיקרו-אלקטרודה להקלטת פוטנציאל ממברנה מעורק מוחי אמצעי של קאננולוב

Membrane potential (Vm) of vascular smooth muscle cells determines vessel tone and thus blood flow to an organ. Changes in the expression and function of ...

Quantitative Analysis of Cellular Composition in Advanced Atherosclerotic Lesions of Smooth Muscle Cell Lineage-Tracing Mice

ניתוח כמותי של הרכב הסלולר בנגעים טרשת עורקים מתקדמת של שריר חלק תא שושלת היוחסין-עקיבה עכברים

Atherosclerosis remains the leading cause of death worldwide and, despite countless preclinical studies describing promising therapeutic targets, novel ...

Ultrasonography of the Adult Male Urinary Tract for Urinary Functional Testing

Ultrasonography של בוגרים זכר בדרכי השתן עבור בדיקות פונקציונליות השתן

The incidence of clinical benign prostatic hyperplasia (BPH) and lower urinary tract symptoms (LUTS) is increasing due to the aging population, resulting ...

שריר חלק בשלפוחית ​​השתן רצועת התכווצות כשיטה להערכת נמוכה יותר בדרכי שתן פרמקולוגיה

שריר חלק בשלפוחית השתן רצועת התכווצות כשיטה להערכת נמוכה יותר בדרכי שתן פרמקולוגיה