Name: bladder smooth muscle strip contractility as a method to evaluate lower urinary tract pharmacology
Uploaded: 2014-08-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Bladder Smooth Muscle Strip Contractility as a Method to Evaluate Lower Urinary Tract Pharmacology at JoVE.com

Это исследование было поддержано NIH R37 DK54824 и R01 DK57284 грантов LB.

Все процедуры, описанные здесь, одобрены комиссией IACUC в Университете Питтсбурга. 1. Решения <ol><li> Приготовьте раствор Кребса в соответствии с рецептом. Состав в мм: NaCl 118, KCl 4,7, CaCl 2 1,9, MgSO 4 1,2, NaHCO 3 24,9, KH 2 PO 4 1,2, декстроза 11,7. </li><li> Аэрируйте Кребса ?...

В этой статье мы описали простой в пробирке гладких мышц методом сократимости, которые могут быть использованы для решения ряда важных научных вопросов, связанных с физиологией мочевого пузыря и патологии, а также пособничество открытие новых препаратов для лечения дисфункций м?...

Мочевой пузырь гладкая мышца расслабляется, чтобы позволить хранение мочи, и контракты, чтобы выявить ликвидации мочи. Релаксация опосредуется внутренними гладкими свойствами мышечных и тоник выпуска норадреналина (NE) от симпатических нервов, который активирует бета адренорецепторов (β 3 AR в человека) в детрузора. Аннулирование достигается путем ингибирования симпатической вход и активации парасимпатических нервов, которые высвобождают АЧ / ATP заключить контракт гладких мышц мочевого пузыря 1. Многочисленные патологические состояния, в том числе головного мозга и / или спинного мозга, нейродегенеративных заболеваний, диабета, инфравезикальной обструкции или интерстициального цистита, может глубоко изменить функцию мочевого пузыря, с тяжелыми последствиями для качества пациента жизни 2. Эти условия изменяют сократительную способность гладкой мускулатуры путем воздействия одного или более компонентов мочевого пузыря: гладкие мышцы, афферентным или эфферентные нервы и / илиСлизистая оболочка. Несколько в естественных условиях и в методах пробирке для изучения функции мочевого пузыря были разработаны. В естественных условиях, цистометрия является основным измерение функции мочевого пузыря. Хотя это нетронутыми подготовка, которая позволяет собирать информацию под близко к физиологическим условиям, существует ряд обстоятельств, при которых использование полос гладкой мускулатуры является предпочтительным. К ним относятся ситуации, когда хирургическое и / или фармакологические манипуляции повлияли бы выживание и стабильность препарата в естественных условиях, или когда исследования требуют использования ткани человека или дорогих химических веществ. Этот метод также облегчает экспертизу воздействия наркотиков, возраста и патологии на каждого компонента пузыря, т.е. гладкие мышцы, слизистую оболочку, афферентные и эфферентные нервы. Мочевого пузыря полосы были использованы на протяжении многих лет многими группами, чтобы ответить на ряд научных вопросов. Они были использованы для выхода в открытый космосизменения luate в миогенной спонтанной активности индуцируется патологии. Эта деятельность, как полагают, в значительной степени актуализирует и частотных симптомов гиперактивного мочевого пузыря (OAB), и, следовательно, является мишенью для лекарств, которые разрабатываются для автономной адресной книги 3-9. Мочевого пузыря полосы были также использованы для расследования миогенные и нейронные факторы, которые модулируют тонус гладких мышц с целью обнаружения ионных каналов и / или рецепторы и / или внутриклеточные пути, которые могли бы быть нацелены, чтобы побудить либо расслабление или сокращение гладкой мускулатуры 3,10- 13. Другие исследования были сосредоточены на природе нервного, в том числе передатчиков и рецепторов, вовлеченных и изменений, вызванных патологией 14,15. Кроме того, этот метод был использован для сравнения между тканей из различных видов 16- 18, между органами 19-21, и оценки структуры-активности препарата отношений 22-24. Расширение этого метода был использован для измерения дэлектронной эффект препаратов на секрецию медиатора из эфферентных нервов 25. Кроме того, различные ткани (мочевой пузырь, мочеиспускательный канал, желудочно-кишечный тракт, ЖКТ) собирают из животных или человека (из операций или органа-донора ткани, одобренных для исследования) и из различных моделях животных, включая повреждением спинного мозга (SCI), инфравезикальной обструкции (BOO), или интерстициальный цистит (IC) могут быть исследованы с помощью этой техники. В этой статье мы иллюстрируют использование этого метода наряду с необходимыми экспериментальных протоколов, для решения несколько научных вопросов, упомянутых выше.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="658">
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:123px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:180px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Equipment</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Tissue Bath System with Reservoir</td>
			<td>Radnoti, LLC</td>
			<td style="width:119px;">159920</td>
			<td style="width:180px;">isolated tissue baths</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Warm water recirculator pump</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">TPZ-749</td>
			<td style="width:180px;">to keep tissue baths to 37 C</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Computer</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Data Acquisiton System</td>
			<td style="width:123px;">DataQ Instruments</td>
			<td style="width:119px;">DI-710-UH</td>
			<td style="width:180px;">To view, record and analyze data</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Transbridge Transducer Amplifier</td>
			<td style="width:123px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:119px;">SYS-TBM4M</td>
			<td style="width:180px;">Transducer amplifier</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Grass stimulator</td>
			<td style="width:123px;">Grass Technologies</td>
			<td>Model S88</td>
			<td style="width:180px;">Stimulator</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Anesthesia System</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td>ACV-1205S</td>
			<td style="width:180px;">To anesthetesize the animal</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:237px;"><a name="RANGE!A10">Anesthetizing Box</a></td>
			<td style="width:123px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:119px;">500116</td>
			<td style="width:180px;">To anesthetesize the animal</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Anesthesia Masks</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">AC-09508</td>
			<td style="width:180px;">To anesthetesize the animal</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Materials and surgical instruments</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">sylgard</td>
			<td>Dow Corning Corp</td>
			<td>184 SIL ELAST KIT</td>
			<td style="width:180px;">To pin, dissect &#38; cut tissue</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Petri Dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3160-152</td>
			<td style="width:180px;">To dissect/cut tissue</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:51px;width:237px;">Insect Pins</td>
			<td style="width:123px;">ENTOMORAVIA Austerlitz Insect Pins</td>
			<td style="width:119px;">Size 5</td>
			<td style="width:180px;">To pin tissue</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Bench Pad</td>
			<td style="width:123px;">VWR International</td>
			<td style="width:119px;">56617-014</td>
			<td style="width:180px;">Absorbent bench underpads</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Rat surgical Kit</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INSRATKIT</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">2 Dumont #3 Forceps</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INS500064</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Tissue Forceps</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INS500092</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Scalpel</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INS500236</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Scalpel blade</td>
			<td style="width:123px;">Kent Scientific Corporation&#160;</td>
			<td style="width:119px;">INS500239</td>
			<td style="width:180px;">To remove and dissect tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Professional Clipper&#160;</td>
			<td style="width:123px;">Braintree Scientific, Inc.</td>
			<td style="width:119px;">CLP-223&#160;45</td>
			<td style="width:180px;">To remove fur</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Suture Thread</td>
			<td style="width:123px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18020-50</td>
			<td style="width:180px;">Tie tissue</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Tissue Clips</td>
			<td>Radnoti, LLC</td>
			<td style="width:119px;">158802</td>
			<td style="width:180px;">Attach tissue to rod/transducer</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">1g weight</td>
			<td style="width:123px;">&#160;Mettler Toledo</td>
			<td>11119525</td>
			<td style="width:180px;">For transducer calibration</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Chemicals</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="170">
			<td height="170" style="height:170px;width:237px;">Krebs Solution:&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Sodium Chloride 
			Potassium Chloride 
			Monobasic Potassium Phosphate 
			Magnesium Sulfate 
			Dextrose 
			Sodium Bicarbonate 
			Calcium Chloride 
			Magnesium Chloride</td>
			<td style="width:123px;">Sigma&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; 
			Fisher 
			Fisher 
			Fisher 
			Fisher 
			Sigma 
			EMD 
			Baker</td>
			<td style="width:119px;">&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; S7653 
			P217-500 
			P285-3 
			M65-500 
			D16-500 
			S5761 
			CX0130-2 
			2444</td>
			<td style="width:180px;">To prepare Krebs solution</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:237px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:123px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">029405</td>
			<td style="width:180px;">To anesthetesize the animal</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">&#160;Oxygen tank</td>
			<td style="width:123px;">Matheson Tri Gas</td>
			<td style="width:119px;">ox251</td>
			<td style="width:180px;">To use with anesthesia system</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:237px;">Carbogen Tank (95% Oxygen; 5% Carbon Dioxide)&#160;</td>
			<td style="width:123px;">Matheson Tri Gas</td>
			<td style="width:119px;">Moxn00hn36D</td>
			<td style="width:180px;">To aerate Krebs solutions</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bladder smooth muscle strip contractility as a method to evaluate lower urinary tract pharmacology

Мы описываем метод в пробирке для измерения пузыря гладкую сократимость мышц, и его использование для исследования физиологических и фармакологических свойств гладких мышц, а также изменения, вызванные патологией. Этот метод обеспечивает критически важную информацию для понимания функции мочевого пузыря, преодолевая основные методологические трудности, возникающие в в естественных условиях экспериментов, например, хирургических и фармакологических манипуляций, которые влияют на стабильность и выживание препаратов, использование человеческих тканей и / или использования дорогих химических веществ. Он также предоставляет возможность исследовать свойства каждого компонента мочевого пузыря (т.е. гладкой мускулатуры, слизистой оболочки, нервы) у здоровых и патологических состояний. Мочевой пузырь удаляется из анестезированных животных, помещали в раствор Кребса и разрезали на полоски. Полоски помещают в камеру, заполненную теплой раствором Кребса. Один конец прикреплен к изометрической Tensioн датчика для измерения силы сжатия, а другой конец прикреплен к неподвижной штанги. Ткань стимулируют путем прямого добавления соединений в баню или путем электрической стимуляции электродов полевых, которые активируют нервы, похожие на срабатывание сокращения мочевого пузыря в естественных условиях. Мы демонстрируем использование этого метода для оценки спонтанной сократительной гладких мышц в процессе разработки и после экспериментального повреждения спинного мозга, природа синапсах (передатчиков и рецепторов, участвующих), факторы, влияющие на модуляции активности гладких мышц, роль отдельных компонентов мочевого пузыря, и виды и различия органов в ответ на фармакологические препараты. Кроме того, он может быть использован для исследования внутриклеточных путей, участвующих в сжатии и / или релаксации гладкой мышцы, наркотиков отношений структура-активность и оценки выпуска передатчика. Гладкая метод мышцы сократимость в пробирке была широко FO используетсяг в течение 50 лет, и предоставил данные, которые внесли значительный вклад в наше понимание функции мочевого пузыря, а также фармацевтической разработке соединений в настоящее время используются клинически для управления мочевого пузыря.

Спонтанное Миогенный активности Спонтанное миогенной деятельность является важным гладкая характеристика мышца, которая претерпевает изменения с постнатального развития 6-9 и патологии (например, SCI, BOO) 3-5. Потому что эта деятельность, как пола...

Watch this Scientific Journal Video about Bladder Smooth Muscle Strip Contractility as a Method to Evaluate Lower Urinary Tract Pharmacology at JoVE.com

Bladder Smooth Muscle Strip Contractility as a Method to Evaluate Lower Urinary Tract Pharmacology

Эта рукопись представляет собой простой, но мощный, в методе экстракорпорального для оценки гладкую сократимость мышц в ответ на фармакологические препараты или стимуляции нерва. Основные области применения скрининг лекарств и понимание ткани физиология, фармакология, и патология.

Гладких мышц мочевого пузыря Газа Сократимость как метод оценки нижних мочевых путей фармакология

We describe an in vitro method to measure bladder smooth muscle contractility, and its use for investigating physiological and pharmacological properties ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Mouse Bladder Wall Injection

Мышь стенки мочевого пузыря инъекций

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

Manual Muscle Testing:  A Method of Measuring Extremity Muscle Strength Applied to Critically Ill Patients

Руководство Тестирование мышц: метод измерения силы мышц конечностей Применяют для критически больных пациентов

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and other causes of critical illness often have generalized weakness, reduced exercise tolerance, ...

Probe-based Confocal Laser Endomicroscopy of the Urinary Tract: The Technique

Зонд на основе конфокальной лазерной Endomicroscopy мочевыводящих путей: Техника

Probe-based  confocal laser endomicroscopy (CLE) is an emerging optical imaging technology  that enables real-time in vivo microscopy of mucosal surfaces ...

A Modified Precipitation Method to Isolate Urinary Exosomes

Модифицированный Осадки Метод изолировать мочевых экзосомы

Identification of biomarkers that allow early detection of kidney diseases in urine and plasma has been an area of active interest for several years. ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Мочевой пузырь Вздутие Вызванные висцеромоторный Ответы в качестве модели для мочевого пузыря боли у мышей

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Calcification of Vascular Smooth Muscle Cells and Imaging of Aortic Calcification and Inflammation

Обызвествление сосудистых гладких мышечных клеток и визуализации аортальной кальцификации и Воспаление

Cardiovascular disease is the leading cause of morbidity and mortality in the world.  Atherosclerotic plaques, consisting of lipid-laden macrophages and ...

Contractility Measurements of Human Uterine Smooth Muscle to Aid Drug Development

Сократительную способность измерения человеческого гладких мышц матки для разработки лекарственных средств помощи

Discovery and characterization of novel pharmaceutical compounds or biochemical probes rely on robust and physiologically relevant assay systems. We ...

Microelectrode Impalement Method to Record Membrane Potential from a Cannulated Middle Cerebral Artery

Метод микроэлектрода Impalement для записи Мембраны Потенциал из канналедированной средней мозговой артерии

Membrane potential (Vm) of vascular smooth muscle cells determines vessel tone and thus blood flow to an organ. Changes in the expression and function of ...

Quantitative Analysis of Cellular Composition in Advanced Atherosclerotic Lesions of Smooth Muscle Cell Lineage-Tracing Mice

Количественный анализ клеточного состава в передовых атеросклеротическим поражением гладкомышечные клетки Lineage трассировки мышей

Atherosclerosis remains the leading cause of death worldwide and, despite countless preclinical studies describing promising therapeutic targets, novel ...

Ultrasonography of the Adult Male Urinary Tract for Urinary Functional Testing

Ультрасонография взрослых мужских мочевыводящих путей для функционального тестирования мочи

The incidence of clinical benign prostatic hyperplasia (BPH) and lower urinary tract symptoms (LUTS) is increasing due to the aging population, resulting ...