Name: olfactory neurons obtained through nasal biopsy combined with laser-capture microdissection: a potential approach to study treatment response in mental disorders
Uploaded: 2014-12-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disord

This work was supported by USPHS grants MH-091460 (E.N.), MH-084018 (A.S.), MH-094268 Silvo O. Conte center (A.S.), MH-069853 (A.S.), MH-085226 (A.S.), MH-088753 (A.S.), MH-092443 (A.S.), and MH-096208 (K.I.), grants from DANA (E.N.), Stanley (A.S.), RUSK (A.S.), S-R foundations (A.S.), NARSAD (A.S. and K.I.), and Maryland Stem Cell Research Fund (A.S. and K.I.).
We sincerely appreciate the efforts and contributions of Pearl Kim, Maria Papapavlou, Nao Gamo, Youjin Chung, Yukiko Lema and Mark Christie towards coordination of the biopsy process.

BEMÆRK: Alle forskningsaktiviteter frivillige i denne undersøgelse blev indgivet informeret samtykke dokumenter godkendt af Institutional Review Board af Howard University og Johns Hopkins University. Kun deltagere, der givet samtykke ved at underskrive informeret samtykke dokumenter blev indskrevet i undersøgelsen. Undersøgelsen base for denne analyse bestod af: 20 patienter (12 BD og 10 kontroller, 30% mænd) og gennemsnitsalder (SD) på 38,2 (14,1) år. BEMÆRK: Spray alle overflader med RNase Zap at fjern...

<ol>
	<li>Goodwin, F. K., Jamison, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manic-depressive illness. , (1990).</li><li>Einat, H., Manji, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+plasticity+cascades:+genes-to-behavior+pathways+in+animal+models+of+bipolar+disorder.">Cellular plasticity cascades: genes-to-behavior pathways in animal models of bipolar disorder.</a> Biol Psychiatry. 59 (12), 1160-1171 (2006).</li><li>Severino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacogenomics+of+bipolar+disorder.">Pharmacogenomics of bipolar disorder.</a> Pharmacogenomics. 14 (6), 655-674 (2013).</li><li>Beech, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene-expression+differences+in+peripheral+blood+between+lithium+responders+and+non-responders+in+the+Lithium+Treatment-Moderate+dose+Use+Study+(LiTMUS).">Gene-expression differences in peripheral blood between lithium responders and non-responders in the Lithium Treatment-Moderate dose Use Study (LiTMUS).</a> Pharmacogenomics J. 14 (2), 182-191 (2013).</li><li>Horiuchi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+cells+via+nasal+biopsy+reflect+the+developing+brain+in+gene+expression+profiles:+utility+and+limitation+of+the+surrogate+tissues+in+research+for+brain+disorders.">Olfactory cells via nasal biopsy reflect the developing brain in gene expression profiles: utility and limitation of the surrogate tissues in research for brain disorders.</a> Neurosci Res. 77 (4), 247-250 (2013).</li><li>Dryer, L., Graziadei, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Projections+of+the+olfactory+bulb+in+an+elasmobranch+fish,+Sphyrna+tiburo:+segregation+of+inputs+in+the+telencephalon.">Projections of the olfactory bulb in an elasmobranch fish, Sphyrna tiburo: segregation of inputs in the telencephalon.</a> Anat Embryol (Berl. 190 (6), 563-572 (1994).</li><li>Hahn, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+and+in+vitro+neurogenesis+in+human+olfactory+epithelium.">In vivo and in vitro neurogenesis in human olfactory epithelium.</a> J Comp Neurol. 483 (2), 154-163 (2005).</li><li>Cascella, N. G., Takaki, M., Lin, S., Sawa, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurodevelopmental+involvement+in+schizophrenia:+the+olfactory+epithelium+as+an+alternative+model+for+research.">Neurodevelopmental involvement in schizophrenia: the olfactory epithelium as an alternative model for research.</a> J Neurochem. 102 (3), 587-594 (2007).</li><li>Sawa, A., Cascella, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+olfactory+system+for+clinical+and+basic+psychiatry:+a+promising+entry+point+to+the+mystery+of+brain+mechanism+and+biomarker+identification+in+schizophrenia.">Peripheral olfactory system for clinical and basic psychiatry: a promising entry point to the mystery of brain mechanism and biomarker identification in schizophrenia.</a> Am J Psychiatry. 166 (2), 137-139 (2009).</li><li>Mor, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-382+expression+is+elevated+in+the+olfactory+neuroepithelium+of+schizophrenia+patients.">MicroRNA-382 expression is elevated in the olfactory neuroepithelium of schizophrenia patients.</a> Neurobiol Dis. 55, 1-10 (2013).</li><li>Kano, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+profiling+of+multiple+histone+methylations+in+olfactory+cells:+further+implications+for+cellular+susceptibility+to+oxidative+stress+in+schizophrenia.">Genome-wide profiling of multiple histone methylations in olfactory cells: further implications for cellular susceptibility to oxidative stress in schizophrenia.</a> Mol Psychiatry. 18 (7), 740-742 (2013).</li><li>Toritsuka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficits+in+microRNA-mediated+Cxcr4/Cxcl12+signaling+in+neurodevelopmental+deficits+in+a+22q11+deletion+syndrome+mouse+model.">Deficits in microRNA-mediated Cxcr4/Cxcl12 signaling in neurodevelopmental deficits in a 22q11 deletion syndrome mouse model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (43), 17552-17557 (2013).</li><li>Evgrafov, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+neuroepithelium-derived+neural+progenitor+cells+as+a+model+system+for+investigating+the+molecular+mechanisms+of+neuropsychiatric+disorders.">Olfactory neuroepithelium-derived neural progenitor cells as a model system for investigating the molecular mechanisms of neuropsychiatric disorders.</a> Psychiatr Genet. 21 (5), 217-228 (2011).</li><li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+adhesion+dynamics+are+altered+in+schizophrenia.">Focal adhesion dynamics are altered in schizophrenia.</a> Biol Psychiatry. 74 (6), 418-426 (2013).</li><li>Ishizuka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+symptoms+of+schizophrenia+correlate+with+impairment+on+the+University+of+Pennsylvania+smell+identification+test.">Negative symptoms of schizophrenia correlate with impairment on the University of Pennsylvania smell identification test.</a> Neurosci Res. 66, 106-110 (2010).</li><li>Sattler, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+nasal+olfactory+epithelium+as+a+dynamic+marker+for+CNS+therapy+development.">Human nasal olfactory epithelium as a dynamic marker for CNS therapy development.</a> Exp Neurol. 232 (2), 203-211 (2011).</li><li>Rimbault, M., Robin, S., Vaysse, A., Galibert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+profiles+of+rat+olfactory+epithelia:+individual+and+age+related+variations.">RNA profiles of rat olfactory epithelia: individual and age related variations.</a> BMC Genomics. 10, 572 (2009).</li><li>Tajinda, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+biomarkers+from+patients+with+mental+illnesses:+a+novel+method+through+nasal+biopsy+combined+with+laser-captured+microdissection.">Neuronal biomarkers from patients with mental illnesses: a novel method through nasal biopsy combined with laser-captured microdissection.</a> Mol Psychiatry. 15 (3), 231-232 (2010).</li><li>Bonner, R. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+capture+microdissection:+molecular+analysis+of+tissue.">Laser capture microdissection: molecular analysis of tissue.</a> Science. 278 (5342), 1481-1483 (1997).</li><li>Fink, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+quantitative+RT-PCR+after+laser-assisted+cell+picking.">Real-time quantitative RT-PCR after laser-assisted cell picking.</a> Nat Med. 4 (11), 1329-1333 (1998).</li><li>Emmert-Buck, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+capture+microdissection.">Laser capture microdissection.</a> Science. 274 (5289), 998-1001 (1996).</li><li>Nurnberger, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+interview+for+genetic+studies.+Rationale,+unique+features,+and+training.">Diagnostic interview for genetic studies. Rationale, unique features, and training.</a> NIMH Genetics Initiative. Arch Gen Psychiatry. 51 (11), 849-859 (1994).</li><li>Montgomery, S. A., Asberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+depression+scale+designed+to+be+sensitive+to+change.">A new depression scale designed to be sensitive to change.</a> Br J Psychiatry. 134, 382-389 (1979).</li><li>Young, R. C., Biggs, J. T., Ziegler, V. E., Meyer, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rating+scale+for+mania:+reliability,+validity+and+sensitivity.">A rating scale for mania: reliability, validity and sensitivity.</a> Br J Psychiatry. 133, 429-435 (1978).</li></ol>

En ny platform for at opnå berigede olfaktoriske neuronale lag ved at kombinere nasal biopsi og LCM præsenteres og er blevet valideret i denne undersøgelse. Denne teknik kan have omfattende konsekvenser. Det kan anvendes mod biomarkør undersøgelser, også for behandlingsrespons og drug discovery indsats for andre neuropsykiatriske tilstande, hvilket gør en bredere indvirkning på området. For at opnå høj kvalitet neuroner høj modtagelige for efterfølgende anvendelser, skal nogle f...

Bipolar lidelse (BD) er en alvorlig neuropsykiatrisk lidelse, karakteriseret ved patologiske ændringer i humør, drive og kognition 1. Lithium anvendes til behandling af BD har vist sig at ændre steady state mRNA niveauer af et stort antal gener i dyreforsøg 2, men det er uvist, om nogen af disse molekyler er forbundet med klinisk respons hos mennesker 2. Forståelse mekanismen af ​​lithium reaktion ville kræve undersøgelse lithium-induceret molekylære ændringer i neuronale væv. Desværre er det ikke praktisk at få hjernen biopsier af BD patienter før og efter lithium terapi for at identificere molekylære signaturer af lithium respons. Post-mortem hjernevæv er blevet anvendt til at undersøge biomarkører i BD, men de kan ikke anvendes til at vurdere molekylære markører forbundet med dynamiske ændringer i følelser, kognition og drev; og gyldigheden af efterfølgende konstateret lithium behandlingsrespons kan være problematisk 4. Lymfocytter og andre blodceller kan være nyttige, men molekylære ændringer i blodcellerne kan afvige neuronal ændringer 3-5. Cerebrospinalvæske kan være utilstrækkelig til at indhente oplysninger om intracellulære molekyler, som kan afspejle sygdomsassocierede og medicin-reversibel iboende forandringer. Lugteepitelet (OE) er en unik del af det centrale nervesystem (CNS), embryologisk relateret til limbiske strukturer 6; og det er let tilgængeligt via nasal biopsier. Den består af glial-lignende støtte (dvs. sustentacular) celler basal prolifererende celler og olfaktoriske receptor neuroner på forskellige stadier af udvikling 7-9. Derfor OE giver en enestående mulighed for at accessibly studere dynamiske ændringer i CNS af patienter med neuropsykiatriske sygdomme 7. Undersøgelser demonstrerer anvendeligheden af ​​OE som surrogat væv til undersøgelse af sygdoms- forbundet begivenheder, der afspejler disse OCCurring i hjerneneuroner 8,9. For eksempel har undersøgelser udnyttes OE for at undersøge molekylære profiler forbundet med psykiatriske lidelser 10-14. Lugtesystemet også tjener til at identificere kliniske endophenoytpes såsom lugt underskud, der er forbundet med de negative symptomer på skizofreni 15. Derudover fortsætter neurologiske processer i OE gennem hele livet, der giver et nyttigt avenue at modellere den underliggende patofysiologi psykiatriske tilstande 8,9. Men en ulempe ved anvendelsen af dette væv er den betydelige forurening af olfaktoriske biopsier med ikke-neuronale celler 16. For eksempel total RNA anvendes til genekspressionsstudier i tidligere OE undersøgelser indeholdt RNA ekstraheret fra hele nasal biopsi væv, herunder RNA fra ikke-neuronale celler 17. Derfor har de tidligere metoder været begrænset af kvaliteten af ​​celler. For at overvinde dette problem, at en ny tilgang opnå<html> berigede neuronale cellepopulationer ved at kombinere nasale biopsier med laser-capture mikrodissektion (LCM) er blevet udviklet 18. LCM er en teknik, der giver mulighed for selektiv isolering af celler under anvendelse af UV laserskæring kombineret med infrarød laser 19-21. Kombinere LCM med OE tilgang minimerer væsentlig forurening af OE af ikke-neuronale celler og dermed øge berigelse af neuronale celler 18. Desuden kan den neuronale lag adskilles fra submucosa lag under et mikroskop, hvilket eliminerer behovet for farvning. Neuronale celletyper kan yderligere skelnes fra andre cellepopulationer med primære antistoffer, som udtrykkes af celletypen af interesse 7. Derfor er denne procedure etablerer en lettere fremgangsmåde til berigelse af næsten rent neuronal cellepopulation, der kan anvendes til genekspression undersøgelser, immunhistokemi og andre morfologiske undersøgelser. ve_content &quot;&gt; Denne undersøgelse har til formål at etablere en eksperimentel platform for at undersøge molekylære forandringer i olfaktoriske neuroner forbundet med sygdomstilstande og behandlingsrespons. For at løse dette, et lille sæt af røgfrie patienter, som opfyldte DSM-IV diagnostiske kriterier for BD baseret på Diagnostic interview til genetiske undersøgelser (DIG) 22 blev ansat til at gennemgå to nasale biopsier: en biopsi før behandling med lithium og den anden biopsi, efter 6 ugers daglig oral lithium terapi Endvidere skal de støtteberettigede BD patienterne være:. symptomatisk for depression baseret på at lave ≥10 ud af 60 i klinikeren administreret Montgomery-Asberg Rating Scale (MADRS) 23 symptomatisk for hypomani eller mani, baseret på en score ≥10 ud af 56 på klinikeren administreret Young-Mania Rating Scale (YMRS) 24. eller ≥10 på begge MADRS og YMRS Rater-Inter-Rater koefficient på aftale mellem klinikere for begge skalaer er&gt; 0,96 Efter biopsier, neuroner var Enri.tede fra OE ved LCM. Efter yderligere kontrolforanstaltninger kvalitet, for at sikre, udvinding af høj kvalitet RNA fra væv og neuronal berigelse, blev Real Time RT-PCR udført for at undersøge før og efter behandling ekspressionsniveauer af gener af interesse. De efterfølgende afsnit indeholder en beskrivelse af valideringen af ​​denne tilgang, fremhæver optimering af protokollen og de strategier, der blev ansøgt om fejlfinding protokollen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="600">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Reagent</td>
			<td style="width:143px;">Manufacturuer&#160;</td>
			<td style="width:175px;">Manufacturer Catalog #</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue Preparation</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue-Tek Cryomold Molds</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4557</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue-Tek O.C.T Compound</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4583</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cryosectioning</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Membrane Slide 1.0 PEN (D)</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy</td>
			<td>415190-9041-000</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Rnase Zap</td>
			<td>Ambion</td>
			<td>AM9780</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DEPC Treated Water</td>
			<td>Quality Biological</td>
			<td>351-068-131</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microdissection</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microscope: PALM Series MicroLaser System</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Model: Axiovert 200M</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Software: Robo v3.2</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">No.5 Dumont Microdissction Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-49085</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNA Extraction</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RNAqueous Micro Kit</td>
			<td>Ambion</td>
			<td>AM1931</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">cDNA Synthesis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SuperScript III First Strand Synthesis Kit</td>
			<td>Invitrogen&#160;</td>
			<td>18080-051</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">OMP qPCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SYBR GreenER qPCR SuperMix</td>
			<td>Invitrogen&#160;</td>
			<td>11760-500</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman qPCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Expression Assay Probes</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Various</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TaqMan Gene Expression Master Mix</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>4369016</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

olfactory neurons obtained through nasal biopsy combined with laser-capture microdissection: a potential approach to study treatment response in mental disorders

Bipolar lidelse (BD) er en alvorlig neuropsykiatrisk lidelse med dårligt forstået patofysiologi og typisk behandlet med stemningen stabilisator, lithiumcarbonat. Dyreforsøg samt humane genetiske undersøgelser viser, at lithium påvirker molekylære mål, der er involveret i neuronal vækst, overlevelse og modning, og især molekyler involveret i Wnt signalering. I betragtning af den etiske udfordring at opnå hjernen biopsier for at undersøge dynamiske molekylære ændringer er forbundet med lithium-respons i det centrale nervesystem (CNS), kan man overveje at anvende neuroner opnået fra olfaktoriske væv for at nå dette goal.The lugteepitel indeholder olfaktoriske receptor neuroner på forskellige stadier af udvikling og glia-lignende støtte celler. Dette giver en unik mulighed for at studere dynamiske ændringer i CNS af patienter med neuropsykiatriske sygdomme, ved hjælp af olfaktoriske væv sikkert fås fra nasale biopsier. For at overvinde den ulempe udgøres af substantial forurening af biopsi olfaktoriske væv med ikke-neuronale celler, blev en ny tilgang for at opnå berigede neuronal cellepopulationer udviklet ved at kombinere nasale biopsier med laser-capture mikrodissektion. I denne undersøgelse blev et system til undersøgelse behandlingsrelaterede associeret dynamiske molekylære forandringer i neuronvæv udviklet og valideret ved hjælp af en lille pilot prøve af BD patienter rekrutteret til studiet af de molekylære mekanismer i lithium behandlingsrespons.

Protokollen og fejlfinding strategi i studiet af molekylære signaturer lykkedes optimeres. RNA kvalitet og neuronale berigelse kriterier for prøver, der skal bruges i længere nedstrøms Real Time-PCR-analyse blev standardiseret. RIN og RNA-koncentrationen blev undersøgt som forstyrrende faktorer til fundne ekspressionsniveauer. På baggrund af analysen af ​​flere prøver med Rins spænder 1-10, blev det bestemt, at et minimum RIN på ~ 3,0 og derover er tilstrækkelig for downstream analyse i denne undersøgelse...

Watch this Scientific Journal Video about Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disord

Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disorders

I denne undersøgelse en ny platform undersøge intraneuronale molekylære underskrifter af behandlingsrespons ved bipolar sygdom (BD) blev udviklet og valideret. Lugteepitel fra BD patienter blev opnået gennem nasale biopsier. Så laser-capture mikrodissektion blev kombineret med Real Time RT-PCR til at undersøge den molekylære signatur af lithium respons i BD.

Olfaktoriske Neuroner opnået ved nasal biopsi Kombineret med Laser-Capture mikrodissektion: En Potentiel tilgang til Uddannelse behandlingsrespons i Mental Disorders

Bipolar disorder (BD) is a severe neuropsychiatric disorder with poorly understood pathophysiology and typically treated with the mood stabilizer, lithium ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

The dendritic arborization (da) neurons of the Drosophila peripheral nervous system (PNS) provide an excellent model system in which to investigate the ...

Isolating Nasal Olfactory Stem Cells from Rodents or Humans

The olfactory mucosa, located in the nasal cavity, is in charge of detecting odours. It is also the only nervous tissue that is exposed to the external ...

Targeting Olfactory Bulb Neurons Using Combined In Vivo Electroporation and Gal4-Based Enhancer Trap Zebrafish Lines

Targeting Olfactory Bulb Neurons Using Combined In Vivo Electroporation and Gal4-Based Enhancer Trap Zebrafish Lines

In vivo electroporation is a powerful method for delivering DNA expression plasmids, RNAi reagents, and morpholino anti-sense oligonucleotides to specific ...

Non-Laser Capture Microscopy Approach for the Microdissection of Discrete Mouse Brain Regions for Total RNA Isolation and Downstream Next-Generation Sequencing and Gene Expression Profiling

Non-Laser Capture Microscopy Approach for the Microdissection of Discrete Mouse Brain Regions for Total RNA Isolation and Downstream Next-Generation Sequencing and Gene Expression Profiling  |

Ikke-Laser Capture Mikroskopi Tilgang til mikrodissektion af diskrete Mouse Brain Regioner for Total RNA Isolation og downstream næste generation sekventering og Gene Expression Profiling

As technological platforms, approaches such as next-generation sequencing, microarray, and qRT-PCR have great promise for expanding our understanding of ...

Laser Capture Microdissection of Enriched Populations of Neurons or Single Neurons for Gene Expression Analysis After Traumatic Brain Injury

Laser Capture mikrodissektion af beriget populationer af neuroner eller enkelte neuroner til genekspression analyse efter traumatisk hjerneskade

Long-term cognitive disability after TBI is associated with injury-induced neurodegeneration in the hippocampus-a region in the medial temporal lobe that ...

Laser Capture Microdissection of Neurons from Differentiated Human Neuroprogenitor Cells in Culture

Laser Capture mikrodissektion af neuroner fra differentierede humane Neuroprogenitor celler i kultur

Neuroprogenitor cells (NPCs) isolated from the human fetal brain were expanded under proliferative conditions in the presence of epidermal growth factor ...

Production of RNA for Transcriptomic Analysis from Mouse Spinal Cord Motor Neuron Cell Bodies by Laser Capture Microdissection

Produktion af RNA til transskriptionsanalyse fra Mus Rygmarv Motor Neuron Cell Organer ved Laser Capture Microdissection

Preparation of high-quality RNA from cells of interest is critical to precise and meaningful analysis of transcriptional differences among cell types or ...

Laser Capture Microdissection - A Demonstration of the Isolation of Individual Dopamine Neurons and the Entire Ventral Tegmental Area

Laser Capture mikrodissektion - en demonstration af Isolering af Individual dopaminneuroner og hele Ventral tegmentalområde

Laser capture microdissection (LCM) is used to isolate a concentrated population of individual cells or precise anatomical regions of tissue from tissue ...

Using an Adapted Microfluidic Olfactory Chip for the Imaging of Neuronal Activity in Response to Pheromones in Male C. Elegans Head Neurons

Using an Adapted Microfluidic Olfactory Chip for the Imaging of Neuronal Activity in Response to Pheromones in Male C. Elegans Head Neurons

Ved hjælp af en tilpasset mikrofluid olfaktoriske Chip til billeddannelse af Neuronal aktivitet som reaktion på feromoner i mandlige C. Elegans hoved neuroner

The use of calcium indicators has greatly enhanced our understanding of neural dynamics and regulation. The nematode Caenorhabditis elegans, with its ...