Name: olfactory neurons obtained through nasal biopsy combined with laser-capture microdissection: a potential approach to study treatment response in mental disorders
Uploaded: 2014-12-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disord

This work was supported by USPHS grants MH-091460 (E.N.), MH-084018 (A.S.), MH-094268 Silvo O. Conte center (A.S.), MH-069853 (A.S.), MH-085226 (A.S.), MH-088753 (A.S.), MH-092443 (A.S.), and MH-096208 (K.I.), grants from DANA (E.N.), Stanley (A.S.), RUSK (A.S.), S-R foundations (A.S.), NARSAD (A.S. and K.I.), and Maryland Stem Cell Research Fund (A.S. and K.I.).
We sincerely appreciate the efforts and contributions of Pearl Kim, Maria Papapavlou, Nao Gamo, Youjin Chung, Yukiko Lema and Mark Christie towards coordination of the biopsy process.

OPMERKING: Alle onderzoek vrijwilligers in deze studie werden toegediend geïnformeerde toestemming documenten door de Institutional Review Board van Howard University en de Johns Hopkins University goedgekeurd. Alleen deelnemers die door ondertekening van de geïnformeerde toestemming documenten ingestemd werden opgenomen in de studie. De studie basis voor deze analyse bestond uit: 20 proefpersonen (12 BD en 10 controles; 30% van de mannen) en de gemiddelde leeftijd (sd) van 38,2 (14,1) jaar. OPMERKING: Spuit al...

<ol>
	<li>Goodwin, F. K., Jamison, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manic-depressive illness. , (1990).</li><li>Einat, H., Manji, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+plasticity+cascades:+genes-to-behavior+pathways+in+animal+models+of+bipolar+disorder.">Cellular plasticity cascades: genes-to-behavior pathways in animal models of bipolar disorder.</a> Biol Psychiatry. 59 (12), 1160-1171 (2006).</li><li>Severino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacogenomics+of+bipolar+disorder.">Pharmacogenomics of bipolar disorder.</a> Pharmacogenomics. 14 (6), 655-674 (2013).</li><li>Beech, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene-expression+differences+in+peripheral+blood+between+lithium+responders+and+non-responders+in+the+Lithium+Treatment-Moderate+dose+Use+Study+(LiTMUS).">Gene-expression differences in peripheral blood between lithium responders and non-responders in the Lithium Treatment-Moderate dose Use Study (LiTMUS).</a> Pharmacogenomics J. 14 (2), 182-191 (2013).</li><li>Horiuchi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+cells+via+nasal+biopsy+reflect+the+developing+brain+in+gene+expression+profiles:+utility+and+limitation+of+the+surrogate+tissues+in+research+for+brain+disorders.">Olfactory cells via nasal biopsy reflect the developing brain in gene expression profiles: utility and limitation of the surrogate tissues in research for brain disorders.</a> Neurosci Res. 77 (4), 247-250 (2013).</li><li>Dryer, L., Graziadei, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Projections+of+the+olfactory+bulb+in+an+elasmobranch+fish,+Sphyrna+tiburo:+segregation+of+inputs+in+the+telencephalon.">Projections of the olfactory bulb in an elasmobranch fish, Sphyrna tiburo: segregation of inputs in the telencephalon.</a> Anat Embryol (Berl. 190 (6), 563-572 (1994).</li><li>Hahn, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+and+in+vitro+neurogenesis+in+human+olfactory+epithelium.">In vivo and in vitro neurogenesis in human olfactory epithelium.</a> J Comp Neurol. 483 (2), 154-163 (2005).</li><li>Cascella, N. G., Takaki, M., Lin, S., Sawa, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurodevelopmental+involvement+in+schizophrenia:+the+olfactory+epithelium+as+an+alternative+model+for+research.">Neurodevelopmental involvement in schizophrenia: the olfactory epithelium as an alternative model for research.</a> J Neurochem. 102 (3), 587-594 (2007).</li><li>Sawa, A., Cascella, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+olfactory+system+for+clinical+and+basic+psychiatry:+a+promising+entry+point+to+the+mystery+of+brain+mechanism+and+biomarker+identification+in+schizophrenia.">Peripheral olfactory system for clinical and basic psychiatry: a promising entry point to the mystery of brain mechanism and biomarker identification in schizophrenia.</a> Am J Psychiatry. 166 (2), 137-139 (2009).</li><li>Mor, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-382+expression+is+elevated+in+the+olfactory+neuroepithelium+of+schizophrenia+patients.">MicroRNA-382 expression is elevated in the olfactory neuroepithelium of schizophrenia patients.</a> Neurobiol Dis. 55, 1-10 (2013).</li><li>Kano, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+profiling+of+multiple+histone+methylations+in+olfactory+cells:+further+implications+for+cellular+susceptibility+to+oxidative+stress+in+schizophrenia.">Genome-wide profiling of multiple histone methylations in olfactory cells: further implications for cellular susceptibility to oxidative stress in schizophrenia.</a> Mol Psychiatry. 18 (7), 740-742 (2013).</li><li>Toritsuka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficits+in+microRNA-mediated+Cxcr4/Cxcl12+signaling+in+neurodevelopmental+deficits+in+a+22q11+deletion+syndrome+mouse+model.">Deficits in microRNA-mediated Cxcr4/Cxcl12 signaling in neurodevelopmental deficits in a 22q11 deletion syndrome mouse model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (43), 17552-17557 (2013).</li><li>Evgrafov, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+neuroepithelium-derived+neural+progenitor+cells+as+a+model+system+for+investigating+the+molecular+mechanisms+of+neuropsychiatric+disorders.">Olfactory neuroepithelium-derived neural progenitor cells as a model system for investigating the molecular mechanisms of neuropsychiatric disorders.</a> Psychiatr Genet. 21 (5), 217-228 (2011).</li><li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+adhesion+dynamics+are+altered+in+schizophrenia.">Focal adhesion dynamics are altered in schizophrenia.</a> Biol Psychiatry. 74 (6), 418-426 (2013).</li><li>Ishizuka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+symptoms+of+schizophrenia+correlate+with+impairment+on+the+University+of+Pennsylvania+smell+identification+test.">Negative symptoms of schizophrenia correlate with impairment on the University of Pennsylvania smell identification test.</a> Neurosci Res. 66, 106-110 (2010).</li><li>Sattler, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+nasal+olfactory+epithelium+as+a+dynamic+marker+for+CNS+therapy+development.">Human nasal olfactory epithelium as a dynamic marker for CNS therapy development.</a> Exp Neurol. 232 (2), 203-211 (2011).</li><li>Rimbault, M., Robin, S., Vaysse, A., Galibert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+profiles+of+rat+olfactory+epithelia:+individual+and+age+related+variations.">RNA profiles of rat olfactory epithelia: individual and age related variations.</a> BMC Genomics. 10, 572 (2009).</li><li>Tajinda, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+biomarkers+from+patients+with+mental+illnesses:+a+novel+method+through+nasal+biopsy+combined+with+laser-captured+microdissection.">Neuronal biomarkers from patients with mental illnesses: a novel method through nasal biopsy combined with laser-captured microdissection.</a> Mol Psychiatry. 15 (3), 231-232 (2010).</li><li>Bonner, R. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+capture+microdissection:+molecular+analysis+of+tissue.">Laser capture microdissection: molecular analysis of tissue.</a> Science. 278 (5342), 1481-1483 (1997).</li><li>Fink, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+quantitative+RT-PCR+after+laser-assisted+cell+picking.">Real-time quantitative RT-PCR after laser-assisted cell picking.</a> Nat Med. 4 (11), 1329-1333 (1998).</li><li>Emmert-Buck, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+capture+microdissection.">Laser capture microdissection.</a> Science. 274 (5289), 998-1001 (1996).</li><li>Nurnberger, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+interview+for+genetic+studies.+Rationale,+unique+features,+and+training.">Diagnostic interview for genetic studies. Rationale, unique features, and training.</a> NIMH Genetics Initiative. Arch Gen Psychiatry. 51 (11), 849-859 (1994).</li><li>Montgomery, S. A., Asberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+depression+scale+designed+to+be+sensitive+to+change.">A new depression scale designed to be sensitive to change.</a> Br J Psychiatry. 134, 382-389 (1979).</li><li>Young, R. C., Biggs, J. T., Ziegler, V. E., Meyer, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rating+scale+for+mania:+reliability,+validity+and+sensitivity.">A rating scale for mania: reliability, validity and sensitivity.</a> Br J Psychiatry. 133, 429-435 (1978).</li></ol>

Een nieuw platform voor het verkrijgen van verrijkte olfactorische neuronale lagen combineert nasale biopsie en LCM wordt gepresenteerd en is gevalideerd in deze studie. Deze techniek kan wijdverspreide implicaties hebben. Het kan worden toegepast in de richting van biomarker studies, waaronder die voor de respons op de behandeling, en drug discovery inspanningen voor andere neuropsychiatrische omstandigheden, het maken van een bredere invloed in het veld. Om de hoge kwaliteit neuronen vatba...

Bipolaire stoornis (BD) is een ernstige neuropsychiatrische aandoening, gekenmerkt door pathologische veranderingen in de stemming, rijden en cognitie 1. Lithium gebruikt voor de behandeling van BD is aangetoond steady state mRNA niveaus van een groot aantal genen in dierstudies 2 veranderen, maar blijft het onduidelijk of een van deze moleculen geassocieerd met klinische respons bij de mens 2. Inzicht in het mechanisme van lithium reactie vereist onderzoeken lithium geïnduceerde moleculaire veranderingen in neuronale weefsels. Helaas, het is niet praktisch om het verkrijgen van de hersenen biopten van BD patiënten pre- en post-lithium therapie om moleculaire handtekeningen van lithium respons te identificeren. Post-mortem hersenweefsel zijn gebruikt om biomarkers in BD studie, maar ze kunnen niet worden gebruikt om moleculaire markers die aan dynamische veranderingen in emoties, cognitie en rijden beoordelen; en de geldigheid van achteraf geconstateerde lithium respons op de behandeling kan problematisch zijn 4. Lymfocyten en andere bloedcellen nuttig zou kunnen zijn, maar de moleculaire veranderingen in de bloedcellen kan geen afspiegeling van neuronale veranderingen 3-5. Cerebrospinale vloeistof onvoldoende informatie over intracellulaire moleculen die ziektegeassocieerde en medicatie-reversibele intrinsieke veranderingen kunnen weerspiegelen verkrijgen. De reukepitheel (OE) is een uniek deel van het centrale zenuwstelsel (CZS), embryologically-gerelateerd aan limbische structuren 6; en het is gemakkelijk toegankelijk via nasale biopsieën. Het bestaat uit glial ondersteuningsorgaan (dwz sustentaculaire) cellen, basale prolifererende cellen en olfactorische receptor neuronen in verschillende ontwikkelingsstadia 7-9. Daarom OE biedt een unieke gelegenheid om toegankelijke studeren dynamische veranderingen in het CZS van patiënten met neuropsychiatrische aandoeningen 7. Studies demonstreren het nut van de OE als surrogaat weefsel voor onderzoek ziekte geassocieerde gebeurtenissen die aan occ weerspiegelenurring in de hersenen neuronen 8,9. Zo hebben studies OE gebruikt moleculaire profielen geassocieerd met psychiatrische aandoeningen 10-14 onderzoeken. Olfactorisch systeem dient ook om klinische endophenoytpes zoals tekorten geur die geassocieerd zijn met negatieve symptomen van schizofrenie 15 identificeren. Bovendien, neurologische processen verder in de OE gedurende het hele leven, die een nuttig laan naar het model van de onderliggende pathofysiologie van psychiatrische aandoeningen 8,9. Een nadeel van het gebruik van dit weefsel is de aanzienlijke verontreiniging van olfactorische biopten met niet-neuronale cellen 16. Bijvoorbeeld, totaal RNA voor genexpressie studies in eerdere studies OE bevatten RNA geëxtraheerd uit het gehele nasale biopsie tissue omvattende RNA van niet-neuronale cellen 17. Daarom zijn eerdere benaderingen beperkt door de kwaliteit van de cellen. Om dit probleem te overwinnen, een nieuwe benadering voor het verkrijgen<html> verrijkte neuronale celpopulaties door het combineren van nasale biopsieën met laser-capture microdissectie (LCM) is ontwikkeld 18. LCM is een techniek die het mogelijk maakt de selectieve isolatie van cellen met UV laser snijden in combinatie met infrarood laser 19-21. De combinatie LCM met OE benadering minimaliseert aanzienlijke verontreiniging van OE door niet-neuronale cellen, waarbij verrijking van neuronale cellen 18 verbeteren. Bovendien kan de neuronale lagen worden onderscheiden van de submucosa laag onder een microscoop, waardoor de noodzaak voor kleuring. Neuronale celtypen kan verder worden onderscheiden van andere celpopulaties met primaire antilichamen die worden uitgedrukt door het celtype van belang 7. Daarom is deze werkwijze wordt een eenvoudiger werkwijze voor de verrijking van bijna zuiver neuronale celpopulatie die kunnen worden gebruikt voor genexpressie studies, immunohistochemie en andere morfologische onderzoeken. ve_content &quot;&gt; Dit onderzoek heeft tot doel een experimenteel platform voor moleculaire veranderingen in olfactorische neuronen in verband met de ziekte van staten en de respons op de behandeling te onderzoeken vast te stellen. Om dit aan te pakken, een kleine set van rookvrije patiënten die de DSM-IV diagnostische criteria voor BD voldaan op basis van het Diagnostisch Interview voor genetische studies (DIG) 22 werd aangeworven om twee nasale biopsieën ondergaan: een biopsie pre-behandeling met lithium en de tweede biopsie, na 6 weken van dagelijkse orale lithium therapie Bovendien moet in aanmerking BD patiënten zijn:. symptomatisch voor depressie , gebaseerd op scoren ≥10 van de 60 in de arts toegediend Montgomery-Asberg Rating Scale (MADRS) 23; symptomatisch voor hypomanie of manie, gebaseerd op een score ≥10 van de 56 op de arts toegediend Young-Mania Rating Scale (YMRS) 24;. of ≥10 op beide MADRS en YMRS Rater-interbeoordelaar coëfficiënt van overeenstemming tussen clinici voor beide schalen is&gt; 0,96 Na biopten, neuronen waren enri.schakeld uit OE door LCM. Na aanvullende maatregelen voor kwaliteitscontrole, extractie van hoge kwaliteit RNA uit de weefsels en neuronale verrijking waarborgen, werd Real Time RT PCR uitgevoerd om voor- en nabehandeling expressie van genen van belang te onderzoeken. De volgende hoofdstukken bevatten een beschrijving van de validatie van deze aanpak, aandacht voor de optimalisatie van het protocol en de strategieën die werden toegepast voor het oplossen van problemen van het protocol.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="600">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Reagent</td>
			<td style="width:143px;">Manufacturuer&#160;</td>
			<td style="width:175px;">Manufacturer Catalog #</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue Preparation</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue-Tek Cryomold Molds</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4557</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue-Tek O.C.T Compound</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4583</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cryosectioning</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Membrane Slide 1.0 PEN (D)</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy</td>
			<td>415190-9041-000</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Rnase Zap</td>
			<td>Ambion</td>
			<td>AM9780</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DEPC Treated Water</td>
			<td>Quality Biological</td>
			<td>351-068-131</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microdissection</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microscope: PALM Series MicroLaser System</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Model: Axiovert 200M</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Software: Robo v3.2</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">No.5 Dumont Microdissction Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-49085</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNA Extraction</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RNAqueous Micro Kit</td>
			<td>Ambion</td>
			<td>AM1931</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">cDNA Synthesis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SuperScript III First Strand Synthesis Kit</td>
			<td>Invitrogen&#160;</td>
			<td>18080-051</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">OMP qPCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SYBR GreenER qPCR SuperMix</td>
			<td>Invitrogen&#160;</td>
			<td>11760-500</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman qPCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Expression Assay Probes</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Various</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TaqMan Gene Expression Master Mix</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>4369016</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

olfactory neurons obtained through nasal biopsy combined with laser-capture microdissection: a potential approach to study treatment response in mental disorders

Bipolaire stoornis (BD) is een ernstige neuropsychiatrische aandoening met slecht begrepen pathofysiologie en meestal behandeld met de stemmingsstabilisator, lithiumcarbonaat. Dierstudies evenals menselijke genetische studies geven aan dat lithium beïnvloedt moleculaire doelwitten die betrokken zijn bij neuronale groei, overleving en rijping, en met name moleculen betrokken bij Wnt-signalering. Gezien de ethische uitdaging verkrijgen brain biopsies onderzoeken dynamische moleculaire veranderingen geassocieerd met lithium-respons in het centrale zenuwstelsel (CZS), kan men het gebruik van neuronen verkregen olfactorische weefsels overwegen dit te bereiken goal.The reukepitheel bevat olfactorische receptor neuronen in verschillende ontwikkelingsstadia en gliale-achtige steuncellen. Dit verschaft een unieke gelegenheid om dynamische veranderingen in het CZS van patiënten met neuropsychiatrische aandoeningen te bestuderen, met olfactorisch weefsel veilig verkregen nasale biopsieën. Om het nadeel als gevolg van subst overwinnenantial besmetting van biopsie olfactorisch weefsel met niet-neuronale cellen, een nieuwe benadering verrijkte neuronale celpopulaties verkrijgen werd ontwikkeld door het combineren nasale biopsieën met laser-capture microdissectie. In deze studie, een systeem voor het onderzoeken therapiegerelateerde dynamische moleculaire veranderingen in neuronale weefsels ontwikkeld en gevalideerd, met een kleine voorsteekproef van BD patiënten gerekruteerd voor de studie van de moleculaire mechanismen van lithium behandelrespons.

Het protocol en het oplossen van problemen strategie in de studie van moleculaire handtekeningen werden succesvol geoptimaliseerd. RNA kwaliteit en neuronale verrijking criteria voor monsters die worden gebruikt stroomafwaarts Real Time-PCR-analyse werden gestandaardiseerd. RIN en RNA-concentratie werden onderzocht als verstorende factoren te gedetecteerd expressie niveaus. Op basis van de analyse van een aantal met RINS variërend 1-10, werd vastgesteld dat een minimum RIN van ~ 3.0 en hoger is voldoende voor downstrea...

Watch this Scientific Journal Video about Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disord

Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disorders

In deze studie, een roman platform om intraneuronaal moleculaire handtekeningen van respons op de behandeling in een bipolaire stoornis (BD) te onderzoeken werd ontwikkeld en gevalideerd. Reukepitheel van BD-patiënten werd verkregen door middel van nasale biopsieën. Vervolgens werd laser-capture microdissection gecombineerd met Real Time RT PCR om de moleculaire signatuur van lithium reactie in BD onderzoeken.

Reukneuronen Verkregen door Neus Biopsie Gecombineerd met Laser-Capture Microdissection: Een benadering die voor Studie respons op de behandeling in Mental Disorders

Bipolar disorder (BD) is a severe neuropsychiatric disorder with poorly understood pathophysiology and typically treated with the mood stabilizer, lithium ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser capture microdissectie van Drosophila Perifere neuronen

The dendritic arborization (da) neurons of the Drosophila peripheral nervous system (PNS) provide an excellent model system in which to investigate the ...

Isolating Nasal Olfactory Stem Cells from Rodents or Humans

Isoleren neus Olfactorische stamcellen van Knaagdieren of mensen

The olfactory mucosa, located in the nasal cavity, is in charge of detecting odours. It is also the only nervous tissue that is exposed to the external ...

Targeting Olfactory Bulb Neurons Using Combined In Vivo Electroporation and Gal4-Based Enhancer Trap Zebrafish Lines

Targeting Olfactory Bulb Neurons Using Combined In Vivo Electroporation and Gal4-Based Enhancer Trap Zebrafish Lines

Targeting bulbus olfactorius Neuronen gebruik van Gecombineerd In Vivo Elektroporatie en Gal4-Based Enhancer Trap zebravis Lines

In vivo electroporation is a powerful method for delivering DNA expression plasmids, RNAi reagents, and morpholino anti-sense oligonucleotides to specific ...

Non-Laser Capture Microscopy Approach for the Microdissection of Discrete Mouse Brain Regions for Total RNA Isolation and Downstream Next-Generation Sequencing and Gene Expression Profiling

Non-Laser Capture Microscopy Approach for the Microdissection of Discrete Mouse Brain Regions for Total RNA Isolation and Downstream Next-Generation Sequencing and Gene Expression Profiling  |

Niet-Laser Capture Microscopie Aanpak voor de Microdissection van Discrete Mouse Brain Regio&#39;s voor Totaal RNA isolatie en Downstream next-generation sequencing en Gene Expression Profiling

As technological platforms, approaches such as next-generation sequencing, microarray, and qRT-PCR have great promise for expanding our understanding of ...

Laser Capture Microdissection of Enriched Populations of Neurons or Single Neurons for Gene Expression Analysis After Traumatic Brain Injury

Laser Capture Microdissection van Verrijkt populaties van neuronen of Single Neuronen voor de analyse van genexpressie na traumatisch hersenletsel

Long-term cognitive disability after TBI is associated with injury-induced neurodegeneration in the hippocampus-a region in the medial temporal lobe that ...

Laser Capture Microdissection of Neurons from Differentiated Human Neuroprogenitor Cells in Culture

Lasermicrodissectie van neuronen van Gedifferentieerd Human Neuroprogenitor Cellen in Cultuur

Neuroprogenitor cells (NPCs) isolated from the human fetal brain were expanded under proliferative conditions in the presence of epidermal growth factor ...

Production of RNA for Transcriptomic Analysis from Mouse Spinal Cord Motor Neuron Cell Bodies by Laser Capture Microdissection

Productie van RNA voor transcriptomische analyse van muis ruggenmerg motor neuron cellichamen door laser capture microdissection

Preparation of high-quality RNA from cells of interest is critical to precise and meaningful analysis of transcriptional differences among cell types or ...

Laser Capture Microdissection - A Demonstration of the Isolation of Individual Dopamine Neurons and the Entire Ventral Tegmental Area

Lasermicrodissectie - Een demonstratie van de Isolatie van individuele dopamineneuronen en de Gehele Ventral tegmentum

Laser capture microdissection (LCM) is used to isolate a concentrated population of individual cells or precise anatomical regions of tissue from tissue ...

Using an Adapted Microfluidic Olfactory Chip for the Imaging of Neuronal Activity in Response to Pheromones in Male C. Elegans Head Neurons

Using an Adapted Microfluidic Olfactory Chip for the Imaging of Neuronal Activity in Response to Pheromones in Male C. Elegans Head Neurons

Met behulp van een aangepast Microfluidic olfactorische Chip voor de beeldvorming van neuronale activiteit in reactie op de feromonen in mannelijke C. Elegans hoofd neuronen

The use of calcium indicators has greatly enhanced our understanding of neural dynamics and regulation. The nematode Caenorhabditis elegans, with its ...