Name: olfactory neurons obtained through nasal biopsy combined with laser-capture microdissection: a potential approach to study treatment response in mental disorders
Uploaded: 2014-12-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disord

This work was supported by USPHS grants MH-091460 (E.N.), MH-084018 (A.S.), MH-094268 Silvo O. Conte center (A.S.), MH-069853 (A.S.), MH-085226 (A.S.), MH-088753 (A.S.), MH-092443 (A.S.), and MH-096208 (K.I.), grants from DANA (E.N.), Stanley (A.S.), RUSK (A.S.), S-R foundations (A.S.), NARSAD (A.S. and K.I.), and Maryland Stem Cell Research Fund (A.S. and K.I.).
We sincerely appreciate the efforts and contributions of Pearl Kim, Maria Papapavlou, Nao Gamo, Youjin Chung, Yukiko Lema and Mark Christie towards coordination of the biopsy process.

הערה: כל המתנדבים למחקר במחקר זה ניתנו מסמכי הסכמה מדעת שאושרו על ידי מועצת המנהלים המוסדית הסקירה של אוניברסיטת הווארד ואוניברסיטת ג&#39;ונס הופקינס. משתתפים היחידים שהסכימו על ידי חתימה על מסמכי ההסכמה מהדעת נרשמו למחקר. בסיס המחקר לניתוח זה מורכב מ: 20 נבדקים (12 BD ו -10...

<ol>
	<li>Goodwin, F. K., Jamison, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manic-depressive illness. , (1990).</li><li>Einat, H., Manji, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+plasticity+cascades:+genes-to-behavior+pathways+in+animal+models+of+bipolar+disorder.">Cellular plasticity cascades: genes-to-behavior pathways in animal models of bipolar disorder.</a> Biol Psychiatry. 59 (12), 1160-1171 (2006).</li><li>Severino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacogenomics+of+bipolar+disorder.">Pharmacogenomics of bipolar disorder.</a> Pharmacogenomics. 14 (6), 655-674 (2013).</li><li>Beech, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene-expression+differences+in+peripheral+blood+between+lithium+responders+and+non-responders+in+the+Lithium+Treatment-Moderate+dose+Use+Study+(LiTMUS).">Gene-expression differences in peripheral blood between lithium responders and non-responders in the Lithium Treatment-Moderate dose Use Study (LiTMUS).</a> Pharmacogenomics J. 14 (2), 182-191 (2013).</li><li>Horiuchi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+cells+via+nasal+biopsy+reflect+the+developing+brain+in+gene+expression+profiles:+utility+and+limitation+of+the+surrogate+tissues+in+research+for+brain+disorders.">Olfactory cells via nasal biopsy reflect the developing brain in gene expression profiles: utility and limitation of the surrogate tissues in research for brain disorders.</a> Neurosci Res. 77 (4), 247-250 (2013).</li><li>Dryer, L., Graziadei, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Projections+of+the+olfactory+bulb+in+an+elasmobranch+fish,+Sphyrna+tiburo:+segregation+of+inputs+in+the+telencephalon.">Projections of the olfactory bulb in an elasmobranch fish, Sphyrna tiburo: segregation of inputs in the telencephalon.</a> Anat Embryol (Berl. 190 (6), 563-572 (1994).</li><li>Hahn, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+and+in+vitro+neurogenesis+in+human+olfactory+epithelium.">In vivo and in vitro neurogenesis in human olfactory epithelium.</a> J Comp Neurol. 483 (2), 154-163 (2005).</li><li>Cascella, N. G., Takaki, M., Lin, S., Sawa, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurodevelopmental+involvement+in+schizophrenia:+the+olfactory+epithelium+as+an+alternative+model+for+research.">Neurodevelopmental involvement in schizophrenia: the olfactory epithelium as an alternative model for research.</a> J Neurochem. 102 (3), 587-594 (2007).</li><li>Sawa, A., Cascella, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+olfactory+system+for+clinical+and+basic+psychiatry:+a+promising+entry+point+to+the+mystery+of+brain+mechanism+and+biomarker+identification+in+schizophrenia.">Peripheral olfactory system for clinical and basic psychiatry: a promising entry point to the mystery of brain mechanism and biomarker identification in schizophrenia.</a> Am J Psychiatry. 166 (2), 137-139 (2009).</li><li>Mor, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-382+expression+is+elevated+in+the+olfactory+neuroepithelium+of+schizophrenia+patients.">MicroRNA-382 expression is elevated in the olfactory neuroepithelium of schizophrenia patients.</a> Neurobiol Dis. 55, 1-10 (2013).</li><li>Kano, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+profiling+of+multiple+histone+methylations+in+olfactory+cells:+further+implications+for+cellular+susceptibility+to+oxidative+stress+in+schizophrenia.">Genome-wide profiling of multiple histone methylations in olfactory cells: further implications for cellular susceptibility to oxidative stress in schizophrenia.</a> Mol Psychiatry. 18 (7), 740-742 (2013).</li><li>Toritsuka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficits+in+microRNA-mediated+Cxcr4/Cxcl12+signaling+in+neurodevelopmental+deficits+in+a+22q11+deletion+syndrome+mouse+model.">Deficits in microRNA-mediated Cxcr4/Cxcl12 signaling in neurodevelopmental deficits in a 22q11 deletion syndrome mouse model.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (43), 17552-17557 (2013).</li><li>Evgrafov, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+neuroepithelium-derived+neural+progenitor+cells+as+a+model+system+for+investigating+the+molecular+mechanisms+of+neuropsychiatric+disorders.">Olfactory neuroepithelium-derived neural progenitor cells as a model system for investigating the molecular mechanisms of neuropsychiatric disorders.</a> Psychiatr Genet. 21 (5), 217-228 (2011).</li><li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+adhesion+dynamics+are+altered+in+schizophrenia.">Focal adhesion dynamics are altered in schizophrenia.</a> Biol Psychiatry. 74 (6), 418-426 (2013).</li><li>Ishizuka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Negative+symptoms+of+schizophrenia+correlate+with+impairment+on+the+University+of+Pennsylvania+smell+identification+test.">Negative symptoms of schizophrenia correlate with impairment on the University of Pennsylvania smell identification test.</a> Neurosci Res. 66, 106-110 (2010).</li><li>Sattler, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+nasal+olfactory+epithelium+as+a+dynamic+marker+for+CNS+therapy+development.">Human nasal olfactory epithelium as a dynamic marker for CNS therapy development.</a> Exp Neurol. 232 (2), 203-211 (2011).</li><li>Rimbault, M., Robin, S., Vaysse, A., Galibert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+profiles+of+rat+olfactory+epithelia:+individual+and+age+related+variations.">RNA profiles of rat olfactory epithelia: individual and age related variations.</a> BMC Genomics. 10, 572 (2009).</li><li>Tajinda, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuronal+biomarkers+from+patients+with+mental+illnesses:+a+novel+method+through+nasal+biopsy+combined+with+laser-captured+microdissection.">Neuronal biomarkers from patients with mental illnesses: a novel method through nasal biopsy combined with laser-captured microdissection.</a> Mol Psychiatry. 15 (3), 231-232 (2010).</li><li>Bonner, R. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+capture+microdissection:+molecular+analysis+of+tissue.">Laser capture microdissection: molecular analysis of tissue.</a> Science. 278 (5342), 1481-1483 (1997).</li><li>Fink, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+quantitative+RT-PCR+after+laser-assisted+cell+picking.">Real-time quantitative RT-PCR after laser-assisted cell picking.</a> Nat Med. 4 (11), 1329-1333 (1998).</li><li>Emmert-Buck, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+capture+microdissection.">Laser capture microdissection.</a> Science. 274 (5289), 998-1001 (1996).</li><li>Nurnberger, J. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+interview+for+genetic+studies.+Rationale,+unique+features,+and+training.">Diagnostic interview for genetic studies. Rationale, unique features, and training.</a> NIMH Genetics Initiative. Arch Gen Psychiatry. 51 (11), 849-859 (1994).</li><li>Montgomery, S. A., Asberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+depression+scale+designed+to+be+sensitive+to+change.">A new depression scale designed to be sensitive to change.</a> Br J Psychiatry. 134, 382-389 (1979).</li><li>Young, R. C., Biggs, J. T., Ziegler, V. E., Meyer, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rating+scale+for+mania:+reliability,+validity+and+sensitivity.">A rating scale for mania: reliability, validity and sensitivity.</a> Br J Psychiatry. 133, 429-435 (1978).</li></ol>

פלטפורמה חדשה לקבלת שכבות עצביות חוש הריח מועשרות על ידי שילוב של הביופסיה וLCM האף מוצגת וקבלה תוקף במחקר זה. טכניקה זו יכולה להיות השלכות נרחבות. זה יכול להיות מיושם ללימודי סמן ביולוגי, כוללים אלה של תגובה לטיפול, ומאמצים לגילוי תרופות לתנאי נוירו-פסיכיאטריים אחרים...

הפרעה דו-קוטבית (BD) היא הפרעת נוירו-פסיכיאטרית חמורה, המתאפיינת בשינויים פתולוגיים במצב רוח, לנהוג וקוגניציה 1. ליתיום משמש לטיפול בBD הוכח לשנות את רמות ה- mRNA המדינה יציבה של מספר רב של גנים במחקרים בבעלי החיים 2, אבל זה עדיין לא ידוע אם כל מולקולות אלה קשורים בתגובה קלינית בבני האדם 2. הבנת המנגנון של תגובת ליתיום תדרוש חוקרת שינויים מולקולריים הנוצר על-ליתיום ברקמות עצביות. למרבה הצער, זה לא מעשי להשיג ביופסיות מוח של חולי BD מראש וטיפול בפוסט ליתיום לזהות חתימות מולקולריות של תגובה ליתיום. רקמות מוח פוסט-מורטם נעשו שימוש כדי ללמוד סמנים ביולוגיים בBD, עם זאת, הם לא יכולים לשמש כדי להעריך סמנים מולקולריים הקשורים לשינויים דינמיים ברגשות, קוגניציה ולנהוג; ואת תוקפו של תגובה לטיפול ליתיום הובררה למפרע יכול להיות בעייתי 4. לימפוציטים ותאי דם אחרים יכולים להיות שימושיים, אבל שינויים מולקולריים בתאי דם עלולים שלא לשקף שינויים עצביים 3-5. נוזל השדרתי עשוי להיות מספיק כדי לקבל מידע על מולקולות תאיות שעשויים לשקף שינויים מהותיים הקשורים למחלות והתרופות-הפיכה. אפיתל הריח (OE) הוא חלק ייחודי של מערכת העצבים המרכזית (CNS), הקשורות למבני embryologically הלימבית 6; והוא נגיש בקלות באמצעות ביופסיות האף. זה מורכב של גליה-כמו תמיכה בתאי תאים (כלומר, sustentacular), בסיס מתרבים, ותאי עצב קולטני ריח בשלבים שונים של פיתוח 7-9. לכן, OE מספק הזדמנות ייחודית ללמוד accessibly שינויים דינמיים במערכת העצבים המרכזית של חולים במחלות נוירו-פסיכיאטריות 7. מחקרים מדגימים את התועלת של OE כרקמה פונדקאית לחקירת אירועי מחלה קשורה המשקפים OCC אלהurring בתאי עצב במוח 8,9. לדוגמא, מחקרים מנוצלים OE לחקור פרופילים מולקולריים הקשורים במצבים פסיכיאטריים 10-14. מערכת חוש הריח משמשת גם לזיהוי endophenoytpes הקליני כגון גירעונות ריח הקשורים לסימפטומים שליליים של סכיזופרניה 15. בנוסף, תהליכי התפתחות נוירולוגית להמשיך בOE לאורך כל חיים, מתן השדרה שימושית למודל הפתופיזיולוגיה הבסיסית של 8,9 מצבים פסיכיאטריים. עם זאת, חסרון לשימוש ברקמה זו הוא הזיהום המשמעותי של ביופסיות חוש הריח עם תאים שאינם עצביים 16. לדוגמא, RNA הכולל המשמש למחקרי ביטוי גנים במחקרים קודמים OE הכיל RNA שחולץ מן רקמות האף כל ביופסיה כוללים RNA מהתאים שאינם עצביים 17. לכן, גישות קודמות היו מוגבלות על ידי האיכות של תאים. כדי להתגבר על בעיה זו, גישה חדשנית להשגה<html> אוכלוסיות תאים עצביות מועשרות על ידי שילוב של ביופסיות האף עם microdissection לייזר ללכוד (LCM) פותחו 18. LCM הוא טכניקה המאפשרת לבידוד סלקטיבי של תאים באמצעות חיתוך לייזר UV בשילוב עם לייזר אינפרא-אדום 19-21. LCM שילוב עם גישת OE ממזער זיהום משמעותי של OE על ידי תאים שאינם עצביים, ובכך משפר את ההעשרה של תאים עצביים 18. יתר על כן, השכבה העצבית ניתן להבחין בין שכבת submucosa תחת מיקרוסקופ, ובכך מבטלת את הצורך בצביעה. עוד ניתן להבחין בין אוכלוסיות תאים אחרות סוגים עצביים תא באמצעות נוגדנים ראשוניים אשר באו לידי ביטוי בסוג התא של עניין 7. לכן, הליך זה קובע שיטה קלה יותר להעשרת אוכלוסיית תאים כמעט אך ורק עצבית שיכול לשמש למחקרי ביטוי גנים, אימונוהיסטוכימיה וחקירות מורפולוגיים אחרות. ve_content &quot;&gt; מחקר זה נועד להקמת פלטפורמה ניסיונית לחקור שינויים מולקולריים בתאי עצב הרחה הקשורים במצבי מחלה ותגובה לטיפול. כדי לטפל בזה, קבוצה קטנה של חולים ללא עישון שעמדה בקריטריונים לאבחון DSM-IV לBD המבוססת על ראיון האבחון למחקרים גנטיים (DIG) 22 גויס לעבור שתי ביופסיות האף: ביופסיה אחד מראש טיפול בליתיום והביופסיה השנייה, לאחר 6 שבועות של טיפול אוראלי יומי ליתיום יתר על כן, חולי BD זכאים חייבים להיות:. סימפטומטי לדיכאון , המבוסס על ניקוד ≥10 מתוך 60 במטפל מנוהל מונטגומרי-Asberg Rating Scale (MADRS) 23; סימפטומטי להיפומאניה או מאניה, המבוסס על ציון ≥10 מתוך 56 על המטפל מנוהל יאנג-מאניה Rating Scale (YMRS) 24;. או ≥10 בשני MADRS וYMRS מקדם מדרג-Inter-מדרג של ההסכם בין רופאים לשני הסולמות הוא&gt; 0.96 לאחר ביופסיות, נוירונים היו enri.CHED מOE ידי LCM. בעקבות אמצעי בקרת איכות נוספת, כדי להבטיח מיצוי של RNA באיכות גבוהה מהרקמה וההעשרה עצבית, Real Time PCR RT נערך לחקור רמות של לפני וביטוי שלאחר הטיפול של הגנים של עניין. הסעיפים שלאחר מכן מכילים תיאור של האימות של גישה זו, המדגישה את אופטימיזציה של הפרוטוקול והאסטרטגיות שיושמו לפרוטוקול ירי-צרות.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="600">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Reagent</td>
			<td style="width:143px;">Manufacturuer&#160;</td>
			<td style="width:175px;">Manufacturer Catalog #</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue Preparation</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tissue-Tek Cryomold Molds</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4557</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue-Tek O.C.T Compound</td>
			<td>Sakura Finetek</td>
			<td>4583</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cryosectioning</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Membrane Slide 1.0 PEN (D)</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy</td>
			<td>415190-9041-000</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Rnase Zap</td>
			<td>Ambion</td>
			<td>AM9780</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DEPC Treated Water</td>
			<td>Quality Biological</td>
			<td>351-068-131</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microdissection</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Microscope: PALM Series MicroLaser System</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Model: Axiovert 200M</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Software: Robo v3.2</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">No.5 Dumont Microdissction Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-49085</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNA Extraction</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RNAqueous Micro Kit</td>
			<td>Ambion</td>
			<td>AM1931</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">cDNA Synthesis</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SuperScript III First Strand Synthesis Kit</td>
			<td>Invitrogen&#160;</td>
			<td>18080-051</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">OMP qPCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SYBR GreenER qPCR SuperMix</td>
			<td>Invitrogen&#160;</td>
			<td>11760-500</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Taqman qPCR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TaqMan Expression Assay Probes</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Various</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TaqMan Gene Expression Master Mix</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>4369016</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

olfactory neurons obtained through nasal biopsy combined with laser-capture microdissection: a potential approach to study treatment response in mental disorders

הפרעה דו-קוטבית (BD) היא הפרעת נוירו-פסיכיאטרית חמורה עם הפתופיזיולוגיה הבינה היטב ובדרך כלל מטופלים עם מייצב מצב הרוח, ליתיום קרבונט. מחקרים בבעלי חיים, כמו גם מחקרים גנטיים מצביעים על כך שאדם ליתיום משפיע מטרות מולקולריות המעורבים בצמיחה עצבית, הישרדות והתבגרות, ובעיקר מולקולות מעורבות באיתות Wnt. בהתחשב באתגר האתי לקבלת ביופסיות מוח לחקר שינויים מולקולריים דינמיים הקשורים ליתיום-תגובה במערכת העצבים המרכזית (CNS), ניתן לשקול את השימוש בתאי עצב המתקבלים מרקמות חוש הריח כדי להשיג אפיתל ריח goal.The זה מכיל תאי עצב קולטני ריח בשלבים שונים של פיתוח ותמיכה בתאים כמו גליה. זה מספק הזדמנות ייחודית ללמוד שינויים דינמיים במערכת העצבים המרכזית של חולים במחלות נוירו-פסיכיאטריות, תוך שימוש ברקמת הרחה ליטול ללא חשש מביופסיות האף. כדי להתגבר על החסרון שמציב substזיהום antial של רקמת הרחה ביופסיה עם תאים לא-עצביים, גישה חדשנית להשגת אוכלוסיות תאים עצביים מועשרות פותחה על ידי שילוב של ביופסיות האף עם microdissection לייזר ללכוד. במחקר זה, מערכת לחקירת שינויים מולקולריים דינמיים הקשורים לטיפול ברקמה עצבית פותחה וקבלה תוקף, באמצעות מדגם טייס קטן של חולי BD גויסו למחקר של המנגנונים המולקולריים של תגובה לטיפול ליתיום.

אסטרטגית הפרוטוקול ופתרון בעיות במחקר של חתימות מולקולריות מותאמת בהצלחה. איכות RNA וקריטריוני העשרה עצביות לדגימות לשימוש בניתוח נוסף במורד הזרם Real Time-PCR היה סטנדרטי. רין וריכוז RNA נבדקו כגורמים מבלבלים לרמות ביטוי מזוהות. בהתבסס על הניתוח של מספר דגימות עם RINs החל 1-10,...

Watch this Scientific Journal Video about Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disord

Olfactory Neurons Obtained through Nasal Biopsy Combined with Laser-Capture Microdissection: A Potential Approach to Study Treatment Response in Mental Disorders

במחקר זה, פלטפורמה חדשנית לחקור חתימות מולקולריות intraneuronal של תגובה לטיפול בהפרעה דו-קוטבית (BD) פותחה ומאומת. אפיתל ריח מחולי BD הושג באמצעות ביופסיות האף. אז microdissection לייזר ללכוד היה בשילוב עם זמן אמת RT PCR לחקור את החתימה המולקולרית של תגובה ליתיום בBD.

נוירונים חוש הריח באף הושגו באמצעות ביופסיה משולבת עם Microdissection הלייזר-Capture: גישה פוטנציאלית לחקר טיפול בהפרעות נפשיות תגובה

Bipolar disorder (BD) is a severe neuropsychiatric disorder with poorly understood pathophysiology and typically treated with the mood stabilizer, lithium ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

Laser Capture Microdissection of Drosophila Peripheral Neurons

לייזר Microdissection לכידה של תסיסנית נוירונים היקפיים

The dendritic arborization (da) neurons of the Drosophila peripheral nervous system (PNS) provide an excellent model system in which to investigate the ...

Isolating Nasal Olfactory Stem Cells from Rodents or Humans

בידוד באף גזע תאים חוש הריח של מכרסמים או בני אדם

The olfactory mucosa, located in the nasal cavity, is in charge of detecting odours. It is also the only nervous tissue that is exposed to the external ...

Targeting Olfactory Bulb Neurons Using Combined In Vivo Electroporation and Gal4-Based Enhancer Trap Zebrafish Lines

Targeting Olfactory Bulb Neurons Using Combined In Vivo Electroporation and Gal4-Based Enhancer Trap Zebrafish Lines

מיקוד Bulb נוירונים חוש הריח שימוש משולב In vivo Electroporation ו Gal4 מבוסס Enhancer מלכודת קווי דג הזברה

In vivo electroporation is a powerful method for delivering DNA expression plasmids, RNAi reagents, and morpholino anti-sense oligonucleotides to specific ...

Non-Laser Capture Microscopy Approach for the Microdissection of Discrete Mouse Brain Regions for Total RNA Isolation and Downstream Next-Generation Sequencing and Gene Expression Profiling

Non-Laser Capture Microscopy Approach for the Microdissection of Discrete Mouse Brain Regions for Total RNA Isolation and Downstream Next-Generation Sequencing and Gene Expression Profiling  |

Non-לייזר מיקרוסקופית לכידת גישה עבור Microdissection של אזורים במוח דיסקרטית עכבר עבור בידוד RNA סך סידור Downstream הדור הבא והביטוי פרופיל גנטי

As technological platforms, approaches such as next-generation sequencing, microarray, and qRT-PCR have great promise for expanding our understanding of ...

Laser Capture Microdissection of Enriched Populations of Neurons or Single Neurons for Gene Expression Analysis After Traumatic Brain Injury

Microdissection לכידת ליזר אוכלוסיות מועשרות של הנוירונים או נוירונים יחידים לניתוח ביטוי גנים לאחר פגיעה מוחית טראומטית

Long-term cognitive disability after TBI is associated with injury-induced neurodegeneration in the hippocampus-a region in the medial temporal lobe that ...

Laser Capture Microdissection of Neurons from Differentiated Human Neuroprogenitor Cells in Culture

Microdissection לכידת לייזר של נוירונים מהתאים מובחנים Neuroprogenitor אדם בתרבות

Neuroprogenitor cells (NPCs) isolated from the human fetal brain were expanded under proliferative conditions in the presence of epidermal growth factor ...

Production of RNA for Transcriptomic Analysis from Mouse Spinal Cord Motor Neuron Cell Bodies by Laser Capture Microdissection

ייצור RNA לניתוח תעתיקי מגופי תאי נוירון מוטוריים של חוט השדרה של העכבר על ידי לכידת לייזר Microdissection

Preparation of high-quality RNA from cells of interest is critical to precise and meaningful analysis of transcriptional differences among cell types or ...

Laser Capture Microdissection - A Demonstration of the Isolation of Individual Dopamine Neurons and the Entire Ventral Tegmental Area

Microdissection לכידת לייזר - הפגנה של הבידוד של פרט דופמין נוירונים ופינת הגחון tegmental השלם

Laser capture microdissection (LCM) is used to isolate a concentrated population of individual cells or precise anatomical regions of tissue from tissue ...

Using an Adapted Microfluidic Olfactory Chip for the Imaging of Neuronal Activity in Response to Pheromones in Male C. Elegans Head Neurons

Using an Adapted Microfluidic Olfactory Chip for the Imaging of Neuronal Activity in Response to Pheromones in Male C. Elegans Head Neurons

באמצעות שבב חוש הריח של Microfluidic מותאם עבור ההדמיה של פעילות. עצבית בתגובה פרומונים בנוירונים הראש הגברי C. Elegans

The use of calcium indicators has greatly enhanced our understanding of neural dynamics and regulation. The nematode Caenorhabditis elegans, with its ...