Name: ordering single cells and single embryos in 3d confinement: a new device for high content screening
Uploaded: 2016-09-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening at JoVE.com

Vi anerkender L. Brino (IGBMC High Content Screening facilitet, Illkirch, Frankrig) for at give os den anti-Giantin antistof, M. Labouesse Lab. for C. elegans (IGBMC) og B. Seraphin Lab. til spirende gær (IGBMC), E. Paluch og A. Hyman for fluorescerende HeLa-celler (MPI-CBG, Dresden), J. Moseley (Dartmouth Medical School) og JQ Wu (Ohio State University) for fission gærceller; A. Hoel og F. Evenou til eksperimentel hjælp, C. Rick (IBMC, Strasbourg, Frankrig) for teknisk hjælp, og JC Jeannot (Femto-st, Frankrig) om hjælp til mikrofabrikation. Dette arbejde blev støttet af midler fra CNRS, University of Strasbourg, Conectus, La Fondation pour la Recherche Médicale og ci-FRC Strasbourg.

1. mikrofabrikation af &#39;Æggebægre&#39; <ol><li> Fabrikation af Master: mikrohulrum Array <ol><li> Varm en 3 &#39;&#39; siliciumwafer op til 200 ° C for at fordampe enhver forekomst af fugt. </li><li> Spin-coat et tyndt lag af SU-8 fotoresist. Justere lydstyrken af ​​harpiks og spinding hastighed afhængigt af den ønskede tykkelse og fotoresist type. Denne tykkelse vil diktere dybden af ​​&#39;æggebægre &quot;(EF). For en 30 um tykt lag og SU-8 2025, spin-coat på 2800 rpm. </li><li> Pre-bage skiven v...

<ol>
	<li>Cukierman, E., Pankov, R., Stevens, D. R., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taking+Cell-Matrix+Adhesions+to+the+Third+Dimension.">Taking Cell-Matrix Adhesions to the Third Dimension.</a> Science. 294, 1708-1712 (2001).</li><li>Azioune, A., Storch, M., Bornens, M., Thery, M., Piel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+and+rapid+process+for+single+cell+micro-patterning.">Simple and rapid process for single cell micro-patterning.</a> Lab Chip. 9, 1640-1642 (2009).</li><li>Mandal, K., Balland, M., Bureau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermoresponsive+Micropatterned+Substrates+for+Single+Cell+Studies.">Thermoresponsive Micropatterned Substrates for Single Cell Studies.</a> PLoS ONE. 7, e37548 (2012).</li><li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue.">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8, 839-845 (2007).</li><li>Baker, B. M., Chen, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deconstructing+the+third+dimension:+how+3D+culture+microenvironments+alter+cellular+cues.">Deconstructing the third dimension: how 3D culture microenvironments alter cellular cues.</a> J Cell Sci. , (2012).</li><li>Ghibaudo, M., Di Meglio, J. M., Hersen, P., Ladoux, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+cell+spreading+within+3D-micropatterned+environments.">Mechanics of cell spreading within 3D-micropatterned environments.</a> Lab Chip. 11, 805-812 (2010).</li><li>Greiner, A. M., Richter, B., Bastmeyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-Engineered+3D+Scaffolds+for+Cell+Culture+Studies.">Micro-Engineered 3D Scaffolds for Cell Culture Studies.</a> Macromol Biosci. 12, 1301-1314 (2012).</li><li>Khetan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degradation-mediated+cellular+traction+directs+stem+cell+fate+in+covalently+crosslinked+three-dimensional+hydrogels.">Degradation-mediated cellular traction directs stem cell fate in covalently crosslinked three-dimensional hydrogels.</a> Nat Mater. 12, 458-465 (2013).</li><li>Legant, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+mechanical+tractions+exerted+by+cells+in+three-dimensional+matrices.">Measurement of mechanical tractions exerted by cells in three-dimensional matrices.</a> Nat Meth. 7, 969-971 (2010).</li><li>Riveline, D., Buguin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing the cell division. , (2010).</li><li>Ochsner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-well+arrays+for+3D+shape+control+and+high+resolution+analysis+of+single+cells.">Micro-well arrays for 3D shape control and high resolution analysis of single cells.</a> Lab Chip. 7, 1074-1077 (2007).</li><li>Riveline, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing cells with cell wall or invertebrate embryos with oblong eggshell . , (2012).</li><li>Riveline, D., Wollrab, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing eukaryotic cells without cell wall. , (2012).</li><li>Zanella, F., Lorens, J. B., Link, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+content+screening:+seeing+is+believing.">High content screening: seeing is believing.</a> Trends Biotech. 28, 237-245 (2010).</li><li>Wolfe, D., Qin, D., Whitesides, G., Hughes, M. P., Hoettges, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microengineering+in+Biotechnology,+Ch+3.">Microengineering in Biotechnology, Ch 3.</a> Methods in Molecular Biology. 583, 81-107 (2010).</li><li>Mehling, M., Tay, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+cell+culture.">Microfluidic cell culture.</a> Curr Op Biotech. 25, 95-102 (2014).</li><li>Wollrab, V., Thiagarajan, R., Wald, A., Kruse, K., Riveline, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Still+and+rotating+myosin+clusters+determine+cytokinetic+ring+constriction.">Still and rotating myosin clusters determine cytokinetic ring constriction.</a> Nat Commun. 7, 11860-11869 (2016).</li><li>Yao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+single+cells+identifies+a+rare+subset+of+circulating+tumor+cells+with+malignant+traits.">Functional analysis of single cells identifies a rare subset of circulating tumor cells with malignant traits.</a> Integr Biol. 6, 388-398 (2014).</li><li>Eberwine, J., Sul, J. Y., Bartfai, T., Kim, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+promise+of+single-cell+sequencing.">The promise of single-cell sequencing.</a> Nat Meth. 11, 25-27 (2014).</li><li>Allen, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+cell-free+extracts+of+Xenopus+eggs+and+demembranated+sperm+chromatin+for+the+assembly+and+isolation+of+in+vitro-formed+nuclei+for+Western+blotting+and+scanning+electron+microscopy+(SEM).">Generation of cell-free extracts of Xenopus eggs and demembranated sperm chromatin for the assembly and isolation of in vitro-formed nuclei for Western blotting and scanning electron microscopy (SEM).</a> Nat. Protocols. 2, 1173-1179 (2007).</li><li>Robbins, E., Marcus, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitotically+Synchronized+Mammalian+Cells:+a+Simple+Method+for+Obtaining+Large+Populations.">Mitotically Synchronized Mammalian Cells: a Simple Method for Obtaining Large Populations.</a> Science. 144, (1964).</li><li>Whitfield, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem-loop+binding+protein,+the+protein+that+binds+the+3&amp;#34;+end+of+histone+mRNA,+is+cell+cycle+regulated+by+both+translational+and+posttranslational+mechanisms.">Stem-loop binding protein, the protein that binds the 3&amp;#34; end of histone mRNA, is cell cycle regulated by both translational and posttranslational mechanisms.</a> Molecular and Cellular Biology. 20, (2000).</li><li>Straight, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+Temporal+and+Spatial+Control+of+Cytokinesis+with+a+Myosin+II+Inhibitor.">Dissecting Temporal and Spatial Control of Cytokinesis with a Myosin II Inhibitor.</a> Science. 299, 1743-1747 (2003).</li><li>Tang, J., Erikson, R. L., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Checkpoint+kinase+1+(Chk1)+is+required+for+mitotic+progression+through+negative+regulation+of+polo-like+kinase+1+(Plk1).">Checkpoint kinase 1 (Chk1) is required for mitotic progression through negative regulation of polo-like kinase 1 (Plk1).</a> Proc Natl Acad Sci. 103, 11964-11969 (2006).</li><li>Zahreddine, H., Zhang, H., Diogon, M., Nagamatsu, Y., Labouesse, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRT-1/Calreticulin+and+the+E3+Ligase+EEL-1/HUWE1+Control+Hemidesmosome+Maturation+in+C.+elegans+Development.">CRT-1/Calreticulin and the E3 Ligase EEL-1/HUWE1 Control Hemidesmosome Maturation in C. elegans Development.</a> Curr Biol. 20, 322-327 (2010).</li><li>Porta-de-la-Riva, M., Fontrodona, L., Villanueva, A., Ceron, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+Caenorhabditis+elegans+Methods:+Synchronization+and+Observation.">Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation.</a> JoVE. , e4019 (2012).</li><li>Saha, S., Pollard, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anillin-related+protein+Mid1p+coordinates+the+assembly+of+the+cytokinetic+contractile+ring+in+fission+yeast.">Anillin-related protein Mid1p coordinates the assembly of the cytokinetic contractile ring in fission yeast.</a> Mol Biol Cell. 23, 3982-3992 (2012).</li><li>Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+Drug+Efficacy+and+Toxicology+in+Three+Dimensions:+Using+Synthetic+Extracellular+Matrices+in+Drug+Discovery.">Evaluating Drug Efficacy and Toxicology in Three Dimensions: Using Synthetic Extracellular Matrices in Drug Discovery.</a> Acc Chem Res. 41, 139-148 (2007).</li><li>Futamura, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphobase,+an+Encyclopedic+Cell+Morphology+Database,+and+Its+Use+for+Drug+Target+Identification.">Morphobase, an Encyclopedic Cell Morphology Database, and Its Use for Drug Target Identification.</a> Chem Biol. 19, 1620-1630 (2012).</li></ol>

Replika støbning blev anvendt for at fremstille de »æggebægre«. Fremstillingsprocessen behøver ikke et rent værelse; det er let og enkelt, selv om der kan være behov nogle praksis. Især frigiver PDMS stempel er den mest kritiske trin for at frembringe et stort område af høj kvalitet &#39;æggebægre «. Af denne grund, særlig pleje skal tages i dette trin. Hvis dette trin gentagne gange ikke, overveje at optimere plasma renere parametre forud for silaniseringen og plasmabinding. Utilstrækkelig silanisering ...

Nuværende in vitro cellebaserede assays er todimensionale (2D). Denne konfiguration er ikke naturligt for pattedyrsceller og er derfor ikke fysiologisk relevant 1; celler udviser en mangfoldighed af former, størrelser og heterogene fænotyper. De præsenterer yderligere alvorlige begrænsninger ved påføring på screening applikationer, såsom en uordnet fordeling inden for planet og ekstreme fænotyper af cellulære organeller (stress fibre, i særdeleshed). Dette er særlig vigtigt i kliniske forsøg for narkotika testning, hvor høje budgetter hvert år bruges. De fleste af disse lægemidler imidlertid mislykkes, når anvendt på dyremodeller på grund af den kunstige 2D dyrkningsbetingelser i tidlige stadier af lægemiddelscreening. Ved at bruge denne fremgangsmåde, specifikke celleorganeller kan ikke sigtes ordentligt, såsom cytokinetic actomyosin ring under cellemitose, og generelt strukturer, der udvikles på planet vinkelret på planet for observation. Noglenye 2D assays er blevet foreslået for at overvinde de ovennævnte ulemper og vigtige indsigt på cytoskeleton organisation er observeret 2,3. Men disse assays stadig findes en alvorlig begrænsning,: celler viser en meget spredt fænotype i modsætning til hvad der observeres in vivo, hvor cellerne udgør en 3D arkitektur. Disse artefakter forbundet med kulturen metoden kan udløse ikke-fysiologiske funktioner såsom forbedrede stress fibre 1,4,5. Tredimensionale celledyrkningsassays giver flere fordele i sammenligning med 2D miljøer 6,7. De er fysiologisk mere relevant, og resultaterne er derfor meningsfuldt. Som et eksempel, celler indlejret i hydrogeler viser 3D-lignende strukturer, men deres morfologier forskellige fra én celle til en anden 8,9. Men deres morfologier forskellige fra én celle til en anden, hvilket komplicerer screening applikationer. En alternativ strategi er at indlejre enkeltceller i mikrofabrikerede hulrum 10,11. Cell position, form, polaritet og intern celle organisation kan så blive normaliseret. Ud over at give 3D-lignende arkitektur til celler, mikrokaviteter giver også mulighed for høj-indhold screeningsundersøgelser 10,12-14; enkeltceller kan bestilles i microarrays og cellulære organeller og kan iagttages deres udviklingstendenser parallelt. Denne regelmæssighed giver god statistik med lavt antal celler og bedre tidsmæssige / rumlige opløsninger. Anvendelige forbindelser er nemmere at identificere pålideligt. I denne undersøgelse, viser vi fremstilling og anvendelse af en ny 3D-lignende enkelt celler kultur for højt indhold-screening applikationer 10,12,13. Enheden består af en vifte af elastomere mikrokaviteter (10 5 hulrum / cm2), opfundet &#39;Æggebægre «(EF). Dimensioner og samlede volumen af ​​EF i dette arbejde er optimeret til den typiske mængde af individuelle NIH3T3 og HeLa-cellerunder celledeling. Morfologi af hulrummene - cylindriske - er valgt til korrekt orientere celleform til visualisering af aktive processer. Replika støbning anvendes til pattern et array af EF på en tynd polydimethylsiloxan (PDMS) lag klæbet på et dækglas 15,16. Celler indført i EF ved centrifugering. Vi rapporterer her observation og normalisering af cellulære organeller (actin stress fibre, Golgi apparater og nucleus) i 3D (EF) sammenlignet med de samme celler på 2D (flad) overflader. Vi rapporterer også observation af aktive dynamiske processer, såsom lukning af cytokinetic actomyosin ring under celle mitose 17. Endelig viser vi resultaterne af denne metode på andre systemer med stive vægge, såsom knopskydende gær, fission gær og C. elegans-embryoer hvilket bekræfter anvendeligheden af vores metodologi til en lang række modelsystemer. Vi næste fremlægge en detaljeret og udtømmende protokol for at fremstille og anvende &#39;æggebægre&#39; til 3D mikrofabrikation. Vores tilgang er enkel og behøver ikke et rent lokale. Vi forventer, at denne nye metode vil være særlig interessant for lægemiddelscreeningsassays og personlig medicin, i stedet for petriskåle. Endelig vil vores enhed være nyttige til undersøgelse af fordelinger af celler reaktioner på eksterne stimuli, for eksempel i cancer 18 eller i grundforskning 19.

ordering single cells and single embryos in 3d confinement: a new device for high content screening

Biologiske celler er sædvanligvis observeres på flade (2D) overflader. Denne betingelse er ikke fysiologisk, og fænotyper og former er meget varierende. Screening baseret på celler i sådanne miljøer har derfor alvorlige begrænsninger: celle organeller viser ekstreme fænotyper, celle morfologier og størrelser er heterogene og / eller specifikke celle organeller kan ikke sigtes ordentligt. Desuden er celler in vivo beliggende i et 3D-miljø; i denne situation, celler udviser forskellige fænotyper primært på grund af deres interaktion med det omgivende ekstracellulære matrix af vævet. For at standardisere og generere orden af enkelte celler i en fysiologisk relevant 3D-miljø for cellebaserede assays, rapporterer vi her den mikrofabrikation og applikationer af en anordning til in vitro-3D cellekultur. Denne anordning består af en 2D array af mikrohulrum (typisk 10 5 kaviteter / cm2), hver fyldt med enkelte celler eller embryoner. Cell position, form, polaritet og intern celle organisation bliver derefter normaliseret viser en 3D arkitektur. Vi brugte replika støbning til mønster en række mikrokaviteter, &#39;æggebægre&#39;, på en tynd polydimethylsiloxan (PDMS) lag klæbet på et dækglas. Hulrum var dækket med fibronectin til lette adhæsion. Celler blev indsat ved centrifugering. Påfyldning procentdel blev optimeret til hvert system giver mulighed for op til 80%. Celler og embryoner levedygtighed blev bekræftet. Vi anvendte denne metode til visualisering af cellulære organeller, såsom nucleus og Golgi apparatet, og til at studere aktive processer, såsom lukningen af ​​cytokinetic ring under cellemitose. Denne enhed tillod identifikation af nye funktioner, såsom periodiske ophobninger og inhomogeniteter af myosin og actin under cytokinetic ring lukning og komprimerede fænotyper for Golgi og nucleus tilpasning. Vi kendetegnet metoden for pattedyrceller, fission gær, spirende gær, C. elegans wed specifikke tilpasning i hvert enkelt tilfælde. Endelig karakteristika denne enhed gør det særligt interessant for lægemiddelscreeningsassays og personlig medicin.

De &quot;eggcups&quot; (EF) er en roman højt indhold-screening metode, der tillader visualisering af orienterede celler og embryoner i et 3D-miljø. Derudover nogle cellulære processer, som er vanskelige at observere i standard 2D (flade) -kulturer, kan observeres ved denne nye fremgangsmåde. Figur 1 a viser et sammendrag af proceduren for EF mikrofabrikation (se også afsnit 1 i den ovenfor beskrevne protokol ). Fremgangsmåden er simpel, hurtig, effektiv og uden krav om særligt udstyr. Fig...

Watch this Scientific Journal Video about Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening at JoVE.com

Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening

Vi rapporterer en indretning og en ny metode til at studere celler og embryoner. Enkelte celler er præcist bestilles i microcavity arrays. Deres 3D indespærring er et skridt i retning 3D-miljøer er stødt på i fysiologiske forhold og tillader organel orientering. Ved at styre celleform, denne opsætning minimerer variation rapporteret i standard assays.

Bestilling enkelte celler og Single Embryoner i 3D Indespærring: En ny enhed for High Content Screening

Biological cells are usually observed on flat (2D) surfaces. This condition is not physiological, and phenotypes and shapes are highly variable. Screening ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

A Microfluidic Chip for the Versatile Chemical Analysis of Single Cells

En Mikrofluid Chip til Alsidig kemisk analyse af enkelte celler

We present a microfluidic device that enables the quantitative determination of intracellular biomolecules in multiple single cells in parallel. For this ...

Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Nanomanipulation af Single RNA-molekyler af Optisk Pincet

A large portion of the human genome is transcribed but not translated. In this post genomic era, regulatory functions of RNA have been shown to be ...

Cultivation of Mammalian Cells Using a Single-use Pneumatic Bioreactor System

Dyrkning af pattedvrceller hjælp af en enkelt brug Pneumatic bioreaktorsystem

Recent advances in mammalian, insect, and stem cell cultivation and scale-up have created tremendous opportunities for new therapeutics and personalized ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

En Mikrofluid platform for High-throughput Single-celle Isolering og Kultur

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

3D Microtissues for Injectable Regenerative Therapy and High-throughput Drug Screening

3D Microtissues for injicerbare regenerativ terapi og høj overførselshastighed stof Screening

To upgrade traditional 2D cell culture to 3D cell culture, we have integrated microfabrication with cryogelation technology to produce macroporous ...

A Protocol for Real-time 3D Single Particle Tracking

En protokol til Real-time 3D enkelt partikel Tracking

Real-time three-dimensional single particle tracking (RT-3D-SPT) has the potential to shed light on fast, 3D processes in cellular systems. Although ...

Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells

Optagelsen af nye Lipid-belagt nanopartikler som indeholder Falcarindiol af humane mesenkymale stamceller

Nanoparticles are the focus of an increased interest in drug delivery systems for cancer therapy. Lipid-coated nanoparticles are inspired in structure and ...

Fabrication of Zero Mode Waveguides for High Concentration Single Molecule Microscopy

Fremstilling af Zero Mode Waveguides for høj koncentration enkelt molekyle mikroskopi

In single molecule fluorescence enzymology, background fluorescence from labeled substrates in solution often limits fluorophore concentration to pico- to ...

Generation of Dynamical Environmental Conditions using a High-Throughput Microfluidic Device

Generering af dynamiske miljøforhold ved hjælp af en mikrofluidisk højoverførselsenhed

Mimicking in vivo environmental conditions is crucial for in vitro studies on complex life machinery. However, current techniques targeting live cells and ...