Name: ordering single cells and single embryos in 3d confinement: a new device for high content screening
Uploaded: 2016-09-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening at JoVE.com

Vi erkjenner L. Brino (IGBMC høyt innhold Screening anlegget, Illkirch, Frankrike) for å gi oss med anti-Giantin antistoff, M. Labouesse Lab. for C. elegans (IGBMC) og B. Séraphin Lab. for spirende gjær (IGBMC), E. Paluch og A. Hyman for fluorescerende HeLa celler (MPI-CBG, Dresden), J. Moseley (Dartmouth Medical School) og JQ Wu (Ohio State University) for fisjon gjærceller; A. Hoel og F. EVENOU for eksperimentell hjelp, C. Rick (IBMC, Strasbourg, Frankrike) for teknisk hjelp, og JC Jeannot (Femto-st, Frankrike) for å få hjelp i microfabrication. Dette arbeidet ble støttet av midler fra CNRS, Universitetet i Strasbourg, Conectus, La Fondation pour la Recherche MEDICALE og ci-FRC fra Strasbourg.

1. microfabrication av &#39;eggcups&#39; <ol><li> Fabrikasjon av Master: mikrohulrom Array <ol><li> Varm en 3 &#39;&#39; silikonplaten opp til 200 ° C for å fordampe ethvert nærvær av fuktighet. </li><li> Spin-coat et tynt lag av SU-8 fotoresist. Juster volumet av harpiks og sentrifugehastighet avhengig av ønsket tykkelse og fotoresist type. Denne tykkelse vil diktere dybden av &#39;eggcups&#39; (EC). For en 30 mikrometer tykt lag og SU-8 2025, spin-coat på 2800 rpm. </li><li> Pre-bake skiven ved 65 ° C i 1 min...

<ol>
	<li>Cukierman, E., Pankov, R., Stevens, D. R., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taking+Cell-Matrix+Adhesions+to+the+Third+Dimension.">Taking Cell-Matrix Adhesions to the Third Dimension.</a> Science. 294, 1708-1712 (2001).</li><li>Azioune, A., Storch, M., Bornens, M., Thery, M., Piel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+and+rapid+process+for+single+cell+micro-patterning.">Simple and rapid process for single cell micro-patterning.</a> Lab Chip. 9, 1640-1642 (2009).</li><li>Mandal, K., Balland, M., Bureau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermoresponsive+Micropatterned+Substrates+for+Single+Cell+Studies.">Thermoresponsive Micropatterned Substrates for Single Cell Studies.</a> PLoS ONE. 7, e37548 (2012).</li><li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue.">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8, 839-845 (2007).</li><li>Baker, B. M., Chen, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deconstructing+the+third+dimension:+how+3D+culture+microenvironments+alter+cellular+cues.">Deconstructing the third dimension: how 3D culture microenvironments alter cellular cues.</a> J Cell Sci. , (2012).</li><li>Ghibaudo, M., Di Meglio, J. M., Hersen, P., Ladoux, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+cell+spreading+within+3D-micropatterned+environments.">Mechanics of cell spreading within 3D-micropatterned environments.</a> Lab Chip. 11, 805-812 (2010).</li><li>Greiner, A. M., Richter, B., Bastmeyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-Engineered+3D+Scaffolds+for+Cell+Culture+Studies.">Micro-Engineered 3D Scaffolds for Cell Culture Studies.</a> Macromol Biosci. 12, 1301-1314 (2012).</li><li>Khetan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degradation-mediated+cellular+traction+directs+stem+cell+fate+in+covalently+crosslinked+three-dimensional+hydrogels.">Degradation-mediated cellular traction directs stem cell fate in covalently crosslinked three-dimensional hydrogels.</a> Nat Mater. 12, 458-465 (2013).</li><li>Legant, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+mechanical+tractions+exerted+by+cells+in+three-dimensional+matrices.">Measurement of mechanical tractions exerted by cells in three-dimensional matrices.</a> Nat Meth. 7, 969-971 (2010).</li><li>Riveline, D., Buguin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing the cell division. , (2010).</li><li>Ochsner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-well+arrays+for+3D+shape+control+and+high+resolution+analysis+of+single+cells.">Micro-well arrays for 3D shape control and high resolution analysis of single cells.</a> Lab Chip. 7, 1074-1077 (2007).</li><li>Riveline, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing cells with cell wall or invertebrate embryos with oblong eggshell . , (2012).</li><li>Riveline, D., Wollrab, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing eukaryotic cells without cell wall. , (2012).</li><li>Zanella, F., Lorens, J. B., Link, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+content+screening:+seeing+is+believing.">High content screening: seeing is believing.</a> Trends Biotech. 28, 237-245 (2010).</li><li>Wolfe, D., Qin, D., Whitesides, G., Hughes, M. P., Hoettges, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microengineering+in+Biotechnology,+Ch+3.">Microengineering in Biotechnology, Ch 3.</a> Methods in Molecular Biology. 583, 81-107 (2010).</li><li>Mehling, M., Tay, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+cell+culture.">Microfluidic cell culture.</a> Curr Op Biotech. 25, 95-102 (2014).</li><li>Wollrab, V., Thiagarajan, R., Wald, A., Kruse, K., Riveline, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Still+and+rotating+myosin+clusters+determine+cytokinetic+ring+constriction.">Still and rotating myosin clusters determine cytokinetic ring constriction.</a> Nat Commun. 7, 11860-11869 (2016).</li><li>Yao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+single+cells+identifies+a+rare+subset+of+circulating+tumor+cells+with+malignant+traits.">Functional analysis of single cells identifies a rare subset of circulating tumor cells with malignant traits.</a> Integr Biol. 6, 388-398 (2014).</li><li>Eberwine, J., Sul, J. Y., Bartfai, T., Kim, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+promise+of+single-cell+sequencing.">The promise of single-cell sequencing.</a> Nat Meth. 11, 25-27 (2014).</li><li>Allen, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+cell-free+extracts+of+Xenopus+eggs+and+demembranated+sperm+chromatin+for+the+assembly+and+isolation+of+in+vitro-formed+nuclei+for+Western+blotting+and+scanning+electron+microscopy+(SEM).">Generation of cell-free extracts of Xenopus eggs and demembranated sperm chromatin for the assembly and isolation of in vitro-formed nuclei for Western blotting and scanning electron microscopy (SEM).</a> Nat. Protocols. 2, 1173-1179 (2007).</li><li>Robbins, E., Marcus, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitotically+Synchronized+Mammalian+Cells:+a+Simple+Method+for+Obtaining+Large+Populations.">Mitotically Synchronized Mammalian Cells: a Simple Method for Obtaining Large Populations.</a> Science. 144, (1964).</li><li>Whitfield, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem-loop+binding+protein,+the+protein+that+binds+the+3&amp;#34;+end+of+histone+mRNA,+is+cell+cycle+regulated+by+both+translational+and+posttranslational+mechanisms.">Stem-loop binding protein, the protein that binds the 3&amp;#34; end of histone mRNA, is cell cycle regulated by both translational and posttranslational mechanisms.</a> Molecular and Cellular Biology. 20, (2000).</li><li>Straight, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+Temporal+and+Spatial+Control+of+Cytokinesis+with+a+Myosin+II+Inhibitor.">Dissecting Temporal and Spatial Control of Cytokinesis with a Myosin II Inhibitor.</a> Science. 299, 1743-1747 (2003).</li><li>Tang, J., Erikson, R. L., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Checkpoint+kinase+1+(Chk1)+is+required+for+mitotic+progression+through+negative+regulation+of+polo-like+kinase+1+(Plk1).">Checkpoint kinase 1 (Chk1) is required for mitotic progression through negative regulation of polo-like kinase 1 (Plk1).</a> Proc Natl Acad Sci. 103, 11964-11969 (2006).</li><li>Zahreddine, H., Zhang, H., Diogon, M., Nagamatsu, Y., Labouesse, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRT-1/Calreticulin+and+the+E3+Ligase+EEL-1/HUWE1+Control+Hemidesmosome+Maturation+in+C.+elegans+Development.">CRT-1/Calreticulin and the E3 Ligase EEL-1/HUWE1 Control Hemidesmosome Maturation in C. elegans Development.</a> Curr Biol. 20, 322-327 (2010).</li><li>Porta-de-la-Riva, M., Fontrodona, L., Villanueva, A., Ceron, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+Caenorhabditis+elegans+Methods:+Synchronization+and+Observation.">Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation.</a> JoVE. , e4019 (2012).</li><li>Saha, S., Pollard, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anillin-related+protein+Mid1p+coordinates+the+assembly+of+the+cytokinetic+contractile+ring+in+fission+yeast.">Anillin-related protein Mid1p coordinates the assembly of the cytokinetic contractile ring in fission yeast.</a> Mol Biol Cell. 23, 3982-3992 (2012).</li><li>Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+Drug+Efficacy+and+Toxicology+in+Three+Dimensions:+Using+Synthetic+Extracellular+Matrices+in+Drug+Discovery.">Evaluating Drug Efficacy and Toxicology in Three Dimensions: Using Synthetic Extracellular Matrices in Drug Discovery.</a> Acc Chem Res. 41, 139-148 (2007).</li><li>Futamura, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphobase,+an+Encyclopedic+Cell+Morphology+Database,+and+Its+Use+for+Drug+Target+Identification.">Morphobase, an Encyclopedic Cell Morphology Database, and Its Use for Drug Target Identification.</a> Chem Biol. 19, 1620-1630 (2012).</li></ol>

Replika støping ble anvendt for å fremstille &#39;eggcups&#39;. Fabrikasjon prosessen trenger ikke et rent rom; det er lett og enkelt, selv om noen praksis kan være nødvendig. Spesielt frigjøring av PDMS stempel er den mest kritiske trinnet for å fremstille et stort område av høy kvalitet &#39;eggcups&#39;. Av denne grunn må tas i dette trinnet spesiell omsorg. Hvis dette trinnet er gjentatte ganger mislykkes, kan du vurdere å optimalisere plasma renere parametere før den silanisering og plasma bindende. Util...

Current in vitro celle-baserte analyser er to-dimensjonale (2D). Denne konfigurasjonen er ikke naturlig for pattedyrceller, og derfor er ikke fysiologisk relevant 1; celler viser et mangfold av former, størrelser og heterogene fenotyper. De presenterer flere alvorlige begrensninger når den brukes til screening applikasjoner, slik som en uordnet fordeling innenfor planet og ekstreme fenotyper av cellulære organeller (stress-fibre, spesielt). Dette er spesielt viktig i kliniske studier for narkotika testing, der høye budsjetter er brukt hvert år. De fleste av disse stoffene selv svikter når den anvendes på dyremodeller på grunn av den kunstige 2D kulturen tilstand i tidlige stadier av legemiddelscreening. I tillegg, ved å bruke denne tilnærmingen, spesifikke celleorganeller kan ikke være riktig visualisert, slik som cytokinetic actomyosin ring under celle mitose, og generelt strukturer som er under utvikling i planet vinkelrett på planet for observasjon. Noennye 2D-analyser er blitt foreslått for å overvinne de ovennevnte ulemper og viktige innsikter for cytoskjelettet organisasjon har blitt observert 2,3. Men disse analysene fortsatt er tilstede en alvorlig begrensning:-celler viser en meget spredt fenotype i motsetning til hva som er observert in vivo, hvor celler som presenterer en 3D-arkitektur. Disse gjenstander knyttet til kultur metoden kan utløse ikke-fysiologiske funksjoner som forbedret stresset fiber 1,4,5. Tredimensjonal cellekulturanalyser gir flere fordeler sammenlignet med 2D-miljøer 6,7. De er fysiologisk mer relevant, og resultatene er derfor meningsfylt. Som et eksempel kan celler som er innleiret i hydrogeler vise 3D-lignende strukturer, men deres morfologi avvike fra en celle til en annen 8,9. Men deres morfologi avvike fra en celle til en annen, noe som kompliserer screening applikasjoner. En alternativ strategi er å legge ned enkeltceller i microfabricated hulrom 10,11. Cell posisjon, form, polaritet og intern celle organisasjon kan da bli normalisert. Foruten 3D-lignende arkitektur til celler, mikrohulrom gir også mulighet for høy innhold screeningstudier 10,12-14; enkeltceller kan bestilles til mikromatriser og cellulære organeller og deres videreutviklinger kan observeres i parallell. Denne regularitet gir god statistikk med lavt antall celler og bedre time / romlig oppløsning. Nyttige forbindelser er enklere å identifisere en pålitelig måte. I denne studien viser vi fremstillingen og anvendelse av en ny 3D-lignende enkeltceller kultursystem for høyt innhold-screening applikasjoner 10,12,13. Enheten består av en rekke elastiske mikrohulrom (10 5 hulrom / cm 2), som ble skapt &#39;eggcups&#39; (EF) nr. Mål og totalvolumet av EU i dette arbeidet er optimalisert til den typiske volum av individuelle NIH3T3 og HeLa-cellerunder celledeling. Morfologi av hulrommene - sylindriske - er valgt å riktig orientere celleform for visualisering av aktive prosesser. Replika støping brukes for å mønster en oppstilling av EC på en tynn polydimetylsiloksan (PDMS) sjikt klebet på et dekkglass 15,16. Celler blir innført i EF ved sentrifugering. Vi rapporterer her observasjon og normalisering av cellulære organeller (aktin spennings fibre, Golgi-apparatet og nucleus) i 3D (EC) sammenlignet med de samme celler på 2D (flat) overflater. Vi rapporterer også observasjon av aktive dynamiske prosesser som for eksempel stenging av cytokinetic actomyosin ring under celle mitose 17. Til slutt viser vi Resultatene av denne metoden for andre systemer med stive vegger, slik som spirende gjær, gjær og fisjons C. elegans embryoer som bekrefter anvendeligheten av vår metode for et bredt spekter av modellsystemer. Vi neste presentere en detaljert og uttømmende protocol for å dikte og anvende &#39;eggcups &quot;for 3D microfabrication. Vår tilnærming er enkel og trenger ikke et rent rom. Vi forventer at denne nye metodikken vil være spesielt interessant for narkotika screening-analyser og personlig medisin, til erstatning for petriskåler. Til slutt vil vår enhet kan være nyttige for å studere fordelingen av cellene respons på ytre stimuli, for eksempel i kreft 18 eller i 19 grunnleggende forskning.

ordering single cells and single embryos in 3d confinement: a new device for high content screening

Biologiske celler er vanligvis observeres på flate (2D) overflater. Denne tilstanden er ikke fysiologisk, og fenotyper og former er svært variabel. Screening basert på celler i slike miljøer har derfor alvorlige begrensninger: celleorgan viser ekstreme fenotyper, celle morfologi og størrelser er heterogene og / eller spesifikke celleorganeller kan ikke være riktig visualisert. I tillegg er celler in vivo som ligger i et 3D-miljø; i denne situasjon, vil celler viser forskjellige fenotyper hovedsakelig på grunn av deres interaksjon med det omgivende ekstracellulær matriks av vevet. For å standardisere og generere ordre av enkeltceller i et fysiologisk relevant 3D-miljø for cellebaserte analyser, rapporterer vi her den microfabrication og anvendelser av en anordning for in vitro-3D-cellekultur. Denne anordning består av en 2D-matrise av mikrohulrom (typisk 10 5 hulrom / cm 2), hver fylt med enkle celler eller embryoer. Cell posisjon, form, polaritet og intern celle organisasjon blir deretter normalisert viser en 3D-arkitektur. Vi brukte replica molding til mønsteret en rekke mikrohulrom, &#39;eggcups&#39;, mot en tynn polydimethylsiloxane (PDMS) sjikt festet på et dekkglass. Hulrom ble dekket med fibronektin å lette adhesjon. Celler ble innsatt ved sentrifugering. Fylling prosent var optimalisert for hvert system som tillater opp til 80%. Celler og embryoer levedyktighet ble bekreftet. Vi har anvendt denne metode for visualisering av cellulære organeller, slik som nucleus og Golgi-apparatet, og for å studere aktive prosesser, slik som lukking av cytokinetic ringen under celle mitose. Denne enheten tillot identifisering av nye funksjoner, for eksempel periodiske ansamlinger og inhomogeniteter av myosin og aktin under cytokinetic ring nedleggelse og kompakt fenotyper for Golgi og kjernen justering. Vi karakteriserte fremgangsmåte for pattedyrceller, gjær, spalting spirende gjær, C. elegans with spesifikk tilpasning i hvert enkelt tilfelle. Til slutt, hva som kjennetegner denne enheten gjør den spesielt interessant for narkotika screening-analyser og personlig medisin.

De &quot;eggcups &#39;(EC) er en ny høyt innhold screening-metode som tillater visualisering av orienterte celler og embryoer i et 3D-miljø. I tillegg har noen cellulære prosesser, noe som er vanskelig å observere i standard 2D (flat) kulturer, kan iakttas ved denne nye fremgangsmåte. Figur 1a viser en oppsummering av fremgangsmåten for EC microfabrication (se også punkt 1 i den ovenfor beskrevne protokoll ). Metoden er enkel, rask, effektiv og uten krav om spesialutstyr. Figur 1b</strong...

Watch this Scientific Journal Video about Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening at JoVE.com

Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening

Vi rapporterer en anordning og en ny metode for å studere celler og embryoer. Enkeltceller er nettopp bestilt i microcavity arrays. Deres 3D innesperring er et skritt mot 3D-miljøer oppstått i fysiologiske forhold og lar organelle orientering. Ved å kontrollere celleform, minimerer dette oppsettet variasjonen rapportert i standardtester.

Bestilling av enkeltceller og enkelt Embryoet i 3D Confinement: En ny enhet for høyt innhold Screening

Biological cells are usually observed on flat (2D) surfaces. This condition is not physiological, and phenotypes and shapes are highly variable. Screening ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

A Microfluidic Chip for the Versatile Chemical Analysis of Single Cells

En Microfluidic Chip for Allsidig Kjemisk analyse av enkeltceller

We present a microfluidic device that enables the quantitative determination of intracellular biomolecules in multiple single cells in parallel. For this ...

Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Nanomanipulation av Enkelt RNA-molekyler ved optisk pinsett

A large portion of the human genome is transcribed but not translated. In this post genomic era, regulatory functions of RNA have been shown to be ...

Cultivation of Mammalian Cells Using a Single-use Pneumatic Bioreactor System

Dyrking av pattedyrceller med en enkelt-bruk Pneumatisk Bioreaktor System

Recent advances in mammalian, insect, and stem cell cultivation and scale-up have created tremendous opportunities for new therapeutics and personalized ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

En mikrofluid plattform for High-throughput encellede Isolering og kultur

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

3D Microtissues for Injectable Regenerative Therapy and High-throughput Drug Screening

3D Microtissues for injiserbare regenerativ Therapy og høy gjennomstrømming narkotikarelaterte Screening

To upgrade traditional 2D cell culture to 3D cell culture, we have integrated microfabrication with cryogelation technology to produce macroporous ...

A Protocol for Real-time 3D Single Particle Tracking

En protokoll for sanntids 3D enkelt partikkel sporing

Real-time three-dimensional single particle tracking (RT-3D-SPT) has the potential to shed light on fast, 3D processes in cellular systems. Although ...

Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells

Opptak av nye Lipid-belagt nanopartikler som inneholder Falcarindiol av menneskelige stamceller

Nanoparticles are the focus of an increased interest in drug delivery systems for cancer therapy. Lipid-coated nanoparticles are inspired in structure and ...

Fabrication of Zero Mode Waveguides for High Concentration Single Molecule Microscopy

Fabrikasjon av zero mode waveguides for høy konsentrasjon enkeltmolekylmikroskopi

In single molecule fluorescence enzymology, background fluorescence from labeled substrates in solution often limits fluorophore concentration to pico- to ...

Generation of Dynamical Environmental Conditions using a High-Throughput Microfluidic Device

Generering av dynamiske miljøforhold ved hjelp av en mikrofluidisk enhet med høy gjennomstrømning

Mimicking in vivo environmental conditions is crucial for in vitro studies on complex life machinery. However, current techniques targeting live cells and ...