Name: ordering single cells and single embryos in 3d confinement: a new device for high content screening
Uploaded: 2016-09-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening at JoVE.com

Vi erkänner L. Brino (IGBMC hög halt Screening anläggning, Illkirch, Frankrike) för att förse oss med den anti-Giantin antikropp, M. Labouesse Lab. för C. elegans (IGBMC) och B. Séraphin Lab. för knoppande jäst (IGBMC), E. Paluch och A. Hyman för fluorescerande HeLa-celler (MPI-CBG, Dresden), J. Moseley (Dartmouth Medical School) och JQ Wu (Ohio State University) för fission jästceller; A. Hoel och F. Evenou för experimentell hjälp, C. Rick (IBMC, Strasbourg, Frankrike) för teknisk hjälp, och JC Jeannot (Femto-st, Frankrike) för att få hjälp i mikro. Detta arbete stöddes av medel från CNRS, universitetet i Strasbourg, Conectus, La Fondation pour la Recherche Médicale och ci-FRC i Strasbourg.

1. Mikro av &quot;äggkoppar&quot; <ol><li> Tillverkning av Master: mikrokaviteter Array <ol><li> Värma en 3 &#39;&#39; kiselskiva upp till 200 ° C för att förånga varje närvaro av fuktighet. </li><li> Spin-coat ett tunt skikt av SU-8 fotoresist. Justera volymen av harts och spinnhastighet beroende på önskad tjocklek och fotoresist typ. Denna tjocklek kommer att diktera djupet av de &quot;eggcups&quot; (EG). För en 30 pm tjockt skikt och SU-8 2025 spin-coat vid 2800 rpm. </li><li> Pre-baka rånet vid 65 ° C ...

<ol>
	<li>Cukierman, E., Pankov, R., Stevens, D. R., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taking+Cell-Matrix+Adhesions+to+the+Third+Dimension.">Taking Cell-Matrix Adhesions to the Third Dimension.</a> Science. 294, 1708-1712 (2001).</li><li>Azioune, A., Storch, M., Bornens, M., Thery, M., Piel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+and+rapid+process+for+single+cell+micro-patterning.">Simple and rapid process for single cell micro-patterning.</a> Lab Chip. 9, 1640-1642 (2009).</li><li>Mandal, K., Balland, M., Bureau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermoresponsive+Micropatterned+Substrates+for+Single+Cell+Studies.">Thermoresponsive Micropatterned Substrates for Single Cell Studies.</a> PLoS ONE. 7, e37548 (2012).</li><li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue.">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8, 839-845 (2007).</li><li>Baker, B. M., Chen, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deconstructing+the+third+dimension:+how+3D+culture+microenvironments+alter+cellular+cues.">Deconstructing the third dimension: how 3D culture microenvironments alter cellular cues.</a> J Cell Sci. , (2012).</li><li>Ghibaudo, M., Di Meglio, J. M., Hersen, P., Ladoux, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+cell+spreading+within+3D-micropatterned+environments.">Mechanics of cell spreading within 3D-micropatterned environments.</a> Lab Chip. 11, 805-812 (2010).</li><li>Greiner, A. M., Richter, B., Bastmeyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-Engineered+3D+Scaffolds+for+Cell+Culture+Studies.">Micro-Engineered 3D Scaffolds for Cell Culture Studies.</a> Macromol Biosci. 12, 1301-1314 (2012).</li><li>Khetan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degradation-mediated+cellular+traction+directs+stem+cell+fate+in+covalently+crosslinked+three-dimensional+hydrogels.">Degradation-mediated cellular traction directs stem cell fate in covalently crosslinked three-dimensional hydrogels.</a> Nat Mater. 12, 458-465 (2013).</li><li>Legant, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+mechanical+tractions+exerted+by+cells+in+three-dimensional+matrices.">Measurement of mechanical tractions exerted by cells in three-dimensional matrices.</a> Nat Meth. 7, 969-971 (2010).</li><li>Riveline, D., Buguin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing the cell division. , (2010).</li><li>Ochsner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-well+arrays+for+3D+shape+control+and+high+resolution+analysis+of+single+cells.">Micro-well arrays for 3D shape control and high resolution analysis of single cells.</a> Lab Chip. 7, 1074-1077 (2007).</li><li>Riveline, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing cells with cell wall or invertebrate embryos with oblong eggshell . , (2012).</li><li>Riveline, D., Wollrab, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing eukaryotic cells without cell wall. , (2012).</li><li>Zanella, F., Lorens, J. B., Link, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+content+screening:+seeing+is+believing.">High content screening: seeing is believing.</a> Trends Biotech. 28, 237-245 (2010).</li><li>Wolfe, D., Qin, D., Whitesides, G., Hughes, M. P., Hoettges, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microengineering+in+Biotechnology,+Ch+3.">Microengineering in Biotechnology, Ch 3.</a> Methods in Molecular Biology. 583, 81-107 (2010).</li><li>Mehling, M., Tay, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+cell+culture.">Microfluidic cell culture.</a> Curr Op Biotech. 25, 95-102 (2014).</li><li>Wollrab, V., Thiagarajan, R., Wald, A., Kruse, K., Riveline, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Still+and+rotating+myosin+clusters+determine+cytokinetic+ring+constriction.">Still and rotating myosin clusters determine cytokinetic ring constriction.</a> Nat Commun. 7, 11860-11869 (2016).</li><li>Yao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+single+cells+identifies+a+rare+subset+of+circulating+tumor+cells+with+malignant+traits.">Functional analysis of single cells identifies a rare subset of circulating tumor cells with malignant traits.</a> Integr Biol. 6, 388-398 (2014).</li><li>Eberwine, J., Sul, J. Y., Bartfai, T., Kim, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+promise+of+single-cell+sequencing.">The promise of single-cell sequencing.</a> Nat Meth. 11, 25-27 (2014).</li><li>Allen, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+cell-free+extracts+of+Xenopus+eggs+and+demembranated+sperm+chromatin+for+the+assembly+and+isolation+of+in+vitro-formed+nuclei+for+Western+blotting+and+scanning+electron+microscopy+(SEM).">Generation of cell-free extracts of Xenopus eggs and demembranated sperm chromatin for the assembly and isolation of in vitro-formed nuclei for Western blotting and scanning electron microscopy (SEM).</a> Nat. Protocols. 2, 1173-1179 (2007).</li><li>Robbins, E., Marcus, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitotically+Synchronized+Mammalian+Cells:+a+Simple+Method+for+Obtaining+Large+Populations.">Mitotically Synchronized Mammalian Cells: a Simple Method for Obtaining Large Populations.</a> Science. 144, (1964).</li><li>Whitfield, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem-loop+binding+protein,+the+protein+that+binds+the+3&amp;#34;+end+of+histone+mRNA,+is+cell+cycle+regulated+by+both+translational+and+posttranslational+mechanisms.">Stem-loop binding protein, the protein that binds the 3&amp;#34; end of histone mRNA, is cell cycle regulated by both translational and posttranslational mechanisms.</a> Molecular and Cellular Biology. 20, (2000).</li><li>Straight, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+Temporal+and+Spatial+Control+of+Cytokinesis+with+a+Myosin+II+Inhibitor.">Dissecting Temporal and Spatial Control of Cytokinesis with a Myosin II Inhibitor.</a> Science. 299, 1743-1747 (2003).</li><li>Tang, J., Erikson, R. L., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Checkpoint+kinase+1+(Chk1)+is+required+for+mitotic+progression+through+negative+regulation+of+polo-like+kinase+1+(Plk1).">Checkpoint kinase 1 (Chk1) is required for mitotic progression through negative regulation of polo-like kinase 1 (Plk1).</a> Proc Natl Acad Sci. 103, 11964-11969 (2006).</li><li>Zahreddine, H., Zhang, H., Diogon, M., Nagamatsu, Y., Labouesse, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRT-1/Calreticulin+and+the+E3+Ligase+EEL-1/HUWE1+Control+Hemidesmosome+Maturation+in+C.+elegans+Development.">CRT-1/Calreticulin and the E3 Ligase EEL-1/HUWE1 Control Hemidesmosome Maturation in C. elegans Development.</a> Curr Biol. 20, 322-327 (2010).</li><li>Porta-de-la-Riva, M., Fontrodona, L., Villanueva, A., Ceron, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+Caenorhabditis+elegans+Methods:+Synchronization+and+Observation.">Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation.</a> JoVE. , e4019 (2012).</li><li>Saha, S., Pollard, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anillin-related+protein+Mid1p+coordinates+the+assembly+of+the+cytokinetic+contractile+ring+in+fission+yeast.">Anillin-related protein Mid1p coordinates the assembly of the cytokinetic contractile ring in fission yeast.</a> Mol Biol Cell. 23, 3982-3992 (2012).</li><li>Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+Drug+Efficacy+and+Toxicology+in+Three+Dimensions:+Using+Synthetic+Extracellular+Matrices+in+Drug+Discovery.">Evaluating Drug Efficacy and Toxicology in Three Dimensions: Using Synthetic Extracellular Matrices in Drug Discovery.</a> Acc Chem Res. 41, 139-148 (2007).</li><li>Futamura, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphobase,+an+Encyclopedic+Cell+Morphology+Database,+and+Its+Use+for+Drug+Target+Identification.">Morphobase, an Encyclopedic Cell Morphology Database, and Its Use for Drug Target Identification.</a> Chem Biol. 19, 1620-1630 (2012).</li></ol>

Replika gjutning användes för att fabricera de &quot;eggcups &#39;. Tillverkningsprocessen behöver inte ett rent rum; det är snabbt och enkelt, även om vissa metoder kan behövas. I synnerhet släppa PDMS stämpel är det mest kritiska steget för att producera ett stort område med hög kvalitet &quot;äggkoppar&quot;. Av denna anledning har särskild omsorg som skall vidtas i detta steg. Om det här steget upprepade gånger misslyckas, anser att optimera plasma renare parametrar före den silanisering och bindnin...

Ström in vitro cellbaserade analyser är två-dimensionell (2D). Denna konfiguration är inte naturligt för däggdjursceller och därför inte är fysiologiskt relevant en; celler visar en mångfald av former, storlekar och heterogena fenotyper. De presenterar ytterligare allvarliga begränsningar när det tillämpas på screeningsapplikationer, såsom en oordnad fördelning inom planet och extrema fenotyper av cellulära organeller (stress fibrer, i synnerhet). Detta är särskilt viktigt i kliniska försök för drogtestning, där höga budgetar spenderas varje år. De flesta av dessa läkemedel men misslyckas när de tillämpas på djurmodeller på grund av den konstgjorda 2D odlingsbetingelser i tidiga skeden av läkemedelsscreening. Dessutom, genom att använda detta tillvägagångssätt, specifika cellorganeller kan inte vara korrekt visualiseras, såsom cytokinetic aktomyosin ringen under cellmitos, och i allmänhet strukturer som utvecklas i planet vinkelrätt mot planet för observation. Någranya 2D-analyser har föreslagits för att övervinna de ovan nämnda nackdelarna och viktiga insikter om cytoskelettet organisation har observerats 2,3. Dessa analyser fortfarande finns en allvarlig begränsning: celler visar en mycket spritt fenotyp i motsats till vad som observerats in vivo, där celler presenterar en 3D-arkitektur. Dessa artefakter i samband med odlingsmetoden kan utlösa icke-fysiologiska funktioner såsom förbättrade spänningsfibrer 1,4,5. Tredimensionella cellodlingsanalyser ge flera fördelar jämfört med 2D-miljöer 6,7. De är fysiologiskt mer relevant, och resultaten är därför meningsfulla. Som ett exempel kan celler inbäddade i hydrogeler visar 3D-liknande strukturer men deras morfologier skiljer sig från en cell till en annan 8,9. Men deras morfologier skiljer sig från en cell till en annan, vilket försvårar screening program. En alternativ strategi är att bädda endaceller i mikrofabricerade hålrum 10,11. Cell läge, form, polaritet och intern cell organisation kan då bli normaliseras. Förutom att ge 3D-liknande arkitektur till celler, mikrokaviteter möjliggör också hög innehåll screeningstudier 10,12-14; enskilda celler kan beställas till mikromatriser och cellulära organeller och deras utvecklingar kan observeras parallellt. Denna regelbundenhet ger bra statistik med lågt antal celler och bättre tids / rumsliga upplösningar. Användbara föreningar är lättare att identifiera ett tillförlitligt sätt. I denna studie visar vi tillverkning och tillämpning av en ny 3D-liknande enda celler odlingssystem för hög halt screening program 10,12,13. Anordningen består av en uppsättning av elastomer mikrokaviteter (10 5 håligheter / cm2), myntade &quot;äggkoppar&quot; (EG). Dimensioner och totala volymen av EG i detta arbete är optimerade för den typiska volym av enskilda NIH3T3 och HeLa-cellerunder celldelning. Morfologin hos håligheterna - cylindriska - väljs för att på rätt sätt orientera cellform för visualisering av aktiva processer. Replik gjutning används för att mönstra en rad EG på ett tunt polydimetylsiloxan (PDMS) skikt vidhäftat på ett täckglas 15,16. Cellerna införs i EG genom centrifugering. Vi rapporterar här observation och normalisering av cellorganeller (aktin spänningsfibrer, Golgiapparaten och nucleus) i 3D (EG) i jämförelse med samma celler på 2D (flat) ytor. Vi rapporterar också observation av aktiva dynamiska processer såsom stängningen av cytokinetic aktomyosin ringen under celldelning 17. Slutligen visar vi resultatet av denna metod på andra system med stela väggar, såsom knoppande jäst, fissionsjäst och C. elegans embryon som bekräftar tillämpligheten av vår metodik för ett brett spektrum av modellsystem. Vi presenterar nästa en detaljerad och uttömmande protocol i syfte att tillverka och tillämpa &quot;äggkoppar&quot; för 3D mikro. Vår inställning är enkel och inte behöver ett rent rum. Vi räknar med att denna nya metod kommer att vara särskilt intressant för läkemedelsscreeningsanalyser och personlig medicin, i utbyte av petriskålar. Slutligen kommer vår anordning att vara användbara för att studera fördelningen av celler svar på yttre stimuli, exempelvis i cancer 18 eller i grundforskning 19.

ordering single cells and single embryos in 3d confinement: a new device for high content screening

Biologiska celler visar sig vanligtvis på platta (2D) ytor. Detta villkor inte är fysiologiska, och fenotyper och former är mycket variabla. Screening baserad på celler i sådana miljöer har därför allvarliga begränsningar: cellorganeller visar extrema fenotyper, cell morfologier och storlekar är heterogena och / eller specifika cellorganeller kan inte ordentligt. Dessutom är celler in vivo som ligger i en 3D-miljö; i denna situation, celler visar olika fenotyper främst på grund av deras interaktion med den omgivande extracellulära matrix av vävnaden. För att standardisera och skapa ordning av enskilda celler i en fysiologiskt relevant 3D-miljö för cellbaserade analyser, rapporterar vi här mikro och applikationer av en anordning för in vitro 3D cellkultur. Denna anordning består av en 2D matris med mikrokaviteter (typiskt 10 5 håligheter / cm 2), var och en fylld med enskilda celler eller embryon. cell posining, form, polaritet och intern cell organisation blir då normaliserade visar en 3D-arkitektur. Vi använde replik gjutning mönster en rad mikrokaviteter, &quot;äggkoppar&quot;, på ett tunt polydimetylsiloxan (PDMS) skikt vidhäftat på ett täckglas. Karies täcktes med fibronektin för att underlätta vidhäftning. Celler infördes genom centrifugering. Fyllnings procentsats optimeras för varje system som möjliggör upp till 80%. Celler och embryon viabilitet bekräftades. Vi tillämpade denna metod för visualisering av cellulära organeller, såsom kärnan och Golgi-apparaten, och för att studera aktiva processer, såsom stängningen av cytokinetic ringen under celldelning. Denna anordning tillät identifiering av nya funktioner, såsom periodiska ansamlingar och inhomogeniteter av myosin och aktin under cytokinetic ringslutning och kompakterade fenotyper för Golgi och kärnan anpassning. Vi kännetecknas metoden för däggdjursceller, fission jäst, knoppande jäst, C. elegans wed särskild anpassning i varje enskilt fall. Slutligen egenskaperna hos denna enhet gör det särskilt intressant för läkemedelsscreeningsanalyser och personlig medicin.

De &quot;eggcups &#39;(EG) är en ny hög halt-screening metod som tillåter visualisering av orienterade celler och embryon i en 3D-miljö. Dessutom kan vissa cellulära processer, som är svåra att observera i standard 2D (platt) kulturer, kan observeras av den nya metoden. Figur 1a visar en sammanfattning av förfarandet för EG-mikro (se även avsnitt 1 i den ovan beskrivna protokoll ). Metoden är enkel, snabb, effektiv och utan krav på speciell utrustning. Figur 1b och 1...

Watch this Scientific Journal Video about Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening at JoVE.com

Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening

Vi rapporterar en anordning och en ny metod för att studera celler och embryon. Enstaka celler exakt beställas i mikrokavitet matriser. Deras 3D förlossning är ett steg mot 3D-miljöer förekommer i fysiologiska förhållanden och tillåter organell orientering. Genom att kontrollera cellens form, minimerar denna inställning variabilitet redovisas i standardanalyser.

Beställa enskilda celler och Single Embryon i 3D Förlossning: En ny enhet för hög halt Screening

Biological cells are usually observed on flat (2D) surfaces. This condition is not physiological, and phenotypes and shapes are highly variable. Screening ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Att skapa två-dimensionell Mönstrad substrat för Protein och Cell inneslutning

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

A Microfluidic Chip for the Versatile Chemical Analysis of Single Cells

Ett mikroflödes Chip för Mångsidig kemisk analys av enskilda celler

We present a microfluidic device that enables the quantitative determination of intracellular biomolecules in multiple single cells in parallel. For this ...

Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Nanomanipulation av Single-RNA-molekyler med optisk pincett

A large portion of the human genome is transcribed but not translated. In this post genomic era, regulatory functions of RNA have been shown to be ...

Cultivation of Mammalian Cells Using a Single-use Pneumatic Bioreactor System

Odling av däggdjursceller med en enda användning Pneumatic bioreaktorsystem

Recent advances in mammalian, insect, and stem cell cultivation and scale-up have created tremendous opportunities for new therapeutics and personalized ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

En mikroflödessystem plattform för hög genomströmning Single-cell isolering och kultur

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

3D Microtissues for Injectable Regenerative Therapy and High-throughput Drug Screening

3D Microtissues för injicerbara regenerativ terapi och hög genomströmning drogkontroll

To upgrade traditional 2D cell culture to 3D cell culture, we have integrated microfabrication with cryogelation technology to produce macroporous ...

A Protocol for Real-time 3D Single Particle Tracking

Ett protokoll för realtid 3D Single Particle Tracking

Real-time three-dimensional single particle tracking (RT-3D-SPT) has the potential to shed light on fast, 3D processes in cellular systems. Although ...

Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells

Upptag av nya Lipid-belagd nanopartiklar som innehåller Falcarindiol av humana mesenkymala stamceller

Nanoparticles are the focus of an increased interest in drug delivery systems for cancer therapy. Lipid-coated nanoparticles are inspired in structure and ...

Fabrication of Zero Mode Waveguides for High Concentration Single Molecule Microscopy

Tillverkning av zero mode vågledare för hög koncentration enmolekylmikroskopi

In single molecule fluorescence enzymology, background fluorescence from labeled substrates in solution often limits fluorophore concentration to pico- to ...

Generation of Dynamical Environmental Conditions using a High-Throughput Microfluidic Device

Generering av dynamiska miljöförhållanden med hjälp av en mikrofluidisk enhet med hög genomströmning

Mimicking in vivo environmental conditions is crucial for in vitro studies on complex life machinery. However, current techniques targeting live cells and ...