Name: ordering single cells and single embryos in 3d confinement: a new device for high content screening
Uploaded: 2016-09-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening at JoVE.com

Anti-Giantin antikoru, M. Labouesse Lab bize sağlamış L. Brino (IGBMC Yüksek İçerik Tarama tesisi, Illkirch, Fransa) kabul. C. elegans (IGBMC) ve B. Séraphin Lab. maya (IGBMC), fisyon maya hücreleri için floresan HeLa hücrelerinden (MPI-CBG, Dresden), J. Moseley (Dartmouth Tıp Okulu) ve JQ Wu (The Ohio State University) E. Paluch ve A. Hyman tomurcuklanan için; A. Hoel ve deneysel yardım için F. EVENOU, teknik yardım için C. Rick (IBMC, Strazburg, Fransa), ve mikrofabrikasyon yardım için JC Jeannot (Femto-st, Fransa). Bu çalışma CNRS, Strasbourg Üniversitesi&#39;nde, Conectus fonları tarafından desteklenen, La Fondation la Recherche MEDICALE ve Strasbourg ci-FRC dökün.

&#39;Eggcups&#39; 1. Mikro ve <ol><li> Master Fabrikasyon: mikro boşluklara Dizi <ol><li> nem bulunması, buharlaştırılması için 200 ° C&#39;ye kadar bir 3 &#39;&#39; silikon gofret ısıtın. </li><li> Spin-kat SU-8 fotorezist ince bir tabaka. İstenilen kalınlık ve fotorezist tipine bağlı olarak reçine ve iplik hızı seviyesini ayarlayın. Bu kalınlık &#39;eggcups&#39; (EC) derinliğini belirleyecektir. 2800 rpm&#39;de 30 mikron kalınlığında bir tabaka ve SU-8 2025, Spin-kat için. </li><li> Ön f...

<ol>
	<li>Cukierman, E., Pankov, R., Stevens, D. R., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taking+Cell-Matrix+Adhesions+to+the+Third+Dimension.">Taking Cell-Matrix Adhesions to the Third Dimension.</a> Science. 294, 1708-1712 (2001).</li><li>Azioune, A., Storch, M., Bornens, M., Thery, M., Piel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+and+rapid+process+for+single+cell+micro-patterning.">Simple and rapid process for single cell micro-patterning.</a> Lab Chip. 9, 1640-1642 (2009).</li><li>Mandal, K., Balland, M., Bureau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermoresponsive+Micropatterned+Substrates+for+Single+Cell+Studies.">Thermoresponsive Micropatterned Substrates for Single Cell Studies.</a> PLoS ONE. 7, e37548 (2012).</li><li>Pampaloni, F., Reynaud, E. G., Stelzer, E. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+third+dimension+bridges+the+gap+between+cell+culture+and+live+tissue.">The third dimension bridges the gap between cell culture and live tissue.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8, 839-845 (2007).</li><li>Baker, B. M., Chen, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deconstructing+the+third+dimension:+how+3D+culture+microenvironments+alter+cellular+cues.">Deconstructing the third dimension: how 3D culture microenvironments alter cellular cues.</a> J Cell Sci. , (2012).</li><li>Ghibaudo, M., Di Meglio, J. M., Hersen, P., Ladoux, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+cell+spreading+within+3D-micropatterned+environments.">Mechanics of cell spreading within 3D-micropatterned environments.</a> Lab Chip. 11, 805-812 (2010).</li><li>Greiner, A. M., Richter, B., Bastmeyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-Engineered+3D+Scaffolds+for+Cell+Culture+Studies.">Micro-Engineered 3D Scaffolds for Cell Culture Studies.</a> Macromol Biosci. 12, 1301-1314 (2012).</li><li>Khetan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degradation-mediated+cellular+traction+directs+stem+cell+fate+in+covalently+crosslinked+three-dimensional+hydrogels.">Degradation-mediated cellular traction directs stem cell fate in covalently crosslinked three-dimensional hydrogels.</a> Nat Mater. 12, 458-465 (2013).</li><li>Legant, W. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+mechanical+tractions+exerted+by+cells+in+three-dimensional+matrices.">Measurement of mechanical tractions exerted by cells in three-dimensional matrices.</a> Nat Meth. 7, 969-971 (2010).</li><li>Riveline, D., Buguin, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing the cell division. , (2010).</li><li>Ochsner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-well+arrays+for+3D+shape+control+and+high+resolution+analysis+of+single+cells.">Micro-well arrays for 3D shape control and high resolution analysis of single cells.</a> Lab Chip. 7, 1074-1077 (2007).</li><li>Riveline, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing cells with cell wall or invertebrate embryos with oblong eggshell . , (2012).</li><li>Riveline, D., Wollrab, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Devices and methods for observing eukaryotic cells without cell wall. , (2012).</li><li>Zanella, F., Lorens, J. B., Link, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+content+screening:+seeing+is+believing.">High content screening: seeing is believing.</a> Trends Biotech. 28, 237-245 (2010).</li><li>Wolfe, D., Qin, D., Whitesides, G., Hughes, M. P., Hoettges, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microengineering+in+Biotechnology,+Ch+3.">Microengineering in Biotechnology, Ch 3.</a> Methods in Molecular Biology. 583, 81-107 (2010).</li><li>Mehling, M., Tay, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+cell+culture.">Microfluidic cell culture.</a> Curr Op Biotech. 25, 95-102 (2014).</li><li>Wollrab, V., Thiagarajan, R., Wald, A., Kruse, K., Riveline, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Still+and+rotating+myosin+clusters+determine+cytokinetic+ring+constriction.">Still and rotating myosin clusters determine cytokinetic ring constriction.</a> Nat Commun. 7, 11860-11869 (2016).</li><li>Yao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+single+cells+identifies+a+rare+subset+of+circulating+tumor+cells+with+malignant+traits.">Functional analysis of single cells identifies a rare subset of circulating tumor cells with malignant traits.</a> Integr Biol. 6, 388-398 (2014).</li><li>Eberwine, J., Sul, J. Y., Bartfai, T., Kim, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+promise+of+single-cell+sequencing.">The promise of single-cell sequencing.</a> Nat Meth. 11, 25-27 (2014).</li><li>Allen, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+cell-free+extracts+of+Xenopus+eggs+and+demembranated+sperm+chromatin+for+the+assembly+and+isolation+of+in+vitro-formed+nuclei+for+Western+blotting+and+scanning+electron+microscopy+(SEM).">Generation of cell-free extracts of Xenopus eggs and demembranated sperm chromatin for the assembly and isolation of in vitro-formed nuclei for Western blotting and scanning electron microscopy (SEM).</a> Nat. Protocols. 2, 1173-1179 (2007).</li><li>Robbins, E., Marcus, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitotically+Synchronized+Mammalian+Cells:+a+Simple+Method+for+Obtaining+Large+Populations.">Mitotically Synchronized Mammalian Cells: a Simple Method for Obtaining Large Populations.</a> Science. 144, (1964).</li><li>Whitfield, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem-loop+binding+protein,+the+protein+that+binds+the+3&amp;#34;+end+of+histone+mRNA,+is+cell+cycle+regulated+by+both+translational+and+posttranslational+mechanisms.">Stem-loop binding protein, the protein that binds the 3&amp;#34; end of histone mRNA, is cell cycle regulated by both translational and posttranslational mechanisms.</a> Molecular and Cellular Biology. 20, (2000).</li><li>Straight, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+Temporal+and+Spatial+Control+of+Cytokinesis+with+a+Myosin+II+Inhibitor.">Dissecting Temporal and Spatial Control of Cytokinesis with a Myosin II Inhibitor.</a> Science. 299, 1743-1747 (2003).</li><li>Tang, J., Erikson, R. L., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Checkpoint+kinase+1+(Chk1)+is+required+for+mitotic+progression+through+negative+regulation+of+polo-like+kinase+1+(Plk1).">Checkpoint kinase 1 (Chk1) is required for mitotic progression through negative regulation of polo-like kinase 1 (Plk1).</a> Proc Natl Acad Sci. 103, 11964-11969 (2006).</li><li>Zahreddine, H., Zhang, H., Diogon, M., Nagamatsu, Y., Labouesse, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRT-1/Calreticulin+and+the+E3+Ligase+EEL-1/HUWE1+Control+Hemidesmosome+Maturation+in+C.+elegans+Development.">CRT-1/Calreticulin and the E3 Ligase EEL-1/HUWE1 Control Hemidesmosome Maturation in C. elegans Development.</a> Curr Biol. 20, 322-327 (2010).</li><li>Porta-de-la-Riva, M., Fontrodona, L., Villanueva, A., Ceron, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+Caenorhabditis+elegans+Methods:+Synchronization+and+Observation.">Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation.</a> JoVE. , e4019 (2012).</li><li>Saha, S., Pollard, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anillin-related+protein+Mid1p+coordinates+the+assembly+of+the+cytokinetic+contractile+ring+in+fission+yeast.">Anillin-related protein Mid1p coordinates the assembly of the cytokinetic contractile ring in fission yeast.</a> Mol Biol Cell. 23, 3982-3992 (2012).</li><li>Prestwich, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+Drug+Efficacy+and+Toxicology+in+Three+Dimensions:+Using+Synthetic+Extracellular+Matrices+in+Drug+Discovery.">Evaluating Drug Efficacy and Toxicology in Three Dimensions: Using Synthetic Extracellular Matrices in Drug Discovery.</a> Acc Chem Res. 41, 139-148 (2007).</li><li>Futamura, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphobase,+an+Encyclopedic+Cell+Morphology+Database,+and+Its+Use+for+Drug+Target+Identification.">Morphobase, an Encyclopedic Cell Morphology Database, and Its Use for Drug Target Identification.</a> Chem Biol. 19, 1620-1630 (2012).</li></ol>

Replika döküm &#39;eggcups&#39; imal etmek amacıyla kullanılmıştır. üretim süreci bir temiz oda ihtiyacı yoktur; Bazı uygulama gerekebilir rağmen, kolay ve basittir. Özellikle, PDMS damga serbest yüksek kalite &#39;eggcups&#39; geniş bir alana üretmek için en kritik adımdır. Bu nedenle, özel bir dikkat bu adımda alınması gerekir. Bu adımı tekrar tekrar başarısız olursa, silanizasyon ve plazma bağlayıcı önce plazma temizleyici parametrelerini optimize etmek düşünün. Yetersiz silanizasy...

İn vitro hücre-esaslı deneyler mevcut (2B), iki boyutludur. Bu yapılandırma, memeli hücreleri için doğal olmayan ve bu nedenle 1 fizyolojik olarak ilgili değildir; Hücreler şekil, boyut ve heterojen fenotip bir çeşitlilik göstermektedir. Böyle düzlemde ve hücresel organellerin aşırı fenotipleri (özellikle stres lifleri) içinde düzensiz dağılım olarak, tarama uygulamaları uygulandığında Onlar ek ciddi sınırlamalar mevcut. Bu yüksek bütçeler her yıl harcanan uyuşturucu testi için klinik çalışmalarda özellikle önemlidir. çünkü ilaç taraması erken dönemlerinde yapay 2B kültür durumun hayvan modellerinde uygulandığında bu ilaçların pek çoğu da başarısız olur. Buna ek olarak, bu yaklaşım ile, özel hücre organelleri doğru genellikle gözlem düzlemine dik bir düzlemde gelişen yapılar, hücre mitoz sırasında cytokinetic aktomiyosin halkası gibi, görsel ve edilemez. Birazyeni 2D deneyleri hücre iskeleti organizasyonu yukarıda belirtilen sakıncaları ve önemli anlayışlar 2,3 gözlenmiştir aşmak için öne sürülmüştür. Bununla birlikte, bu deneyler, hala mevcut ciddi bir sınırlaması hücreleri hücreler 3B yapıların varlığı, in vivo olarak gözlemlenen bir tezat çok yayılmış bir fenotip göstermektedir. Kültür yöntemi ile ilişkili Bu eserler gibi gelişmiş stres lifleri 1,4,5 olmayan fizyolojik özellikleri tetikleyebilir. 2D 6,7 ortamlarda göre üç boyutlu hücre kültürü deneyleri, çok sayıda avantaj sağlar. Onlar fizyolojik daha alakalı ve sonuçlar bu nedenle anlamlıdır. Bir örnek olarak, hidrojeller gömülü hücrelerin 3D-benzeri yapılar gösterir ancak morfolojileri bir 8,9 bir hücreden diğerine farklılık göstermektedir. Bununla birlikte, bunların morfolojileri tarama uygulamaları komplike bir hücreden, farklıdır. Alternatif bir strateji tek gömmektirmicrofabricated boşlukların 10,11 hücreleri. Hücre pozisyon, şekil, polarizasyon ve hücre içi organizasyonu daha sonra normalize olabilir. Hücrelere 3D benzeri mimari sağlamanın yanı sıra, mikro boşluklara da yüksek içerik tarama çalışmaları 10,12-14 için izin verir; tek hücre mikrodiziler ve hücresel organellerine sipariş edilebilir ve değerlendirmelerin paralel gözlenebilir. Bu düzenlilik hücrelerinin sayısının az ve daha iyi uzaysal / zamansal çözünürlükte iyi istatistikler sağlar. Yararlı bileşikler güvenilir tespit etmek daha kolaydır. Bu çalışmada, yüksek içerik tarama uygulamaları 10,12,13 için imalat ve yeni bir 3D benzeri tek hücre kültür sisteminin uygulanmasını göstermektedir. Cihaz elastomerik mikro boşluklara (10 5 boşluklar / cm 2), icat &#39;eggcups&#39; (AK) bir dizi oluşur. Bu çalışmada Ölçüler ve AT toplam hacmi bireysel NIH3T3 ve HeLa hücrelerinde tipik hacmi optimize edilmiştirhücre bölünmesi sırasında. silindirik - - boşlukların Morfoloji etkin işlemlerin görüntülenmesi için gerektiği gibi yönlendirmek hücre şekli seçilir. 15,16 lamel çoğaltma kalıp bir cam üzerine yapıştırılmış ince bir polidimetilsiloksan (PDMS) tabaka üzerine desen AT&#39;nin bir dizi kullanılır. Hücreler santrifüj ile EC tanıtıldı. Biz 2D aynı hücrelerle karşılaştırıldığında burada gözlem ve 3D (EC) hücresel organellere (aktin stres lifleri, golgi aygıtı ve çekirdek) normalleşmesini rapor (düz) uygulanabilir. Biz de böyle bir hücre mitoz 17 sırasında cytokinetic actomyosin halka kapatılması gibi aktif dinamik süreçlerin gözlem raporu. Son olarak, biz böyle tomurcuklanan maya, fisyon maya ve C gibi katı duvarlar, diğer sistemlerde bu yöntemin sonuçlarını göstermek model sistemlerinde geniş bir yelpazede bizim metodoloji uygulanabilirliğini teyit elegans embriyolar. Önümüzdeki ayrıntılı ve kapsamlı p sunmaksırayla rotocol imal ve 3D mikrofabrikasyon için &#39;eggcups&#39; uygulamak. Bizim yaklaşım basittir ve bir temiz oda ihtiyacı yoktur. Biz bu yeni metodoloji Petri yerine de, ilaç tarama deneyleri ve kişiselleştirilmiş tıp için özellikle ilginç olacağını tahmin ediyoruz. Son olarak, cihaz, kanser 18 veya temel araştırma 19, örneğin, dış uyarılara karşı hücre yanıtlarının dağılımı çalışmaları için yararlıdır.

ordering single cells and single embryos in 3d confinement: a new device for high content screening

Biyolojik hücreler genellikle daire (2D) yüzeylerinde görülür. Bu durum fizyolojik değildir ve fenotipleri ve şekiller oldukça değişkendir. Bu tür ortamlarda hücreler dayalı tarama bu nedenle ciddi sınırlamaları vardır: hücre organelleri heterojen ve / veya belirli bir hücre organelleri düzgün görüntülenmiştir olamaz olan aşırı fenotipleri, hücre morfolojileri ve boyutları göstermektedir. Buna ek olarak, in vivo olarak hücreler, bir 3 boyutlu bir ortamda yer alır; Bu durumda, hücreler, esas olarak doku çevreleyen hücre dışı matris ile etkileşimi farklı fenotipleri göstermektedir. Standartlaştırmak ve hücre tabanlı tahlillerde için fizyolojik olarak ilgili 3 boyutlu bir ortamda tek hücre sırasını oluşturmak için, burada in vitro olarak 3D hücre kültürü için bir cihazın mikroüretim ve uygulamalar sunulmaktadır. Bu cihaz, mikro boşlukların üst 2B dizi (tipik olarak 10 5 oyuklar / cm2), tek hücreler ya da embriyolar ile doldurulmuş, her oluşur. hücre poziyon, şekil, polarite ve iç hücre organizasyonu 3D mimarisini gösteren sonra normalize olur. Biz bir lamel üzerine yapıştırılmış ince bir polidimetilsiloksan üzerine &#39;eggcups&#39; (PDMS) katman deseni mikro boşlukların bir dizi çoğaltma kalıp kullanılır. Boşluklar yapışmayı kolaylaştırmak için fibronektin ile örtülmüştür. Hücreler, santrifüj ile sokulmuştur. Dolum yüzdesi% 80&#39;e kadar izin her bir sistem için optimize edilmiştir. Hücreler ve embriyolar canlılığı teyit edildi. Biz çekirdek ve Golgi gibi hücresel organellere, görüntülenmesi için bu yöntemi uygulanır ve bu tür hücre mitoz sırasında cytokinetic halka kapatılması gibi aktif süreçleri incelemek için. Bu cihaz, Golgi ve çekirdek hizalama için cytokinetic halka kapanması ve sıkıştırılmış fenotipleri sırasında bu tür periyodik birikimleri ve miyozin ve aktin homojensizliklerin gibi yeni özellikler, belirlenmesini sağladı. Biz memeli hücrelerinin, fisyon maya, tomurcuklanan maya, C yöntemi ile karakterize elegans wher durumda i&#39;inci özel adaptasyon. Son olarak, bu cihazın özellikleri ilaç tarama tahlillerine ve kişiselleştirilmiş ilaç için özellikle ilginç hale getirir.

&#39;Eggcups&#39; (AK) 3 boyutlu bir ortamda odaklı hücrelerin ve embriyoların görselleştirme sağlayan bir roman içeriği yüksek-tarama yöntemi vardır. Buna ek olarak, standart 2D (düz) kültürlerde gözlemlemek zor olan bazı hücresel süreçler, bu yeni yöntem ile gözlenebilir. Şekil 1a (Bölüm 1, yukarıda tarif edilen protokol da bakınız AT mikrofabrikasyon için prosedürün bir özetini gösterir ). Yöntem 1b Şekil., Basit, hızlı, verimli ve özel ekipman he...

Watch this Scientific Journal Video about Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening at JoVE.com

Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening

Biz hücreleri ve embriyolar incelemek için bir cihaz ve yeni bir yöntem sunulmuştur. Tek hücreler tam microcavity dizileri sıralanır. Onların 3D hapsi fizyolojik koşullarda karşılaşılan 3D ortamlarda yolunda atılmış bir adımdır ve organel yönünü verir. Hücre şekli kontrol ederek, bu kurulum standart deneylerde bildirilen değişkenlik en aza indirir.

Tek Hücreleri ve 3D Sınırlaması Tek Embriyolar Sipariş: Yüksek İçerik Tarama için Yeni Bir Cihaz

Biological cells are usually observed on flat (2D) surfaces. This condition is not physiological, and phenotypes and shapes are highly variable. Screening ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Creating Two-Dimensional Patterned Substrates for Protein and Cell Confinement

Protein ve hücre Etrafının İki Boyutlu Desenli Yüzeyler Oluşturma

Microcontact printing provides a rapid, highly reproducible method for the creation of well-defined patterned substrates.1  While microcontact printing ...

A Microfluidic Chip for the Versatile Chemical Analysis of Single Cells

Tek Hücrelerinin yönlü Kimyasal Analiz için mikroakışkan Chip

We present a microfluidic device that enables the quantitative determination of intracellular biomolecules in multiple single cells in parallel. For this ...

Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Optik cımbız ile Tek RNA Moleküllerin Nanomanipulation

A large portion of the human genome is transcribed but not translated. In this post genomic era, regulatory functions of RNA have been shown to be ...

Cultivation of Mammalian Cells Using a Single-use Pneumatic Bioreactor System

Tek kullanımlık Pnömatik Biyoreaktör Sistemi kullanılarak memeli hücrelerinde yetiştirme

Recent advances in mammalian, insect, and stem cell cultivation and scale-up have created tremendous opportunities for new therapeutics and personalized ...

A Microfluidic Platform for High-throughput Single-cell Isolation and Culture

Yüksek verim Tek hücreli İzolasyonu ve Kültür mikroakışkan Platformu

Studying the heterogeneity of single cells is crucial for many biological questions, but is technically difficult. Thus, there is a need for a simple, yet ...

3D Microtissues for Injectable Regenerative Therapy and High-throughput Drug Screening

Enjekte edilebilir rejeneratif terapi ve yüksek-den geçerek uyuşturucu tarama için 3D Microtissues

To upgrade traditional 2D cell culture to 3D cell culture, we have integrated microfabrication with cryogelation technology to produce macroporous ...

A Protocol for Real-time 3D Single Particle Tracking

Gerçek zamanlı 3D tek parçacık izleme için bir iletişim kuralı

Real-time three-dimensional single particle tracking (RT-3D-SPT) has the potential to shed light on fast, 3D processes in cellular systems. Although ...

Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells

Falcarindiol tarafından insan mezenkimal kök hücre içeren yeni Lipid kaplı nano tanecikleri alımını

Nanoparticles are the focus of an increased interest in drug delivery systems for cancer therapy. Lipid-coated nanoparticles are inspired in structure and ...

Fabrication of Zero Mode Waveguides for High Concentration Single Molecule Microscopy

Yüksek Konsantrasyonlı Tek Moleküllü Mikroskopi için Sıfır Mod Dalga Kılavuzlarının İmalatı

In single molecule fluorescence enzymology, background fluorescence from labeled substrates in solution often limits fluorophore concentration to pico- to ...

Generation of Dynamical Environmental Conditions using a High-Throughput Microfluidic Device

Yüksek Verimli Mikroakışkan Cihaz Kullanarak Dinamik ÇevreSel Koşulların Üretilmesi

Mimicking in vivo environmental conditions is crucial for in vitro studies on complex life machinery. However, current techniques targeting live cells and ...