Name: non-terminal blood sampling techniques in guinea pigs
Uploaded: 2014-10-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs at JoVE.com

Vi anerkender den dygtige bistand fra Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft og animalske pedeller på Institut for Eksperimentel Medicin, Frederiksberg Campus, Det Sundhedsvidenskabelige Fakultet, Københavns Universitet, Danmark. Jacob Lønholdt er takkede for hans fremragende teknisk bistand filme procedurerne. Denne undersøgelse blev støttet delvist af LIFEPHARM Center for in vivo Farmakologi og Københavns Universitet.

De viste procedurer blev udført i henhold til protokoller, der er godkendt af den danske Dyreforsøg inspektorat under Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og Fiskeri. 1. Blodprøvetagning fra Lateral saphenus eller Tarsal Vein <ol><li> Udfør denne procedure uden bedøvelse og med hjælp fra en efterforsker, en håndtering af marsvin, og en opsamling af prøven. </li><li> Barber tarsal region bagbenet med en elektrisk barbermaskine, indtil vener er synlige. Sørg for, at området er stor...

<ol>
	<li>DeOgburn, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increased+dietary+cholesterol+with+carbohydrate+restriction+on+hepatic+lipid+metabolism+in+Guinea+pigs.">Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs.</a> Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).</li><li>Fernandez, M., Volek, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guinea+pigs+a+suitable+animal+model+to+study+lipoprotein+metabolism,+atherosclerosis+and+inflammation.">Guinea pigs a suitable animal model to study lipoprotein metabolism, atherosclerosis and inflammation.</a> Nutr Metab (Lond). 3 (17), (2006).</li><li>Frikke-Schmidt, H., Tveden-Nyborg, P., Birck, M. M., Lykkesfeldt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+dietary+fat+and+cholesterol+exacerbates+chronic+vitamin+C+deficiency+in+guinea+pigs.">High dietary fat and cholesterol exacerbates chronic vitamin C deficiency in guinea pigs.</a> Br J Nutr. 105 (1), 54-61 (2011).</li><li>Hem, A., Smith, A. J., Solberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saphenous+vein+puncture+for+blood+sampling+of+the+mouse,+rat,+hamster,+gerbil,+guinea+pig,+ferret+and+mink.">Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink.</a> Lab Anim. 32 (4), 364-368 (1998).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Guillen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+guidelines+and+recommendations.">FELASA guidelines and recommendations.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (3), 311-321 (2012).</li><li>Ye, P., Cheah, I. K., Halliwell, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+fat+diets+and+pathology+in+the+guinea+pig+Atherosclerosis+or+liver+damage.">High fat diets and pathology in the guinea pig Atherosclerosis or liver damage.</a> Biochim Biophys Acta. 1832 (2), 355-364 (2013).</li><li>Tveden-Nyborg, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+vitamin+C+deficiency+during+pregnancy+persistently+impairs+hippocampal+neurogenesis+in+offspring+of+guinea+pigs.">Maternal vitamin C deficiency during pregnancy persistently impairs hippocampal neurogenesis in offspring of guinea pigs.</a> PLoS One. 7 (10), 12-18391 (2012).</li><li>Schjoldager, J. G., Tveden-Nyborg, P., Lykkesfeldt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+maternal+vitamin+C+deficiency+overrides+preferential+fetal+ascorbate+transport+but+does+not+influence+perinatal+survival+in+guinea+pigs.">Prolonged maternal vitamin C deficiency overrides preferential fetal ascorbate transport but does not influence perinatal survival in guinea pigs.</a> Br J Nutr. 110 (9), 1573-1579 (2013).</li><li>Greulich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretory+products+of+guinea+pig+epicardial+fat+induce+insulin+resistance+and+impair+primary+adult+rat+cardiomyocyte+function.">Secretory products of guinea pig epicardial fat induce insulin resistance and impair primary adult rat cardiomyocyte function.</a> J Cell Mol Med. 15 (11), 2399-2410 (2011).</li><li>Swifka, J., Weiss, J., Addicks, K., Eckel, J., Rosen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epicardial+fat+from+guinea+pig+a+model+to+study+the+paracrine+network+of+interactions+between+epicardial+fat+and+myocardium.">Epicardial fat from guinea pig a model to study the paracrine network of interactions between epicardial fat and myocardium.</a> Cardiovasc Drugs Ther. 22 (2), 107-114 (2008).</li><li>Pilny, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+hematology+of+rodent+species.">Clinical hematology of rodent species.</a> Vet.Clin North Am Exot Anim Pract. 11 (3), 523-vii (2008).</li><li>Franco, N. H., Olsson, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scientists+and+the+3Rs:+attitudes+to+animal+use+in+biomedical+research+and+the+effect+of+mandatory+training+in+laboratory+animal+science.">Scientists and the 3Rs: attitudes to animal use in biomedical research and the effect of mandatory training in laboratory animal science.</a> Lab Anim. 48 (1), 50-60 (2014).</li><li>Van, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=eAssessing+the+application+of+the+3Rs+a+survey+among+animal+welfare+officers+in+The+Netherlands.">eAssessing the application of the 3Rs a survey among animal welfare officers in The Netherlands.</a> Lab Anim. 47 (3), 210-219 (2013).</li><li>Sloan, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+doses+of+ketamine-xylazine+anesthesia+reduce+cardiac+ischemia-reperfusion+injury+in+guinea+pigs.">High doses of ketamine-xylazine anesthesia reduce cardiac ischemia-reperfusion injury in guinea pigs.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (3), 349-354 (2011).</li><li>Jacobson, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+anaesthetic+regimen+for+surgical+procedures+in+guinea+pigs.">A novel anaesthetic regimen for surgical procedures in guinea pigs.</a> Lab Anim. 35 (3), 271-276 (2001).</li><li>Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+hyperglycemia+induced+by+ketamine+xylazine+anesthesia+in+rats+mechanisms+and+implications+for+preclinical+models.">Acute hyperglycemia induced by ketamine xylazine anesthesia in rats mechanisms and implications for preclinical models.</a> Exp Biol Med(Maywood). 230 (10), 777-784 (2005).</li></ol>

Sammenlignet med mus og rotter, marsvin er bange af natur og skal behandles roligt og håndteres korrekt med henblik på at reducere stress. Ud fra et dyrevelfærdsmæssigt synspunkt, der handler med omhu, er naturligvis en prioritet; Dette vil imidlertid også reducere risikoen for angst-effekter på indsamlede data f.eks., øgede blodniveauer af kortikosteroider og glucose 12. Ligeledes vil daglige håndtering vænne dyrene til normale procedurer og kan tjene til at reducere stress yderligere. Prak...

Marsvin er en værdifuld og valideret eksperimentel dyremodel på grund af en række biologiske ligheder til mennesker, såsom et krav om en kosten forsyning af C-vitamin, sammenlignelig plasma lipoprotein enzymer og lipoprotein profiler, samt delte ligheder med menneskelig placentation og prænatal udvikling 1-3,7,8. Dette gør marsvin et attraktivt og velegnet model til at studere virkningerne af kost-associerede sygdomme såsom alkoholfri fedtlever sygdom, hjerte-kar-sygdomme og formodede virkninger af C-vitaminmangel, men også effekten af f.eks., Moderens kostintervention på udviklingslandene afkom. Gentagen blodprøvetagning er ofte nødvendig i både lang og kort sigt, in vivo-undersøgelser. På grund af artsspecifikke anatomiske forskelle er nødvendigt modulation af stikprøveudtagningsteknik for at opnå blodprøver i marsvin sammenlignet med andre gnavermodeller <sup&gt; 4,5. Dette omfatter variation i løbet af vener og arterier, og endvidere, at marsvin ikke har en hale, har således forskellige krav og muligheder for både prøveudtagning og håndtering. Prøveudtagning fra saphenous eller tarsal vene, inducerer minimal ubehag og stress i dyret og ikke kræver anæstesi 3,9. Denne teknik gør det muligt gentagne prøver af små mængder af blod (100-400 pi), f.eks. At bestemme biokemiske markører i plasma. Hvis en endnu mindre stikprøve er tilstrækkelig (50-100 ul), kan dette ganske let opnås ved at punktere ørevene. Denne teknik kan også udføres i bevidste dyr og er nyttige for eksempel ved måling af blodglukose 10,11. Prøveudtagning fra halsvenen muliggør indsamling af større mængder af blod (1-2 ml), men kræver anæstesi. Her præsenterer vi fire forskellige blodprøvetagning teknikker til enten bevidste eller bedøvede marsvin. Procedures er alle ikke-terminale procedurer, forudsat at prøvevolumener og antal prøver ikke overstiger retningslinjer for indsamling af blod i forsøgsdyr 6. Det er af hensyn til god videnskab samt dyrevelfærd, at stress bør holdes på et minimum. Følgelig kan kun veluddannede og kompetent personlig skal udføre procedurerne dyr.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="944">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:295px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:315px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:295px;">Wella (Contura), Denmark</td>
			<td style="width:119px;">273207</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Syringes&#160;</td>
			<td style="width:295px;">B.Braun-Omnifix-F, Germany</td>
			<td style="width:119px;">9161406V</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Needles</td>
			<td style="width:295px;">BD Microlance,Spain</td>
			<td style="width:119px;">301156</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Microvette collection tube&#160;</td>
			<td style="width:295px;">Sarstedt, D-51588N&#252;mbrecht, Germany</td>
			<td style="width:119px;">201,288,100</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Accu-Check analyzer</td>
			<td style="width:295px;">Roche A/S Diagnostics, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Heparin 5000 IE/ml</td>
			<td style="width:295px;">LEO Pharma, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Zoletil 50, Chemvet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Neutral eye ointment</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Gauze or a cotton swab&#160;</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Disinfectant (70% alcohol)</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

non-terminal blood sampling techniques in guinea pigs

Marsvin har flere biologiske ligheder til mennesker og valideres eksperimentelle dyremodeller 1-3. Men brugen af ​​marsvin i øjeblikket udgør et relativt smalt område af forskning og beskrivende data om specifikke metode er tilsvarende knappe. De anatomiske træk af marsvin er lidt forskellig fra andre gnavermodeller dermed modulering af stikprøver at rumme artsspecifikke forskelle, f.eks. Sammenlignet med mus og rotter, er nødvendige for at opnå tilstrækkelige og høj kvalitet prøver. Da både lang og kort sigt in vivo-undersøgelser ofte kræver gentagne blodprøvetagning valg af teknik bør være godt overvejes for at reducere stress og ubehag i dyrene, men også for at sikre overlevelse, samt overholdelse af kravene til stikprøvestørrelse og tilgængelighed. Kan fås venøse blodprøver på en række steder i marsvin f.eks., Saphenous og jugularisvener, hver teknik indeholder både fordele og ulemper 4,5. Her præsenterer vi fire forskellige blodprøvetagning teknikker til enten bevidste eller bedøvede marsvin. Procedurerne er alle ikke-terminale procedurer, forudsat at prøvevolumener og antal prøver ikke overstiger retningslinjer for indsamling af blod i forsøgsdyr 6. Alle de beskrevne metoder er blevet grundigt afprøvet og anvendt til gentagen in vivo blodprøveudtagning i studier inden for vores forskning facilitet.

Fire forskellige tilgange til ikke-terminal in vivo blodprøvetagning teknikker i enten bevidste eller bedøvede marsvin er blevet præsenteret. Figur 1 viser forløbet af den laterale vena og tarsal vene i marsvin og eventuelle punktur. Ørevener synlige på den dorsale overflade af et marsvin øre er illustreret i figur 2. Disse vener kan anvendes til blodprøvetagning, hvor kun en meget lille mængde er påkrævet. Placeringen af forsøgskanin for jugularis blodprøvetagning...

Watch this Scientific Journal Video about Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs at JoVE.com

Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs

Ikke-Terminal blodprøvetagning teknikker i marsvin

Selvom en kendt model, marsvin i øjeblikket udgør en niche i forsøgsdyr videnskaber og begrænsede data om gennemførelsen af ​​de fleste procedurer. Her præsenterer vi fire forskellige tilgange til ikke-terminal in vivo blodprøvetagning teknikker i enten bevidste eller bedøvede marsvin.

Guinea pigs possess several biological similarities to humans and are validated experimental animal models1-3. However, the use of guinea pigs currently ...

Research

JoVE Journal

Biology

Seawater Sampling and Collection

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

Optical Recording of Electrical Activity in Guinea-pig Enteric Networks using Voltage-sensitive Dyes

The enteric nervous system (ENS) is a self-contained network with identified functions, capable of performing complex behaviors in isolation. Its neurons ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

Techniques for the Analysis of Extracellular Vesicles Using Flow Cytometry

Teknikker til analyse af ekstracellulær Vesikler anvendelse af flowcytometri

Extracellular Vesicles (EVs) are small, membrane-derived vesicles found in bodily fluids that are highly involved in cell-cell communication and help ...

Dried Blood Spots - Preparing and Processing for Use in Immunoassays and in Molecular Techniques

Tørrede blod pletter - forberedelse og forarbejdning til brug i immunassays og molekylærbiologiske teknikker

The idea of collecting blood on a paper card and subsequently using the dried blood spots (DBS) for diagnostic purposes originated a century ago. Since ...

Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Blodprøvetagning fra den laterale halevene af Rat

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Gentagen Blodprøvetagning for blodprøver Voksen Zebrafisk

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Micron-scale Phenotyping Techniques of Maize Vascular Bundles Based on X-ray Microcomputed Tomography

Micron-skala fænotyper teknikker af majs kardiovaskulære bundter baseret på X-ray Microcomputed tomografi

It is necessary to accurately quantify the anatomical structures of maize materials based on high-throughput image analysis techniques. Here, we provide a ...