Name: non-terminal blood sampling techniques in guinea pigs
Uploaded: 2014-10-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs at JoVE.com

Vi erkjenner dyktig hjelp av Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft og dyre vaktmester ved Institutt for eksperimentell medisin, Frederiksberg Campus, Fakultet for helse og medisinske basalfag, Universitetet i København, Danmark. Jacob Lønholdt takkes for hans utmerkede teknisk assistanse i filme prosedyrene. Denne studien ble støttet delvis av LIFEPHARM Senter for in vivo Farmakologi og Københavns Universitet.

De viste prosedyrer ble utført i henhold til protokoller som er godkjent av det danske forsøk med dyr Datatilsynet under Ministry of Food, landbruk og fiskeri. 1. Blodprøvetaking fra Lateral saphena eller Tarsal Vein <ol><li> Utfør denne prosedyren uten bedøvelse og ved hjelp av en etterforsker, en håndtering av marsvin, og en innsamling av prøven. </li><li> Barbere tarsal regionen i bakbenet med en barbermaskin til venene er synlige. Sikre at området er stort nok til å unngå pel...

<ol>
	<li>DeOgburn, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increased+dietary+cholesterol+with+carbohydrate+restriction+on+hepatic+lipid+metabolism+in+Guinea+pigs.">Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs.</a> Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).</li><li>Fernandez, M., Volek, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guinea+pigs+a+suitable+animal+model+to+study+lipoprotein+metabolism,+atherosclerosis+and+inflammation.">Guinea pigs a suitable animal model to study lipoprotein metabolism, atherosclerosis and inflammation.</a> Nutr Metab (Lond). 3 (17), (2006).</li><li>Frikke-Schmidt, H., Tveden-Nyborg, P., Birck, M. M., Lykkesfeldt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+dietary+fat+and+cholesterol+exacerbates+chronic+vitamin+C+deficiency+in+guinea+pigs.">High dietary fat and cholesterol exacerbates chronic vitamin C deficiency in guinea pigs.</a> Br J Nutr. 105 (1), 54-61 (2011).</li><li>Hem, A., Smith, A. J., Solberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saphenous+vein+puncture+for+blood+sampling+of+the+mouse,+rat,+hamster,+gerbil,+guinea+pig,+ferret+and+mink.">Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink.</a> Lab Anim. 32 (4), 364-368 (1998).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Guillen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+guidelines+and+recommendations.">FELASA guidelines and recommendations.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (3), 311-321 (2012).</li><li>Ye, P., Cheah, I. K., Halliwell, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+fat+diets+and+pathology+in+the+guinea+pig+Atherosclerosis+or+liver+damage.">High fat diets and pathology in the guinea pig Atherosclerosis or liver damage.</a> Biochim Biophys Acta. 1832 (2), 355-364 (2013).</li><li>Tveden-Nyborg, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+vitamin+C+deficiency+during+pregnancy+persistently+impairs+hippocampal+neurogenesis+in+offspring+of+guinea+pigs.">Maternal vitamin C deficiency during pregnancy persistently impairs hippocampal neurogenesis in offspring of guinea pigs.</a> PLoS One. 7 (10), 12-18391 (2012).</li><li>Schjoldager, J. G., Tveden-Nyborg, P., Lykkesfeldt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+maternal+vitamin+C+deficiency+overrides+preferential+fetal+ascorbate+transport+but+does+not+influence+perinatal+survival+in+guinea+pigs.">Prolonged maternal vitamin C deficiency overrides preferential fetal ascorbate transport but does not influence perinatal survival in guinea pigs.</a> Br J Nutr. 110 (9), 1573-1579 (2013).</li><li>Greulich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretory+products+of+guinea+pig+epicardial+fat+induce+insulin+resistance+and+impair+primary+adult+rat+cardiomyocyte+function.">Secretory products of guinea pig epicardial fat induce insulin resistance and impair primary adult rat cardiomyocyte function.</a> J Cell Mol Med. 15 (11), 2399-2410 (2011).</li><li>Swifka, J., Weiss, J., Addicks, K., Eckel, J., Rosen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epicardial+fat+from+guinea+pig+a+model+to+study+the+paracrine+network+of+interactions+between+epicardial+fat+and+myocardium.">Epicardial fat from guinea pig a model to study the paracrine network of interactions between epicardial fat and myocardium.</a> Cardiovasc Drugs Ther. 22 (2), 107-114 (2008).</li><li>Pilny, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+hematology+of+rodent+species.">Clinical hematology of rodent species.</a> Vet.Clin North Am Exot Anim Pract. 11 (3), 523-vii (2008).</li><li>Franco, N. H., Olsson, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scientists+and+the+3Rs:+attitudes+to+animal+use+in+biomedical+research+and+the+effect+of+mandatory+training+in+laboratory+animal+science.">Scientists and the 3Rs: attitudes to animal use in biomedical research and the effect of mandatory training in laboratory animal science.</a> Lab Anim. 48 (1), 50-60 (2014).</li><li>Van, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=eAssessing+the+application+of+the+3Rs+a+survey+among+animal+welfare+officers+in+The+Netherlands.">eAssessing the application of the 3Rs a survey among animal welfare officers in The Netherlands.</a> Lab Anim. 47 (3), 210-219 (2013).</li><li>Sloan, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+doses+of+ketamine-xylazine+anesthesia+reduce+cardiac+ischemia-reperfusion+injury+in+guinea+pigs.">High doses of ketamine-xylazine anesthesia reduce cardiac ischemia-reperfusion injury in guinea pigs.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (3), 349-354 (2011).</li><li>Jacobson, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+anaesthetic+regimen+for+surgical+procedures+in+guinea+pigs.">A novel anaesthetic regimen for surgical procedures in guinea pigs.</a> Lab Anim. 35 (3), 271-276 (2001).</li><li>Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+hyperglycemia+induced+by+ketamine+xylazine+anesthesia+in+rats+mechanisms+and+implications+for+preclinical+models.">Acute hyperglycemia induced by ketamine xylazine anesthesia in rats mechanisms and implications for preclinical models.</a> Exp Biol Med(Maywood). 230 (10), 777-784 (2005).</li></ol>

Sammenlignet med mus og rotter, marsvin er engstelig av natur og må nærmet rolig og håndteres på riktig måte for å redusere stress. Fra et dyrevelferd synspunkt, opptrer med forsiktighet er naturligvis en prioritet; men dette vil også redusere risikoen for angstassosierte effekter på de innsamlede data, f.eks., økte blodnivåer av kortikosteroider og glukose 12.. Likeledes vil daglige håndtering tilvenne dyrene til normale prosedyrer og kan tjene til å redusere stress ytterligere. Praktisk...

Marsvin er en verdifull og validert eksperimentell dyremodell på grunn av en rekke biologiske likheter med mennesker slik som et krav for et diett-tilførsel av vitamin C, tilsvar plasma lipoprotein metaboliserende enzymer og lipoproteinprofiler, samt felles likheter med human og placentation prenatal utvikling 1-3,7,8. Dette gjør marsvin en attraktiv og egnet modell for å studere effektene av diettrelaterte sykdommer slik som ikke-alkoholholdige fettleversykdom, kardiovaskulære sykdommer og mulige effekter av vitamin C-mangel, men også virkningen av f.eks. Maternal kost inngrep på utvikling avkom. Gjentatte blodprøvetaking er ofte nødvendig i både lang og kort sikt in vivo studier. Med hensyn til det artsspesifikke anatomiske forskjeller modulering av prøvetagningsteknikk er nødvendig for å oppnå blodprøver hos marsvin sammenlignet med andre gnagermodeller <sup&gt; 4,5. Dette inkluderer variasjon i løpet av vener og arterier, og også at marsvin ikke har en hale, og dermed har forskjellige krav og muligheter for både prøvetaking og håndtering. Prøvetaking fra saphena eller tarsal vene, induserer minimalt ubehag og stress i dyret, og krever ikke anestesi 3,9. Denne teknikken gjør det mulig gjentatte prøver av små mengder av blod (100-400 pl), f.eks. For å bestemme de biokjemiske markørene i plasma. Ved en enda mindre prøvestørrelsen er tilstrekkelig (50-100 ul), kan dette ganske enkelt oppnås ved punktering ørevenen. Denne teknikken kan også bli utført i bevisste dyr og er nyttige for eksempel ved måling av blodglukose 10,11. Prøvetaking fra vena jugularis tillater innsamling av større mengder av blod (1-2 ml), men krever anestesi. Her presenterer vi fire forskjellige blodprøvetaking teknikker for enten bevisst eller bedøvede marsvin. Procedures er alle ikke-terminal prosedyrer gitt at prøvevolumer og antall prøver ikke overstiger retningslinjer for blodprøvetaking hos forsøksdyr seks. Det er av hensyn til god vitenskap samt dyrevelferd at stress bør holdes på et minimum. Dermed kan bare godt trente og kompetente personlige bør utføre dyre prosedyrer.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="944">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:295px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:315px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:295px;">Wella (Contura), Denmark</td>
			<td style="width:119px;">273207</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Syringes&#160;</td>
			<td style="width:295px;">B.Braun-Omnifix-F, Germany</td>
			<td style="width:119px;">9161406V</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Needles</td>
			<td style="width:295px;">BD Microlance,Spain</td>
			<td style="width:119px;">301156</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Microvette collection tube&#160;</td>
			<td style="width:295px;">Sarstedt, D-51588N&#252;mbrecht, Germany</td>
			<td style="width:119px;">201,288,100</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Accu-Check analyzer</td>
			<td style="width:295px;">Roche A/S Diagnostics, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Heparin 5000 IE/ml</td>
			<td style="width:295px;">LEO Pharma, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Zoletil 50, Chemvet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Neutral eye ointment</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Gauze or a cotton swab&#160;</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Disinfectant (70% alcohol)</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

non-terminal blood sampling techniques in guinea pigs

Marsvin har flere biologiske likheter med mennesker, og er validert eksperimentelle dyremodeller 1-3. Imidlertid representerer bruk av marsvin i dag et relativt smalt område for forskning og beskrivende data om spesifikke metode er tilsvarende begrenset. De anatomiske trekk av marsvin er litt forskjellig fra andre gnagere modeller, derav modulering av sampling teknikker for å tilrettelegge for artsspesifikke forskjeller, f.eks. Mot mus og rotter, er nødvendig for å oppnå tilstrekkelig og høy kvalitet prøver. Som både lang og kort sikt in vivo studier ofte krever gjentatt blod prøvetaking valg av teknikk bør være godt vurderes for å redusere stress og ubehag for dyrene, men også for å sikre overlevelse samt etterlevelse av kravene i utvalgsstørrelse og tilgjengelighet. Venøse blodprøver kan fås på en rekke steder i marsvin f.eks., Saphenous og venavener, hver teknikk som inneholder både fordeler og ulemper 4,5. Her presenterer vi fire forskjellige blodprøvetaking teknikker for enten bevisst eller bedøvede marsvin. Prosedyrene er alle ikke-terminal prosedyrer gitt at prøvevolumer og antall prøver ikke overstiger retningslinjer for blodprøvetaking hos forsøksdyr seks. Alle de beskrevne metodene har blitt grundig testet og anvendt for gjentatt in vivo blodprøvetaking av studier innenfor vår forskning anlegget.

Fire ulike tilnærminger til ikke-terminal in vivo blodprøvetaking teknikker i enten bevisst eller bedøvede marsvin har blitt presentert. Figur 1 illustrerer løpet av lateral saphena og tarsal blodåre i marsvin og mulige injeksjonssteder. Øret vener synlige på den dorsale overflate av et marsvin øret er illustrert i figur 2. Disse årer kan benyttes ved blodprøvetaking når bare en meget lite volum kreves. Posisjonen til marsvin for jugular blodprøvetaking er viser i <...

Watch this Scientific Journal Video about Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs at JoVE.com

Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs

Non-Terminal blodprøvetaking Teknikker i Guinea Pigs

Selv om en kjent modell, representerer marsvin for tiden en nisje i eksperimentelle dyre vitenskaper og begrenset informasjon er tilgjengelig for utførelse av de fleste fremgangsmåter. Her presenterer vi fire forskjellige tilnærminger til ikke-terminal in vivo blodprøvetaking teknikker i enten bevisst eller bedøvede marsvin.

Guinea pigs possess several biological similarities to humans and are validated experimental animal models1-3. However, the use of guinea pigs currently ...

Research

JoVE Journal

Biology

Seawater Sampling and Collection

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

Optical Recording of Electrical Activity in Guinea-pig Enteric Networks using Voltage-sensitive Dyes

The enteric nervous system (ENS) is a self-contained network with identified functions, capable of performing complex behaviors in isolation. Its neurons ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

Techniques for the Analysis of Extracellular Vesicles Using Flow Cytometry

Teknikker for analyse av Ekstracellulær Blemmer ved hjelp av flowcytometri

Extracellular Vesicles (EVs) are small, membrane-derived vesicles found in bodily fluids that are highly involved in cell-cell communication and help ...

Dried Blood Spots - Preparing and Processing for Use in Immunoassays and in Molecular Techniques

Tørket blod flekker - forbereder og behandling for bruk i immunanalyser og i molekylær teknikker

The idea of collecting blood on a paper card and subsequently using the dried blood spots (DBS) for diagnostic purposes originated a century ago. Since ...

Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Prøvetaking Blod fra Lateral Tail Vein of the Rat

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Gjentatte Blodprøvetaking for blodprøver Adult Sebrafisk

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Micron-scale Phenotyping Techniques of Maize Vascular Bundles Based on X-ray Microcomputed Tomography

Micron skala Phenotyping teknikker av mais vaskulær pakker basert på X-ray Microcomputed tomografi

It is necessary to accurately quantify the anatomical structures of maize materials based on high-throughput image analysis techniques. Here, we provide a ...