Name: non-terminal blood sampling techniques in guinea pigs
Uploaded: 2014-10-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs at JoVE.com

Vi erkänner skicklig hjälp av Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft och djur vaktmästare vid institutionen för experimentell medicin, Frederiksberg Campus, Fakulteten för Hälsa och medicinska vetenskaper, Köpenhamns universitet, Danmark. Jacob Lønholdt är tackade för hans utmärkta tekniskt bistånd filma förfarandena. Denna studie stöddes delvis av LIFEPHARM Centrum för in vivo farmakologi och Köpenhamns universitet.

De förfaranden som visas utfördes enligt protokoll som godkänts av den danska djurförsöksInspektionen under ministeriet för livsmedel, jordbruk och fiske. 1 Blodprovstagning från Lateral Saphenous eller Tarsal Vein <ol><li> Utför denna procedur utan bedövning och med hjälp av en utredare, en hantering av marsvin, och en insamling av provet. </li><li> Raka böjd regionen i bakbenet med en elektrisk rakapparat tills venerna syns. Se till att området är tillräckligt stort för at...

<ol>
	<li>DeOgburn, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increased+dietary+cholesterol+with+carbohydrate+restriction+on+hepatic+lipid+metabolism+in+Guinea+pigs.">Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs.</a> Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).</li><li>Fernandez, M., Volek, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guinea+pigs+a+suitable+animal+model+to+study+lipoprotein+metabolism,+atherosclerosis+and+inflammation.">Guinea pigs a suitable animal model to study lipoprotein metabolism, atherosclerosis and inflammation.</a> Nutr Metab (Lond). 3 (17), (2006).</li><li>Frikke-Schmidt, H., Tveden-Nyborg, P., Birck, M. M., Lykkesfeldt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+dietary+fat+and+cholesterol+exacerbates+chronic+vitamin+C+deficiency+in+guinea+pigs.">High dietary fat and cholesterol exacerbates chronic vitamin C deficiency in guinea pigs.</a> Br J Nutr. 105 (1), 54-61 (2011).</li><li>Hem, A., Smith, A. J., Solberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saphenous+vein+puncture+for+blood+sampling+of+the+mouse,+rat,+hamster,+gerbil,+guinea+pig,+ferret+and+mink.">Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink.</a> Lab Anim. 32 (4), 364-368 (1998).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Guillen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+guidelines+and+recommendations.">FELASA guidelines and recommendations.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (3), 311-321 (2012).</li><li>Ye, P., Cheah, I. K., Halliwell, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+fat+diets+and+pathology+in+the+guinea+pig+Atherosclerosis+or+liver+damage.">High fat diets and pathology in the guinea pig Atherosclerosis or liver damage.</a> Biochim Biophys Acta. 1832 (2), 355-364 (2013).</li><li>Tveden-Nyborg, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+vitamin+C+deficiency+during+pregnancy+persistently+impairs+hippocampal+neurogenesis+in+offspring+of+guinea+pigs.">Maternal vitamin C deficiency during pregnancy persistently impairs hippocampal neurogenesis in offspring of guinea pigs.</a> PLoS One. 7 (10), 12-18391 (2012).</li><li>Schjoldager, J. G., Tveden-Nyborg, P., Lykkesfeldt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prolonged+maternal+vitamin+C+deficiency+overrides+preferential+fetal+ascorbate+transport+but+does+not+influence+perinatal+survival+in+guinea+pigs.">Prolonged maternal vitamin C deficiency overrides preferential fetal ascorbate transport but does not influence perinatal survival in guinea pigs.</a> Br J Nutr. 110 (9), 1573-1579 (2013).</li><li>Greulich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretory+products+of+guinea+pig+epicardial+fat+induce+insulin+resistance+and+impair+primary+adult+rat+cardiomyocyte+function.">Secretory products of guinea pig epicardial fat induce insulin resistance and impair primary adult rat cardiomyocyte function.</a> J Cell Mol Med. 15 (11), 2399-2410 (2011).</li><li>Swifka, J., Weiss, J., Addicks, K., Eckel, J., Rosen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epicardial+fat+from+guinea+pig+a+model+to+study+the+paracrine+network+of+interactions+between+epicardial+fat+and+myocardium.">Epicardial fat from guinea pig a model to study the paracrine network of interactions between epicardial fat and myocardium.</a> Cardiovasc Drugs Ther. 22 (2), 107-114 (2008).</li><li>Pilny, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+hematology+of+rodent+species.">Clinical hematology of rodent species.</a> Vet.Clin North Am Exot Anim Pract. 11 (3), 523-vii (2008).</li><li>Franco, N. H., Olsson, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scientists+and+the+3Rs:+attitudes+to+animal+use+in+biomedical+research+and+the+effect+of+mandatory+training+in+laboratory+animal+science.">Scientists and the 3Rs: attitudes to animal use in biomedical research and the effect of mandatory training in laboratory animal science.</a> Lab Anim. 48 (1), 50-60 (2014).</li><li>Van, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=eAssessing+the+application+of+the+3Rs+a+survey+among+animal+welfare+officers+in+The+Netherlands.">eAssessing the application of the 3Rs a survey among animal welfare officers in The Netherlands.</a> Lab Anim. 47 (3), 210-219 (2013).</li><li>Sloan, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+doses+of+ketamine-xylazine+anesthesia+reduce+cardiac+ischemia-reperfusion+injury+in+guinea+pigs.">High doses of ketamine-xylazine anesthesia reduce cardiac ischemia-reperfusion injury in guinea pigs.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (3), 349-354 (2011).</li><li>Jacobson, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+anaesthetic+regimen+for+surgical+procedures+in+guinea+pigs.">A novel anaesthetic regimen for surgical procedures in guinea pigs.</a> Lab Anim. 35 (3), 271-276 (2001).</li><li>Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+hyperglycemia+induced+by+ketamine+xylazine+anesthesia+in+rats+mechanisms+and+implications+for+preclinical+models.">Acute hyperglycemia induced by ketamine xylazine anesthesia in rats mechanisms and implications for preclinical models.</a> Exp Biol Med(Maywood). 230 (10), 777-784 (2005).</li></ol>

Jämfört med möss och råttor, marsvin är rädda av naturen och måste närma sig lugnt och hanteras på rätt sätt för att minska stress. Ur djurskyddssynpunkt, båda med omsorg är naturligtvis en prioritering; Men kommer detta också att minska risken för ångestrelaterade effekter på insamlade data t ex., förhöjda blodnivåer av kortikosteroider och glukos 12. På samma sätt kommer daglig hantering vänja djuren till normala rutiner och kan tjäna till att minska stressen ytterligare. P...

Den marsvin är en värdefull och validerad experimentell djurmodell på grund av ett antal biologiska likheter med människan, såsom ett krav på kost tillförsel av C-vitamin, jämförbar plasma lipoprotein enzymer och lipoprotein profiler, samt delade likheter med människans placentation och prenatal utveckling 1-3,7,8. Detta gör marsvin en attraktiv och lämplig modell för att studera effekter av kost-associerade sjukdomar såsom alkoholfri fettlever, hjärt-kärlsjukdomar och förmodade effekter av C-vitaminbrist, men också effekten av t ex., Maternal dietary intervention på utvecklings avkomma. Upprepad provtagning blod krävs ofta både lång och kort sikt in vivo-studier. På grund av artspecifika anatomiska skillnader modulering av provtagningsteknik som är nödvändigt för att erhålla blodprover hos marsvin jämfört med andra gnagarmodeller <sup&gt; 4,5. Detta innefattar variation i loppet av vener och artärer, och även att marsvin inte har en svans, sålunda har olika krav och alternativ för både provtagning och hantering. Provtagning från vena eller tarsala ven, inducerar minsta möjliga obehag och stress hos djuret och inte kräver anestesi 3,9. Denna teknik medger upprepade prov av små mängder blod (100-400 | il), t ex., För att bestämma biokemiska markörer i plasma. Om en ännu mindre provstorleken är tillräcklig (50-100 | il), kan detta helt enkelt erhållas genom att punktera örvenen. Denna teknik kan även utföras i medvetna djur och är användbart till exempel vid mätning av blodglukos 10,11. Provtagning från jugularvenen möjliggör insamling av större mängder blod (1-2 ml) men kräver narkos. Här presenterar vi fyra olika blodprovtagningsmetoder för antingen medvetna eller sövda marsvin. Den procedures är alla icke-terminalförfaranden under förutsättning att provvolymer och antal prover inte överstiger riktlinjer för blodinsamling i försöksdjur 6. Det är av intresse för god vetenskap samt för djurens välbefinnande att stress bör hållas till ett minimum. Följaktligen kan endast välutbildad och kompetent personal bör utföra djurförsök.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="944">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:295px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:315px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:295px;">Wella (Contura), Denmark</td>
			<td style="width:119px;">273207</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Syringes&#160;</td>
			<td style="width:295px;">B.Braun-Omnifix-F, Germany</td>
			<td style="width:119px;">9161406V</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Needles</td>
			<td style="width:295px;">BD Microlance,Spain</td>
			<td style="width:119px;">301156</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Microvette collection tube&#160;</td>
			<td style="width:295px;">Sarstedt, D-51588N&#252;mbrecht, Germany</td>
			<td style="width:119px;">201,288,100</td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Accu-Check analyzer</td>
			<td style="width:295px;">Roche A/S Diagnostics, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Heparin 5000 IE/ml</td>
			<td style="width:295px;">LEO Pharma, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Zoletil 50, Chemvet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Anesthesia</td>
			<td style="width:295px;">Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Neutral eye ointment</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Gauze or a cotton swab&#160;</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Disinfectant (70% alcohol)</td>
			<td style="width:295px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Alternative product may be used. Multiple suppliers</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

non-terminal blood sampling techniques in guinea pigs

Marsvin har flera biologiska likheter med människor och valideras experimentella djurmodeller 1-3. Däremot representerar användningen av marsvin för närvarande ett relativt smalt område av forskning och beskrivande data om särskild metod är på motsvarande knapp. De anatomiska funktioner i marsvin skiljer sig något från andra djurmodeller, därav modulering av urvalsmetoder för att rymma för artspecifika skillnader, t ex., Jämfört med möss och råttor, är nödvändiga för att få tillräckliga och högkvalitativa prover. Eftersom både lång och kort sikt in vivo-studier ofta kräver upprepade blodprover valet av teknik bör vara väl övervägas för att minska stress och obehag i djuren utan också för att säkerställa överlevnaden och överensstämmelse med kraven i provstorlek och tillgänglighet. Venblodprover kan erhållas från ett antal platser i marsvin t.ex.., Vena och halsvenenvener, varje teknik som innehåller både fördelar och nackdelar 4,5. Här presenterar vi fyra olika blodprovtagningsmetoder för antingen medvetna eller sövda marsvin. Procedurerna är alla icke-terminalförfaranden under förutsättning att provvolymer och antal prover inte överstiger riktlinjer för blodinsamling i försöksdjur 6. Alla de beskrivna metoderna är noggrant testade och tillämpas för upprepad in vivo provtagning blod i studier inom vår forskningsanläggning.

Fyra olika sätt att icke-terminala in vivo blodprovtagningstekniker i antingen medvetna eller sövda marsvin har presenterats. Figur 1 illustrerar loppet av den laterala vena och böjd ven i marsvin och möjliga injektionsställen. Öron vener synliga på den övre delen av ett marsvin öra illustreras i figur 2 Dessa vener kan användas för blodprovstagning då krävs endast en mycket liten volym. Placeringen av marsvin för jugular blodprov är show i figur 3.</stro...

Watch this Scientific Journal Video about Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs at JoVE.com

Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs

Icke Terminal Blood Provtagningstekniker i marsvin

Även en känd modell, representerar marsvin närvarande en nisch i försöksdjursvetenskap och begränsade data finns tillgängliga för utförandet av de flesta förfaranden. Här presenterar vi fyra olika metoder för icke-terminal in vivo blodprovtagningsmetoder i antingen medvetna eller sövda marsvin.

Guinea pigs possess several biological similarities to humans and are validated experimental animal models1-3. However, the use of guinea pigs currently ...

Research

JoVE Journal

Biology

Seawater Sampling and Collection

Havsvatten Provtagning och insamling

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

Optical Recording of Electrical Activity in Guinea-pig Enteric Networks using Voltage-sensitive Dyes

Optisk Registrering av elektrisk aktivitet i marsvin Enteric Nätverk som använder spänningskänsliga Färgämnen

The enteric nervous system (ENS) is a self-contained network with identified functions, capable of performing complex behaviors in isolation. Its neurons ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Tekniker för Imaging Ca 2 + Signalering i mänskliga spermier

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp och tekniker perfusion för att studera jonkanaler Uttryckt i Xenopus Oocyter

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Isolation and Culture of Pulmonary Endothelial Cells from Neonatal Mice

Isolering och odling av pulmonell endotelceller från neonatala möss

Endothelial cells provide a useful research model in many areas of vascular biology. Since its first isolation 1, human umbilical vein endothelial cells ...

Techniques for the Analysis of Extracellular Vesicles Using Flow Cytometry

Tekniker för analys av extracellulärt Blåsor Använda flödescytometri

Extracellular Vesicles (EVs) are small, membrane-derived vesicles found in bodily fluids that are highly involved in cell-cell communication and help ...

Dried Blood Spots - Preparing and Processing for Use in Immunoassays and in Molecular Techniques

Torkat blod fläckar - förberedelse och bearbetning för användning i immunoanalyser och molekylärbiologiska metoder

The idea of collecting blood on a paper card and subsequently using the dried blood spots (DBS) for diagnostic purposes originated a century ago. Since ...

Sampling Blood from the Lateral Tail Vein of the Rat

Provtagning Blod från den laterala svansvenen av Rat

Blood samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure targets of interest, including hormones, immune factors, growth factors, ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

Upprepad Blood Collection för Blodprov i vuxen Zebrafish

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...

Micron-scale Phenotyping Techniques of Maize Vascular Bundles Based on X-ray Microcomputed Tomography

Micron-skala fenotypning tekniker för majs kärlknippena baserat på röntgen Microcomputed tomografi

It is necessary to accurately quantify the anatomical structures of maize materials based on high-throughput image analysis techniques. Here, we provide a ...