Name: real time analysis of metabolic profile in ex vivo mouse intestinal crypt organoid cultures
Uploaded: 2014-11-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Real Time Analysis of Metabolic Profile in Ex Vivo Mouse Intestinal Crypt Organoid Cultures at JoVE.com

Denne undersøgelse blev støttet af tilskud RO1 CA 135.561, R01 CA151494, R01 CA174432 og P3013330 fra National Institutes of Health. Vi vil gerne takke Michele Houston, Elena Dhima og Dr. Anna Velcich for deres værdifulde kommentarer i udviklingen krypten isolation protokollen. Vi takker også Diabetes Uddannelse og Research Center for Albert Einstein College of Medicine støttet af NIH P60DK20541, og Dr. Michael Brownlee og Dr. Xue-Liang Du, der leder og driver Seahorse facilitet hhv.

Denne undersøgelse blev udført i overensstemmelse med anbefalingerne i vejledningen til pleje og anvendelse af forsøgsdyr af National Institutes of Health. Protokollen blev godkendt af Udvalget om den etiske dyreforsøg af Albert Einstein College of Medicine. 1. Crypt Isolering og Kultur <ol><li> Isolering af Cryptocoryner fra tyndtarmen: <ol><li> Isoler tarm krypter fra enhver mus model af interesse. Aflive mus med CO 2 efterfulgt af cervikal dislokation. </li><li> Åbne mav...

<ol>
	<li>Jemal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> CA Cancer J Clin. 58, 71-96 (2008).</li><li>Slattery, M. L., Boucher, K. M., Caan, B. J., Potter, J. D., Ma, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eating+patterns+and+risk+of+colon+cancer.">Eating patterns and risk of colon cancer.</a> Am J Epidemiol. 148, 4-16 (1998).</li><li>Warburg, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+origin+of+cancer+cells.">On the origin of cancer cells.</a> Science. 123, 309-314 (1956).</li><li>Coles, N. W., Johnstone, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamine+metabolism+in+Ehrlich+ascites-carcinoma+cells.">Glutamine metabolism in Ehrlich ascites-carcinoma cells.</a> Biochem J. 83, 284-291 (1962).</li><li>Medina, M. A., Castro I, N. u. n. e. z. d. e. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutaminolysis+and+glycolysis+interactions+in+proliferant+cells.">Glutaminolysis and glycolysis interactions in proliferant cells.</a> Int J Biochem. 22, 681-683 (1990).</li><li>Anso, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+changes+in+cancer+cells+upon+suppression+of+MYC.">Metabolic changes in cancer cells upon suppression of MYC.</a> Cancer Metab. 1, 7 (2013).</li><li>Malmgren, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinate+changes+in+histone+modifications,+mRNA+levels,+and+metabolite+profiles+in+clonal+INS-1+832/13+&#946;-cells+accompany+functional+adaptations+to+lipotoxicity.">Coordinate changes in histone modifications, mRNA levels, and metabolite profiles in clonal INS-1 832/13 &#946;-cells accompany functional adaptations to lipotoxicity.</a> J Biol Chem. 288 (17), 11973-11987 (2013).</li><li>Whitehead, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+conditionally+immortalized+epithelial+cell+lines+from+both+colon+and+small+intestine+of+adult+H-2Kb-tsA58+transgenic+mice.">Establishment of conditionally immortalized epithelial cell lines from both colon and small intestine of adult H-2Kb-tsA58 transgenic mice.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 90 (2), 587-591 (1993).</li><li>Roig, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immortalized+epithelial+cells+derived+from+human+colon+biopsies+express+stem+cell+markers+and+differentiate+in+vitro.">Immortalized epithelial cells derived from human colon biopsies express stem cell markers and differentiate in vitro.</a> Gastroenterology. 138 (3), 1012-1021 (2010).</li><li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+LGR5+stem+cells+build+crypt-villus+structures+in+vitro+without+a+mesenchymal+niche.">Single LGR5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.</a> Nature. 459, 262-265 (2009).</li><li>Sato, T., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growing+self-organizing+mini-guts+from+a+single+intestinal+stem+cell:+mechanism+and+applications.">Growing self-organizing mini-guts from a single intestinal stem cell: mechanism and applications.</a> Science. 340, 1190-1194 (2013).</li><li>Yilmaz, O. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=mTORC1+in+the+Paneth+cell+niche+couples+intestinal+stem-cell+function+to+calorie+intake.">mTORC1 in the Paneth cell niche couples intestinal stem-cell function to calorie intake.</a> Nature. 486, 490-495 (2012).</li></ol>

Vi testede oxygenforbrugshastigheden (OCR) og den ekstracellulære forsuringshastighed (ECAR) af krypter isoleret fra 8-måneder gamle mus og dyrkes i organoids ex vivo. Efter måling af basal rate blev crypt metabolisme evalueret ved tilsætning oligomycin, carbonyl cyanid -p-trifluoromethoxyphenylhydrazone (FCCP) og rotenon sekventielt. Basal OCR og basal ECAR blev registreret 0-29 min (figur 2A og 2B). På 29. min blev oligomycin (fra ...

Colorectal cancer (CRC) er den tredje hyppigste årsag til cancer-relaterede dødsfald i USA. Sporadisk tyktarmskræft - nemlig at der opstår senere i livet (&gt; 50 år), og uden klare disponerende genetiske faktorer - tegner sig for ca. 80% af alle tilfælde, med forekomsten stærkt påvirket af langsigtede kostvaner 1,2. Disse tumorer udviser en metabolisk skift i retning af afhængighed af oxidativ glycolysen, kendt som Warburg virkning, hvilket delvist kan gøre højere koncentrationer af cellulære byggesten og energi til rådighed (gennem glutaminolysis) for at tillade og måske køre høje tumorcelleproliferation 3-5 . Undersøgelser af tyktarmskræft samt andre gastrointestinale cancerformer, herunder tyndtarmen kræft giver vigtig indsigt i årsagen til tumor formation. Undersøge metaboliske forskelle mellem normale, pro-tumorigene og tumorigene tilstande af gastrointestinale organsystemer kan bistå itermination af relativ risiko for tumor udvikling samt tidlig påvisning af neoplasi. Desuden vil forstå bioenergetic metabolisme involverer mitokondrie respiration og glykolyse give grundlæggende indsigt i, hvordan celle fysiologi, aldring og sygdom tilstand forstyrrer tarm homøostase. Udnyttelse af bioenergetik assay teknologi til ekstracellulær flux analyse kan vurdere satserne for mitokondrie respiration og glykolyse samtidigt i celler, der vokser i kultur i realtid 6,7. Indtil for nylig var in vitro studier af tyndtarmen begrænset til cellelinier afledt fra enten godartede eller ondartede svulster 8,9 og ikke repræsenterer fysiologi af normale tarm epitel og indflydelse mikromiljø, hvor de bor. I 2009 Sato et al. 10 indført en ex vivo kultur system til at vokse tre-dimensionelle (3D) mus tarmepitelceller organoids eller epithelial &quot;mini-indvolde&quot;, der er egnede til forsøg, diagnostiske og terapeutiske undersøgelser 10,11. Desuden krypter isoleret fra calorically begrænset mus opretholde deres ændrede vækstegenskaber som organoids i sådanne kulturer 12. Sammenlignet med transformerede cellelinier kan krypt organoide kulturer anvendes til at frembringe fysiologisk relevante data, der udgør en langt bedre model for at forstå in vivo tilstand. Vi har tilpasset bioenergetik analyse teknologi til analyse energiomsætning af intestinale krypt organoids. Mus tarm krypt organoids blev dyrket ex vivo til at udvikle de krypt organoide energi metabolismeundersøgelser præsenteret. Oxygenforbrugshastigheden (OCR) og den ekstracellulære forsuringshastighed (ECAR) af krypt organoids blev målt i fravær og nærvær af to forskellige metaboliske inhibitorer (oligomycin, rotenon) og en ion bærer (carbonyl cyanid-p-trifluoromethoxyphenylhydrazone). Krypten organoid metaboliske reaktion på disse kemiske forbindelser lykkedes afspejlet gennem skiftende ECAR og OCR-værdier. Cellular bioenergetic studier vil belyse de gensidige interaktioner mellem metabolisk tilstand og risiko for sygdom og fænotype i kræft, fedme, diabetes, stofskiftesygdomme og mitokondriesygdomme og hjælpe forskud screeningsmetoder med direkte følger for translationel medicin. Her beskriver vi en detaljeret protokol til at isolere tyndtarmens krypter og kultur krypt organoids. Derudover introducerer vi en ny metode til at bruge krypt organoide kulturer for metaboliske assays.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1633">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">BD Matrigel Basement Membrane Matrix, GFR, Phenol Red-free, LDEV-free</td>
			<td style="width:229px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:135px;">356231</td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">PBS (phosphate buffered saline), no magnesium, no calcium, pH 7.2</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">20012-027</td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Advanced DMEM/F-12 (1X)</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">12634-028</td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Dulbecco&#8242;s Modified Eagle&#8242;s Medium without glucose, L-glutamine, Phenol Red, sodium pyruvate and sodium bicarbonate</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">D5030</td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Phenol Red sodium salt&#160;</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">P4758</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 15 mg / L in DMEM (D5030) - step 2.2.2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Antibiotic-Antimycotic, 100X, 100ml</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">15240-062&#160;</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 X or 2 X</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Penicilin-Streptomycin, liquid</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">15140-122</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 X</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Gibco&#174; GlutaMAX&#8482; supplement</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">35050061</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 X</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Gibco&#174; HEPES (N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethane sulfonic acid), 1 M</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">15630-080</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 10 mM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">N-Acetyl-L-Cysteine, 25g</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">A9165-25G</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 mM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">100X N-2 supplement, liquid</td>
			<td style="width:229px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:135px;">17502-048</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 X</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">50X B-27&#174; supplement minus Vitamin A, liquid</td>
			<td style="width:229px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:135px;">12587-010</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 X</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Recombinant Mouse R-Spondin 1, CF, 50ug</td>
			<td style="width:229px;">R&#38;D Systems</td>
			<td style="width:135px;">3474-RS-050&#160;</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 500 ng / mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Recombinant Murine EGF, 100ug&#160;</td>
			<td style="width:229px;">Peprotech</td>
			<td style="width:135px;">315-09&#160;</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 50 ng / mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Recombinant Murine Noggin, 20ug&#160;</td>
			<td style="width:229px;">Peprotech</td>
			<td style="width:135px;">250-38</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 100 ng / mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Gibco&#174; L-glutamine, 200 mM</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">25030-081</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 2 mM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Gibco&#174; Glucose powder</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">15023-021</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 5 mM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Ambion&#174; 0.5 M EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid), pH 8.0</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">AM9260G</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 3 mM for step 1.1.5; 2 mM for step 1.1.8&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">DTT (Dithiothreitol), 1M</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">P2325</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 3 mM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Albumin from bovine serum (BSA)</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">A2058</td>
			<td style="width:456px;">0.1 % in PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">16000-044</td>
			<td style="width:456px;">1 % in PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Recovery&#8482; Cell Culture Freezing Medium</td>
			<td style="width:229px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:135px;">12648-010</td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">ROCK inhibitor (Y-27632)&#160;</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">Y0503</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 10 &#181;M</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Oligomycin</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">O4876</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 &#181;M&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Carbonyl cyanide-p-trifluoro-methoxy-phenyl-hydrazone (FCCP)</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">C2920</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 &#181;M&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Rotenone</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">R8875</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 1 &#181;M&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">Sodium hydroxide</td>
			<td style="width:229px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">221465</td>
			<td style="width:456px;">Final Concentration 0.1 N in PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:815px;">XF24 Extracellular Flux Analyzer (XF Analyzer)</td>
			<td style="width:229px;">Seahorse Bioscience</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

real time analysis of metabolic profile in ex vivo mouse intestinal crypt organoid cultures

Tyndtarmens slimhinde udviser et repetitivt arkitektur organiseret i to grundlæggende strukturer: villi, som rager ind i det intestinale lumen og sammensat af modne enterocytter, bægerceller og enteroendocrine celler; og krypter, bosiddende proximalt til submucosa og muscularis, der huser voksne stamceller og progenitorceller og modne Paneth celler, samt stromale celler og immunceller i krypten mikromiljø. Indtil de sidste par år, blev in vitro studier af tyndtarmen begrænset til cellelinier afledt fra enten godartede eller ondartede svulster, og ikke repræsenterer fysiologi af normale tarm epitel og indflydelse mikromiljø, hvor de bor. Her viser vi en fremgangsmåde tilpasset fra Sato et al. (2009) til dyrkning af primære muse intestinale krypt organoids afledt fra C57BL / 6-mus. Derudover præsenterer vi brugen af ​​krypt organoide kulturer at analysere krypten metaboliske profil i realtid ved foranstaltningenling af basal iltforbrug, glycolytisk sats, ATP-produktion og respiratorisk kapacitet. Organoids vedligeholde ejendomme defineret ved deres kilde og fastholde aspekter af deres metaboliske tilpasning afspejles af ilt forbrug og ekstracellulære forsuring satser. Realtid metaboliske studier i denne krypt organoide kultur-system er et kraftfuldt værktøj til at studere krypt organoide stofskifte energi, og hvordan den kan moduleres ved ernæringsmæssige og farmakologiske faktorer.

Crypt organoids blev etableret fra 8 måned gamle C57BL / 6 mus fodret renset gnaverkost American Institute of Nutrition 76A (AIN76A). Tarm krypt organoids kan dyrkes i kultur i længere perioder fra en enkelt krypt (figur 1A, enkelt rød pil). Organoids vokse ud krypt-lignende strukturer i 18-20 dage i kultur (figur 1B, røde pile). Cryptocoryner blev passeret hver 3. uge og organoids effektivt nyttiggøres efter hver passage. Seahorse bioenergetik instrume...

Watch this Scientific Journal Video about Real Time Analysis of Metabolic Profile in Ex Vivo Mouse Intestinal Crypt Organoid Cultures at JoVE.com

Real Time Analysis of Metabolic Profile in Ex Vivo Mouse Intestinal Crypt Organoid Cultures

Real Time Analyse af metaboliske profil i<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Mus Intestinal Crypt organoide Cultures

Små intestinale krypt organoids dyrket ex vivo tilvejebringe en vævskultur, der sammenfatter vækst af krypter afhængige af stamceller og deres niche. Vi har etableret en metode til at analysere den metaboliske profil i realtid i primær mus krypt organoids. Vi fandt organoids opretholde fysiologiske egenskaber, der er defineret ved deres kilde.

The small intestinal mucosa exhibits a repetitive architecture organized into two fundamental structures: villi, projecting into the intestinal lumen and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Real Time Analysis of Metabolic Profile in Ex Vivo Mouse Intestinal Crypt Organoid Cultures

Eukaryotic Polyribosome Profile Analysis

Protein synthesis is a complex cellular process that is regulated at many levels. For example, global translation can be inhibited at the initiation phase ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Metabolic Profile Analysis of Zebrafish Embryos

Metaboliske profil Analyse af zebrafisk embryoner

A growing goal in the field of metabolism is to determine the impact of genetics on different aspects of mitochondrial function. Understanding these ...

A Video Protocol of Retroviral Infection in Primary Intestinal Organoid Culture

En video-protokollen af ​​retroviral infektion i Primary Intestinal organoide Kultur

Lgr5-positive stem cells can be supplemented with the essential growth factors Egf, Noggin, and R-Spondin, which allows us to culture ever-expanding ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Måling stivheden af<em&gt; Ex vivo</em&gt; Mus Aortas Brug Atomic force mikroskopi

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...

Mixed Primary Cultures of Murine Small Intestine Intended for the Study of Gut Hormone Secretion and Live Cell Imaging of Enteroendocrine Cells

Blandet Primære kulturer af murine Tyndtarm Beregnet for Studiet af Gut hormon sekretion og levende celler af enteroendokrine Cells

The gut is the largest endocrine organ of the body, with hormone-secreting enteroendocrine cells located along the length of the gastrointestinal ...

Real-time In Vivo Recording of Arabidopsis Calcium Signals During Insect Feeding Using a Fluorescent Biosensor

Real-time In Vivo Recording of Arabidopsis Calcium Signals During Insect Feeding Using a Fluorescent Biosensor

Real-time In Vivo optagelse af Arabidopsis calciumsignaler under insekt fodring ved hjælp af en fluorescerende Biosensor

Calcium ions are predicted to be key signaling entities during biotic interactions, with calcium signaling forming an established part of the plant ...

An Ex Vivo Choroid Sprouting Assay of Ocular Microvascular Angiogenesis

En Ex Vivo Choroid Spirende Assay af okulær mikrovaskulær angiogenese

Pathological choroidal angiogenesis, a salient feature of age-related macular degeneration, leads to vision impairment and blindness. Endothelial cell ...

Organoid-Derived Epithelial Monolayer: A Clinically Relevant In Vitro Model for Intestinal Barrier Function

Organoidafledt epitelmonolag: En klinisk relevant in vitro-model til tarmbarrierefunktion

In the past, intestinal epithelial model systems were limited to transformed cell lines and primary tissue. These model systems have inherent limitations ...

Using Real-Time Cell Metabolic Flux Analyzer to Monitor Osteoblast Bioenergetics

Brug af cellemetabolisk fluxanalysator i realtid til at overvåge osteoblastbioenergetika

Bone formation by osteoblasts is an essential process for proper bone acquisition and bone turnover to maintain skeletal homeostasis, and ultimately, ...