Name: toxicological assays for testing effects of an epigenetic drug on development, fecundity and survivorship of malaria mosquitoes
Uploaded: 2015-01-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Toxicological Assays for Testing Effects of an Epigenetic Drug on Development, Fecundity and Survivorship of Malaria Mosquitoes at JoVE.com

We thank Victor Marquez for providing DZNep.HCl and Scotty Bolling for manufacturing the bloodfeeders. The Mopti and SUA2La strains of An. gambiae were obtained from the Malaria Research and Reference Reagent Resource Center (MR4). This work was supported by the Fralin Life Science Institute and the grant from National Institutes of Health 1R21AI094289 to Igor V. Sharakhov.

OPMERKING: De drie delen van het protocol beschrijven waterige blootstelling van de DZNep geneesmiddel larvale muggen, een bloed gebaseerde blootstelling van DZNep volwassen vrouwtjes om het effect van vruchtbaarheid te bestuderen en SAH hydrolase remming door DZNep gemeten met een eenvoudige colorimetrische techniek. Een schematische weergave van deze testen wordt in figuur 1. 1. Onvolwassen Mosquito Ontwikkeling en Survivorship Testen OPMERKING: ...

<ol>
	<li>Gatton, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+mosquito+behavioural+adaptations+to+malaria+control+in+Africa.">The importance of mosquito behavioural adaptations to malaria control in Africa.</a> Evolution; International Journal of Organic Evolution. 67, 1218-1230 (2013).</li><li>Sternberg, E. D., Thomas, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+adaptation+to+temperature+and+the+implications+for+vector-borne+diseases.">Local adaptation to temperature and the implications for vector-borne diseases.</a> Trends in Parasitology. , (2014).</li><li>Rocca, K. A., Gray, E. M., Costantini, C., Besansky, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2La+chromosomal+inversion+enhances+thermal+tolerance+of+Anopheles+gambiae+larvae.">2La chromosomal inversion enhances thermal tolerance of Anopheles gambiae larvae.</a> Malaria Journal. 8, 147 (2009).</li><li>Coluzzi, M., Sabatini, A., Petrarca, V., Di Deco, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromosomal+differentiation+and+adaptation+to+human+environments+in+the+Anopheles+gambiae+complex.">Chromosomal differentiation and adaptation to human environments in the Anopheles gambiae complex.</a> Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 73, 483-497 (1979).</li><li>Donepudi, S., Mattison, R. J., Kihslinger, J. E., Godley, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+Cancer+Therapeutics.">Update on Cancer Therapeutics.</a> Science Direct. 2 (4), 157-206 (2007).</li><li>Greer, E. L., Shi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histone+methylation:+a+dynamic+mark+in+health,+disease+and+inheritance.">Histone methylation: a dynamic mark in health, disease and inheritance.</a> Nature Reviews. Genetics. 13, 343-357 (2012).</li><li>Kouzarides, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromatin+modifications+and+their+function.">Chromatin modifications and their function.</a> Cell. 128, 693-705 (2007).</li><li>Dawson, M. A., Kouzarides, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+epigenetics:+from+mechanism+to+therapy.">Cancer epigenetics: from mechanism to therapy.</a> Cell. 150, 12-27 (2012).</li><li>Clough, E., Tedeschi, T., Hazelrigg, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+regulation+of+oogenesis+and+germ+stem+cell+maintenance+by+the+Drosophila+histone+methyltransferase+Eggless/dSetDB1.">Epigenetic regulation of oogenesis and germ stem cell maintenance by the Drosophila histone methyltransferase Eggless/dSetDB1.</a> Developmental Biology. 388, 181-191 (2014).</li><li>Conrad, T., Akhtar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dosage+compensation+in+Drosophila+melanogaster:+epigenetic+fine-tuning+of+chromosome-wide+transcription.">Dosage compensation in Drosophila melanogaster: epigenetic fine-tuning of chromosome-wide transcription.</a> Nature Reviews. Genetics. 13, 123-134 (2011).</li><li>Miranda, T. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DZNep+is+a+global+histone+methylation+inhibitor+that+reactivates+developmental+genes+not+silenced+by+DNA+methylation.">DZNep is a global histone methylation inhibitor that reactivates developmental genes not silenced by DNA methylation.</a> Molecular Cancer Therapeutics. 8, 1579-1588 (2009).</li><li>Cui, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PRIMA-1,+a+Mutant+p53+Reactivator,+Restores+the+Sensitivity+of+TP53+Mutant-type+Thyroid+Cancer+Cells+to+the+Histone+Methylation+Inhibitor+3-Deazaneplanocin+A+(DZNep).">PRIMA-1, a Mutant p53 Reactivator, Restores the Sensitivity of TP53 Mutant-type Thyroid Cancer Cells to the Histone Methylation Inhibitor 3-Deazaneplanocin A (DZNep).</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 99 (11), E962 (2014).</li><li>Fujiwara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3-Deazaneplanocin+A+(DZNep),+an+inhibitor+of+S-adenosyl-methionine-dependent+methyltransferase,+promotes+erythroid+differentiation.">3-Deazaneplanocin A (DZNep), an inhibitor of S-adenosyl-methionine-dependent methyltransferase, promotes erythroid differentiation.</a> The Journal of Biological Chemistry. , (2014).</li><li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+polycomb+group+protein+EZH2+is+a+novel+therapeutic+target+in+tongue+cancer.">The polycomb group protein EZH2 is a novel therapeutic target in tongue cancer.</a> Oncotarget. 4, 2532-2549 (2013).</li><li>Nakagawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+therapy+with+the+histone+methyltransferase+EZH2+inhibitor+3-deazaneplanocin+A+inhibits+the+growth+of+cholangiocarcinoma+cells.">Epigenetic therapy with the histone methyltransferase EZH2 inhibitor 3-deazaneplanocin A inhibits the growth of cholangiocarcinoma cells.</a> Oncology Reports. 31, 983-988 (2014).</li><li>Crea, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologic+disruption+of+Polycomb+Repressive+Complex+2+inhibits+tumorigenicity+and+tumor+progression+in+prostate+cancer.">Pharmacologic disruption of Polycomb Repressive Complex 2 inhibits tumorigenicity and tumor progression in prostate cancer.</a> Molecular Cancer. 10, 40 (2011).</li><li>Vella, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EZH2+down-regulation+exacerbates+lipid+accumulation+and+inflammation+in+in+vitro+and+in+vivo+NAFLD.">EZH2 down-regulation exacerbates lipid accumulation and inflammation in in vitro and in vivo NAFLD.</a> International Journal of Molecular Sciences. 14, 24154-24168 (2013).</li><li>Tan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologic+disruption+of+Polycomb-repressive+complex+2-mediated+gene+repression+selectively+induces+apoptosis+in+cancer+cells.">Pharmacologic disruption of Polycomb-repressive complex 2-mediated gene repression selectively induces apoptosis in cancer cells.</a> Genes &amp; Development. 21, 1050-1063 (2007).</li><li>Chiang, P. K., Cantoni, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perturbation+of+biochemical+transmethylations+by+3-deazaadenosine+in+vivo.">Perturbation of biochemical transmethylations by 3-deazaadenosine in vivo.</a> Biochemical Pharmacology. 28, 1897-1902 (1979).</li><li>Lu, Y. X., Denlinger, D. L., Xu, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polycomb+repressive+complex+2+(PRC2)+protein+ESC+regulates+insect+developmental+timing+by+mediating+H3K27me3+and+activating+prothoracicotropic+hormone+gene+expression.">Polycomb repressive complex 2 (PRC2) protein ESC regulates insect developmental timing by mediating H3K27me3 and activating prothoracicotropic hormone gene expression.</a> The Journal of Biological Chemistry. 288, 23554-23564 (2013).</li></ol>

Er zijn verschillende stappen van vitaal belang voor de succesvolle toepassing van dit protocol. Voor het larvale assay, moet ervoor worden gezorgd dat de juiste labels en repliceren elke testconcentratie. Randomizing testmonsters en toevoegen van de aangegeven hoeveelheid geneesmiddel respectieve proefputjes is een belangrijk onderdeel van deze experimentele opstelling. Voor het toevoegen 2e mug instar larven een 96-well microplaat, kan elke larve op keukenpapier worden gezet gedurende 2-3 seconden om overto...

Malaria is verantwoordelijk voor het hoogste aantal insecten sterfgevallen in de wereld. Naar schatting 219 miljoen gevallen per jaar wereldwijd, resulterend in ongeveer 660.000 doden, voornamelijk in Afrika 1. Ondanks de gezamenlijke inspanningen, malaria programma&#39;s voor tal van uitdagingen. Terwijl insecticide behandelde muskietennetten en spuiten van insecticiden binnenshuis vorm belangrijke onderdelen van het programma, weerstand tegen insecticiden in de lokale bevolking belemmeren deze inspanningen 2. De snelle toename insecticide resistente muggen populaties is grotendeels toegeschreven aan het vermogen van de malariamuggen snel aanpassen aan veranderingen in hun omgeving en exploiteren verschillende niches 3,4,5. Om de bestaande mechanismen van resistentie tegen insecticiden te overwinnen, is de exploratie van nieuwe insecticide targets en de volgende generatie verbindingen gerechtvaardigd. Een eenvoudige stap-voor-stap protocol voor het bepalen van de werkzaamheid van experimentele insecticiden op de verschillende levensstadia van malaria mosquitoes aanzienlijk zou verbeteren deze inspanningen. Farmacologisch onderzoek van de effecten van geneesmiddelen op cellijnen en diermodellen hebben het gebruik van epigenetische drugs als een nuttig instrument voor het moduleren van de genetica en fysiologie van cellen en organismen vastgesteld. DNA-methylatie en histon-eiwitten zijn twee epigenetische mechanismen die genexpressie in meercellige organismen beïnvloeden zonder dat de onderliggende DNA-sequentie 6. Posttranslationele modificaties zoals methylering speelt een cruciale rol bij het ​​handhaven van cellulaire integriteit en genexpressie en invloed kunnen verscheidene fundamentele processen 7,8,9. Onderzoek in een aantal insectensoorten hebben het belang van epigenetica gemarkeerd in processen waarbij oögenese en stamcel onderhoud 10, evenals de dosering compensatie 11. Dergelijke aspecten ziektevectoren nog worden onderzocht. Met behulp van een verbinding om dit systeem in muggen moduleren kan ons voorzien inbezienswaardigheden in de roman insecticide doel paden. 3-Deazaneplanocin A (DZNep) is een bekend histon-methylatie-remmer, die van invloed zijn op de verschillende vormen van kanker zijn bestudeerd 12,13,14,15,16. DZNep is een stabiele in water oplosbare epigenetische geneesmiddel dat indirect remt histon lysine N-methyltransferase (EZH2), een component van de Polycomb repressieve complex 2 (PRC2) in zoogdiercellen. PRC2 speelt een belangrijke rol in het reguleren van de groei van stamcellen in meercellige organismen en histon methylatie is een belangrijk aspect van de PRC2 gemedieerde silencing. Bij immuungecompromitteerde muizen werden cellen voorbehandeld met DZNep aangetoond minder tumorigene 17 zijn. Dit geneesmiddel wordt steeds gebruikt voor het bestuderen van andere ziekten, zoals niet-alcoholische vette leverziekte, waarin EZH2 betrokken is 18. DZNep is een gevestigde S -adenosylhomocysteine ​​(SAH) hydrolase remmer 19, 20. De remming van SAH hydrolase resulteert in eenaccumulatie van SAH en op zijn beurt leidt tot de inhibitie van methyltransferase activiteit door beperking beschikbaar methyldonor groepen. SAH een aminozuurderivaat gebruikt door vele organismen, waaronder insecten in hun metabole routes. Een recente studie heeft aangetoond dat DZNep in lage doses kunnen diapause beïnvloeden en vertragen de ontwikkeling van insecten 21. Hier, een robuust protocol om de effecten van een in water oplosbare verbinding van verschillende levensstadia muggen onderzoeken ontwikkeld. De drie delen van dit protocol instructies omvatten voor het onderzoeken van de effecten van een in water oplosbare verbinding onvolwassen muggen, volwassen bloed voedende vrouwen en enzymactiviteit van volwassen mannelijke en vrouwelijke muggen. Eerste, DZNep wordt opgelost in water om onvolwassen mosquito ontwikkeling en overleving te bestuderen. Dit wordt uitgevoerd bij twee concentraties eventuele verschillen door 10-voudige toename in drug blootstelling vergelijken. Om het effect van het geneesmiddel op volwassen vrouwelijke muggen, DZNep verkennenwordt toegevoegd aan gedefibrilleerd schapen bloed en gevoed het bloed kunstmatig om vrouwtjes. Vervolgens wordt de uitkomst van het geneesmiddel op vruchtbaarheid onderzocht. Tenslotte wordt een enzymactiviteitsanalyse uitgevoerd met 5,5&#39;-dithiobis- (2-nitrobenzoëzuur) (DTNB) als een indicator van het effect van DZNep op SAH hydrolase inhibitoren op volwassen mannelijke en vrouwelijke muggen bepalen. Hoewel dit protocol is ontwikkeld met een malariamug, Anopheles gambiae kan gemakkelijk worden aangepast aan het bestuderen van de effecten van verbindingen van belang op een soort van muggen of andere insecten. De technieken die in dit protocol kan niet doeltreffend worden toegepast op een geneesmiddel met weinig of geen oplosbaarheid in water of waterige media.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="668">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:219px;">Name of the Reagent/Equipment&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
			<td style="width:192px;">Company</td>
			<td style="width:133px;">Catalgue Number</td>
			<td style="width:125px;">Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">96-well microplate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12565561</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cell culture plate</td>
			<td>CytoOne</td>
			<td>CC7682-7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centrifuge</td>
			<td>Sorvall Fresco</td>
			<td>76003758</td>
			<td>A different centrifuge can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Colored tape rolls</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>S68134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dissection microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DTNB</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D8130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DZNep.HCl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>SMLO305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Egg dish cups</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Filter papers</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>09-795E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass feeders</td>
			<td>Virginia Tech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass tissue homogenizer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Heating element</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td style="width:133px;">NC0520091</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Incubator</td>
			<td>Percival scientific</td>
			<td>I36VLC8</td>
			<td>A different incubator can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microcentrifuge tube, &#160;2 ml</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>22-283</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microcentrifuge tube, 1.5 ml</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micropipette</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>4910 000.069</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Na2HPO4</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M-3154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaH2PO4</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M-8643</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">pH meter&#160;</td>
			<td>Mettler Toledo 7easy</td>
			<td>S20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Plate reader</td>
			<td>Spectramax</td>
			<td>M2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SAH</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A9384</td>
			<td>store at -20C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

toxicological assays for testing effects of an epigenetic drug on development, fecundity and survivorship of malaria mosquitoes

Insecticide resistentie vormt een groot probleem voor malaria controleprogramma&#39;s. Muggen aan te passen aan een breed scala van veranderingen in de omgeving snel, waardoor malaria controle een alomtegenwoordig probleem in tropische landen. De opkomst van insecticide resistente populatie staat in voor de exploratie van nieuwe drug target paden en verbindingen voor vector mugcontrole. Epigenetische drugs zijn goed ingeburgerd in het onderzoek naar kanker, echter niet veel bekend is over de effecten ervan op insecten. Deze studie geeft een eenvoudig protocol voor de behandeling van de toxicologische effecten van 3-Deazaneplanocin A (DZNep), een experimentele epigenetische medicijn voor de behandeling van kanker, op de malaria vector, Anopheles gambiae. Een concentratie-afhankelijke toename in mortaliteit en afname in grootte werd waargenomen bij onvolwassen muggen blootgesteld DZNep, terwijl de verbinding verminderde de vruchtbaarheid van volwassen muskieten opzichte behandelingen controleren. Daarnaast was er een drug-afhankelijke afname in S -adenosylhomocysteïne (SAH) hydrolase activiteit muggen na blootstelling aan DZNep opzichte behandelingen controleren. Deze protocollen bieden de onderzoeker een eenvoudige stap-voor-stap procedure om meerdere toxicologische eindpunten beoordelen met een experimenteel geneesmiddel en, op zijn beurt, tonen een unieke multi-prong benadering voor het verkennen van de toxicologische effecten van in water oplosbare epigenetische geneesmiddelen of verbindingen van rente tegen vector muggen en andere insecten.

Figuur 1 is een schematische weergave van de assays; het beschrijft de verschillende stappen van de in dit artikel genoemde procedure. Aangezien het protocol is gebaseerd op verschillende levensstadia van muggen, is er geen bepaalde volgorde te volgen voor de experimenten die hier worden beschreven. De gebruiker kan voor een of meerdere assays voeren tegelijk, afhankelijk van beschikbaarheid monster. Figuur 2 toont de set-up voor de onrijpe mug ontwik...

Watch this Scientific Journal Video about Toxicological Assays for Testing Effects of an Epigenetic Drug on Development, Fecundity and Survivorship of Malaria Mosquitoes at JoVE.com

Toxicological Assays for Testing Effects of an Epigenetic Drug on Development, Fecundity and Survivorship of Malaria Mosquitoes

A protocol is developed to examine the effects of an epigenetic drug DZNep on the development, fecundity and survivorship of mosquitoes. Here we describe procedures for the aqueous exposure of DZNep to immature mosquitoes and a blood-based exposure of DZNep to adult mosquitoes in addition to measuring SAH hydrolase inhibition.

Toxicologische Testen voor Testing Effecten van een epigenetische Drug ontwikkelingssamenwerking, Vruchtbaarheid en Survivorship van malariamuggen

Insecticidal resistance poses a major problem for malaria control programs. Mosquitoes adapt to a wide range of changes in the environment quickly, making ...

Research

JoVE Journal

Biology

Injection of An. stephensi Embryos to Generate Malaria-resistant Mosquitoes

Injectie van An. stephensi Embryo&#39;s aan Malaria-resistente muggen Generate

The introduction of exogenous genes into the genomes of mosquitoes requires microinjection techniques tailored to the specific species of interest. This ...

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes (A. aegypti) and Infection Phenotype Determination

Protocol for Dengue Infections in Mosquitoes A. aegypti and Infection Phenotype Determination

Protocol voor Dengue Infecties in Muggen (A. aegypti) en Infectie Fenotype Bepaling

The purpose of this procedure is to infect the Aedes mosquito with dengue virus in a laboratory condition and examine the infection level and dynamic of ...

Protocol for Plasmodium falciparum Infections in Mosquitoes and Infection Phenotype Determination

Protocol voor Plasmodium falciparum Infecties in Muggen en Infection Fenotype Bepaling

Once a gene is identified as potentially refractory for malaria, it must be evaluated for its role in preventing Plasmodium infections within the ...

Protocol for RNAi Assays in Adult Mosquitoes (A. gambiae)

Protocol for RNAi Assays in Adult Mosquitoes A. gambiae

Protocol voor RNAi Testen in volwassen muggen (A. gambiae)

Reverse genetic approaches have proven extremely useful for determining  which genes underly resistance to vector pathogens in mosquitoes.  This video ...

Preventing the Spread of Malaria and Dengue Fever Using Genetically Modified Mosquitoes

Voorkomen van de verspreiding van malaria en knokkelkoorts Met behulp van genetisch gemodificeerde muggen

In this candid interview, Anthony A. James explains how mosquito genetics can be exploited to control malaria and dengue transmission.   Population ...

Building a Better Mosquito: Identifying the Genes Enabling Malaria and Dengue Fever Resistance in A. gambiae and A. aegypti Mosquitoes

Bouwen aan een betere Mosquito: Het identificeren van de genen Enabling malaria en knokkelkoorts verzet in A. gambiae en A. aegypti muggen

In this interview, George Dimopoulos focuses on the physiological mechanisms used by mosquitoes to combat Plasmodium falciparum and dengue virus ...

Development of automated imaging and analysis for zebrafish chemical screens.

Ontwikkeling van geautomatiseerde beeldvorming en analyse voor de zebravis chemische schermen.

We demonstrate the application of image-based high-content screening (HCS) methodology to identify small molecules that can modulate the FGF/RAS/MAPK ...

Visualization of Mitochondrial Respiratory Function using Cytochrome C Oxidase / Succinate Dehydrogenase (COX/SDH) Double-labeling Histochemistry

Visualization of Mitochondrial Respiratory Function using Cytochrome C Oxidase / Succinate Dehydrogenase COX/SDH Double-labeling Histochemistry

Visualisatie van Mitochondriale respiratoire functie met behulp van cytochroom C Oxidase / succinaat dehydrogenase (COX / SDH) Double-labeling Histochemistry

Mitochondrial DNA (mtDNA) defects are an important cause of disease and may underlie aging and aging-related alterations 1,2. The mitochondrial theory of ...

Generation of Myospheres From hESCs by Epigenetic Reprogramming

Generatie Myospheres Van hESCs door Epigenetische herprogrammeren

Generation of a homogeneous and abundant population of skeletal muscle cells from human embryonic stem cells (hESCs) is a requirement for cell-based ...

A Multi-detection Assay for Malaria Transmitting Mosquitoes

Een Multi-detectie test voor Malaria Zenden Muggen

The Anopheles gambiae species complex includes the major malaria transmitting mosquitoes in Africa. Because these species are of such medical importance, ...