Name: methods to assess subcellular compartments of muscle in c. elegans
Uploaded: 2014-11-13T14:00:00
Duration: 10 min 13 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Methods to Assess Subcellular Compartments of Muscle in C. elegans at JoVE.com

This work was supported by a grant from the US National Institutes of Health National Institute for Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases (AR-054342) to NJS. CJG was funded by a Doctoral training studentship funded by the University of Nottingham. JJB was funded by an MRC Doctoral training award (J500495). The funders had no role in study design, data collection and analysis, decision to publish, or preparation of the manuscript.

1. Штаммы, культура, и микроскопия <ol><li> Обращении и обслуживании штаммы C. Элеганс, как описано выше 19. Штаммы доступны из генетики Центра Caenorhabditis (CGC). ПРИМЕЧАНИЕ: Штаммы, используемые в этих экспериментах были CB5600 (ccIs4251 (Pmyo-3 :: Ngfp-LacZ; Pmyo-3 :: Mtgfp) я; он-8 (e1489) IV) с GFP слитых белков, локализованных в митохондриях и ядрах; PJ727 (jls01 (мио-3 :: GFP, рол-6 (su1006)); UNC-54 :: LacZ V) с GFP слитых белков, локализованных в сократительного аппарата и PD55 (ccIs55 (SUP-7 (СТ5); unc- 54 :: LacZ) V) с β-галактозидазы слитых белков, локализованных в цитоплазме. </li><li> Полные эксперименты РНК-интерференции, как ранее описанные для разных поколений экспериментов RNAi 13 и получить RNAi бактерии из последовательности проверяется библиотеку ORF-RNAi построенный Марком Видаль и др. 12. </li><li> Построить штаммов, содержащих &lt;EM&gt; ИССА 4251, jls01 или ИССА 55 с использованием стандартных методов 20. Используйте эти трансгены создать напряжение для оценки митохондриальной структуры сети, миозин организацию или состояние proteostasis, соответственно. Крест штаммов в мутанта, где на одной из этих субклеточных отсеков в желании каждое животное. </li><li> Использование ингибитора PtdIns-3-киназы, LY-294002 (LY), как описано выше 21. Вкратце, добавить LY-294002, в конечной концентрации 160 мкМ в верхней части сухих OP50 семенами NGM пластин. </li><li> Захват всех изображений с использованием GFP фильтр для GFP основе экспериментов и микроскоп с тройным фильтром, который позволяет визуализации красного, зеленого и синего каналов одновременно для оценки в естественных условиях мембранного потенциала с C 32 H 32 Cl 2 N 2 O, обычно продается как Mitotracker Красной CMXRos. Провести анализ изображения и подготовку рисунок в программное обеспечение для обработки изображений. </li></ol><ol><li> Минимум 1 сутки до необходимости сделать M9 буфер - 22,04 мМ KH 2 PO 4, 42,27 ммоль Na 2 HPO 4, 85,56 ммоль NaCl (конечные концентрации), и стерилизовать в автоклаве. После охлаждения до 45 ° С, добавить стерильный MgSO 4 до 1 мМ, после обработки в автоклаве, чтобы предотвратить осаждение 22. Разрешить М9 остыть при 4 ° С и аликвоты в 50 мл пробирки. </li><li> В день эксперимента, добавить 3 мл M9 буфер с одной пластиной 9 см с большим числом L1 личинок. Промыть пластины многократно путем аспирации жидкости M9 и пипетирования против поверхности агара с пластиной держать под углом. </li><li> Промыть L1 от пластины, а затем передать M9 в пробирку на 10 мл с помощью пипетки. </li><li> Оставьте в течение 2,5 мин, чтобы позволить большей взрослых и более поздние стадии личинки животных, чтобы упасть на дно пробирки и мелкие животные L1 остаются вблизи топ буфера M9. </li><li> Удалить верхние 500 мкл M9 в пробирке с помощью пипетки. Затем пипетки М9, содержащей L1 личинок на новый NGM пластины затравку 500 мкл OP50 с помощью препаровальной лупы. </li><li> Как правило, цель перенести ~ 200-300 L1 личинок на чашку. Монитор пластин ежедневно с взрослой жизни и, при необходимости, выбрать животных на свежих OP50 NGM пластин для предотвращения источником питания OP50 потребляется. Примечание: Это, как правило, 1-3 капли M9 с использованием пипетки P1000, хотя это зависит в значительной степени в зависимости от количества L1 на исходной пластине. </li><li> Если перспективные исследования в отдельных животных желательны, когда животные достигают совершеннолетия, подобрать индивидуальные животных отделить сеяных NGM пластин. Передача животных каждый 24-48 ч, чтобы отделить от личинок животных. </li></ol> 3. Движение Анализы 19 <ol><li> Минимум 2 ч до начала экспериментов, удалить 50 мл аликвоты M9 и позволить, чтобы уравновесить до комнатной температурытературы. </li><li> Pick одну взрослое животное в 50 мкл буфера М9 на предметное стекло микроскопа. </li><li> Подсчитайте количество левых и вправо изгибов тела в 10 сек, где один влево и один вправо изгиб равна одним ударом. </li><li> Повторите подсчет ударов тела, чтобы дать в общей сложности не менее 5 измерений, из которых в среднем может быть принято. Умножьте эти цифры на шесть, чтобы дать скорость движения в минуту. </li><li> С помощью пипетки, передать животное обратно в чашку Петри. Этот метод позволяет временную измерение движения на протяжении всего срока службы в С. elegan с. </li></ol><img alt="Рисунок 1" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/52043/52043fig1highres.jpg" width="600" /> Рисунок 1: Движение анализы. После того, как черви собирают в буфер, один влево (A) и один вправо (B) изгиб добавляются вместе, чтобы дать один полный движение(Инсульт). 4. Визуализация митохондриальных сетей и саркомеры в орган Уолл Muscle <ol><li> ПРИМЕЧАНИЕ: В тот же протокол применяется для визуализации как митохондрии и саркомерах. </li><li> Синхронизация червей, как описано выше (раздел 1) и расти в течение 48-60 ч при 20 ° С, когда они достигнут молодом возрасте. </li><li> Выберите 20 червей (представитель пластины) из пластин в 20 мкл M9 на предметное стекло. </li><li> Нанесите покровное и перейти к изображению с помощью флуоресцентного микроскопа под GFP фильтр (460-500 нм, синий возбуждения свет) в 40-кратном увеличении. </li></ol> 5. Оценка мембранного потенциала с помощью в естественных условиях Накопления Пробирной с Mitotracker Красной CMXRos (C 32 H 32 Cl 2 N 2 O) <ol><li> Синхронизация CB5600 (раздел 1), все помечены GFP в митохондриях мышц, и расти, чтобы в начале взрослой жизни на NGM содержащей OP50 для 48-60 часов при температуре 20 ° С. </li><li> Добавить 100 мкл ДМСО к 50 мкг аликвотой C 32 H 32 Cl 2 N 2 O с получением концентрированного раствора 940,692 мкМ. </li><li> Принимать по 1 мкл исходного раствора 940,692 мкМ и ресуспендируйте в 199 мкл M9 создать рабочий раствор 4,70 мкМ (4,70346 мкм). Подготовить этот в коричневых 1,5 мл пробирки, потому что C 32 H 32 Cl 2 N 2 O является светочувствительная. </li><li> Подготовка 20 мкл аликвоты 4,70 мкМ рабочий раствор (20 взрослых червей в 20 мкл аликвоты). </li><li> Выберите 20 взрослых животных в 20 мкл 4,70 мкМ С 32 Н 32 Cl 2 N 2 O в коричневых 1,5 мл пробирки. Инкубируют при 20 ° С в течение 1 часа. </li><li> После 1 ч инкубации, добавить 1 мл M9 с коричневыми 1,5 мл пробирки, содержащие червей, центрифуги в 2000 мкг в течение 10 сек, а затем удалите супернатант. Повторите эту стирки шаг до ресуспендированием червя осадок и передачи оставшихся 20 μл (содержащий червей) на слайде для визуализации. </li><li> Возьмите образы митохондриях с 40-кратном увеличении, используя тройной фильтр, который позволяет визуализировать обе красные, синие и зеленые каналов одновременно. Изображений с использованием тройной фильтр показывает совместной локализации C 32 H 32 Cl 2 N 2 O с GFP локализованный в митохондриях, появляющихся как апельсин. </li><li> Приняв образ оранжевой митохондрий, фото-отбеливание животное в течение 10 сек, используя свет с длиной волны 540/25-нм на максимальных настройках со всеми снятыми фильтрами. Это будет отбеливать красный внутри митохондрий и выявить митохондриальную GFP в покое, чтобы подтвердить колокализацию в мышечных митохондрий. </li></ol> 6. Оценка мышечного белка деградации в С. Элеганс <ol><li> Синхронизация PD55s (или любой штамм, содержащий трансген LacZ) на на NGM пластин затравку OP50 (раздел 1). Растут в молодом возрасте для 48-60 часов при 2От 0 ° C. </li><li> Pick 20 взрослых червей в 20 мкл DDH 2 O на предметное стекло микроскопа. Будьте осторожны, чтобы попытаться выбрать только червя, а не любые бактерии с выбором. Этикетка микроскопа карандашом. </li><li> Поместите в эксикаторе в течение 30 мин, чтобы высушить и трещины кутикулу животных. Убедитесь, герметичное уплотнение на эксикаторе с использованием смазки вокруг уплотнения. </li><li> Проверьте усыхание был эффективным при вскрытии рамки (рисунок 2). </li><li> Погрузите стекло микроскопа в ледяной ацетоне в течение 3,5 мин затем оставить стекло микроскопа на бумажном полотенце при комнатной температуре в течение 15 мин, чтобы позволить ацетон на слайде испаряться. В этот момент растопить X-Gal и окислению буфер и позволяют уравновешивания до комнатной температуры. </li><li> Добавить 2 мкл X-гал до 100 мкл буфера окисления и вихря осторожно, чтобы обеспечить это однородная. Это X-гал / окисления буфер мастер микс. </li><li> Добавить 20 мкл X-гал / окисления буфер мастер микс друг опервоначально оплащенной площадью 20 червей. Осмотр с помощью препаровальной лупы, чтобы обеспечить Master Mix полностью охватывает все животные полностью. Осторожно наклоните стекло микроскопа для перемещения основной смеси над районами, где животные не распространяется. </li><li> Поместите стекло микроскопа во влажной камере в течение 1-2,5 ч при 20 ° С. Image животные, когда темно-синий цвет присутствует в стенки тела мышц контрольных животных. Оценка контрольных животных с помощью препаровальной лупы каждые 15 мин, чтобы определить, когда животные должны быть отображены. </li></ol><img alt="Рисунок 2" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/52043/52043fig2highres.jpg" width="600" /> Рисунок 2: Оценка деградации белков мышечной использованием β-галактозидазы анализов. (A) Животные, содержащие LacZ трансген собирают с чашек Петри с 20 мкл DDH 2 O на слайде микроскопии (B). Животные обезвоживанию и стать перелом <sЧонг&gt; (C). Животных затем промывают в ацетоне (D). После того, как ацетон испаряется X-гал / окисление буфер Master Mix добавляется (Е). Развитие синего цвета у контрольных животных не оценивали с интервалом 15 мин (FL) с Т = 0 мин (F), пока синий цвет получается по всей длине животных (L). Изображения червей принимаются на 2.5 x увеличение в AE и 8X в штат Флорида. Наезд C, D, F, G и L являются 4X оригинал увеличения.

The authors have nothing to disclose.

Мышцы это многофункциональный ткани, хорошо оценили за его роль в двигательной, постуральной поддержки и обмена веществ. Развитие и поддержание здорового мышцы требует координации нескольких клеточных процессов и компонентов. Либо через повреждение или болезнь, нарушение регуляции может произойти, в результате чего измененной структурой и / или мышечной функции. Связанное с возрастом снижение функции мышц представляет собой значительную нагрузку на бюджеты здравоохранения в западном мире, так как мышечная масса 1,2 и особенно мышечная сила и выносливость 3-5 отрицательную корреляцию со смертностью. Измерение аспектов, связанных с ухудшением функции мышц, такие как измененное митохондриальной функции или нарушения саркомера, может позволить большее понимание механизмов, лежащих в основе общего развития и здоровья мышц. С aenorhabditis Элеганс (C. Элеганс) является микроскопические нематоды бест известно, потому что это был первый многоклеточный организм, чтобы иметь весь его геном последовательность 6, первый есть гены замолчать с помощью РНК-интерференции 7, и только метазоа иметь свои Вся клональные клеток 8 и нейроанатомии 9 определяется. C. Элеганс впервые была предложена в качестве модель для изучения генетического контроля поведения в 1974 году Сидней Бреннер 10 и важности этого и последующих работ была признана с первым из трех Нобелевских премий, присужденных C. Элеганс исследователей. Около 35% C. Элеганс гены определили ортологи в людях, с C. Элеганс является ключевым организм используются для понимания генетического контроля развития мышц 11. Почти каждый ген в C. Элеганс генома может быть сбит с помощью РНК-интерференции 7,12. Таким образом, сбивая генов в полностью развитой мышцы, генетические компоненты вклад в реgulation здоровья мышц могут быть исследованы с относительной простотой 13. Комбинированный Возможность использования RNAi, мутанты, и химические соединения делает C. Элеганс ведущим системы для изучения генетической регуляции 7,14,15 структуры и функции мышц с возрастом 16 и в моделях болезни 17. Воздействие генной мутации нокдауна, и / или воздействием химических соединений от структуры и / или функции мышц может быть измерена с помощью нескольких аспектах. Здесь мы кратко опишем простые методы для оценки C. Элеганс структуру и функцию мышц, многие из которых могут быть использованы в перспективных исследований здоровья мышц. Развитие зеленого флуоресцентного белка (GFP), 18 позволила визуализировать как местности специфических белков и общей структуры органелл в C. Элеганс. Здесь мы объясним, как GFP выразил специфичнуюfically в тела стены мышц митохондрий, ядра, или саркомеры может использоваться для определения того, дистрофия этих субклеточных структур присутствует. Как структура не всегда является надежным суррогатом функции, мы также объяснить, как использование катионных красителей в естественных условиях позволяет оценить нарушения митохондриального мембранного потенциала в мышцах. Когда красители используют в сочетании с GFP, они позволяют изучать архитектуру и функции в височной образом на протяжении срока службы. Наконец, мы также объяснить, как белка гомеостаз в мышцах может быть оценена и как все эти меры могут быть использованы для корреляции изменения в целый здоровья мышц животных посредством использования движения анализов. Эти методы, в сочетании с генной мутации, нокдаун, и / или химических соединений обеспечивают мощный арсенал для изучения того, как специфические гены или соединения влиять на здоровье мышц в естественных условиях. Параллели в структуре, метаболизме и валового функции мышцы между C. Элеганс имлекопитающие значит С. Элеганс представляет собой выдающийся пример организм для понимания регулирование мышцы у высших организмов, включая человека.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="603">
	<tbody>
		<tr height="45">
			<td height="45" style="height:45px;width:195px;">Name of Material/Equipment</td>
			<td style="width:103px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:187px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:195px;">MitoTracker Red CMXRos (C32H32Cl2N2O)</td>
			<td style="width:103px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">M-7512</td>
			<td style="width:187px;">Red mitochondrial dye which accumulates based on a negative membrane potential</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:195px;">DMSO</td>
			<td style="width:103px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">67-63-5</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:195px;">KH2 PO4</td>
			<td style="width:103px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">7778-77-0</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:195px;">Na2HPO4</td>
			<td style="width:103px;">BDH</td>
			<td style="width:119px;">301584L</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:195px;">NaCl</td>
			<td style="width:103px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">7647-14-5</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:195px;">MgSO4</td>
			<td style="width:103px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">M-7506</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:195px;">Microscopy Slides</td>
			<td style="width:103px;">Starfrost</td>
			<td style="width:119px;">K220</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:195px;">Microscopy Cover Slips</td>
			<td style="width:103px;">VW2 International</td>
			<td style="width:119px;">631-0124</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:195px;">1.5ml Eppendorph Tubes</td>
			<td style="width:103px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">FB74031</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:195px;">Dessicator</td>
			<td style="width:103px;">Nalgene</td>
			<td style="width:119px;">D2672</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:195px;">Nikon Microscope</td>
			<td style="width:103px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">H600L</td>
			<td style="width:187px;">Nikon H600L microscope with proprietary software</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:195px;">Nikon Camera</td>
			<td style="width:103px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">DS-Fi1</td>
			<td style="width:187px;">Nikon Digital Sight DS-Fi1 digital camera&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="101">
			<td height="101" style="height:101px;width:195px;">Zeiss Microscope</td>
			<td style="width:103px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;">Ax10</td>
			<td style="width:187px;">Zeiss AX10 microscope with an Axiocam MRC digital camera and Axiovision LE software and a triple-pass filter</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:195px;">Plates 9cm</td>
			<td style="width:103px;">Starstedt</td>
			<td style="width:119px;">82-1473</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="42" rowspan="2" style="height:42px;width:195px;">Plates 6cm</td>
			<td rowspan="2" style="width:103px;">Gosselin</td>
			<td rowspan="2" style="width:119px;">BP53-01</td>
			<td rowspan="2" style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="84" rowspan="3" style="height:84px;width:195px;">Potassium Ferrocyanide</td>
			<td rowspan="3" style="width:103px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td rowspan="3" style="width:119px;">14459-95-1&#160;</td>
			<td rowspan="3" style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
		</tr>
		<tr height="21">
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:195px;">MgCl2</td>
			<td style="width:103px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">7786-30-3</td>
			<td style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="61" rowspan="3" style="height:61px;width:195px;">Na3PO4</td>
			<td rowspan="3" style="width:103px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td rowspan="3" style="width:119px;">7601-54-9</td>
			<td rowspan="3" style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
		</tr>
		<tr height="21">
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="147" rowspan="3" style="height:147px;width:195px;">5-Bromo-4-chloro-3-indolyl &#946;-D-galactopyranoside</td>
			<td rowspan="3" style="width:103px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td rowspan="3" style="width:119px;">7240-90-6&#160;</td>
			<td rowspan="3" style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
		</tr>
		<tr height="21">
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="84" rowspan="3" style="height:84px;width:195px;">N,N8-dimethylformamide</td>
			<td rowspan="3" style="width:103px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td rowspan="3" style="width:119px;">68-12-2&#160;</td>
			<td rowspan="3" style="width:187px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
		</tr>
		<tr height="21">
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods to assess subcellular compartments of muscle in c. elegans

Мышцы это динамичная ткань, которая реагирует на изменения в питании, физических упражнений и болезненного состояния. Потеря мышечной массы и функции с болезнью и возраста значительные тяготы здравоохранения. В настоящее время мы понимаем, немного о генетической регуляции здоровья мышц с заболеванием или возрастом. Нематода C. Элеганс является признанным образцом для понимания геномной регуляции биологических процессов, представляющих интерес. Стенки тела мышцы этот червь отображают большую степень гомологии с мышц высших многоклеточных видов. Поскольку C. Элеганс является прозрачным организм, локализация GFP в митохондриях и саркомерах позволяет визуализировать этих структур в естественных условиях. Аналогичным образом, кормление животных катионные красители, которые накапливаются на основе существования митохондриальной мембранного потенциала, позволяет оценить митохондриальной функции в живом организме. Эти методы, а также оценка из мышечного белка homeostaSIS, в сочетании с оценкой всей животной мышечной функции, в виде движения анализов, чтобы позволить корреляцию субклеточных дефектов с функциональных показателей эффективности мышц. Таким образом, С. Элеганс представляет собой мощную платформу, с помощью которой для оценки влияния мутаций, генной нокдаун, и / или химических соединений на структуру и функции мышц. И, наконец, как GFP, катионных красителей, а движение анализов оцениваются неинвазивно, перспективные исследования структуры и функции мышц может быть проведена на всей жизни, конечно, и это в настоящее время не могут быть легко исследованы в естественных условиях и в любом другом организме.

Watch this Scientific Journal Video about Methods to Assess Subcellular Compartments of Muscle in C. elegans at JoVE.com

Methods to Assess Subcellular Compartments of Muscle in C. elegans

Методы оценки субклеточных отсеков Muscle в<em&gt; С. Элеганс</em

Скелетных мышц имеет важное значение для передвижения и является основным магазин белок органов. Измерения здоровья мышц внутри C. Элеганс описаны. Предполагаемые изменения в структуре и функции мышц оцениваются с использованием локализованного GFP и катионные красители.

Muscle is a dynamic tissue that responds to changes in nutrition, exercise, and disease state. The loss of muscle mass and function with disease and age ...

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Biology

Methods to Assess Subcellular Compartments of Muscle in C. elegans

Human Biology

Musculoskeletal System

SCIENTISTS IN ACTION

Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection

Генерация Стабильный Трансгенные Элеганс C. Использование Микроинъекция

Transgenic Caenorhabditis elegans can be readily created via microinjection of a DNA plasmid solution into the gonad 1.  The plasmid DNA rearranges to ...

RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in C. elegans

RNAi Screening to Identify Postembryonic Phenotypes in C. elegans

RNAi скрининга для выявления Постэмбриональное фенотипы в С. Элеганс</em

C. elegans has proven to be a valuable model system for the discovery and functional characterization of many genes and gene pathways1. More sophisticated ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Основной<em&gt; Caenorhabditis Элеганс</em&gt; Методы синхронизации и наблюдения

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Creating Defined Gaseous Environments to Study the Effects of Hypoxia on C. elegans

Creating Defined Gaseous Environments to Study the Effects of Hypoxia on C. elegans

Создание определяемых газообразных сред для изучения влияния гипоксии на<em&gt; С. Элеганс</em

Oxygen is essential for all metazoans to survive, with one known exception1. Decreased O2 availability (hypoxia) can arise during states of disease, ...

Use of Time Lapse Microscopy to Visualize Anoxia-induced Suspended Animation in C. elegans Embryos

Use of Time Lapse Microscopy to Visualize Anoxia-induced Suspended Animation in C. elegans Embryos

Использование времени Lapse микроскопии для визуализации Anoxia вызванных Подвесные анимации в<em&gt; C. Элеганс</em&gt; Эмбрионы

Caenorhabdits elegans has been used extensively in the study of stress resistance, which is facilitated by the transparency of the adult and embryo stages ...

C. elegans Chemotaxis Assay

C. elegans Chemotaxis Assay

C. Элеганс Анализ хемотаксиса

Many organisms use chemotaxis to seek out food sources, avoid noxious substances, and find mates.  Caenorhabditis elegans has impressive chemotaxis ...

Force Measurement During Contraction to Assess Muscle Function in Zebrafish Larvae

Измерение силы при сжатии для оценки функции мышц в личинки данио

Zebrafish larvae provide models of muscle development, muscle disease and muscle-related chemical toxicity, but related studies often lack functional ...

Antibody Staining in C. Elegans Using &quot;Freeze-Cracking&quot;

Antibody Staining in C. Elegans Using "Freeze-Cracking"

Антитела Окрашивание в<em&gt; С. Элеганс</em&gt; Использование &quot;Freeze-Крекинг&quot;

To stain C.  elegans with antibodies, the relatively impermeable cuticle must be  bypassed by chemical or mechanical methods.  "Freeze-cracking" is one ...

An Anoxia-starvation Model for Ischemia/Reperfusion in C. elegans

An Anoxia-starvation Model for Ischemia/Reperfusion in C. elegans

Аноксия-голодание модель ишемии / реперфузии в<em&gt; С. Элеганс</em

Protocols for anoxia/starvation in the genetic model organism C. elegans simulate ischemia/reperfusion. Worms are separated from bacterial food and placed ...

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

Методы для кожи телесные повреждения и анализы для заживления ответы в<em&gt; C. Элеганс</em

The C. elegans epidermis and cuticle form a simple yet sophisticated skin layer that can repair localized damage resulting from wounding. Studies of wound ...