Name: long-term time lapse imaging of mouse cochlear explants
Uploaded: 2014-11-02T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants at JoVE.com

Tak til Willy Sun for teknisk bistand og Dr. Kris Gellynck for nyttige kommentarer og tre anonyme korrekturlæsere for deres konstruktive råd. Dette arbejde blev finansieret af Sunnybrook Hearing Regeneration Initiative

Mus væv blev høstet fra Sox2 EGFP -reporter mus 12 vedligeholdes og aflivet i overensstemmelse med canadisk Rådet om Animal Care retningslinjer for pasning og anvendelse af forsøgsdyr. 1. Dyrkning embryonale Cochleae <ol><li> Supplere Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) ved at blande 8,89 ml af DMEM, 1 ml føtalt bovint serum (FBS), 100 pi 100x N2 supplement, og 10 pi 10 mg / ml ciprofloxacin. Supplere Hanks Balanced Salt Solution (HBSS) ved at blande ...

<ol>
	<li>Wu, D. K., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+inner+ear+development.">Molecular mechanisms of inner ear development.</a> Cold Spring Harbor perspectives in biology. 4, (2012).</li><li>Shim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+sensory+epithelium:+the+instrument+of+sound+perception.">The auditory sensory epithelium: the instrument of sound perception.</a> The international journal of biochemistry &amp; cell biology. 38, 1827-1833 (2006).</li><li>Van de Water, T., Ruben, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+of+the+inner+ear+in+organ+culture.">Growth of the inner ear in organ culture.</a> The Annals of otology, rhinology, and laryngology. 83, 1-16 (1974).</li><li>Jacques, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dual+function+for+canonical+Wnt/beta-catenin+signaling+in+the+developing+mammalian+cochlea.">A dual function for canonical Wnt/beta-catenin signaling in the developing mammalian cochlea.</a> Development. 139, 4395-4404 (2012).</li><li>Castellano-Munoz, M., Peng, A. W., Salles, F. T., Ricci, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swept+field+laser+confocal+microscopy+for+enhanced+spatial+and+temporal+resolution+in+live-cell+imaging.+Microscopy+and+microanalysis+:+the+official+journal+of+Microscopy.">Swept field laser confocal microscopy for enhanced spatial and temporal resolution in live-cell imaging. Microscopy and microanalysis : the official journal of Microscopy.</a> Society of America, Microbeam Analysis Society, Microscopical Society of Canada. 18, 753-760 (2012).</li><li>Szarama, K. B., Gavara, N., Petralia, R. S., Chadwick, R. S., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thyroid+hormone+increases+fibroblast+growth+factor+receptor+expression+and+disrupts+cell+mechanics+in+the+developing+organ+of+corti.">Thyroid hormone increases fibroblast growth factor receptor expression and disrupts cell mechanics in the developing organ of corti.</a> BMC developmental biology. 13, 6 (2013).</li><li>Appler, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata3+is+a+critical+regulator+of+cochlear+wiring.">Gata3 is a critical regulator of cochlear wiring.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 33, 3679-3691 (2013).</li><li>Wibowo, I., Pinto-Teixeira, F., Satou, C., Higashijima, S., Lopez-Schier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentalized+Notch+signaling+sustains+epithelial+mirror+symmetry.">Compartmentalized Notch signaling sustains epithelial mirror symmetry.</a> Development. 138, 1143-1152 (2011).</li><li>Hashimoto, S., Kato, N., Saeki, K., Morimoto, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selection+of+high-potential+embryos+by+culture+in+poly(dimethylsiloxane)+microwells+and+time-lapse+imaging.">Selection of high-potential embryos by culture in poly(dimethylsiloxane) microwells and time-lapse imaging.</a> Fertility and sterility. 97, 332-337 (2012).</li><li>Matsuoka, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology-based+prediction+of+osteogenic+differentiation+potential+of+human+mesenchymal+stem+cells.">Morphology-based prediction of osteogenic differentiation potential of human mesenchymal stem cells.</a> PloS one. 8, (2013).</li><li>Ma, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.Transforming+growth+factor-beta1+and+-beta2+in+gastric+precancer+and+cancer+and+roles+in+tumor-cell+interactions+with+peripheral+blood+mononuclear+cells+in+vitro.">et al.Transforming growth factor-beta1 and -beta2 in gastric precancer and cancer and roles in tumor-cell interactions with peripheral blood mononuclear cells in vitro.</a> PloS one. 8, (2013).</li><li>Taranova, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SOX2+is+a+dose-dependent+regulator+of+retinal+neural+progenitor+competence.">SOX2 is a dose-dependent regulator of retinal neural progenitor competence.</a> Genes &amp; development. 20, 1187-1202 (2006).</li><li>Chen, P., Segil, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p27(Kip1)+links+cell+proliferation+to+morphogenesis+in+the+developing+organ+of+Corti.">p27(Kip1) links cell proliferation to morphogenesis in the developing organ of Corti.</a> Development. , 1581-1590 (1999).</li></ol>

Der er flere tekniske punkter at overveje, når kulturer er etableret, og i oprettelsen af ​​time-lapse mikroskop, for langsigtet billeddannelse. Vi bruger basalmembranmatrix som et substrat til dyrkning af cochlear eksplantater, men substratet skal matches til celletype. For eksempel til at afbilde neuronale kulturer, kan det være bedre at tilvejebringe en fibronectincoating. Inkubationstemperatur og gassammensætning bør også vælges efter vævstype. Vælge en alder af eksplantatet ...

Pattedyr cochlea er en yderst ordnede komplekst organ. Hos mus, mellem fremkomsten af ​​den primitive indre øre fra den otisk vesikel på dag E11 og færdiggørelse af den udviklingsmæssige program på tidlige postnatale faser, flere bølger af cellesignalering og koordinerede ændringer i genekspression finde sted. Løb fra base til spidsen af ​​den cochlear kanal er lyden detektering sensoriske epithel eller organ Corti. Udvikling af organet for Corti er udsøgt styres således, at ved udgangen af ​​udvikling, vil det bestå af en enkelt række af indre hårceller, tre rækker af ydre hårceller spækket med fem rækker af understøttende celler (to rækker af søjle celler, tre rækker af Deiters &#39;celler) 1. Afvigelse fra denne præcise rækkefølge resulterer i høretab, heighlighting betydningen af studye afde tilblivelse og mønstring af den sensoriske epithemlium 2. In vitro dyrkning af embryonale mus cochlea er et vigtigt redskab i at studere de mekanismer for udvikling af et organ under Corti. Denne teknik blev etableret i 1974 og i løbet af de sidste 40 år, er blevet brugt til at belyse mange af de mekanismer, som det sensoriske epithel er angivet, og det organ Corti etablerede 3. Cochlea er et komplekst organ med dynamiske udviklingsprocesser; en manipulation kan tage så lang tid som syv dage, manifestere 1. For eksempel, når tilsætning af GSK 3β inhibitorer til en cochlear eksplantat kultur på E13, den optimale inkubationstid at observere en robust virkningen af forbindelsen seks dage 4. Live-billeddannelse af det udviklende cochlea muliggør undersøgelse ændringer i morfologi af orglet af Corti, ændringer i genekspression, tracking af trækfugle, prolifererende eller døende celler, og det giver real-time observation af resultaterne af farmaceutiske midler og afbrydelse af signalering veje. Indtil nu lever billeddannelse af cochleaer hovedsagelig blevet udført under anvendelse konfokalmikroskopi til billedet små områder af det organ Corti over korte tidsperioder 5-8, men denne teknik har begrænsninger på grund eksplantat levedygtighed. I billedbehandling af virkningerne af længerevarende manipulationer på langsomme udviklingsprocesser, imaging miljø er afgørende. Typisk en konfokal billeddannelse system bruger en fugtig plastboks, der sidder på mikroskopet. Varme og fugt kan slippe ud gennem hullerne i inkubere boks, hvor den møder mikroskop bordet, gennem adgang vinduerne, gennem de hængslede åbninger og gennem huller omkring forskellige dele af microscope- såsom formålet eller lyskilden. Dette er ikke optimal til at opretholde en sund eksplantater for mere end to eller tre dage. Vi definerer &quot;incubator mikroskop &#39;som et omvendt mikroskop forseglet i en standard CO 2-inkubator, snarere end en inkubator bygget omkring mikroskopet. En inkubator mikroskop extendens livet af forsøget, således at i stedet for billeddannelse over to eller tre dage, kan prøver afbildes i op til to uger. En inkubator mikroskop giver et glimrende miljø for cellevækst og differentiering, med minimal forstyrrelse eksplantatkulturer og standard kontrollerede forhold. I undersøgelser, der finder sted over flere dage er det almindeligt at ty til billeddannelse prøver dagligt ved at fjerne dem fra inkubatoren og transporterer dem til et omvendt fluorescerende mikroskop. Mens denne tilgang kan arbejde, fjerne retter fra inkubatoren påfører stress på følsomme udvikle væv. Ændringer i surhed af dyrkningsmediet og svingninger i temperatur på grund af fjernelse fra inkubatoren kan medføre suboptimal udvikling og usundt væv. Billeddannelse af samme region på samme fokale plan og i samme retning på hver tidspunkt er meget udfordrende. Ved anvendelse af et automatiseret system i en inkubator, er det muligt at opretholde en sundvæv, at indsamle billeder på flere tidspunkter og sikre, at det samme område er fanget i hver ramme. I de senere år er der udviklet flere integrerede mikroskop væv væksthuse, disse har været nyttig, ikke kun i klinisk praksis 9, men også i stamceller og kræftforskning 10,11. Her præsenterer vi en protokol for langsigtet billeddannelse af embryonale mus cochleare eksplantater. Vi bruger en automatiseret mikroskopi-system inde i en standard CO 2 inkubator, der har evnen til at tage billeder af flere prøver på indstillede tidspunkter. Systemet består af et omvendt mikroskop sæt inde i en inkubator. Prøverne anbringes i en roterende forhøjning, der tillader billeddannelse af multiple prøver ved hvert tidspunkt. Illumination, image capture og rotation af podiet styres af et automatiseret system, der drives gennem Metamorph software. Ved at sætte en billeddannende rutine ved hjælp af operativsystemet software kan vi sætte et eksperiment til at køre op til two uger med minimal menneskelig indgriben. I dette eksempel anvender vi både lysfelt og fluorescens til at vise store vækst og omlejring af cochlea, og specifikt prosensory region. I dette eksperiment, vil cochleae dissekeres fra Sox2 EGFP reporter mus på embryonale dag E13. In vitro-kulturer vil blive etableret, og derefter afbildes over fem dage.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle media</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12430</td>
			<td>Multiple brands manufacture this</td>
			<td>http://www.lifetechnologies.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/classical-media/dmem.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement membrane extract&#160;</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354230</td>
			<td>Matrigel. Alternative similar products are available from other suppliers. 
			http://catalog2.corning.com/Lifesciences/en-US/Shopping/Product.aspx?categoryname=Cell+Culture+and+Bioprocess%28Lifesciences%29|Extracellular+Matrix+Proteins+ECMs+and+Attachment+Factors%28Lifesciences%29|Matrigel+Basement+Membrane+Matrix+%28Lifesciences%29</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16000044</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=fbs&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>5630080</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=hepes&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 x N2 supplement</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17502-048</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=n2&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ciprofloxacin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>17850-5G-F</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/fluka/17850?lang=en&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14170161</td>
			<td>Multiple brands manufacture this. Should be refidgerated before use. 
			http://www.lifetechnologies.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/reagents/balanced-salt-solutions/hbss-hanks-balanced-salt-solution.html?s_kwcid=AL!3652!3!26107410508!e!!g!!hbss&#38;ef_id=xoFOglw2s UMAAMU8:20140228185720:s</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td>Size number 5 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=350&#38;CategoryId=29</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curette&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10080-05</td>
			<td>size 1 mm&#160; 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=91&#38;CategoryId=118</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insect Pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26001-35</td>
			<td>Must be stainless Steel 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=124</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mm plastic dishes</td>
			<td>Corning/Falcon</td>
			<td>351006</td>
			<td>Multiple brands manufacture this</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>charcoal</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>05105-250G</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/fluka/05105?lang=en&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>184 silicone elastomer</td>
			<td>Dow/Corning&#160;</td>
			<td>SYLGARD&#174; 184 SILICONE ELASTOMER KIT</td>
			<td>Dishes are home made several weeks in advance.&#160; Silicone elastomer can be from any supplier.<a href="http://www.dowcorning.com/applications/search/products/Details.aspx?prod=01064291">http://www.dowcorning.com/applications/search/products/Details.aspx?prod=01064291</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom dishes</td>
			<td>MatTek</td>
			<td>P35G-0-10-C</td>
			<td>The dimensions of the dish are determined by the specifications of the imaging system.&#160; 35 mm diameter, 10mm well, number 0 coverslip fits Olympus Vivaview FL. 
			http://glass-bottom-dishes.com/catalog/index.php?main_page=product_info&#38;cPath= 1_4_15&#38;products_id=2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Zeiss&#160;</td>
			<td>495101-9804-000</td>
			<td>&#160;Stemi 2000 model. multiple brands manufacture similar items 
			http://microscopy.zeiss.com/microscopy/en_de/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-2000.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cold Light Source</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>000000-1063-182</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://microscopy.zeiss.com/microscopy/en_de/products/microscope-components/lightsources.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent Stereomicroscope&#160;</td>
			<td>Leica microsystems</td>
			<td>Contact Leica microsystems</td>
			<td>Leica M165-FC. Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.leica-microsystems.com/products/stereo-microscopes-macroscopes/fluorescence/details/product/leica-m165-fc/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator Microscope +imaging software</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>Contact Olympus</td>
			<td>Inverted microcope sealed inside a Co2 incubator. Vivaview FL incubator microscope with proprietry Metamorpoh imaging software. 
			http://olympuscanada.com/seg_section/product.asp?product=1055&#38;c=0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean bench</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>51029701</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/product/heraguard-eco-clean-bench.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>3310</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/products/co2-incubators.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow hood</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>51026651</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/products/biological-safety-cabinets-clean-benches.html</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term time lapse imaging of mouse cochlear explants

Her præsenterer vi en metode for langsigtet time-lapse billeddannelse af levende embryonale mus cochleare eksplantater. Den udviklingsmæssige program ansvarlig for opbygning af stærkt bestilt, komplekse struktur af de pattedyr cochlea provenuet for omkring ti dage. For at studere ændringer i genekspression i denne periode og deres reaktion på farmaceutiske eller genetisk manipulation, er nødvendige langsigtede billeddannelse. Tidligere har den direkte billedvisning typisk været begrænset af levedygtigheden af ​​eksplanterede væv i et fugtigt kammer oven på en standard mikroskop. Vanskeligheder med at bevare optimale betingelser for vækst kultur med hensyn til fugtighed og temperatur har sat grænser for længden af ​​imaging eksperimenter. Et mikroskop integreret i en modificeret vævsdyrkningsinkubator giver et glimrende miljø for langsigtet-live billeddannelse. I denne metode, vi demonstrere, hvordan at etablere embryonale muse cochlear eksplantater og hvordan man bruger en inkubator mikroskop til at foretage tid bortfalder imaging anvendelse af både lysfelt og fluorescensmikroskopi for at undersøge opførslen af ​​en typisk embryonisk dag (E) 13 cochlear eksplantat og Sox2, en markør for de prosensory celler i cochlea, i løbet af 5 dage.

Her viser vi en montage (figur 1) og en film (figur 2) viser, hvordan en typisk organotypisk cochlear explant vil vokse, hvis belagt på E13.5. En Sox2 reporter mus blev anvendt til at visualisere prosensory region. Filmen illustrerer, at cochlea undergår vækst og konvergens og udvidelse, må cellerne i den laterale område af den grønne Sox2 domænet ikke synes at opdele som væv, der omgiver den udvider sig. Dette er en egenskab af et organ under Corti; på E13 de...

Watch this Scientific Journal Video about Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants at JoVE.com

Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants

Live-billeddannelse af embryonale pattedyr cochlea er udfordrende, fordi de udviklingsmæssige processer ved hånden operere på en tidsmæssig gradient i løbet af ti dage. Her præsenteres en fremgangsmåde til dyrkning og derefter afbilde embryonale cochlear eksplantat væv taget fra en fluorescerende reporter musen over fem dage.

Langsigtet Time Lapse Imaging af Mouse Cochlear Eksplantater

Here we present a method for long-term time-lapse imaging of live embryonic mouse cochlear explants. The developmental program responsible for building ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Multiple-mouse Neuroanatomical Magnetic Resonance Imaging

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

A Polished and Reinforced Thinned-skull Window for Long-term Imaging of the Mouse Brain

En poleret og forstærket tyndt befolket kranie Window for langsigtet Imaging af Mouse Brain

In vivo imaging of cortical function requires optical access to the brain without disruption of the intracranial environment. We present a method to form ...

Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Acute Slices of the Adult Mouse Forebrain

Time-lapse Imaging af neuroblast Migration i Akutte Skiver af den voksne Mouse forhjerne

There is a substantial body of evidence indicating that new functional neurons are constitutively generated from an endogenous pool of neural stem cells ...

Motor Nerve Transection and Time-lapse Imaging of Glial Cell Behaviors in Live Zebrafish

Motor Nerve transection og Time-lapse Imaging af gliacelle Behaviors Live zebrafisk

The  nervous system is often described as a hard-wired component of the body even  though it is a considerably fluid organ system that reacts to external ...

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Fødselsdepression Elektroporation og Time-lapse Imaging af neuroblast Migration i Mouse Akut hjerneskiver

The subventricular zone (SVZ) is one of the main neurogenic niches in the postnatal brain. Here, neural progenitors proliferate and give rise to ...

Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans

Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans

Agarose Microchambers for Langsigtet Calcium Imaging af<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Behavior is controlled by the nervous system. Calcium imaging is a straightforward method in the transparent nematode Caenorhabditis elegans to measure ...

Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Brain Using In Utero Electroporation

Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Brain Using In Utero Electroporation

Time-lapse konfokal billeddannelse af migrerende neuroner i organotypisk skive kultur af embryonale mus hjernen ved hjælp af<em&gt; I Utero</em&gt; Elektroporation

In utero electroporation is a rapid and powerful approach to study the process of radial migration in the cerebral cortex of developing mouse embryos. It ...

Generation and Long-term Maintenance of Nerve-free Hydra

Generation and Long-term Maintenance of Nerve-free Hydra

Generering og langvarig vedligeholdelse af nervefri<em&gt; Hydra</em

The interstitial cell lineage of Hydra includes multipotent stem cells, and their derivatives: gland cells, nematocytes, germ cells, and nerve cells. The ...

Long-term Sensory Conflict in Freely Behaving Mice

Langsigtet sensoriske konflikt i frit opfører mus

Long-term sensory conflict protocols are a valuable means of studying motor learning. The presented protocol produces a persistent sensory conflict for ...