Name: long-term time lapse imaging of mouse cochlear explants
Uploaded: 2014-11-02T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants at JoVE.com

Takk til Willy Sun for teknisk assistanse og Dr. Kris Gellynck for nyttige kommentarer og tre anonyme anmeldere for sin konstruktive råd. Dette arbeidet ble finansiert av Sunnybrook Hearing Regeneration Initiative

Mus vev ble høstet fra Sox2 EGFP -reporter mus 12 vedlikeholdt og avlives i samsvar med Canadian Council on Animal Care retningslinjer for omsorg og bruk av forsøksdyr. 1. Dyrking Embryonic Cochleae <ol><li> Supplement Dulbeccos modifiserte Eagle-medium (DMEM) ved å blande 8,89 ml av DMEM, 1 ml føtalt bovint serum (FBS), 100 ul av N2-supplement 100x, og 10 ul av 10 mg / ml ciprofloksacin. Supplement Hanks Balanced Salt Solution (HBSS) ved å blande 495 ml...

<ol>
	<li>Wu, D. K., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+inner+ear+development.">Molecular mechanisms of inner ear development.</a> Cold Spring Harbor perspectives in biology. 4, (2012).</li><li>Shim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+auditory+sensory+epithelium:+the+instrument+of+sound+perception.">The auditory sensory epithelium: the instrument of sound perception.</a> The international journal of biochemistry &amp; cell biology. 38, 1827-1833 (2006).</li><li>Van de Water, T., Ruben, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+of+the+inner+ear+in+organ+culture.">Growth of the inner ear in organ culture.</a> The Annals of otology, rhinology, and laryngology. 83, 1-16 (1974).</li><li>Jacques, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dual+function+for+canonical+Wnt/beta-catenin+signaling+in+the+developing+mammalian+cochlea.">A dual function for canonical Wnt/beta-catenin signaling in the developing mammalian cochlea.</a> Development. 139, 4395-4404 (2012).</li><li>Castellano-Munoz, M., Peng, A. W., Salles, F. T., Ricci, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swept+field+laser+confocal+microscopy+for+enhanced+spatial+and+temporal+resolution+in+live-cell+imaging.+Microscopy+and+microanalysis+:+the+official+journal+of+Microscopy.">Swept field laser confocal microscopy for enhanced spatial and temporal resolution in live-cell imaging. Microscopy and microanalysis : the official journal of Microscopy.</a> Society of America, Microbeam Analysis Society, Microscopical Society of Canada. 18, 753-760 (2012).</li><li>Szarama, K. B., Gavara, N., Petralia, R. S., Chadwick, R. S., Kelley, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thyroid+hormone+increases+fibroblast+growth+factor+receptor+expression+and+disrupts+cell+mechanics+in+the+developing+organ+of+corti.">Thyroid hormone increases fibroblast growth factor receptor expression and disrupts cell mechanics in the developing organ of corti.</a> BMC developmental biology. 13, 6 (2013).</li><li>Appler, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gata3+is+a+critical+regulator+of+cochlear+wiring.">Gata3 is a critical regulator of cochlear wiring.</a> The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 33, 3679-3691 (2013).</li><li>Wibowo, I., Pinto-Teixeira, F., Satou, C., Higashijima, S., Lopez-Schier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentalized+Notch+signaling+sustains+epithelial+mirror+symmetry.">Compartmentalized Notch signaling sustains epithelial mirror symmetry.</a> Development. 138, 1143-1152 (2011).</li><li>Hashimoto, S., Kato, N., Saeki, K., Morimoto, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selection+of+high-potential+embryos+by+culture+in+poly(dimethylsiloxane)+microwells+and+time-lapse+imaging.">Selection of high-potential embryos by culture in poly(dimethylsiloxane) microwells and time-lapse imaging.</a> Fertility and sterility. 97, 332-337 (2012).</li><li>Matsuoka, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology-based+prediction+of+osteogenic+differentiation+potential+of+human+mesenchymal+stem+cells.">Morphology-based prediction of osteogenic differentiation potential of human mesenchymal stem cells.</a> PloS one. 8, (2013).</li><li>Ma, G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.Transforming+growth+factor-beta1+and+-beta2+in+gastric+precancer+and+cancer+and+roles+in+tumor-cell+interactions+with+peripheral+blood+mononuclear+cells+in+vitro.">et al.Transforming growth factor-beta1 and -beta2 in gastric precancer and cancer and roles in tumor-cell interactions with peripheral blood mononuclear cells in vitro.</a> PloS one. 8, (2013).</li><li>Taranova, O. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SOX2+is+a+dose-dependent+regulator+of+retinal+neural+progenitor+competence.">SOX2 is a dose-dependent regulator of retinal neural progenitor competence.</a> Genes &amp; development. 20, 1187-1202 (2006).</li><li>Chen, P., Segil, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p27(Kip1)+links+cell+proliferation+to+morphogenesis+in+the+developing+organ+of+Corti.">p27(Kip1) links cell proliferation to morphogenesis in the developing organ of Corti.</a> Development. , 1581-1590 (1999).</li></ol>

Det er flere tekniske poeng å vurdere når kulturer er etablert og i å sette opp time-lapse mikroskop for at langsiktig bildebehandling. Vi bruker basalmembran matrise som et substrat for dyrking av cochlea eksplantater, men underlaget bør matches til celletype. For eksempel, i bilde neuronale kulturer, kan det være bedre å tilveiebringe et belegg fibronektin. Inkubasjon temperatur og gassammensetning bør også velges i henhold til vevstype. Å velge en alder av eksplantatet er viktig....

Pattedyrsneglehuset er en høyt organisert komplekst organ. I mus, mellom fremveksten av den primitive indre øret fra otic vesikkel på dag E11 og gjennomføring av utviklings program på tidlige postnatal stadier, flere bølger av cellesignalisering og koordinerte endringer i genuttrykk skje. Kjører fra bunn til toppen av cochlea-kanalen er lyden påvise sensorisk epitel, eller organ Corti. Utvikling av orgelet av Corti er utsøkt kontrollert slik at ved slutten av utviklingen, vil det bestå av en enkelt rad av indre hårceller, tre rader med ytre hårcellene ispedd fem rader med støtte celler (to rader med pilar celler, tre rader av Deiters &#39;celler) 1. Avvik fra dette presise ordre resultater i hørselstap, heighlighting betydningen av studye ofthe tilblivelse og fordelingen av den sensoriske epithemlium to. In vitro dyrkning av den embryonale muse cochlea er et viktig verktøy i å studere mekanismene for utvikling av orgelet i Corti. Denne teknikken ble etablert i 1974 og i løpet av de siste 40 årene, har blitt brukt til å belyse mange av de mekanismer som sensorisk epitel er spesifisert og orgel av Corti etablerte tre. Sneglehuset er et komplekst organ med dynamiske utviklingsprosesser; en manipulasjon kan ta så lenge som syv dager å manifestere en. For eksempel, når du legger GSK 3β hemmere til et cochlea eksplantering kultur på E13, til optimal inkubasjonstid observere en robust effekt av det sammensatte er seks dager 4. Live-avbildning av utviklings cochlea tillater gransking endringer i morfologi av orgelet av Corti, endringer i genuttrykk, sporing av migrerende, prolifererende eller døende celler, og det gjør at real-time observasjon av resultatene av farmasøytiske midler og forstyrrelse av signalering trasé. Inntil nå, leve avbildning av sneglehusethar i hovedsak blitt utført ved hjelp konfokalmikroskopi til bilde små områder av organ Corti over korte tidsperioder 5-8, men denne teknikken har begrensninger på grunn eksplantering levedyktighet. I avbildning av effektene av langsiktige manipulasjoner på langsomme utviklingsprosesser, er bildebehandlingsmiljøet avgjørende. Vanligvis en confocal levende bildesystem bruker en fuktet plastboks som sitter på mikroskopet. Varme og fuktighet kan unnslippe gjennom hullene i rugende boksen der den møter mikroskop tabellen, gjennom tilgangs vinduer, gjennom hengslede åpninger og gjennom hullene rundt ulike deler av microscope- som objektiv eller lyskilde. Dette er ikke optimal for å opprettholde sunne eksplantater i mer enn to eller tre dager. Vi definerer &quot;inkubator mikroskop &#39;som et invertert mikroskop forseglet inne i en standard CO 2 inkubator, snarere enn en inkubator bygget rundt mikroskopet. En inkubator mikroskop exhar en tendens til levetiden av forsøket, slik at heller enn avbildning over to eller tre dager, kan prøvene bli avbildet i inntil to uker. En inkubator mikroskop gir et utmerket miljø for cellevekst og differensiering, med minimal forstyrrelse eksplanterer kulturer og standard kontrollerte forhold. I studier som går over flere dager er det vanlig å ty til bildeprøver på daglig basis ved å fjerne dem fra inkubatoren og frakte dem til en invertert fluorescerende mikroskop. Mens denne tilnærmingen kan arbeide, tar ut serviset fra inkubatoren påfører stress på sensitive utvikle vev. Endringer i surheten i dyrkningsmediet, og fluktuasjoner i temperatur på grunn av fjerning fra inkubatoren kan resultere i suboptimal utvikling og usunt vev. Imaging samme region på samme fokalplan og i samme retning på hver gang punktet er ekstremt krevende. Ved å bruke et automatisert system i en inkubator, er det mulig å opprettholde sunnvev, for å fange opp bilder på flere tidspunkter, og for å sikre at det samme området er fanget i hver ramme. I de senere årene har flere integrerte mikroskop vev inkubatorer har blitt utviklet, disse har vært nyttig ikke bare i klinisk praksis 9, men også i stamcelle og kreftforskning 10,11. Her presenterer vi en protokoll for langsiktig levende avbildning av embryonale muse cochlea eksplantater. Vi bruker en automatisert mikros system inne i en standard CO 2 inkubator som har evnen til å ta bilder av flere prøver på sett tidspunkter. Systemet består av et invertert mikroskop beliggende inne i en inkubator. Prøvene blir plassert i en roterende pallen som tillater avbildning av flere prøver på hvert tidspunkt. Belysning, bildeopptak, og rotasjon av pallen er kontrollert av et automatisk system drevet gjennom Metamorph programvare. Ved å sette en bilde rutine med programvaren kan vi sette et eksperiment for å kjøre i opptil two uker med minimal menneskelig inngripen. I dette eksempelet bruker vi både lyse felt og fluorescens for å vise vekst i stor skala og omleiring av sneglehuset, og spesifikt, prosensory regionen. I dette eksperimentet, vil cochleae bli dissekert fra Sox2 EGFP rapportør mus på embryoniske dag E13. In vitro kulturer blir etablert og deretter avbildes i løpet av fem dager.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle media</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12430</td>
			<td>Multiple brands manufacture this</td>
			<td>http://www.lifetechnologies.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/classical-media/dmem.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement membrane extract&#160;</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354230</td>
			<td>Matrigel. Alternative similar products are available from other suppliers. 
			http://catalog2.corning.com/Lifesciences/en-US/Shopping/Product.aspx?categoryname=Cell+Culture+and+Bioprocess%28Lifesciences%29|Extracellular+Matrix+Proteins+ECMs+and+Attachment+Factors%28Lifesciences%29|Matrigel+Basement+Membrane+Matrix+%28Lifesciences%29</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16000044</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=fbs&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>5630080</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=hepes&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 x N2 supplement</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17502-048</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.lifetechnologies.com/search/global/searchAction.action?query=n2&#38;resultPage=1&#38;results PerPage=15&#38;autocomplete=</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ciprofloxacin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>17850-5G-F</td>
			<td>Multiple brands manufacture this 
			http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/fluka/17850?lang=en&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14170161</td>
			<td>Multiple brands manufacture this. Should be refidgerated before use. 
			http://www.lifetechnologies.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/reagents/balanced-salt-solutions/hbss-hanks-balanced-salt-solution.html?s_kwcid=AL!3652!3!26107410508!e!!g!!hbss&#38;ef_id=xoFOglw2s UMAAMU8:20140228185720:s</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td>Size number 5 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=350&#38;CategoryId=29</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curette&#160;</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10080-05</td>
			<td>size 1 mm&#160; 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=91&#38;CategoryId=118</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insect Pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26001-35</td>
			<td>Must be stainless Steel 
			http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=124</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mm plastic dishes</td>
			<td>Corning/Falcon</td>
			<td>351006</td>
			<td>Multiple brands manufacture this</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>charcoal</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>05105-250G</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/fluka/05105?lang=en&#38;region=CA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>184 silicone elastomer</td>
			<td>Dow/Corning&#160;</td>
			<td>SYLGARD&#174; 184 SILICONE ELASTOMER KIT</td>
			<td>Dishes are home made several weeks in advance.&#160; Silicone elastomer can be from any supplier.<a href="http://www.dowcorning.com/applications/search/products/Details.aspx?prod=01064291">http://www.dowcorning.com/applications/search/products/Details.aspx?prod=01064291</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom dishes</td>
			<td>MatTek</td>
			<td>P35G-0-10-C</td>
			<td>The dimensions of the dish are determined by the specifications of the imaging system.&#160; 35 mm diameter, 10mm well, number 0 coverslip fits Olympus Vivaview FL. 
			http://glass-bottom-dishes.com/catalog/index.php?main_page=product_info&#38;cPath= 1_4_15&#38;products_id=2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Zeiss&#160;</td>
			<td>495101-9804-000</td>
			<td>&#160;Stemi 2000 model. multiple brands manufacture similar items 
			http://microscopy.zeiss.com/microscopy/en_de/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-2000.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cold Light Source</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>000000-1063-182</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://microscopy.zeiss.com/microscopy/en_de/products/microscope-components/lightsources.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescent Stereomicroscope&#160;</td>
			<td>Leica microsystems</td>
			<td>Contact Leica microsystems</td>
			<td>Leica M165-FC. Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.leica-microsystems.com/products/stereo-microscopes-macroscopes/fluorescence/details/product/leica-m165-fc/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator Microscope +imaging software</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>Contact Olympus</td>
			<td>Inverted microcope sealed inside a Co2 incubator. Vivaview FL incubator microscope with proprietry Metamorpoh imaging software. 
			http://olympuscanada.com/seg_section/product.asp?product=1055&#38;c=0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean bench</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>51029701</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/product/heraguard-eco-clean-bench.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>3310</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/products/co2-incubators.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow hood</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>51026651</td>
			<td>Multiple brands manufacture similar items 
			http://www.thermoscientific.com/en/products/biological-safety-cabinets-clean-benches.html</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term time lapse imaging of mouse cochlear explants

Her presenterer vi en metode for langsiktig time-lapse avbildning av levende foster muse cochlea eksplantater. Utviklings program ansvaret for å bygge den svært bestilt, kompleks struktur av de pattedyr cochlea inntektene for rundt ti dager. For å studere forandringer i gen-ekspresjon i denne perioden og deres respons på farmasøytiske eller genetisk manipulasjon, er langvarig avbildning nødvendig. Tidligere har levende avbildning vanligvis vært begrenset av levedyktigheten til eksplanterte vevet i en fuktet kammer på toppen av en standard mikroskop. Vanskeligheter med å opprettholde optimale betingelser for vekstkultur med hensyn til fuktighet og temperatur har lagt begrensninger på lengden av bildebehandlings eksperimenter. Et mikroskop integrert i en modifisert vevsdyrkningsinkubator gir et utmerket miljø for langsiktig-live imaging. I denne metoden viser vi hvordan å etablere embryonale mus cochlea eksplantater og hvordan du bruker en inkubator mikroskop for å gjennomføre tid forfalle Imaging bruke både lyse felt og fluorescerende mikroskopi for å undersøke oppførselen til en typisk embryonale dag (E) 13 cochlea eksplantering og Sox2, en markør av prosensory cellene i sneglehuset, over fem dager.

Her viser vi en montasje (figur 1) og en film (figur 2) viser hvordan en typisk organotypic cochlea eksplantering vil vokse hvis belagt på E13.5. En Sox2 reporter mus ble brukt til å visualisere prosensory regionen. Filmen illustrerer at sneglehuset undergår vekst og konvergens og forlengelse, har cellene i den laterale delen av den grønne Sox2 domenet ikke synes å dele som vevet som omgir det utvider seg. Dette er en egenskap av organ Corti; E13 på den potensiel...

Watch this Scientific Journal Video about Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants at JoVE.com

Long-term Time Lapse Imaging of Mouse Cochlear Explants

Live-avbildning av den embryonale pattedyr cochlea er utfordrende fordi de utviklingsprosesser for hånden operere på en tidsmessig gradient over ti dager. Her presenterer vi en metode for dyrking og deretter bildebehandling embryonale cochlea explant vev tatt fra en fluorescerende reporter musen over fem dager.

Langsiktig Time Lapse Imaging av Mouse Cochlea eksplantater

Here we present a method for long-term time-lapse imaging of live embryonic mouse cochlear explants. The developmental program responsible for building ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Multiple-mouse Neuroanatomical Magnetic Resonance Imaging

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and ...

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

A Polished and Reinforced Thinned-skull Window for Long-term Imaging of the Mouse Brain

En polert og forsterket tynnet-skalle Window for langsiktig Imaging av Mouse Brain

In vivo imaging of cortical function requires optical access to the brain without disruption of the intracranial environment. We present a method to form ...

Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Acute Slices of the Adult Mouse Forebrain

Time-lapse Imaging av Neuroblast Migrasjon i Akutt Skiver av Adult Mouse forebrain

There is a substantial body of evidence indicating that new functional neurons are constitutively generated from an endogenous pool of neural stem cells ...

Motor Nerve Transection and Time-lapse Imaging of Glial Cell Behaviors in Live Zebrafish

Motor Nerve transection og Time-lapse Imaging av Glial Cell atferd Live Sebrafisk

The  nervous system is often described as a hard-wired component of the body even  though it is a considerably fluid organ system that reacts to external ...

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation og Time-lapse Imaging av neuroblast Migration in Mouse Akutt Brain Slices

The subventricular zone (SVZ) is one of the main neurogenic niches in the postnatal brain. Here, neural progenitors proliferate and give rise to ...

Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans

Agarose Microchambers for Long-term Calcium Imaging of Caenorhabditis elegans

Agaroseplater Microchambers for Long-term Kalsium Imaging av<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Behavior is controlled by the nervous system. Calcium imaging is a straightforward method in the transparent nematode Caenorhabditis elegans to measure ...

Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Brain Using In Utero Electroporation

Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Brain Using In Utero Electroporation

Time-lapse Confocal Imaging av Migrating Neurons i Organotypic Slice Kultur av Embryonic Mouse Brain Using<em&gt; I Utero</em&gt; Elektroporasjon

In utero electroporation is a rapid and powerful approach to study the process of radial migration in the cerebral cortex of developing mouse embryos. It ...

Generation and Long-term Maintenance of Nerve-free Hydra

Generation and Long-term Maintenance of Nerve-free Hydra

Generering og langvarig vedlikehold av nervefri<em&gt; Hydra</em

The interstitial cell lineage of Hydra includes multipotent stem cells, and their derivatives: gland cells, nematocytes, germ cells, and nerve cells. The ...

Long-term Sensory Conflict in Freely Behaving Mice

Langsiktig sensoriske konflikt i fritt oppfører seg mus

Long-term sensory conflict protocols are a valuable means of studying motor learning. The presented protocol produces a persistent sensory conflict for ...