Name: localization, identification, and excision of murine adipose depots
Uploaded: 2014-12-04T14:00:00
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참고 : 모든 동물의 절차는 신시내티 대학의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의과 (NIH 출판 없음 국립 보건원 (National Institutes of Health)에서 실험 동물의 관리 및 사용을위한 설명서에 따라 승인을 수행 하였다 . 85-23) 1996 개정. 1. 안락사와 마우스 소독 <ol><li> 이소 플루 란의 supratheraputic 복용량을 포함하는 드롭 박스에 마우스를 놓고 효과를 흡입 할 수 있습니다. 마우스를...

<ol>
	<li>Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+obesity+in+the+United+States,+2009-2010.">Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010.</a> NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).</li><li>Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+obesity+and+trends+in+the+distribution+of+body+mass+index+among+US+adults,+1999-2010.">Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index among US adults, 1999-2010.</a> 307 (5), 491-497 (2012).</li><li>Cawley, J., Meyerhoefer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+medical+care+costs+of+obesity:+an+instrumental+variables+approach.">The medical care costs of obesity: an instrumental variables approach.</a> Journal of Health Economics. 31 (1), 219-230 (2012).</li><li>Marder, W., Chang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Childhood+Obesity:+Costs,+Treatment+Patterns,+Disparities+in+Care,+and+Prevalent+Medical+Conditions.">Childhood Obesity: Costs, Treatment Patterns, Disparities in Care, and Prevalent Medical Conditions.</a> Thomson Medstat Research Brief. , (2006).</li><li>Cortez, M., Carmo, L. S., Rogero, M. M., Borelli, P., Fock, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-fat+diet+increases+IL-1,+IL-6,+and+TNF-&#945;+production+by+increasing+NF-&#954;B+and+attenuating+PPAR-&#947;+expression+in+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells.">A high-fat diet increases IL-1, IL-6, and TNF-&#945; production by increasing NF-&#954;B and attenuating PPAR-&#947; expression in bone marrow mesenchymal stem cells.</a> Inflammation. 36 (2), 379-386 (2013).</li><li>Sanchez-Gurmaches, J., Hung, C. M., Sparks, C. A., Tang, Y., Li, H., Guertin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PTEN+loss+in+the+Myf5+lineage+redistributes+body+fat+and+reveals+subsets+of+white+adipocytes+that+arise+from+Myf5+precursors.">PTEN loss in the Myf5 lineage redistributes body fat and reveals subsets of white adipocytes that arise from Myf5 precursors.</a> Cell Metab. 16 (3), 348-362 (2012).</li><li>Sethi, J. K., Vidal-Puig, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thematic+review+series:+adipocyte+biology.+Adipose+tissue+function+and+plasticity+orchestrate+nutritional+adaptation.">Thematic review series: adipocyte biology. Adipose tissue function and plasticity orchestrate nutritional adaptation.</a> J Lipid Res. 48 (6), 1253-1262 (2007).</li><li>Aarsland, A., Chinkes, D., Wolfe, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+and+whole-body+fat+synthesis+in+humans+during+carbohydrate+overfeeding.">Hepatic and whole-body fat synthesis in humans during carbohydrate overfeeding.</a> Am J Clin Nutr. 65 (6), 1774-1782 (1997).</li><li>Park, A., Kim, W. K., Bae, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinction+of+white,+beige+and+brown+adipocytes+derived+from+mesenchymal+stem+cells.">Distinction of white, beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells.</a> World J. Stem Cells. 6 (1), 33-42 (2014).</li><li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beige+adipocytes+are+a+distinct+type+of+thermogenic+fat+cell+in+mouse+and.">Beige adipocytes are a distinct type of thermogenic fat cell in mouse and.</a> 150 (2), 366-376 (2012).</li><li>Giralt, M., Villarroya, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White,+brown,+beige/brite:+different+adipose+cells+for+different+functions.">White, brown, beige/brite: different adipose cells for different functions.</a> Endocrinology. 154 (9), 2992-3000 (2013).</li><li>Casteilla, L., P&#233;nicaud, L., Cousin, B., Calise, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choosing+an+adipose+tissue+depot+for+sampling:+factors+in+selection+and+depot+specificity.">Choosing an adipose tissue depot for sampling: factors in selection and depot specificity.</a> Methods Mol. Biol. 456, 23-38 (2008).</li><li>Grant, R., Youm, Y. H., Ravussin, A., Dixit, V. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+adipose+tissue+leukocytosis+in+obesity.">Quantification of adipose tissue leukocytosis in obesity.</a> Methods Mol. Biol. 1040, 195-209 (2013).</li></ol>

비만은 합병증의 큰 호스트와 지방이 완전히 이해되지하는 역할의 전체 이해 될 수 있습니다; 지방의 분야에 따라서 지속적인 연구가 필요하다. 동물 모델은, 특히 쥐 모델은 질병 및 잠재적 인 제약 트리트먼트 테스트의 진행에 초기 연구에 이상적이다. 이 모델을 사용하여, 정확한 분리 및 지방 창고의 절제 지방에 영향을 질병의 병리학의 연구에서 매우 중요하고 필요한 도구입니다. <p class=...

지방이 때문에 20 세기의 지난 수십 년 동안 비만의 급격한 증가로, 미디어 스포트 라이트에서 주목할만한 활약을 보였습니다. 비만은 현재 성인의 3 분의 1, 미국 (US) 1 어린이와 청소년의 17 %보다 더 많은 영향을 미칩니다. 모든 인종 그룹에 걸쳐, 비만 전염병을 둘러싼 통계 조사는 멕시코 미국 (40.4 %), 모든 스페인 (39.1 %), 그리고 비에 비해 비 히스패닉 흑인 비만 (49.5 %)이 가장 높은 연령 보정 율을 보여 주었다 히스패닉 백인 (34.3 %) 2. 비만의 경제 효과도 의료 시스템에 대한 우려이다. 2012 년, 그것은 2005 년 미국에서 비만 치료의 연간 의료 비용이 1천9백2억달러, 전체 의료 지출 예산의 거의 21 %라고 추정되었다. 슬프게도, 소아 비만은 단독으로 직접 의료 비용 140 억 달러에 대한 책임을 것으로 추정했다. 통계적으로는 평균 의료 비용 것을 결정 하였다비만을 가진 개인이 병적 3-5 않고보다 높은 2천7백41달러 한 해였습니다. 제 2 형 당뇨병, 이상 지질 혈증, 심혈관 질환, 암, 근​​육 골격 장애 및 만성 염증 비만과 같은 다양한 조건의 주요 위험 인자이다. 비만은 깊이 대사 증후군 및 기타 만성 질환 6-8의 병인에 연결됩니다. 비만 및 다른 동반 질환 사이의 이러한 급격한 음의 연결로, 과학 연구는 더 나은 현재의 유행과 지방에 의해 연주 다양하고 중추적 인 역할을 이해하는 데 관심을 집중하고있다. 역사적으로, 지방 조직은 중요하지 않은 것으로 간주하고, 간단한 충전 조직으로 단지 전망되었다. 신진 대사, 호르몬 조절, 염증, 보호 및 절연 9 : 현재, 지방은 몸의 기능에 많은 중요한 역할을하는 것으로 나타났다. 지방 조직은 주로 구성되어있다지방 세포뿐만 아니라 혈관 주위 세포, 혈관 내피 세포, 단핵구, 대 식세포 및 다 능성 줄기 세포 (8)이 포함되어 있습니다. 지방 조직은 별개의 저장소에 몸 전체에 분포한다. 주요 저장소 피하, 근육, subdermally 발견하고, 본능적으로 열 수 있습니다. 지방이 저장소는 장애 8 비만 저장소 특정 감수성을 보여 및 관련 한 저장소에 특정 대사 프로파일을 가지고하는 것으로 나타났다. 전통적으로 지방 조직은 두 가지 유형으로 분류되었습니다 흰색 지방 조직 (WAT)과 갈색 지방 조직 (BAT); 최근 문학이 표시되지만 세 번째 그룹의 현존은 브라이트 또는 베이지 색 지방 (11) 세례. 지방 조직은 서로 다른 색상, 형태학, 대사 기능, 생화학 적 기능과 식 (10)의 유전자 패턴을 가지고있는 것으로 밝혀졌다. WAT의 지방 세포는 하나의 큰 지질 방울과 미토콘드리아의 다양한 양의가 있습니다. WAT지배적으로 몸의 피하 지방과 내장에서 발견된다. 주로 에너지 저장과 장기 보호 WAT 사이트로서 기능한다. BAT의 지방 세포는 다방 형태와 풍부한 미토콘드리아를 가지고있다. BAT는 주로 목 및 가슴의 큰 혈관뿐만 아니라, 견갑골 (12)에 위치한다. 열 발생 (7)을 조절하는 에너지 늘리지 행동에 BAT는 주로 기능. 브라이트 또는 베이지 색 지방은 BAT에 유사한 형태와 표현을 공유하는 것으로 나타났다하지만 흰색 지방 세포 (11)에서 유래 것으로 밝혀졌다. 이 논문에 기술 된 수술 방법은 다음과 같은 요인에 서로 다른 효과를 분석 할 수있는 능력과 연구자를 제공합니다 : 환경, 의약품, 및 유전학, 지방에 미칠를; 뿐만 아니라 유익한 또는 해로운 역할 지방은 질병과 전반적인 건강에 재생 될 때. 또한, 길을 제공하는 단계를 식별하고 지방 조직의 다른 유형을 차단더 나은 수 있도록 저장소 사이의 생화학 적 관계와 차이 이해합니다. 이것은 본체 내의 위치, 기능 및 지방 유형 간의 관계를 결정하는데 도움을 줄 수있다. 이는 상술 한 방법은 시험 관내 연구를 위해 총 시각화, 유전자 발현 분석, 단백질 발현 분석, 조직 학적 검사와 일차 세포주의 분리를위한 수단을 제공함으로써이를 달성한다. 현재 다른 ​​지방 저장소뿐만 아니라 그 해부학 적 위치 대사 동작에 대한 통찰력을 제공하는 많은 문서가있다; 하지만 구체적으로 지역화 식별하고 이러한 저장소를 분리하는 방법에 대한 심도있는 방법을 제공하지 않습니다. 이 수술 방법은 하나 또는 두 저장소 13-14의 분리를 위해 설계된 다른 방법에 비해 박리 및 오염의 최소량 여러 저장소의 분리를 허용하는 정확한 방법을 제공한다. 이 프로토콜의 목적은 제공하는 것이다여러 해부학 적 위치에서 지방 창고의 다른 유형의 식별 및 분리를위한 정확한 방법.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="730">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:175px;">Company</td>
			<td style="width:125px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:188px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">isoflurane</td>
			<td>Med-Vet International&#160;</td>
			<td>#RXISO-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:125px;">07-678-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">DMEF-12</td>
			<td style="width:175px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:125px;">D-6421</td>
			<td>Warm in waterbath before putting on tissue</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">2 mL microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:175px;">Midsci</td>
			<td style="width:125px;">MCT-200-C-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Phosphate buffered saline</td>
			<td style="width:175px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:125px;">P5368-10PAK</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

localization, identification, and excision of murine adipose depots

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 reached a staggering sum of $190.2 billion in direct medical costs alone. Obesity is a major risk factor for a wide host of diseases. Historically, little was known regarding adipose and its major and essential functions in the body. Brown and white adipose are the two main types of adipose but current literature has identified a new type of fat called brite or beige adipose. Research has shown that adipose depots have specific metabolic profiles and certain depots allow for a propensity for obesity and other related disorders. The goal of this protocol is to provide researchers the capacity to identify and excise adipose depots that will allow for the analysis of different factorial effects on adipose; as well as the beneficial or detrimental role adipose plays in disease and overall health. Isolation and excision of adipose depots allows investigators to look at gross morphological changes as well as histological changes. The adipose isolated can also be used for molecular studies to evaluate transcriptional and translational change or for in vitro experimentation to discover targets of interest and mechanisms of action. This technique is superior to other published techniques due to the design allowing for isolation of multiple depots with simplicity and minimal contamination.

식별 및 서혜부 피하 지방, 견갑골 갈색 지방, 내장 부고환 지방 (그림 1),뿐만 아니라 대동맥 혈관 주위 지방, 흉부 대동맥 지방, 부신 대동맥 지방과 infrarenal 대동맥 지방의 현지화 (그림 2)를 사용하여 성공적으로 달성되었다 설명 수술 방법. BAT와 WAT 샘플 간의 조직 학적 검사와 차별화 긍정적으로 염색 (그림 3) 헤 마톡 실린 및 에오신 (H &amp; E)를 사용하여 ?...

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Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots

때문에 비만 및 다른 동반 질환의 급격한 음의 연결, 역할 지방에 대한 연구는 질병에 재생 및 전반적인 건강을 보증합니다. 우리는 고립과 현장에서 사용하여 지방의 연구를 허용 지방 창고의 절제 및 생체 외 방법에 프로토콜을 제시한다.

현지화, 식별 및 절제 쥣과 지방이 종점의

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

위한 간편한 기법<em&gt; 현장에서</em인간 안구 글로브에서 각막 및 망막 조직의 내장 적출의&gt; 절단

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the ...

연구

의학

Cerenkov Luminescence Imaging of Interscapular Brown Adipose Tissue

견갑골 갈색 지방 조직의 Cerenkov 발광 이미징

Brown adipose tissue (BAT), widely known as a &#8220;good fat&#8221; plays pivotal roles for thermogenesis in mammals. This special tissue is closely ...

Isolation and Excision of Murine Aorta; A Versatile Technique in the Study of Cardiovascular Disease

분리 및 설치류 대동맥 절제; 심혈관 질환의 연구에 다목적 기술

Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated ...

Human Brown Adipose Tissue Depots Automatically Segmented by Positron Emission Tomography/Computed Tomography and Registered Magnetic Resonance Images

인간의 갈색 지방 조직의 종점은 자동으로 양전자 방출 단층 촬영 / 전산화 단층 촬영 분단과 자기 공명 이미지 등록

Reliably differentiating brown adipose tissue (BAT) from other tissues using a non-invasive imaging method is an important step toward studying BAT in ...

Encapsulation Thermogenic Preadipocytes for Transplantation into Adipose Tissue Depots

지방 조직의 종점에 이식 캡슐화 열 발생 Preadipocytes

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

인간 지방 조직 Microvascular 함수 Videomicroscopy를 사용 하 여 평가

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Vessel-sparing Excision and Primary Anastomosis

선박을 살려주는 절단 및 기본 문 합

Urethroplasty is considered to be the standard treatment for urethral strictures since it provides excellent long-term success rates. For isolated short ...

Electromagnetic Navigation Transthoracic Nodule Localization for Minimally Invasive Thoracic Surgery

최소 침습적 흉부 수술을 위한 전자기 네비게이션 흉부 결절 국소화

The increased use of chest computed tomography (CT) has led to an increased detection of pulmonary nodules requiring diagnostic evaluation and/or ...

Murine Appendectomy Model of Chronic Colitis Associated Colorectal Cancer by Precise Localization of Caecal Patch

만성 대장염 관련 대장암의 뮤린 충수 절제술 모델은 Caecal 패치의 정확한 국소화에 의해

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal ...

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue (ISWAT) Transplantation Model of Murine Islets

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue ISWAT Transplantation Model of Murine Islets

뮤린 아일렛의 인과 피하 백색 지방 조직 (ISWAT) 이식 모형

Pancreatic islet transplantation is a well-established therapeutic treatment for type 1 diabetes. The kidney capsule is the most commonly used site for ...