Name: localization, identification, and excision of murine adipose depots
Uploaded: 2014-12-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots at JoVE.com

The authors have no acknowledgements.

NOT: Tüm hayvan prosedürleri Cincinnati Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) ve (NIH Yayın No Ulusal Sağlık Enstitüleri Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu uyarınca onayı ile yapıldı . 85-23) 1996 Revize. 1. Euthanize ve Fare sterilize <ol><li> Izofluran bir supratheraputic dozunu içeren bir açılır kutu içinde fare yerleştirin ve etkisi nefes sağlar. Fare ötenazi sonra, kutudan çıkarın. </li><li> Cervically ötenaz...

<ol>
	<li>Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+obesity+in+the+United+States,+2009-2010.">Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010.</a> NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).</li><li>Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+obesity+and+trends+in+the+distribution+of+body+mass+index+among+US+adults,+1999-2010.">Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index among US adults, 1999-2010.</a> 307 (5), 491-497 (2012).</li><li>Cawley, J., Meyerhoefer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+medical+care+costs+of+obesity:+an+instrumental+variables+approach.">The medical care costs of obesity: an instrumental variables approach.</a> Journal of Health Economics. 31 (1), 219-230 (2012).</li><li>Marder, W., Chang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Childhood+Obesity:+Costs,+Treatment+Patterns,+Disparities+in+Care,+and+Prevalent+Medical+Conditions.">Childhood Obesity: Costs, Treatment Patterns, Disparities in Care, and Prevalent Medical Conditions.</a> Thomson Medstat Research Brief. , (2006).</li><li>Cortez, M., Carmo, L. S., Rogero, M. M., Borelli, P., Fock, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-fat+diet+increases+IL-1,+IL-6,+and+TNF-&#945;+production+by+increasing+NF-&#954;B+and+attenuating+PPAR-&#947;+expression+in+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells.">A high-fat diet increases IL-1, IL-6, and TNF-&#945; production by increasing NF-&#954;B and attenuating PPAR-&#947; expression in bone marrow mesenchymal stem cells.</a> Inflammation. 36 (2), 379-386 (2013).</li><li>Sanchez-Gurmaches, J., Hung, C. M., Sparks, C. A., Tang, Y., Li, H., Guertin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PTEN+loss+in+the+Myf5+lineage+redistributes+body+fat+and+reveals+subsets+of+white+adipocytes+that+arise+from+Myf5+precursors.">PTEN loss in the Myf5 lineage redistributes body fat and reveals subsets of white adipocytes that arise from Myf5 precursors.</a> Cell Metab. 16 (3), 348-362 (2012).</li><li>Sethi, J. K., Vidal-Puig, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thematic+review+series:+adipocyte+biology.+Adipose+tissue+function+and+plasticity+orchestrate+nutritional+adaptation.">Thematic review series: adipocyte biology. Adipose tissue function and plasticity orchestrate nutritional adaptation.</a> J Lipid Res. 48 (6), 1253-1262 (2007).</li><li>Aarsland, A., Chinkes, D., Wolfe, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+and+whole-body+fat+synthesis+in+humans+during+carbohydrate+overfeeding.">Hepatic and whole-body fat synthesis in humans during carbohydrate overfeeding.</a> Am J Clin Nutr. 65 (6), 1774-1782 (1997).</li><li>Park, A., Kim, W. K., Bae, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinction+of+white,+beige+and+brown+adipocytes+derived+from+mesenchymal+stem+cells.">Distinction of white, beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells.</a> World J. Stem Cells. 6 (1), 33-42 (2014).</li><li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beige+adipocytes+are+a+distinct+type+of+thermogenic+fat+cell+in+mouse+and.">Beige adipocytes are a distinct type of thermogenic fat cell in mouse and.</a> 150 (2), 366-376 (2012).</li><li>Giralt, M., Villarroya, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White,+brown,+beige/brite:+different+adipose+cells+for+different+functions.">White, brown, beige/brite: different adipose cells for different functions.</a> Endocrinology. 154 (9), 2992-3000 (2013).</li><li>Casteilla, L., P&#233;nicaud, L., Cousin, B., Calise, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choosing+an+adipose+tissue+depot+for+sampling:+factors+in+selection+and+depot+specificity.">Choosing an adipose tissue depot for sampling: factors in selection and depot specificity.</a> Methods Mol. Biol. 456, 23-38 (2008).</li><li>Grant, R., Youm, Y. H., Ravussin, A., Dixit, V. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+adipose+tissue+leukocytosis+in+obesity.">Quantification of adipose tissue leukocytosis in obesity.</a> Methods Mol. Biol. 1040, 195-209 (2013).</li></ol>

Obezite morbidite büyük bir ev sahibi ve adipoz tam olarak anlaşılmış değildir oynadığı rolün tam bir anlayış yol açabilir; adipoz alanında nedenle devam araştırma gereklidir. Hayvan modelleri, özellikle fare modelleri hastalıklar ve potansiyel ilaç tedavilerinin test ilerlemesinde ilk araştırma için idealdir. Bu modelleri kullanarak, kesin izolasyon ve yağ depolarında eksizyonu yağ etkilenen hastalıkların patolojisi çalışmada son derece önemli ve gerekli bir araçtır. <p class="jove...

Yağ nedeniyle 20. yüzyılın son birkaç on yıl içinde obezite en dramatik artış, medya spot kayda değer bir görünüm getirmişti. Obezite anda yetişkinlerin üçte biri ve Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde (ABD) 1 çocuk ve ergenlerin% 17 daha fazla etkiler. Tüm etnik grupları Kapsayan, obezite salgını çevreleyen istatistiksel araştırma Meksikalı Amerikalılar (% 40.4), tüm İspanyollar (% 39.1), ve olmayan kıyasla İspanyol olmayan siyahlar obezite (% 49.5) en yüksek yaşa göre düzeltilmiş oranına sahip olduğunu göstermiştir Hispanik beyazlar (% 34.3) 2. Obezitenin ekonomik etkisi de sağlık sistemi için büyüyen bir husustur. 2012 yılında, 2005 yılında ABD&#39;de obezite için bakım yıllık tıbbi maliyeti 190.200.000.000 $, genel tıbbi harcama bütçesinin yaklaşık% 21 olduğu tahmin edilmiştir. Ne yazık ki, çocukluk çağı obezitesi tek başına doğrudan tıbbi maliyetler 14 milyar dolar sorumlu olduğu tahmin edilmiştir. İstatistiksel olarak, bu ortalama tıbbi maliyeti olduğu tespit edildiobezite ile bireylerin bu morbidite 3-5 olmayanlara göre daha yüksek 2741 $ bir yıl oldu. Tip 2 diyabet, dislipidemi, kardiyovasküler hastalıklar, kanser, kas iskelet bozuklukları ve kronik inflamasyon: Obezite gibi durumların çeşitli için önemli bir risk faktörüdür. Obezite derinden metabolik sendrom ve diğer kronik hastalıkların 6-8 patogenezi bağlıdır. Obezite ve diğer yandaş arasında böyle sert ve olumsuz bağlantıları ile, bilimsel araştırma daha güncel salgın ve adipoz oynadığı çeşitli ve önemli rolleri anlamak için dikkat odaklanmıştır. Tarihsel, yağ dokusu önemsiz kabul edildi ve basit bir dolgu dokusu gibi sadece görülüyordu. Metabolizma, hormon regülasyonu, inflamasyon, koruma ve izolasyon 9: Şu anda, yağ vücudun işlevi birçok temel rol oynamaya gösterilmiştir. Yağ dokusu öncelikle oluşuradipositler de perisitler, endotel hücreleri, monositler, makrofajlar ve pluripotent kök hücrelerin 8 içerir. Yağ dokusu farklı depolarda vücuda dağılır. ana depolar deri altından, kas içinden, deri altından bulunan ve içgüdüsel 10 edilebilir. Yağ depolar bozuklukları 8 obeziteye bir depo belirli duyarlılık göstermiştir ve ilgili olan depo belirli metabolik profillerin sahip olduğu gösterilmiştir. Geleneksel, adipoz doku iki ana gruba sınıflandırılmıştır: beyaz yağ dokusu (WAT) ve kahverengi adipoz doku (BAT); Son literatür gösterir, ancak üçüncü bir grup varlıkları brite veya bej adipoz 11 vaftiz. Adipoz doku farklı renkler, morfolojileri, metabolik fonksiyonları, biyokimyasal özellikleri ve ifade 10 genetik modellerine sahip olduğu gösterilmiştir. WAT içinde Adipositler tek, büyük lipit damlacık ve mitokondri değişken miktarlarda bulunmaktadır. WATbaskın olarak vücudun deri altına ve visseral yerlerde bulunur. Birincil enerji depolama ve organ koruma alanı olarak WAT çalışır. BAT Adipositler bir multiloküler morfoloji ve bol mitokondri var. BAT öncelikle boyun ve göğüs büyük kan damarlarının yanı sıra, skapula 12 yer almaktadır. Thermogenesis 7 düzenleyen enerji sokmaksızın davranışları BAT öncelikle çalışır. Brite veya bej yağ BAT benzer bir morfoloji ve ifade paylaşmaya gösterilmiştir fakat beyaz adipositlerden 11 kaynaklandığı tespit edilmiştir. Bu yazıda anlatılan cerrahi yöntem gibi faktörler farklı etkilerini analiz etmek kapasitesine sahip araştırmacılar sunar: çevre, ilaç ve genetik, adipoz var; de yararlı veya zararlı rol adipoz hastalığı ve genel sağlık oynar gibi. Aynı zamanda, bir yol sağlayarak tespit ve adipoz dokuda farklı izole etmek içindaha izin depoları arasındaki biyokimyasal ilişkiler ve farklılıklar anlamak. Bu vücut içindeki konumu, işlev ve yağ arasındaki ilişkinin belirlenmesinde yardımcı olabilir. Bu tarif edilen yöntem, in vitro çalışmalar için brüt görselleştirme, gen ekspresyon analizi, protein ifadesi analizi, histolojik ve birincil hücre hatlarının izolasyonu için araçlar sağlayarak gerçekleştirir. Şu anda farklı yağ depoları, yanı sıra anatomik yerlerde metabolik davranışı içgörü sağlayan birçok makaleleri vardır; ama özellikle, lokalize belirlemek ve bu depoları izole etmek için nasıl bir derinlemesine bir yöntem vermeyin. Bu durum bunların cerrahi, bir veya iki depo 13-14 bir izolat için tasarlanan diğerleri yöntemlerine göre diseksiyon ve kontaminasyon en az bir miktar ile birden fazla depo izolasyonu sağlayan bir hassas bir teknik sağlamaktadır. Bu protokolün amacı sağlamaktırBirden fazla anatomik bölgelerden yağ depoları farklı tiplerinin belirlenmesi ve izolasyonu için kesin bir metot.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="730">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:175px;">Company</td>
			<td style="width:125px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:188px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">isoflurane</td>
			<td>Med-Vet International&#160;</td>
			<td>#RXISO-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:175px;">Fisher</td>
			<td style="width:125px;">07-678-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">DMEF-12</td>
			<td style="width:175px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:125px;">D-6421</td>
			<td>Warm in waterbath before putting on tissue</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">2 mL microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:175px;">Midsci</td>
			<td style="width:125px;">MCT-200-C-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Phosphate buffered saline</td>
			<td style="width:175px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:125px;">P5368-10PAK</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

localization, identification, and excision of murine adipose depots

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 reached a staggering sum of $190.2 billion in direct medical costs alone. Obesity is a major risk factor for a wide host of diseases. Historically, little was known regarding adipose and its major and essential functions in the body. Brown and white adipose are the two main types of adipose but current literature has identified a new type of fat called brite or beige adipose. Research has shown that adipose depots have specific metabolic profiles and certain depots allow for a propensity for obesity and other related disorders. The goal of this protocol is to provide researchers the capacity to identify and excise adipose depots that will allow for the analysis of different factorial effects on adipose; as well as the beneficial or detrimental role adipose plays in disease and overall health. Isolation and excision of adipose depots allows investigators to look at gross morphological changes as well as histological changes. The adipose isolated can also be used for molecular studies to evaluate transcriptional and translational change or for in vitro experimentation to discover targets of interest and mechanisms of action. This technique is superior to other published techniques due to the design allowing for isolation of multiple depots with simplicity and minimal contamination.

Kimlik ve kasık deri altı yağ, interskapular kahverengi adipoz, viseral adipoz epididim (Şekil 1), yanı sıra aort arkı perivasküler adipoz, torakal aort adipoz, böbreküstü aort adipoz ve infrarenal aort adipoz lokalizasyonu (Şekil 2) kullanılarak başarıyla gerçekleştirilmiştir açıklanan cerrahi yöntem. BAT ve WAT örnekler arasında histolojik muayene ve farklılaşma pozitif boyanan (Şekil 3) hematoksilen ve eozin (H &amp; E) ile değerlendirildi....

Watch this Scientific Journal Video about Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots at JoVE.com

Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots

Nedeniyle obezite ve diğer yandaş arasındaki şiddetli ve negatif bağlantı, rol adipoz araştırma hastalığında oynadığı ve genel sağlık garantilidir. Biz izolasyon ve yerinde kullanarak adipoz çalışması için izin yağ depolarında eksizyonu ve in vitro yöntemler bir protokol mevcut.

Yerelleştirme, Kimlik ve Eksizyon Kemirgen Yağ depolarının

Obesity has increased dramatically in the last few decades and affects over one third of the adult US population. The economic effect of obesity in 2005 ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

Için Basitleştirilmiş Tekniği<em&gt; Yerinde</emİnsan Oküler Globe gelen Kornea ve Retina Doku Eviserasyon of&gt; eksizyonu

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the ...

Cerenkov Luminescence Imaging of Interscapular Brown Adipose Tissue

Interskapular kahverengi adipoz dokuda arasında Çerenkov Lüminesans Görüntüleme

Brown adipose tissue (BAT), widely known as a &#8220;good fat&#8221; plays pivotal roles for thermogenesis in mammals. This special tissue is closely ...

Isolation and Excision of Murine Aorta; A Versatile Technique in the Study of Cardiovascular Disease

İzolasyon ve Kemirgen Aort eksizyonu; Kardiyovasküler Hastalığı Çalışmasında Çok Yönlü Tekniği

Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated ...

Human Brown Adipose Tissue Depots Automatically Segmented by Positron Emission Tomography/Computed Tomography and Registered Magnetic Resonance Images

İnsan Brown Yağ Dokusu Depolar otomatik Pozitron Emisyon Tomografi / Bilgisayarlı Tomografi tarafından Parçalı ve Manyetik Rezonans Görüntüler Kayıtlı

Reliably differentiating brown adipose tissue (BAT) from other tissues using a non-invasive imaging method is an important step toward studying BAT in ...

Encapsulation Thermogenic Preadipocytes for Transplantation into Adipose Tissue Depots

Yağ Dokusu Depolarında içine Nakli Enkapsülasyon termojenik Preadipositler

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

İnsan yağ dokusu mikrovasküler işlevini kullanarak Videomicroscopy değerlendirilmesi

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Vessel-sparing Excision and Primary Anastomosis

Gemi tutumlu eksizyon ve birincil anastomoz

Urethroplasty is considered to be the standard treatment for urethral strictures since it provides excellent long-term success rates. For isolated short ...

Electromagnetic Navigation Transthoracic Nodule Localization for Minimally Invasive Thoracic Surgery

Minimal İnvaziv Göğüs Cerrahisinde Elektromanyetik Navigasyon Transtorasik Nodül Lokalizasyonu

The increased use of chest computed tomography (CT) has led to an increased detection of pulmonary nodules requiring diagnostic evaluation and/or ...

Murine Appendectomy Model of Chronic Colitis Associated Colorectal Cancer by Precise Localization of Caecal Patch

Kaekal Patch Kesin Lokalizasyonu ile Kronik Kolit İlişkili Kolorektal Kanser Murine Apendektomi Modeli

The human appendix has been recently implicated to play important biological roles in the pathogenesis of various complex diseases, such as colorectal ...

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue (ISWAT) Transplantation Model of Murine Islets

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue ISWAT Transplantation Model of Murine Islets

Inguinal Subkutan Beyaz Yağ Dokusu (ISWAT) Transplantasyon Modeli Murine Adacıkları

Pancreatic islet transplantation is a well-established therapeutic treatment for type 1 diabetes. The kidney capsule is the most commonly used site for ...