The author is grateful for the assistance of Mrs. Sharon Spana (University of Sydney) in rodent monitoring, handling and experimentation. The authorwould like to thank Prof. Jonathan Stone and Dr. Dan Johnstone for the assistance in the preparation of this manuscript. PhD funding support has been provided by University of Sydney and Australian Center for Excellence in Vision.

Ethiek statement: Het protocol volgt het dier zorg richtlijnen van de Universiteit van Sydney, AEC # 5657. Verdoving werd goedgekeurd door dier ethische commissie (Universiteit van Sydney, AEC # 5657). 1. apparatuur Voorbereiding <ol><li> Met real-time huidtemperatuur tracking. Schakel op de computer, en de data-acquisitie hardware. </li><li> Open temperatuur opname-software en de temperatuur instelling om tussen de 30-35 ° C en de frequentie van de bemonstering op elke 100 msec te passen...

Knaagdier achterpoot ischemie werd geïnduceerd met succes een manuele bloeddrukmeter en manchet levert neuroprotectie de fotoreceptoren van de retina. Een bevinding consistent met ischemische conditioning geïnduceerde bescherming van de fotoreceptoren van licht letsel 9,28. In wezen, remote ischemie veroorzaakt korte zuurstoftekort aan weefsels. Derhalve remote ischemische voorconditionering veel overeenkomsten ischemische conditioneren of als alternatief genoemd ischemische tol...

De overleving van de meeste, zo niet alle weefsels in aanwezigheid van metabole stress kan worden verbeterd door voorafgaande conditionering met een periode van subletale ischemie 1,2. Ischemische preconditionering (IP) in de praktijk is de blootstelling van weefsel subletale ischemie, voordat het weefsel ervaringen ernstiger stressoren, zoals een volgend ischemische schade. In diermodellen IP geeft opvallend bescherming aan de hersenen, retina, hart en longen 3-6. Dienovereenkomstig, waarnemingen bij patiënten met een beroerte toonde een verband tussen de eerdere TIA&#39;s en een betere klinische resultaten 7,8. IP beschermt ook retinale fotoreceptoren van niet-ischemische verwondingen 9. De effectiviteit van IP in diverse weefsels en letsels suggereert dat het activeren van een aangeboren mechanisme van celoverleving in alle weefsels. Ischemische preconditionering van het myocard is gesuggereerd om beschermende effecten door de upregulation hebbenhypoxie induceerbare factor (HIF), bij velen bekend metabole routes te reguleren door het vrijkomen van adenosine of door de opening van de mitochondriale ATP kaliumkanalen 10,11. Adenosine afgifte en ATP kaliumkanalen zijn betrokken bij cerebrale ischemie maar onderzoek naar de neuroprotectieve mechanismen van ischemische conditionering tot nu toe gericht op modificaties van anti-excitotoxiciteit, anti-apoptotische en anti-inflammatoire pathways 12,13. Algemeen begrip van het moleculaire proces van ischemische conditionering voor bescherming neuronen beperkt. Remote ischemische voorconditionering pogingen conditioneren verre kritisch belangrijke organen (hart, hersenen, long) door het opwekken van ischemie minder kritische weefsels. Remote ischemische preconditionering (RIP) met behulp van de achterste ledematen is aangetoond neuroprotectieve in knaagdiermodellen van een beroerte 14-17 te zijn. De werkwijze beschreven door ons een eenvoudige, betrouwbare en niet-invasieve protocol voor het induceren van TNO. De overgrote meerderheid van RIP protocollen omvatten het achterste lidmaat, waarschijnlijk omdat de femorale slagader in het bovenste achterste ledematen gemakkelijk herkenbaar en toegankelijk voor chirurgische klem- en tourniquet toepassing. In ischemische ledematen invasieve studies voor het onderzoek van de hersenen en huidbescherming, ischemie geïnduceerd door het scheiden van de femorale slagader van de lies ligamenten en klemmend de femorale arterie 2,15,18. De ischemie die uit een ledemaat cuffing of femorale slagader klemming is bevestigd door veranderingen op het onderdeel inclusief een verlies van puls afname oxygenatie en een daling van de huidtemperatuur. Remote ischemie kan worden bevestigd door het verlies van puls met laser Doppler of Doppler ultrasound 17-19. Huidtemperatuur kan worden gebruikt als alternatief voor Doppler hoewel de relatie niet lineair 20,21. Accurate temperatuur opnames zijn gemeengoed in laboratoria en blikgemakkelijk opgenomen in remote ischemische studies. Een alternatief voor femorale vastklemmen operatie is de inductie van ischemie met een tourniquet. Tourniquet toepassing produceert vergelijkbaar ischemie is aan dat van vaartuig klemmen; Kutchner et al. vergeleken invasieve femorale arterie klemmen met een niet-invasieve tourniquet en vonden werkwijzen onderbroken bloedtoevoer naar de ledematen en verminderde huidbeschadiging in een plastische chirurgie model van ischemie huidflap 18. Cuffing hetzij een been of arm en verhogen van de manchetdruk boven de systolische bloeddruk is gevonden beschermde tegen ischemische schade bij varkens en mensen 17,19,22 te zijn. Verschillende tourniquet zal remote-inducerende ischemische omvatten het gebruik van een bloeddrukmanchet of een elastische band 17,22,23. Het gebruik van een elastische band ischemie induceren een onveilige methode mogelijk die tot een ongereguleerde hoeveelheid druk in deledematen, met de druk stijgt boven de 500 mmHg wordt opgenomen bij de mens 24. Verder ischemie middels een elastische band leidt tot spierbeschadiging in ratten na verwijdering van de band 23, zoals beoordeeld door Evans Blue Dye, een in vivo marker van myofiber permeabiliteit 25. Daarentegen kan de afgifte van een geregelde druk aan de tourniquet worden bereikt met behulp van een bloeddrukmanchet verbonden met een sphygmomanometer 17,19,22,26. In deze studie werd een lichte letselmodel van fotoreceptor degeneratie werd gebruikt voor het neuroprotectieve effect van externe ischemische preconditionering tonen. Remote ischemie werd onmiddellijk opgewekt voor lichte verwondingen, zodat de daaropvolgende fotoreceptor degeneratie zoals bevestigd door retinale functie testen. De bijbehorende video zal de toepassing van niet-invasieve remote ischemie aangetoond.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Gold series DuraShock Hand Aneroid Sphygmomanometer</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td>DS56</td>
			<td>Manual Sphygmomanometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neonate [size 2] 1 Tube, 10 Pack</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td>5082-102-1&#160;</td>
			<td>Limb blood pressure cuff</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer lock adaptor</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td>5082-178</td>
			<td>Adaptor for neonatal cuff</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermistor pod</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>ML 309</td>
			<td>skin tempertature unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skin temperture probe</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>MLT 422/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powerlab, 4 channel acquistion hardware</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>PL 35044</td>
			<td>Skin temperature recorder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic blanket system with flexible probe</td>
			<td>Harvard Appartus</td>
			<td>507222F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Towel</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>optional: awake remote ischemia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflo - 100% Isoflurane -250 ml</td>
			<td>Abbot Animal Health</td>
			<td>05260-05</td>
			<td>optional: inhaltion anaesthetic remote ischemia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamil - ketamine 100 mg/ml - 50 ml</td>
			<td>Troy Laboratories Pty Ltd</td>
			<td></td>
			<td>optional: injectable anaesthetic remote ischemia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylium - Xylazine 100 mg/ml - 50 ml</td>
			<td>Troy Laboratories Pty Ltd</td>
			<td></td>
			<td>optional: injectable anaesthetic remote ischemia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

remote limb ischemic preconditioning:  a neuroprotective technique in rodents

Subletale ischemie weefsels beschermt tegen latere, meer ernstige ischemie door opregulatie van endogene mechanismen in het aangetaste weefsel. Subletale ischemie is ook aangetoond dat beschermingsmechanismen upregulate afgelegen weefsels. Een korte periode van ischemie (5-10 min) in de achterste ledematen van zoogdieren induceert zelfbeschermende reacties in de hersenen, longen, hart en retina. Het effect is bekend als remote ischemische preconditionering (RIP). Het is een therapeutisch veelbelovende manier van bescherming van vitale organen, en is nu al onder de klinische proeven voor het hart en de hersenen verwondingen. Deze publicatie toont een gecontroleerde, minimaal invasieve werkwijze voor het maken van een ledemaat - speciaal de achterpoot van een rat - ischemische. Een bloeddrukmanchet ontwikkeld voor humane neonaten is verbonden met een handmatige sfygmomanometer en gebruikt om 160 mmHg druk uitoefent rond het bovenste gedeelte van de achterste ledematen. Een sonde ontworpen om huidtemperatuur sporen wordt gebruikt om te controleren ischemia, door registratie van de temperatuurdaling huid veroorzaakt door drukgeïnduceerde occlusie van de beenslagaders en de temperatuurstijging wat afgifte van de manchet volgt. Deze methode van TNO biedt bescherming aan de rat retina tegen fel licht veroorzaakte schade en degeneratie.

Een bloeddrukmanchet verhoogd tot boven 160 mmHg stopt de bloedstroom naar de achterste ledematen zoals duidelijk te zien in figuur 1B. Het ontbreken van weefseloxygenatie resulteerde in een reducerende temperatuur van de voeten van het dier voor ischemie-reperfusie protocol (Figuur 2). De voet temperatuur (33 ° C) lager dan de eigen temperatuur en betrouwbaar verlaagd gedurende manchetdruk elevatie (31 ° C) stijgt wanneer de manchet is leeggelopen (32 ° C). Een enkele 1.000 lux lich...

Watch this Scientific Journal Video about Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents at JoVE.com

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

Remote Limb Ischemische preconditionering: Een Neurobeschermende Technique in Knaagdieren

Remote ischemische preconditionering (RIP) is een werkwijze voor het conditioneren weefsels tegen schadelijke stress. We hebben een methode van remote ischemie vastgesteld op de achterste ledematen, door het opblazen van een bloeddrukmeter manchet voor 5-10 min. De neurobeschermende capaciteiten van RIP zijn aangetoond in een model van retinale degeneratie in knaagdieren.

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Gene Transfer voor ischemisch hartfalen in een preklinisch model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

Een vereenvoudigde methode voor het produceren van een ischemische Wound Model

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Remote Magnetic Navigation for Accurate, Real-time Catheter Positioning and Ablation in Cardiac Electrophysiology Procedures

Afstandsbediening Magnetische Navigation voor Nauwkeurige, Real-time Catheter Positionering en Ablation in hartelektrofysiologie Procedures

New remote navigation systems have been developed to improve current limitations of conventional manually guided catheter ablation in complex cardiac ...

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

Het gebruik van Cystometry in kleine knaagdieren: Een studie van de blaas Chemosensation

	The lower urinary tract (LUT) functions as a  dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a  convenient time. While ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

Bilaterale Gemeenschappelijke occlusie van de halsslagader als een adequate Voorconditionering Stimulus naar Early ischemische tolerantie te induceren bij focale ischemie

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

Angiogenese in het ischemische Rat Lung

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

Performing Subretinal Injections in Rodents to Deliver Retinal Pigment Epithelium Cells in Suspension

Presterende Subretinal Injecties in Knaagdieren om retinale pigment epitheel cellen leveren in Suspension

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Een Knorretje Model van Neonatale hypoxisch-ischemische encefalopathie

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Orthotope Hind Limb Transplantation in de muis

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Method for Quantifying Upper Limb Performance in Daily Life Using Accelerometers

Een methode voor het kwantificeren van de bovenste ledematen optreden in het dagelijks leven gebruik maakt van versnellingsmeters

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. ...