Name: adapting human videofluoroscopic swallow study methods to detect and characterize dysphagia in murine disease models
Uploaded: 2015-03-01T14:00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Adapting Human Videofluoroscopic Swallow Study Methods to Detect and Characterize Dysphagia in Murine Disease Models at JoVE.com

Damos las gracias amablemente miembros adicionales del Lab Palanca que contribuyeron a la recolección de datos (Andries Ferreira, Danarae Aleman, Alexis Mok, Kaitlin Flynn, Elizabeth Bearce, y Matan Kadosh) y revisión de manuscritos (Andries Ferreira, Rebecca Schneider, y Kate Robbins). También reconocemos Roderic Schlotzhauer y Edwin Honse de la tienda de máquina MU Física por su entrada para el diseño y la fabricación de los tubos de observación de roedores utilizados en este estudio. Estamos especialmente agradecidos de Malea Jan Kunkel (Radiología Supervisor en el Departamento de Medicina Veterinaria y Cirugía en la Universidad de Missouri - Facultad de Medicina Veterinaria) y Jan Ivey (Gerente del laboratorio de la catedral de Investigación Animal de la Universidad de Missouri - Escuela de Medicina) para demostrar paciencia y motivación constante, mientras que la operación de los fluoroscopios de alta energía como desarrollamos el protocolo VFSS murino. Fuentes de financiación para este estudio incluían NIH / NIDCD (TE palanca), NIH / NINDS (GK Pavlath), Otolaryngofondos de Cirugía de Cabeza y Cuello de puesta en marcha (TE palanca), Fondo MU PRIME (TE palanca), Mizzou Advantage (TE palanca), y el Centro de MU sobre Envejecimiento (TE palanca) - logía.

Acceso abierto para este artículo es patrocinado por Glenbrook.

La disfagia (deglución deterioro) es un síntoma común de numerosas condiciones médicas que afectan a personas de todas las edades. Los ejemplos incluyen accidente cerebrovascular, enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, parálisis cerebral, distrofia muscular, esclerosis lateral amiotrófica (ELA), la enfermedad de Batten, cáncer de cabeza y cuello, el nacimiento prematuro y el envejecimiento avanzado. La disfagia está altamente correlacionado con la mortalidad, por lo general como consecuencia de la desnutrición grave o neumonía que se desarrolla cuando-bacterial cargados de alimentos / líquido / saliva se aspira en los pulmones 1-4. Esta dolencia debilitante y potencialmente mortal afecta a más de 15 millones de personas cada año en los Estados Unidos solamente 3. A pesar de la alta prevalencia y los resultados negativos asociados, las opciones actuales de tratamiento para la disfagia se limitan a paliativos (en vez de curativo) enfoques, tales como modificación de la dieta (por ejemplo, evitar consistencias de alimentos / líquidos específicos), cambios posturales (por ejemplo, tucking de la barbilla al tragar), los enfoques de motor (por ejemplo, ejercicios que apuntan los músculos en la cavidad oral, la faringe y la laringe), los enfoques sensoriales (por ejemplo, el sabor de aplicación, temperatura, y / o la estimulación mecánica), y el tubo de alimentación (por ejemplo, nutrición e hidratación administrada vía nasogástrica (NG) sonda o gastrostomía endoscópica percutánea (PEG) de tubo). Estos tratamientos sólo sirven como tratamiento sintomático y no se abordan las causas subyacentes del problema. De hecho, una barrera importante para el descubrimiento de nuevos tratamientos eficaces, para la disfagia es el conocimiento científico limitado de los mecanismos patológicos responsables, que probablemente diferente para cada enfermedad. La disfagia diagnóstico se realiza predominantemente mediante un procedimiento radiográfico llamado videofluoroscópico tragar estudio (VFSS), también conocido como un estudio de trago de bario modificado. En los últimos más de 30 años, esta prueba de diagnóstico ha sido considerado como el estándar de oro para evaluating función golondrina 5-7. Esta prueba implica que el paciente sentado o de pie dentro de la trayectoria del haz de rayos X de una máquina de fluoroscopia mientras voluntariamente la ingestión de alimentos y consistencias líquido mezclado con un agente de contraste oral, típicamente sulfato de bario 8,9 o iohexol 10. A medida que el paciente traga, los alimentos y líquidos que contienen agente de contraste se puede ver en tiempo real a través de un monitor de ordenador durante el viaje desde la boca hasta el estómago. Estructuras de los tejidos blandos también son visibles y pueden ser evaluados en relación a la estructura y función. Se les pide a los pacientes para llevar a cabo varios tragos de cada comida y consistencia líquida, todos los cuales son de vídeo grabado para su posterior visualización y análisis cuadro por cuadro para cuantificar la presencia y grado de disfagia. Numerosos componentes fisiológicos de la deglución son típicamente analizadas, como el punto de disparo anatómica de la deglución faríngea, bolo tiempo de tránsito a través de la faringe y el esófago, el alcance y la duración de Laryngeal elevación, la ubicación y cantidad de residuos post-deglución, y la aparición de y la razón fisiológica para la aspiración 7,11. Aspectos del protocolo VFSS humana fueron adaptadas recientemente para el estudio de ratas libremente comportan; Sin embargo, los resultados fueron limitados debido a las ratas no se quedaron en el campo videofluoroscópico de vista durante la prueba 12. VFSS no ha sido previamente tratado con ratones. Éxito de la adaptación del protocolo VFSS humana para su uso con ratones y ratas proporcionaría un método de investigación novedosa para investigar los cientos de modelos de enfermedades que se sabe que causan disfagia en los seres humanos murino actualmente existente (ratón y rata). Este nuevo método (en adelante, VFSS murina) sería, por tanto, acelerar la identificación y validación de modelos murinos de disfagia que son adecuados para la investigación de los mecanismos neurofisiológicos subyacentes en el tejido músculos, los nervios y el cerebro que son patológicos y contribuyendo a la disfagia in seres humanos. Por otra parte, murino VFSS permitiría la identificación de medidas objetivas (biomarcadores) de la función golondrina / disfunción que pueda compararse directamente con los seres humanos. Estas especies cruzadas biomarcadores videofluoroscópicas podrían luego servir medidas de resultado como nuevos para cuantificar la eficacia del tratamiento en los ensayos preclínicos con ratones y ratas, que sería mejor traducir a los ensayos clínicos con personas. Para este fin, el protocolo VFSS murino se estableció utilizando ~ 100 ratones de ambos sexos. Todos los ratones eran o C57 o híbridos cepas C57 / SJL. Los ratones C57 no fueron alterados genéticamente, mientras que C57 / SJL fue la cepa de fondo para una colonia de ratones transgénicos SOD1-G93A (o SOD1), el modelo animal más utilizado de la ELA. La colonia SOD1 fue un aproximado de 50-50 mezcla de transgénicos (es decir, los afectados por ELA) ratones y las camadas no transgénicas (es decir, no afectados). El protocolo VFSS murino consta de tres componentes: <ol><li&gt; cámaras de observación de diseño personalizado que permiten la alimentación voluntaria y tragar mientras está de pie sin restricciones en un espacio confinado dentro de una máquina de fluoroscopia, </li><li> Recetas que enmascaran el sabor aversivo / olor de agentes de contraste oral y producen radiodensidad suficiente para permitir la visualización adecuada de la deglución, </li><li> Un protocolo paso a paso de la prueba que maximiza el cumplimiento animal, minimiza el tiempo total de la prueba y la exposición a la radiación, y permite la cuantificación de varios parámetros de tragar para cada etapa de tragar (es decir, oral, faríngea y esofágica). </li></ol> El efecto combinado produce un bajo estrés, ambiente cómodo, de autoalimentación examen que permite la evaluación de la alimentación típica y tragar comportamientos de los ratones.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" >
	<tbody>
		<tr >
			<td >Name of Material/ Equipment</td>
			<td >Company</td>
			<td >Catalog Number</td>
			<td >Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Polycarbonate tubing for observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >3161T41</td>
			<td>Body of observation tubes, 2&#34;X2&#34; diameter, 0.080&#34; thick wall</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Polycarbonate sheet&#160; for observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >9115K71</td>
			<td>End-caps for observation tubes, 2&#34;x12&#34;x3/4&#34;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Polycarbonate sheet&#160; for observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >8574K281</td>
			<td>Peg-bowls for observation tubes</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Silicone O-rings&#160; for end-caps of observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >9396K108</td>
			<td>S1138 AS568-029, pack of 25 
			http://www.mcmaster.com/#o-rings/=t0wt5r&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Silicone stoppers for observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >2903K22</td>
			<td>Package of 10 stoppers to plug the oval opening in the top of the observation chamber when using a peg-bowl 
			http://www.mcmaster.com/#catalog/120/3803/=t0y5at</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Centrifuge tubes for sipper tube bottles</td>
			<td >Evergreen Scientific</td>
			<td >222-3530-G80</td>
			<td>30 ml freestanding centrifuge tubes, with caps, sterile 
			https://www.evergreensci.com/labware-catalog/tubes-and-vials/30-and-50-ml-centrifuge-tubes/&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Silcone stoppers for sipper tube bottles</td>
			<td >Saint-Gobain Performance Plastics</td>
			<td >DX263031-10&#160;</td>
			<td>Number 31D, size: 26 mm bottom, 32 mm top, 30 mm high; 10 pack;&#160; 
			http://www.labpure.com/en/Products.asp?ID=179&#38;PageBrand=STOPPERS</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stopper borers for sipper tube bottles</td>
			<td >Thomas Scientific</td>
			<td >3276G40</td>
			<td>Cork Borer Set that ranges from 3/16-15/16 inch&#160; 
			http://www.thomassci.com/Supplies/Corks/_/CORK-BORER-SET-316-1516-IN?q=Humboldt</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Drinking tubes for sipper tube bottles</td>
			<td >Ancare</td>
			<td >TD-100&#160;</td>
			<td>2 1/2&#8221; long drinking tubes with 5/16&#8221; opening, straight ball-spout 
			http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Iohexol for making oral contrast agent solution</td>
			<td >GE Healthcare</td>
			<td ></td>
			<td>350 mg iodine per ml 
			http://www3.gehealthcare.com/en/products/categories/contrast_media/omnipaque&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Chocolate syrup for flavoring oral contrast agent</td>
			<td >Herseys</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >10 ml syringe for syringe delivery system</td>
			<td >Becton, Dickinson and Company</td>
			<td >309604</td>
			<td>Luer lock tip syringe without needle, 100 per box 
			http://www.bd.com/hypodermic/products/syringeswithoutneedles.asp</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Catheter tubing for syringe delivery system</td>
			<td >Becton, Dickinson and Company</td>
			<td >427451</td>
			<td>Polyethylene Tubing (Non-Sterile) (PE 240) 100&#39; 
			http://www.bd.com/ds/productCenter/427451.asp&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle for syringe delivery system</td>
			<td >Becton, Dickinson and Company</td>
			<td >427560</td>
			<td>15-gauge needle, fits into PE 240 catheter tubing 
			http://www.bd.com/ds/productCenter/427560.asp&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Delrin acetal resin rod for syringe delivery system</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >8576K15</td>
			<td>1/2 inch diameter, black 
			http://www.mcmaster.com/#catalog/120/3609/=t0wvaf&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Acrylic sheeting for scissor lift</td>
			<td >Ponoko</td>
			<td ></td>
			<td>Laser cut 
			http://www.ponoko.com&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3D printed ABS frame</td>
			<td >Engineering Rapid Prototyping Facility, University of Missouri</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brass rods for scissor lift</td>
			<td >Amazon</td>
			<td >TTRB-03-12-03</td>
			<td>made into axles 
			http://www.amazon.com/Brass-Seamless-Round-Tubing-Length/dp/B000FN898M</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Drawer slide for scissor lift</td>
			<td >Richelieu</td>
			<td >10292G116</td>
			<td>Attaches to base of scissor lift 
			http://www.lowes.com/pd_380986-93052-T35072G16_0__?productId=50041754</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >28BYJ-48 stepper motor for scissor lift</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td>2 each</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ULN2003 Darlington transistor array for scissor lift</td>
			<td >Toshiba</td>
			<td >ULN2003APG</td>
			<td>Used as stepper drivers (2 each)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ATTINY85 microcontroller for scissor lift</td>
			<td >Atmel</td>
			<td >ATTINY85-20PU</td>
			<td>2 each 
			http://www.taydaelectronics.com/attiny85-attiny85-20pu-8-bit-20mhz-microcontroller-ic.html</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Nylon spur gear</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >57655K34</td>
			<td>2 each 
			http://www.mcmaster.com/#57655k34/=t0yaqz</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Nylon spur gear rack</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >57655K62</td>
			<td>2 each 
			http://www.mcmaster.com/#57655k62/=t0ybh9</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >4-40 nylon machine screws</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >95133A315</td>
			<td>Lift assembly 
			http://www.mcmaster.com/#95133a315/=t0yd8q</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >4-40 nylon hex nuts</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >94812A200</td>
			<td>Lift assembly 
			http://www.mcmaster.com/#94812a200/=t0ye29</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Buna-N O-Ring AS568A Dash No. 104</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >9452K318</td>
			<td>Lift assembly 
			http://www.mcmaster.com/#9452k318/=t0yem7</td>
		</tr>
		<tr >
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

adapting human videofluoroscopic swallow study methods to detect and characterize dysphagia in murine disease models

Este estudio adaptado videofluoroscópico humana tragar estudio métodos (VFSS) para su uso con modelos de enfermedad murinos con el fin de facilitar la investigación traslacional disfagia. Los resultados exitosos dependen de tres componentes fundamentales: cámaras de prueba que permiten la auto-alimentación mientras está de pie sin restricciones en un espacio confinado, recetas que enmascaran el sabor aversivo / olor de agentes de contraste orales disponibles en el mercado, y un protocolo de prueba paso a paso que permite la cuantificación de la fisiología golondrina. Eliminación de uno o más de estos componentes tendrá un impacto negativo en los resultados del estudio. Por otra parte, la capacidad de nivel de energía del sistema de fluoroscopia determinará que tragar parámetros puede ser investigado. La mayoría de los centros de investigación tienen fluoroscopios alta energía diseñados para su uso con las personas y los animales más grandes, lo que resulta en excepcionalmente pobre calidad de imagen cuando se prueban los ratones y otros roedores pequeños. A pesar de esta limitación, hemos identificado siete VFSParámetros S que son consistentemente cuantificable en ratones cuando se utiliza un fluoroscopio de alta energía, en combinación con el nuevo protocolo VFSS murino. Hemos obtenido recientemente un sistema de fluoroscopia de baja energía con capacidades excepcionales de alta resolución de imagen y de ampliación que fue diseñado para su uso con ratones y otros roedores pequeños. Los trabajos preliminares con este nuevo sistema, en combinación con el nuevo protocolo VFSS murino, ha identificado 13 parámetros golondrina que son consistentemente cuantificables en ratones, lo cual es casi el doble del número que se obtiene utilizando (es decir, de alta energía) convencional fluoroscopios. Se espera que la identificación de los parámetros de golondrina adicionales como optimizamos las capacidades de este nuevo sistema. Resultados hasta ahora demuestran la utilidad de usar un sistema de fluoroscopia de baja energía para detectar y cuantificar los cambios sutiles en la fisiología golondrina que de otro modo puede pasarse por alto cuando se utiliza fluoroscópios de alta energía para investigar modelos de enfermedad murinos.

Hemos diseñado con éxito un novedoso y protocolo VFSS-murino específico replicable que incluye cámaras de prueba que permiten la auto-alimentación, recetas para dar sabor a los agentes de contraste por vía oral, y un protocolo de paso a paso de la prueba que permite la cuantificación de la fisiología golondrina. La capacidad de nivel de energía del sistema de fluoroscopia determinó que tragan parámetros podrían ser investigados en ratones. Inicialmente se utilizó fluoroscopios alta energía diseñados para su uso con las personas y los animales más grandes (por ejemplo, GE Advantx, GE OEC 9600, y Omega cardiaco de la catedral CS-25, cada uno a 30 fotogramas por segundo). Sin embargo, estos sistemas tenían capacidades de aumento insuficientes para los ratones de prueba, lo que resultó en el llenado de los animales sólo una pequeña porción del campo de visión (Figura 9). Como resultado, la calidad de imagen era excepcionalmente pobre, lo que hace que sea imposible visualizar la mayoría de las estructuras del mecanismo de deglución. A pesar de esta limitación, se identificaron 7 objetivo VFSS tragar parámetros que eran consistentemente cuantificable para los ratones cuando se utiliza un fluoroscopio convencional (es decir, alta energía) en combinación con el nuevo protocolo VFSS murino (Tabla 3). Además, hemos identificado el espacio vallecular como el punto de disparo anatómico para tragar en ratones adultos sanos (3-17 meses de edad), así como los ratones con las condiciones de edad avanzada (&gt; 18 meses) y ALS en fase terminal. <img alt="Figura 9" src="/files/ftp_upload/52319/52319fig9highres.jpg" width="650" /> Figura 9:. Altos sistemas de fluoroscopia Energía Izquierda: imagen representativa de un ratón obtenido utilizando alta energía (es decir, los convencionales) sistemas de fluoroscopia. Tenga en cuenta que el ratón se llena sólo una pequeña porción del campo de fluoroscopia de vista, lo que demuestra la capacidad de aumento insuficiente de fluoroscópios convencionales para roedores de imagen. Derecha: La misma imagen ampliada post-capture usando un programa de software de edición de vídeo. Flecha Negro: tragar punto de disparo (valléculas). Flecha blanca:. Bolo en el esófago distal, inmediatamente antes de pasar a través de la unión GE (asterisco blanco) <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig9highres.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> PARÁMETROS TRAGO </td><td style="width:140px"> Sistema de Alta Energía </td><td style="width:140px"> Low Energy System </td></tr><tr><td> Inter-Swallow Intervalo (ISI) </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Mandíbula Excursión Rate (Tasa Lick Equivalente) </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Mandíbula Excursión Distancia </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Relación de Lick-Swallow </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Swallow Rate </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> PharyngEl tiempo de tránsito eal (PTT) </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Velocidad bolo a través de la faringe </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> El tiempo de tránsito esofágico (ETT) </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Velocidad bolo a través de Esófago </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Bolo de velocidad a través de la faringe y el esófago </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Bolo Area </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Faríngea Residuos Zona </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> El volumen de líquido consumido </td><td> X </td><td> X </td></tr></tbody></table> Tabla 3: Swallow parámetros cuantificables Usando alta Versus Sistemas de fluoroscopia Energía Bajos. Recientemente hemos obtenido un sistema de fluoroscopia bajo aumento de energía llamado El Labscope (Glenbrook Technologies, Randolph, NJ) que fue diseñado específicamente para nuestro laboratorio para su uso conratones y otros roedores pequeños (Figura 10). Sin embargo, los marcadamente mayores niveles de ampliación de este sistema hicieron imposible para ver todo el mecanismo de la deglución de un ratón en un solo campo de visión. En lugar de ello, se requieren dos posiciones de prueba, como se muestra en la Figura 11. Posición 1 permite la visualización de toda la región de cabeza y torácica proximal. Esta posición es necesaria para evaluar las fases oral y faríngea de la deglución. Posición 2 permite la visualización del punto de disparo golondrina (es decir, valléculas) al gastroesofágico (GE) de conexiones. Esta posición es necesaria para evaluar la etapa esofágica de la deglución. El trabajo preliminar utilizando la Labscope en combinación con el nuevo protocolo VFSS murino ha identificado 13 parámetros golondrina objetivas que son consistentemente cuantificables en ratones, lo cual es casi el doble del número que se obtiene utilizando alta energía fluoroscopios (es decir, convencionales) (Tabla 3). Este o<html> ESULTADO se atribuye a la capacidad de ampliación avanzada de la Labscope, que permite la visualización de numerosas estructuras anatómicas (Figura 12) que eran esencialmente invisibles cuando se utilizan sistemas convencionales: por ejemplo, el hueso hioides, la tráquea y las vértebras cervicales. Como resultado, también pudimos analizar los videos de pruebas de penetración laríngea y aspiración. Tampoco se observó penetración ni aspiración de cualquier ratón en este estudio, independientemente de las condiciones de salud o enfermedad. <img alt="Figura 10" src="/files/ftp_upload/52319/52319fig10highres.jpg" width="650" /> Figura 10:. El Labscope Izquierda: El Labscope realiza como un fluoroscopio escritorio para animales pequeños. Derecha: Vista cercana de El Labscope con componentes etiquetados. La mesa elevadora de tijera está posicionando una cámara de observación dentro del campo fluoroscopio de vista.<html> tp_upload / 52319 / 52319fig10highres.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura. <img alt="Figura 11" src="/files/ftp_upload/52319/52319fig11highres.jpg" width="650" /> Figura 11: Sistema de fluoroscopia. Low Energy Imágenes de un ratón obtenido mediante un sistema de fluoroscopia de baja energía. Tenga en cuenta que la capacidad de alta magnificación impide la visualización de todo el mecanismo golondrina dentro del campo de vista fluoroscopia. Izquierda: Posición 1 - permite la visualización de toda la cabeza y región torácica proximal. El punto de disparo golondrina (flecha negro) se centra esencialmente en el campo de visión. Derecha: Posición 2 - permisos de visualización desde el punto de disparo golondrina (flecha negro) a la unión GE (asterisco blanco). Nota que el bolo pasa a través del esófago distal (flecha blanca).<html> g11highres.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura. <img alt="Figura 12" src="/files/ftp_upload/52319/52319fig12highres.jpg" width="650" /> Figura 12:. Estructuras anatómicas Visible El uso de un sistema de fluoroscopia de baja energía incluso en el ajuste de aumento más bajo (izquierda), las estructuras óseas de la cabeza y el cuello de un ratón son fácilmente visibles utilizando nuestro sistema de fluoroscopia de baja energía (es decir, el Labscope). Se muestran las estructuras anatómicas en el cuadrado negro (y etiquetados) a mayor aumento a la derecha. Mejora de la visualización de las estructuras óseas permite la cuantificación de varios parámetros golondrina adicionales que eran imposibles de analizar el uso de fluoroscopios alta energía. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig12highres.jpg" target="_blank">Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a> t &quot;&gt; Swallow tasa y el intervalo entre golondrina son parámetros VFSS representativas que se pueden cuantificar ya sea utilizando sistemas de bajas o altas de fluoroscopia de energía en combinación con el nuevo protocolo VFSS murino Estos dos parámetros golondrina se cuantificaron por tres grupos de ratones:. SOD1-G93A (SOD1) ratones transgénicos (es decir, un modelo de ELA) en la enfermedad en etapa terminal entre 4-5 meses de edad, los ratones C57 de edad (18 a 24 meses de edad), y un grupo de control de jóvenes sanos (4-8 meses de edad) ratones C57 y camadas no transgénicas de la colonia SOD1. Todos los datos se refieren a pitón para beber solamente, utilizando un sistema de baja o alta fluoroscopia energía. No se encontraron diferencias significativas entre los jóvenes ratones C57 y no transgénicos control) ratones jóvenes (a partir de la SOD1 colonia con respecto a estos dos parámetros golondrina;. Por lo tanto, los datos se combinaron en un general &quot;control&quot; grupo de ratones jóvenes sanos para la comparación con ratones de edad C57 y ratones SOD1 en etapa terminal tasa Swallow (es decir,el número de golondrinas durante 2 segundos consecutivos de beber ininterrumpida) fue significativamente más lento para los ratones SOD1 en comparación con los ratones y los controles de edad C57. Intervalo entre golondrina (es decir, el tiempo entre dos tragos sucesivos) no fue significativamente diferente entre los grupos. Estos hallazgos apoyan la idea de que los perfiles de disfagia es probable que sean claramente diferentes para cada condición de la enfermedad (Figura 13). <img alt="Figura 13" src="/files/ftp_upload/52319/52319fig13highres.jpg" width="650" /> Figura 13:. Resultados Preliminares Esta figura muestra los resultados preliminares representativos de dos parámetros golondrina VFSS cuantificados usando el protocolo VFSS murino: tasa (izquierda) y el intervalo entre golondrina (derecha) tragar. Tasa Swallow fue significativamente más lento para los ratones SOD1 en comparación con los ratones y los controles de edad C57. No se identificaron diferencias significativas entre los grupos de inter inter-golondrinaval. Líneas en la parte superior de las barras indican diferencias estadísticamente significativas (p &lt;0,05) entre los grupos, identificados mediante las comparaciones por pares de Bonferroni. Las barras de error representan ± 1 SEM. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig13highres.jpg" target="_blank">Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Adapting Human Videofluoroscopic Swallow Study Methods to Detect and Characterize Dysphagia in Murine Disease Models at JoVE.com

Adapting Human Videofluoroscopic Swallow Study Methods to Detect and Characterize Dysphagia in Murine Disease Models

Este estudio adaptado con éxito videofluoroscópico tragar estudio (VFSS) métodos humanos para su uso con modelos de enfermedad murinos con el fin de facilitar la investigación traslacional disfagia.

Adaptación videofluoroscópicos Swallow Métodos de Estudio Humanos para detectar y caracterizar disfagia en modelos murinos de enfermedades

This study adapted human videofluoroscopic swallowing study (VFSS) methods for use with murine disease models for the purpose of facilitating ...

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Métodos de explantes de tejidos El cultivo fémur humano para el Estudio de la colonización de la célula del cáncer de pecho de la Niche metastásico

Bone is the most common site of breast cancer metastasis. Although it is widely accepted that the microenvironment influences cancer cell behavior, little ...

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

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Ex Vivo intestinal Sacs para evaluar la permeabilidad de la mucosa en modelos de enfermedad gastrointestinal

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying ...

Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia

Los métodos para aguda y subaguda murino de isquemia del miembro posterior

Peripheral artery disease (PAD) is a leading cause of cardiovascular morbidity and mortality in developed countries, and animal models that reliably ...