Name: instrumentation of near-term fetal sheep for multivariate chronic non-anesthetized recordings
Uploaded: 2015-10-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Instrumentation of Near-term Fetal Sheep for Multivariate Chronic Non-anesthetized Recordings at JoVE.com

authors gratefully acknowledge funding support from the Molly Towell Perinatal Research Foundation, Canadian Institutes of Health Research (CIHR), and Fonds de Recherche du Qu&#233;bec &#8211; Sant&#233; (FRQS) (to MGF) and CIHR-Quebec Training Network in Perinatal Research (QTNPR) (to LDD).
The authors wish to thank Esther Simard, Marco Bosa, Carl Bernard and Carmen Movila for technical assistance.

जानवरों की देखभाल जानवरों की देखभाल पर कनाडा परिषद और जानवर की देखभाल पर विश्वविद्यालयों डी मॉन्ट्रियल परिषद (प्रोटोकॉल # 10-Rech-1560) द्वारा अनुमोदन के दिशा-निर्देशों का पालन किया। सामग्री और तरीकों का इस्...

लंबे समय से instrumented गैर anesthetized भ्रूण भेड़: संवेदनाहारी और शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं भ्रूण शरीर विज्ञान और pathophysiology के अध्ययन के लिए एक पशु मॉडल की स्थापना के लिए आवश्यक हैं कि प्रस्तुत कर रहे हैं। प...

पशु मॉडल की एक किस्म प्रयोगशाला मूषक, गैर मानव प्राइमेट और घरेलू जुगाली करने वाले पशुओं सहित सामान्य और समझौता गर्भधारण दोनों के अध्ययन के लिए मौजूद हैं। 1,2,3,4,5 चिरकाल instrumented गर्भवती भेड़ 50 वर्ष के रूप में के लिए बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया गया है ऐसे lipopolysaccharide रूप pathophysiologic उत्तेजनाओं (एलपीएस) के लिए मानव भ्रूण के विकास और प्रतिक्रियाओं की एक मॉडल। 6-10 एलपीएस प्रदर्शन के बाद घावों की वजह से दोनों प्रजातियों में से एक समान maturational प्रोफ़ाइल के लिए है जो periventricular leukomalacia, साथ अपरिपक्व शिशुओं में देखा जाता है कि क्या वास्तव में नकल। 11, 12 अन्य गर्भावस्था जटिलताओं भी इस तरह के प्रसव पूर्व glucocorticoids फेफड़ों के विकास 13-15 और भ्रूण 16,17 पर अंतर्गर्भाशयी विकास प्रतिबंध (IUGR) के प्रभाव को समझने को बढ़ावा देने कि खोज के रूप में बहुत विस्तार से अध्ययन किया गया है। भ्रूण भेड़ मॉडल के व्यापक उपयोग uniq की वजह से हैदोहराव रक्त नमूने, bioelectrical गतिविधि की रिकॉर्डिंग, बिजली उत्तेजना की और इन विवो ब्रेन इमेजिंग में आवेदन की अनुमति सर्जिकल प्लेसमेंट और कैथेटर और इलेक्ट्रोड के रखरखाव के लिए गैर anesthetized भ्रूण भेड़ की UE ज़िम्मा। कम बार इस्तेमाल किया है, हालांकि 18 टेलीमेटरी, यह भी संभव है अभी तक उच्च मिलावट के कारण प्रारंभिक और रखरखाव लागत के रूप में के रूप में अच्छी तरह से स्थापित करने के लिए। 19 इंस्ट्रूमेंटेशन के कई रूपों के हित के उपायों के आधार पर कर रहे हैं संभव के रूप में इसके अलावा, भ्रूण भेड़ मॉडल बहुत बहुमुखी है। उदाहरण के लिए, यह सप्ताह के दिनों से अधिक रिकॉर्ड करने के लिए संभव है जैसे कि भ्रूण श्वास आंदोलनों, बिजली के मस्तिष्क की गतिविधियों, हृदय की प्रतिक्रियाएं, इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम, अंगों की एक श्रृंखला के लिए क्षेत्रीय रक्त के प्रवाह के प्रवाह जांच या microspheres, आदि के लिए धन्यवाद का उपयोग कर के रूप में वास्तविक समय में बहुभिन्नरूपी संकेतों इस बहुमुखी प्रतिभा, अध्ययन की एक विस्तृत रेंज cardi के विकास सहित आयोजित किया गया हैovascular सिस्टम 20,21, hypothalamo पीयूषिका आधिवृक्क (एचपीए) धुरी 22, विशेष रूप से 24 में मस्तिष्क के विकास को 23 और नींद राज्यों विकास, हाइपोक्सिया का प्रभाव / श्वासावरोध 25, चिकित्सकीय हाइपोथर्मिया 26, सूजन 6-11, दोनों 27 का संयोजन, glucocorticoids 28,29, विरोधी अवसाद 30, ब्रांको-फेफड़े डिसप्लाजिया (बीपीडी) 31,32, पूर्व और प्रसव के दौरान के नाम पर करने के लिए भ्रूण प्रोग्रामिंग 33,34,35,36,37,38,39 या उपन्यास भ्रूण निगरानी तौर तरीकों का विकास जांच के कुछ क्षेत्रों में। 40,41,42,43 प्रस्तुत विधि के समग्र लक्ष्य इस बहुमुखी मॉडल की बुनियादी कार्यान्वयन को दिखाने के लिए है। यह सेलुलर एकीकृत, अंग, और आणविक स्तर पर भ्रूण शरीर विज्ञान और पैथोफ्य्सिओलोजी का अध्ययन तीव्र और जीर्ण प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल की एक विस्तृत विविधता की स्थापना की अनुमति देता है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ACE Light source</td>
			<td>Schott-Fostec</td>
			<td>A20500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14060 - 11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Angled dissecting scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15006 - 09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel handle</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003 - 12</td>
			<td>alternating dissecting tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved scalpel blades #12</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10012 - 00</td>
			<td>alternating dissecting tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bone scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>16044 - 10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S &#38; T suture tying forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>00272 - 13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont SS forceps - angled</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11203 - 25&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braided silk suture size 6-0</td>
			<td>Teleflex Medical</td>
			<td>07 - 30&#160; - 10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Tape</td>
			<td>transpore</td>
			<td>3M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine hydrochloride 100 mg/ml</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>NDC 0409 - 2051 - 05</td>
			<td>Final Does is 80 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tranqui Ved Injection (xylazine 100 mg/ml)</td>
			<td>Vecdo</td>
			<td>NDC 50989 - 234 - 11</td>
			<td>Final Does is 10 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reactive orange 14</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>R - 8254</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringers Solution Components</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Solution is gas equilibrated with 95% O2 and 5% Co2, final pH 7.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>S7653</td>
			<td>Final Concentration: 118 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P217 - 3</td>
			<td>Final Concentration: 4.7 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C79 - 500</td>
			<td>Final Concentration: 2.5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium phosphate monobasic</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P -285</td>
			<td>Final Concentration: 1.2 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate</td>
			<td>J.T. Baker</td>
			<td>Jan-00</td>
			<td>Final Concentration: 0.57 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid (HEPES)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP 310 - 500</td>
			<td>Final Concentration: 5.95 g/L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma - Aldrich</td>
			<td>G8270</td>
			<td>Final Concentration: 5.5 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LifeWindow</td>
			<td>Digicare Biomedical Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CED bioamplifier and ADC units</td>
			<td>Cambridge Electronic Design Limited, 
			Unit 4, Science Park, 
			Milton Road, 
			Cambridge CB4 0FE 
			ENGLAND.</td>
			<td>Bioamp: 1902; ADC: micro1401; Data acquisition software: Spike 2, V7.13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurolog analog signal bioamplifier</td>
			<td>Digitimer Ltd 
			37 Hydeway 
			Welwyn Garden City 
			Hertfordshire, AL7 3BE, England</td>
			<td>NL108A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABL800Flex</td>
			<td>Radiometer Canada; 200 Aberdeen Dr, London, ON N5V 4N2</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf 5804R</td>
			<td>Eppendorf Canada; 2810 Argentia Road, #2 
			Mississauga, Ontario, L5N 8L2</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arrow Jugular Catheterization Set</td>
			<td>Arrow International, Inc., 2400 Bernville Road, Reading, PA 19605 USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atravet</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>10 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diazepam</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>5mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Ketalar</td>
			<td></td>
			<td>100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>10 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SurgiVeT</td>
			<td>Endotracheal Tubes; Smiths Medical ASD, Inc. St. Paul, MN 55112, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cook Airway Exchange Catheter with RAPI-FIT Adapters</td>
			<td>Cook Critical Care 750, Bloomington IN 47402-0489 USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispomed Ventilator</td>
			<td>Dispomed Ltd., 745 Nazaire-Laurin, Joliette, Quebec J6E 0L6</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Insyte-W</td>
			<td>Becton Dickinson, Infusion Therapy Systems Inc., 9450 S State St, Sandy Utah 84070 USA</td>
			<td></td>
			<td>22 to 20 G; 1 in [0.9 x 25 mm] to 1.16 in [1.1 x 30 mm]</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Edwards Lifesciences Ref: PX272 Pressure monitoring kit with TruWave Disposable Pressure</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LifeWindow LW6000</td>
			<td>Digicare Biomedical Technology 107 Commerce Road, Boynton Beach, FL 33426-9365 USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gaymar</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Babcock</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyvinyl catheters</td>
			<td>SCI (Scientific Commodities Inc.)</td>
			<td></td>
			<td>2 meters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Vicryl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrocardiogram (ECG)</td>
			<td>LIFYY, Metrofunk Kabel-Union, Berlin, Germany</td>
			<td></td>
			<td>four copper electrodes in single sheath, 2 meters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-O Vicryl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-0 Vicryl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDS II USP</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimethoprim sulfadoxine</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopcock</td>
			<td>Argon Medical, Cat&#160;041220001A</td>
			<td></td>
			<td>Double 4-way Stopcock with male luer lock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles</td>
			<td>Tyco Healthcare 8881202389</td>
			<td></td>
			<td>Monoject aluminum hub blunt needles, 22Gx, 0.7mmx 38.1mm: for fetal arterial and venous catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles</td>
			<td>Tyco Healthcare 8881202322</td>
			<td></td>
			<td>Monoject aluminum hub blunt needles, 16Gx, 1.6mmx38.1mm: for amniotic catheters</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

instrumentation of near-term fetal sheep for multivariate chronic non-anesthetized recordings

The chronically instrumented pregnant sheep has been used as a model of human fetal development and responses to pathophysiologic stimuli such as endotoxins, bacteria, umbilical cord occlusions, hypoxia and various pharmacological treatments. The life-saving clinical practices of glucocorticoid treatment in fetuses at risk of premature birth and the therapeutic hypothermia have been developed in this model. This is due to the unique amenability of the non-anesthetized fetal sheep to the surgical placement and maintenance of catheters and electrodes, allowing repetitive blood sampling, substance injection, recording of bioelectrical activity, application of electric stimulation and in vivo organ imaging. Here we describe the surgical instrumentation procedure required to achieve a stable chronically instrumented non-anesthetized fetal sheep model including characterization of the post-operative recovery from blood gas, metabolic and inflammation standpoints.

38 गर्भवती समय दिनांकित EWES गर्भ के 128 ± 2 दिन में instrumented थे (डीजीए, ~ 0.88 हमल, अवधि 145 डीजीए) धमनी, शिरापरक और एमनियोटिक कैथेटर और इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी) बाँझ सामान्य संज्ञाहरण के तहत तकनीक (भेड़ दोनों और भ्...

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Instrumentation of Near-term Fetal Sheep for Multivariate Chronic Non-anesthetized Recordings

यह शल्य प्लेसमेंट और कैथेटर और इलेक्ट्रोड, दोहराए रक्त नमूने, पदार्थ इंजेक्शन, bioelectrical गतिविधि की रिकॉर्डिंग के रखरखाव, और vivo इमेजिंग में परमिट क्योंकि लंबे समय से instrumented गैर anesthetized भ्रूण भेड़ मॉडल, स्वास्थ्य और रोग में मानव भ्रूण के विकास का अध्ययन करने के लिए प्रयोग किया जाता है। हम इस मॉडल की स्थापना के लिए आवश्यक प्रक्रियाओं का वर्णन है।

बहुभिन्नरूपी पुरानी गैर anesthetized रिकॉर्डिंग के लिए निकट अवधि भ्रूण भेड़ इंस्ट्रुमेंटेशन

The chronically instrumented pregnant sheep has been used as a model of human fetal development and responses to pathophysiologic stimuli such as ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Preparation and Culture of Myogenic Precursor Cells/Primary Myoblasts from Skeletal Muscle of Adult and Aged Humans

तैयारी और प्रौढ़ और वृद्ध मनुष्यों के कंकाल की मांसपेशी से Myogenic अग्रदूत साबित कोशिकाओं / प्राथमिक myoblasts की संस्कृति

Skeletal muscle homeostasis depends on muscle growth (hypertrophy), atrophy and regeneration. During ageing and in several diseases, muscle wasting ...

Isolation and Characterization of Mesenchymal Stromal Cells from Human Umbilical Cord and Fetal Placenta

मानव गर्भनाल और भ्रूण प्लेसेंटा से अलगाव और Mesenchymal Stromal कोशिकाओं की विशेषता

The human umbilical cord (UC) and placenta are non-invasive, primitive and abundant sources of mesenchymal stromal cells (MSCs) that have increasingly ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings of Isolated Primary Epithelial Cells from the Epididymis

एपिडीडिमिस से पृथक प्राथमिक उपकला कोशिकाओं के पूरे सेल पैच-क्लैंप रिकॉर्डिंग

The epididymis is an essential organ for sperm maturation and reproductive health. The epididymal epithelium consists of intricately connected cell types ...

Zika Virus Infection of Cultured Human Fetal Brain Neural Stem Cells for Immunocytochemical Analysis

Immunocytochemical विश्लेषण के लिए प्रसंस्कृत मानव भ्रूण मस्तिष्क तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं के Zika वायरस संक्रमण

Human fetal brain neural stem cells are a unique non-genetically modified model system to study the impact of various stimuli on human developmental ...

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Murine मॉडल में Utero ट्रांसप्लांटेशन में नसों और इंट्रा-एमनियोटिक

In utero transplantation (IUT) is a unique and versatile mode of therapy that can be used to introduce stem cells, viral vectors, or any other substances ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Vivo में भ्रूण और अपरा विकास के विश्लेषण के लिए उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

Culturing and Measuring Fetal and Newborn Murine Long Bones

मुर्गियों को मारने और मापने भ्रूण और नवजात Murine लंबी हड्डियों

Long bones are complex and dynamic structures, which arise from endochondral ossification via a cartilage intermediate. The limited access to healthy ...

Recapitulating Suckling-to-Weaning Transition In Vitro using Fetal Intestinal Organoids

भ्रूण आंतों ऑर्गेनॉइड का उपयोग करके विट्रो में दूध पिलाने-से-प्रातः संक्रमण को संक्षिप्त करना

At the end of the suckling period, many mammalian species undergo major changes in the intestinal epithelium that are associated with the capability to ...

Transuterine Fetal Tracheal Occlusion Model in Mice

चूहों में ट्रांसगर्भाशय भ्रूण श्वासनली ऑक्क्लुसेशन मॉडल

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Turner Syndrome (45XO) Fetal Cells for Downstream Modelling of Neurological Deficits Associated with the Syndrome

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सिंड्रोम से जुड़े न्यूरोलॉजिकल घाटे के डाउनस्ट्रीम मॉडलिंग के लिए टर्नर सिंड्रोम (45XO) भ्रूण कोशिकाओं से प्रेरित Pluripotent स्टेम सेल की पीढ़ी

Chromosomal aneuploidies cause severe congenital malformations including central nervous system malformations and fetal death. Prenatal genetic screening ...