Name: isolation of mononuclear cells from the central nervous system of rats with eae
Uploaded: 2007-12-04T04:23:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Mononuclear Cells from the Central Nervous System of Rats with EAE at JoVE.com

<ol><li><span style="font-size: x-small; font-family: arial,helvetica,sans-serif;"> </span> Profondément anesthésier les rats. Vaporiser avec de l&#39;éthanol 70% et faire un perfusion cardiaque avec du PBS pendant 10 min pour éliminer les cellules des vaisseaux sanguins (couper les oreillettes droite et perfuser à travers le ventricule gauche). </li><li> Enlever le cerveau et la moelle épinière et les placer dans un tube de 50 ml contenant PBS glacé. Couper le cerveau et la moelle épinière dans une passoire cellule 70 mm placé dans ...

<ol>
	<li>Beeton, C., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+and+clinical+scoring+of+chronic-relapsing+experimental+autoimmune+encephalomyelitis.">Induction and clinical scoring of chronic-relapsing experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Visualized Experiments</em>. <b>5</b>, .</li></ol>

<p> Cette procédure, comme toutes les procédures impliquant des animaux vivants, doivent être approuvés par l&#39;utilisation des animaux de votre institution et le comité de soins. Nous recommandons qu&#39;un vétérinaire ou un technicien vétérinaire être présents lors de l&#39;exécution du premier perfusions cardiaques afin d&#39;assurer un niveau suffisant de l&#39;anesthésie est donné à l&#39;animal avant et pendant la procédure, et que les animaux ne subissent pas de souffrances inutiles ou de détresse. </p>

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>PBS, 1x, sterile</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco / Invitrogen</td>
<td>14190-250</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cell strainer, 70 um</td>
<td>Tool</td>
<td>Fisher</td>
<td>08-771-2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Percoll</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P1644</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

isolation of mononuclear cells from the central nervous system of rats with eae

<p class="jove_content"> Qu&#39;il s&#39;agisse d&#39;étudier une maladie auto-immune dirigés vers le système nerveux central (SNC), tels que encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE, 1), ou la réponse immunitaire à une infection du système nerveux central, telles que la poliomyélite, maladie de Lyme neuroborréliose ou neurosyphilis, il est souvent nécessaire d&#39;isoler les cellules du SNC infiltrant immunitaire. </p><p class="jove_content"> Dans cette vidéo-protocole que nous montrent comment isoler les cellules mononucléées (CMN) du SNC de rat avec une EAE. La première étape de cette procédure nécessite une perfusion cardiaque du rongeur avec une solution saline pour s&#39;assurer que le sang ne reste dans les vaisseaux sanguins irriguant le SNC. Toute contamination du sang sera d&#39;augmenter artificiellement le nombre de SNC-apparente infiltrer les multinationales et peut modifier la composition apparente du système immunitaire infiltrer. Nous avons ensuite montrer comment retirer le cerveau et la moelle épinière du rat pour dilacération ultérieure pour préparer une suspension à cellule unique. Cette suspension est séparé sur un dégradé de deux couches de Percoll à isoler les multinationales. Après lavage, ces cellules sont alors prêtes à subir une procédure requise. </p><p class="jove_content"> Des cellules mononucléées isolées en utilisant cette procédure sont viables et peuvent être utilisés pour l&#39;électrophysiologie, la cytométrie en flux (FACS), ou en biochimie. Si la technique est réalisée dans des conditions stériles (à l&#39;aide d&#39;instruments stériles sous une hotte de culture de tissus), les cellules peuvent également être cultivées dans un milieu de culture de tissus. Une population de cellules donné peut encore être purifié en utilisant soit des procédures de séparation magnétique ou un FACS. </p>

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Isolation of Mononuclear Cells from the Central Nervous System of Rats with EAE

<p class="jove_content">Dans cette vidéo, nous démontrons comment isoler les cellules mononucléées du système nerveux central de rats avec encéphalomyélite allergique expérimentale.</p>

Isolement de cellules mononucléées du système nerveux central de rats avec EAE

Whether studying an autoimmune disease directed to the central nervous system (CNS), such as experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE, 1), or the ...

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