Name: isolation of mononuclear cells from the central nervous system of rats with eae
Uploaded: 2007-12-04T04:23:00
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<ol><li><span style="font-size: x-small; font-family: arial,helvetica,sans-serif;"> </span> Profundamente anestesiar ratos. Pulverização com etanol 70% e fazer uma perfusão cardíaca com PBS por 10 min para remover as células dos vasos sanguíneos (corte os átrios direito e perfundir através do ventrículo esquerdo). </li><li> Remover o cérebro ea medula espinhal e coloque em um tubo de 50 ml contendo gelada PBS. Cortar o cérebro ea medula espinhal em um coador de células 70 milímetros colocado em um prato de 10 centímetros de petri ...

<ol>
	<li>Beeton, C., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+and+clinical+scoring+of+chronic-relapsing+experimental+autoimmune+encephalomyelitis.">Induction and clinical scoring of chronic-relapsing experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> <em style='font-style: italic'>Journal of Visualized Experiments</em>. <b>5</b>, .</li></ol>

<p> Este procedimento, como todos os procedimentos envolvendo animais vivos, deve ser aprovada pelo uso de sua instituição animal e comissão de cuidado. Recomendamos que um veterinário ou um técnico veterinário estar presente ao executar o primeiro perfusões cardíaca para garantir um nível suficiente de anestesia é dada ao animal antes e durante o procedimento, e que os animais não sofrem dores ou aflições desnecessárias. </p>

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>PBS, 1x, sterile</td>
<td>Reagent</td>
<td>Gibco / Invitrogen</td>
<td>14190-250</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Cell strainer, 70 um</td>
<td>Tool</td>
<td>Fisher</td>
<td>08-771-2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Percoll</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>P1644</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

isolation of mononuclear cells from the central nervous system of rats with eae

<p class="jove_content"> Se estudar uma doença auto-imune direcionada para o sistema nervoso central (SNC), tais como encefalomielite autoimune experimental (EAE, 1), ou a resposta imunológica a uma infecção do SNC, tais como poliomielite, neuroborreliose Lyme, ou a neurossífilis, é muitas vezes necessário isolar as células do SNC infiltrantes imunológico. </p><p class="jove_content"> Neste vídeo protocolo demonstramos como isolar células mononucleares (MNCs) a partir do SNC de um rato com EAE. O primeiro passo deste procedimento requer uma perfusão cardíaca dos roedores com uma solução salina para assegurar que nenhum sangue permanece nos vasos sanguíneos que nutrem o SNC. Qualquer contaminação do sangue vai aumentar artificialmente o número de aparente CNS-infiltrando multinacionais e pode alterar a composição aparente do sistema imunológico se infiltrar. Nós, então, demonstrar como remover o cérebro ea medula espinhal do rato para dilaceração subseqüentes para preparar uma suspensão de uma única célula. Esta suspensão é separado em um gradiente de Percoll duas camadas para isolar as multinacionais. Após a lavagem, estas células são, então, pronto para passar por qualquer procedimento necessário. </p><p class="jove_content"> Células mononucleares isoladas usando este procedimento é viável e pode ser usado para eletrofisiologia, citometria de fluxo (FACS), ou bioquímica. Se a técnica é realizada sob condições estéreis (utilizando instrumentos esterilizados em uma capa de cultura de tecidos) as células podem também ser cultivadas em meio de cultura de tecidos. A população de determinada célula pode ser purificado usando procedimentos de separação magnética ou um FACS. </p>

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Isolation of Mononuclear Cells from the Central Nervous System of Rats with EAE

<p class="jove_content">Neste vídeo demonstramos como isolar células mononucleares do sistema nervoso central de ratos com encefalomielite autoimune experimental.</p>

Isolamento de células mononucleares do Sistema Nervoso Central de ratos com EAE

Whether studying an autoimmune disease directed to the central nervous system (CNS), such as experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE, 1), or the ...

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Isolation of High Quality Murine Atrial and Ventricular Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca<sup>2+</sup> Transients and L-Type Calcium Current

Isolation of High Quality Murine Atrial and Ventricular Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and L-Type Calcium Current

Isolamento de miócitos murinos atrial e ventricular de alta qualidade para medidas simultâneas de Ca<sup>2+</sup> transitórios e corrente de cálcio tipo L

Mouse models play a crucial role in arrhythmia research and allow studying key mechanisms of arrhythmogenesis including altered ion channel function and ...